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上海第二医科大学学报 1996年第2期16卷 141-147页

作者：李德懿刘正焦炳华上海第二医科大学附属第九人民医院上海市口腔医学研究所第二军医大学微生物学教研室

提纯的六种口腔厌氧菌（产碱韦荣氏球菌Ｖａ、牙龈类杆菌Ｂｇ、脆弱类杆菌Ｂｆ、核梭杆菌Ｆｎ、放线共生放线杆菌Ａａ、黄褐色二氧化碳噬纤维菌Ｃｏ）内毒素与肠道需氧菌（明尼苏达沙门氏菌Ｓｍ）内毒素均具有内毒素的基本组成成分，能... 详细信息

提纯的六种口腔厌氧菌（产碱韦荣氏球菌Ｖａ、牙龈类杆菌Ｂｇ、脆弱类杆菌Ｂｆ、核梭杆菌Ｆｎ、放线共生放线杆菌Ａａ、黄褐色二氧化碳噬纤维菌Ｃｏ）内毒素与肠道需氧菌（明尼苏达沙门氏菌Ｓｍ）内毒素均具有内毒素的基本组成成分，能表达典型的内毒素活性。局部Ｓｈｗａｒｔｚｍａｎ反应顺序为：Ｓｍ＞Ｆｎ＞Ａａ＞Ｖａ＞Ｂｆ＞Ｂｇ＞Ｃｏ，细胞毒顺序为：Ｆｎ＞Ａａ＞Ｂｆ＞Ｃｏ＞Ｂｇ＞Ｖａ＞Ｓｍ。但另一方面在化学组成和生物活性上又有显著差异，如直接法除Ｖａ未测到ＫＤＯ，庚糖含量较低，测到甲基化和分枝脂防酸。提示口腔厌氧菌内毒素的化学特性可能与生物活性和致病潜力有关。Ｎｅｇａｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌ：０．２ｍｌＮＳＴａｂｌｅ６ＨｅｔｅｒｌｏｇｏｕｓＬＰＳｐｒｏｖｏｋｉｎｇｌｏｃａｌＳｈｗａｒｔｚｍａｎｒｅａｃｔｉｏｎＴｈｉｓｓｔｕｄｙｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｏｒａｌａｎａｅｒｏｂｅＬＰＳｓｈａｄｌｏｗｅｒｃａｐａｃｉｔｙｔｏｉｎｄｕｃｅｔｈｅｌｏｃａｌＳｈｗａｒｔｚｍａｎｒｅａｃｔｉｏｎｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＬＰＳｆｒｏｍＳｍ．ＴｈｅｌｏｗｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆＬＰＳｓｃｏｕｌｄｒｅｓｕｌｔｉｎｉｎｄｕｒａｔｉｏｎｗｉｔｈ?

关键词：口腔厌氧菌内毒素脂多糖

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缺氧诱导因子-1α基因转染对缺氧损伤HepG2细胞的保护作用

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中国病理生理杂志 2010年第1期26卷 1-6页

作者：蒋春华罗勇军黄庆愿高钰琪第三军医大学高原军事医学系病理生理学与高原生理学教研室重庆400038 高原医学教育部重点实验室重庆400038 全军高原生理与高原病研究重点实验室重庆400038 第三军医大学高原军事医学系高原疾病学教研室重庆400038

目的:观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因转染对HepG2细胞缺氧损伤的影响并初步探讨其作用机制。方法:腺病毒转染的人HepG2细胞常氧培养24h后分为4组:Ad-GFP转染常氧培养组(Ad-GFP transfected-normoxia组)、Ad-HIF转染常氧培养组(Ad-HI... 详细信息

