项目所属科学技术领域：生物学及基础医学。主要研究内容：采用链脲佐菌素(Streptozocin，STZ)药物诱导糖尿病动物模型。采用Ⅳ型胶原快速粘附法分离富集表皮干细胞；K19和?1整合素免疫细胞化学染色进行鉴定。观察不同糖浓度对正常大鼠表皮干细胞β-catenin及相关信号分子的影响。取正常大鼠表皮干细胞分别置于不同葡萄糖浓度的K-SFM培养基中培养，采用免疫细胞化学方法检测表皮干细胞中Wnt1、β-catenin 、CyclinD1的表达。上调β-catenin对表皮干细胞增殖及分化的影响研究。体外分离培养糖尿病SD大鼠表皮干细胞（ESCs），采用脂质体介导法将pcDNA3.1myc-β-catenin质粒转入ESCs。同时设立脂质体对照组(转脂质体) 和空白对照组(无特殊处理)，48h后，检测转染组与对照组表皮干细胞中β-catenin、Wnt1、CyclinD1的表达情况。建立糖尿病大鼠创面模型，研究上调β-catenin对表皮干细胞在糖尿病鼠创面修复中的影响。建立糖尿病SD大鼠创面模型，随机分为4组：A组(创面移植羊膜负载转染的表皮干细胞组)，B组(创面移植羊膜负载未转染表皮干细胞组)，C组(羊膜组)和D组(对照组，不加任何干预)。观察创面愈合情况并计算创面愈合率，HE及免疫组织化学SP法检测创面愈合组织中增殖细胞核抗原（PCNA）的表达。比较各组β-catenin 、CyclinD1、K19和?1整合素的表达差异，评价β-catenin及相关信号分子对创面修复的影响。科学价值：延迟的再上皮化和持续性上皮化缺失是糖尿病难愈性创面的典型特点。该项目综合采用表皮干细胞体外培养模型和糖尿病创面模型、基因转染技术，系统观察糖尿病大鼠和正常大鼠皮肤创面表皮干细胞β-catenin及各相关信号分子表达差异及其相互关系，研究β-catenin影响糖尿病皮肤表皮干细胞增殖分化作用及其分子机制，为治疗糖尿病皮肤难愈创面提供新思路和理论依据。被同行引用评价情况：据不完全统计，该项目研究被国内外同行在正式刊物包括期刊、硕博士学位论文共引用14次。发表在Mol Med Rep的《Expression of β-catenin and cyclin D1 in epidermal stem cells of diabetic rats》被BioMed research international（影响因子：2.88）期刊引用。其他论文分别被南华大学、第三军医大学、兰州大学、广州中医药大学、河南科技大学等五所高校优秀硕博学位论文引用，同时也被《第三军医大学学报》等七种期刊引用。
[研究背景]癌症正成为二十一世纪人类的第一死因。预计2020年我国经确诊的癌症现患病例将达三千万,新发病例一千五百万,死亡病例一千万,癌症严重危害劳动人口健康,也是国内医疗费用上涨的主要因素,我国每年政府财政支出达数百亿元。然而目前为止,癌症的治疗无论是传统的手术、放疗、化疗还是新兴的生物靶向治疗疗效均不确切,患者生存周期及生活质量未有明显提高,晚期癌症的治疗效果更是不尽人意。目前亟需寻找治疗癌症的新技术和有效方法。人类将磁场应用于健康领域历史已久。早在两千多年前,我国西汉时代就有用磁石治病的记载；公元前200年希腊科学家发现了磁体具有镇痛的特性；西门子公司于1983年在德国成功安装了医用领域内全世界首套磁共振成像(MRI)系统；1995年世界生物磁场治疗协会和磁场治疗研究院创建于英国；1996年全世界首届磁场治疗会议在英国举办；本世纪初,难治性骨折的磁场疗法获得了美国食品药品管理局的正式许可。诸多实验报道均提示低频磁场(Low-Frequency Magnetic Fields, LF-MF)有较强的抑制癌细胞及杀灭癌细胞的作用,并还具有更广泛的生物学效应。