目的:观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因转染对HepG2细胞缺氧损伤的影响并初步探讨其作用机制。方法:腺病毒转染的人HepG2细胞常氧培养24h后分为4组:Ad-GFP转染常氧培养组(Ad-GFP transfected-normoxia组)、Ad-HIF转染常氧培养组(Ad-HIF transfected-normoxia组)、Ad-GFP转染低氧培养组(Ad-GFP transfected-hypoxia组)和Ad-HIF转染低氧培养组(Ad-HIF transfected-hypoxia组)。观察各组细胞的细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)释放率、细胞内活性氧(ROS)、一氧化氮(NO)含量和诱导型一氧化氮合酶(iN-OS)活力。结果:Ad-HIF转染的HepG2细胞可高效表达HIF-1α。Ad-GFP transfected-hypoxia组的细胞活力显著低于Ad-GFP transfected-normoxia组(P<0.05);Ad-HIF transfected-hypoxia组的细胞活力与Ad-HIF transfected-normoxia组比较无显著差异。Ad-GFP transfected-hypoxia组细胞内ROS含量显著高于Ad-GFP transfected-normoxia组(P<0.05);Ad-HIF transfected-hypoxia细胞内ROS含量与Ad-HIF transfected-normox-ia组或Ad-GFP transfected-hypoxia组比较均无显著差异。Ad-HIF transfected-normoxia组和Ad-GFP trans-fected-hypoxia组细胞内NO含量和iNOS活力均显著高于Ad-GFP transfected-normoxia组(P<0.05);Ad-HIFtransfected-hypoxia组细胞内NO含量和iNOS活力与Ad-GFP transfected-hypoxia组和Ad-HIF transfected-nor-moxia组比较无显著差异。结论:基础性HIF-1高表达可显著减轻缺氧时HepG2细胞的损伤程度,其机制可能与HIF-1高表达提高HIF-1调控的缺氧相关基因的基础表达水平和其产物含量有关;也可能与HIF-1高表达防止缺氧时ROS的过度增加有关。

关键词：缺氧缺氧诱导因子-1 基因转染腺病毒载体

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靶向抑制黑质网状部GABA能神经元的DRP1改善肝性脑病小鼠运动功能

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神经解剖学杂志 2024年第1期40卷 25-34页

作者：李晓东铁静静陈京浩孙毓泽吴菲菲杨雁灵王亚云空军军医大学第一附属医院肝胆胰脾外科西安710032 延安大学医学院人体解剖与组织胚胎学教研室延安716000 空军军医大学基础医学院神经系统疾病线粒体可塑性实验室国家级基础医学实验教学示范中心西安710032

目的:探讨黑质网状部(SNr)的GABA能神经元中线粒体分裂对急性肝性脑病(AHE)小鼠运动障碍的影响。方法:利用硫代乙酰胺(TAA)腹腔注射制备AHE小鼠模型,通过苏木精-伊红(HE)染色观察AHE小鼠肝小叶的变化,利用生化检测试剂盒检测AHE小鼠血... 详细信息

目的:探讨黑质网状部(SNr)的GABA能神经元中线粒体分裂对急性肝性脑病(AHE)小鼠运动障碍的影响。方法:利用硫代乙酰胺(TAA)腹腔注射制备AHE小鼠模型,通过苏木精-伊红(HE)染色观察AHE小鼠肝小叶的变化,利用生化检测试剂盒检测AHE小鼠血清天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)和血氨的变化。接下来通过转棒疲劳实验、高架十字迷宫实验、旷场实验观察AHE小鼠运动功能。进一步利用透射电镜观察分析AHE小鼠SNr的线粒体面积、周长、圆率等形态学指标的变化,Western Blot观察AHE小鼠SNr的线粒体分裂融合相关分子的表达变化。接下来,利用重组腺相关病毒(AAV)靶向调控AHE小鼠SNr的线粒体动力相关蛋白1(DRP1)的表达,在荧光酶标仪上检测SNr的线粒体膜电位(MMP)、细胞的ATP和活性氧(ROS),并观察小鼠运动功能的变化。结果:较对照组,AHE小鼠运动功能明显降低,SNr的线粒体分裂明显增强,线粒体分裂相关蛋白表达显著升高;AHE小鼠SNr的MMP显著下降,细胞的ATP下降,ROS升高。靶向抑制AHE小鼠SNr的DRP1表达后,运动改善;进一步观察发现,AHE小鼠SNr的线粒体分裂被抑制后,MMP显著升高,细胞的ATP升高,ROS下降,证明线粒体功能明显改善。结论:靶向抑制AHE小鼠黑质网状部GABA能神经元的线粒体分裂,可以改善线粒体形态和功能,从而缓解其运动障碍。

关键词：急性肝性脑病黑质网状部线粒体线粒体动力相关蛋白1 小鼠

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尼古丁对人牙周膜细胞长链非编码RNA NEAT1表达的影响

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医学研究生学报 2017年第3期30卷 240-244页

作者：袁帅杜样汪璐璐周志斐吴兴安王小竞军事口腔医学国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心陕西省口腔疾病临床医学研究中心第四军医大学口腔医院儿童口腔科西安医学硕士710032 第四军医大学微生物学教研室

目的多种长链非编码RNA可影响人牙周膜细胞的生理反应,而尼古丁作为吸烟相关性牙周炎的主要危险因素,可引起人牙周膜细胞内多种细胞因子的变化。文中旨在探究尼古丁对人牙周膜细胞(h PDLCs)核内长链非编码RNA NEAT1表达水平和白细胞介素... 详细信息