有研究者应用低频磁场(强度为0.12特斯拉、频率为0.8赫兹)作用于自然杀伤细胞(NK),观察到一周内自然杀伤细胞的增殖能力较前明显增强,表明低频磁场能增强机体的抗癌能力；另有研究发现成骨细胞的增殖速度在低频磁场 (强度为4豪特斯拉)环境下可得到迅速提升；最近有学者将S-180肉瘤细胞株种于白鼠体内,之后将荷瘤白鼠平均分为磁疗组及对照组,结果发现暴磁后白鼠体内肉瘤组织重量较未暴磁组明显减轻(P<0.05),暴磁后白鼠体内肉瘤细胞大量凋亡,提示低频磁场可通过提高免疫系统的活性来增加自组织系统的有序性,从而产生显著的抗癌作用。然而迄今为止,应用低频磁场进行抗癌治疗的研究绝大多数为基础性研究,系统性的临床研究罕见,尽管偶有个别散在报道,但各自报道的治疗结果相差甚远,治疗的安全性和疗效信息也非常有限。低频旋转磁场生物治疗系统是山东超瑞施公司偶然发现的低频磁场对癌症患者有治疗作用,并在对国内外大量相关实验资料进行分析后,在中国工程院院士俞梦孙和中国科学院院士都有为等国内生物医学及磁学专家指导下研发的国家三类医疗器械产品并通过动物学实验得到验证。其技术采用一定强度和频率的低频磁场作用于人体,通过调控直接作用部位、系统旋转速率和作用时间,利用电磁生物学效应的阈临界效应、窗口效应、矢量效应、滞后效应、累积效应等方式,达到加快癌细胞凋亡的目的。2012年,“低频旋转磁场治疗系统的研发”课题正式列入“十二五”国家科技支撑计划重大项目。中国科学院院士都有为近期带领研究团队于南京大学医学院成功完成了体外细胞实验和动物肿瘤模型实验,研究发现低频磁场能够有选择性的抑制癌细胞的倍增,同时免疫细胞的增殖速度得到大幅提升,结果表明磁疗组生存时间显著优于对照组。中国工程院院士俞梦孙团队对低频磁场参数进行了实际测量,实现了实时动态剂量控制,为提高低频磁场的治疗水平奠定了基础。目前低频磁场治疗系统的动物学安全性验证已于第三军医大电磁辐射医学防护教育部重点实验室完成,实验结果确认了该系统既定参数的安全性。上述结果表明,低频磁场治疗给癌症患者带来了希望。目前迫切需要系统性临床研究,以评价应用低频磁场治疗癌症的安全性和有效性,使低频磁场治疗能够获得更多的临床证据,以便其尽快投入应用,服务于人类健康。[研究目的]本研究旨在探讨特定参数低频磁场治疗不适合接受手术、放疗、化疗等抗癌治疗的晚期癌症患者的临床安全性和有效性,评价低频磁场治疗对患者生活质量和生存时间的改善,分析影响生存的预后因素,为低频磁场的进一步应用提供临床依据,以便其尽快投入应用,从而创建一种新的、有效的抗癌治疗模式。[研究方法]1.临床资料本研究选取山东大学附属省立医院肿瘤中心在2009年3月至2013年2月期间经病理或细胞学确诊的的晚期癌症患者共257例为研究对象。2.治疗组的分配131例患者纳入低频磁场治疗组：给予患者低频磁场治疗,同时给予最佳支持治疗,直至患者死亡或要求退出研究。126例患者纳入对照组：只给予患者最佳支持治疗,直至患者死亡或要求退出研究。3.低频磁场治疗组研究方案本研究采用山东超瑞施公司在中国工程院院士俞梦孙和中国科学院院士都有为等国内生物医学及磁学专家指导下研究开发的国家三类医疗器械产品：ZCX-Ⅱ型低频旋转磁场生物治疗系统(发明专利号：ZL200820025132.X;国家食药监总局检验编号：2006021522)。该系统的低频磁场源使用钕铁硼(NdFeB)永恒磁性物质,磁场强度范围介于0.38特斯拉至0.42特斯拉,旋转磁场的转速参数可根据治疗需要设定于300转/分至600转/分之间。131例低频磁场治疗组患者由该治疗系统治疗,
暂无评论