目的多种长链非编码RNA可影响人牙周膜细胞的生理反应,而尼古丁作为吸烟相关性牙周炎的主要危险因素,可引起人牙周膜细胞内多种细胞因子的变化。文中旨在探究尼古丁对人牙周膜细胞(h PDLCs)核内长链非编码RNA NEAT1表达水平和白细胞介素(IL)-8表达水平的影响。方法体外培养h PDLCs,第4代细胞用于后续实验。将细胞随机分为对照组、α-BTX组和尼古丁+α-BTX组。对照组:不加任何刺激的人牙周膜细胞;尼古丁组:10-5mol/L尼古丁刺激细胞4 h;α-BTX组:10-8mol/Lα-BTX刺激细胞;尼古丁+α-BTX组:10-5mol/L尼古丁+10-8mol/Lα-BTX共同刺激。qRT-PCR检测细胞NEAT1及下游IL-8 mRNA表达水平;ELISA检测培养基中IL-8蛋白表达情况。结果牙周膜组织块原代培养3周后可见组织块周围细胞成放射状排列,稳定传代后镜下观察可见h PDLCs呈长梭形或纺锤形,轮廓清晰,贴壁生长。与尼古丁组比较,其余3组h PDLCs NEAT1-1、NEAT1-2和IL-8 mRNA表达均降低(P<0.05)。尼古丁组培养上清中IL-8蛋白表达水平较对照组显著升高,约为对照组的4.8倍[(1226.0±163.0)pg/m L vs(256.4±49.3)pg/m L,P<0.05],而α-BTX组和尼古丁+α-BTX组的IL-8蛋白表达水平较对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论尼古丁可促进h PDLCs NEAT1和IL-8的表达,提示NEAT1可能通过促进早期炎性反应参与吸烟相关性牙周炎的发生发展。

关键词：人牙周膜细胞尼古丁 NEAT1 炎性反应白细胞介素-8

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体外人牙髓细胞的连续培养

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第三军医大学学报 2002年第7期24卷 836-839页

作者：何飞谭颖徽杨峥嵘第三军医大学附属新桥医院口腔科重庆400037 第三军医大学预防医学系防原医学教研室全军复合伤研究所重庆400038

目的　探讨体外连续培养过程中人恒牙牙髓细胞向成牙本质样细胞分化的可行性。方法　采用细胞连续培养、酶动力学法、透射电镜观察、免疫组化等方法 ,对体外人牙髓细胞在连续培养过程中的生物学特性进行研究。结果　部分人牙髓细胞在体... 详细信息

目的　探讨体外连续培养过程中人恒牙牙髓细胞向成牙本质样细胞分化的可行性。方法　采用细胞连续培养、酶动力学法、透射电镜观察、免疫组化等方法 ,对体外人牙髓细胞在连续培养过程中的生物学特性进行研究。结果　部分人牙髓细胞在体外可以出现复层生长 ,形成细胞结节 ,并可进一步钙化 ;与成牙本质细胞相似 ,它们具有高碱性磷酸酶活性 ,可合成Ⅰ型胶原 ,其超微结构有许多与成牙本质细胞相似的特征 ,胞间基质中可见膜被基质小泡 ,某些基质小泡内含针状晶体。结论　体外连续培养的人牙髓细胞可向成牙本质细胞分化 ,此过程可作为研究体内牙髓损伤修复细胞增殖。

关键词：牙髓细胞成牙本质细胞细胞分化细胞培养牙髓损伤

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含核受体真核表达载体的构建及其转染真皮多能干细胞(英文)

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第40期13卷 7919-7924页

作者：王涛邱安春李露斯刘雁平屈纪富徐文岳解放军第三军医大学西南医院急救部重庆市400038 四川省隆昌县中医院骨二科四川省内江市642100 解放军第三军医大学西南医院神经内科重庆市400038 解放军第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆市400038

背景:研究表明含核受体基因在神经系统发育过程中具有重要意义,是维持成体干细胞增殖和成神经分化的关键基因。目的:拟构建含核受体真核重组表达质粒pEGFPN1-TLX,并筛选出能稳定表达含核受体的真皮多能干细胞。设计、时间及地点:细胞基... 详细信息

背景:研究表明含核受体基因在神经系统发育过程中具有重要意义,是维持成体干细胞增殖和成神经分化的关键基因。目的:拟构建含核受体真核重组表达质粒pEGFPN1-TLX,并筛选出能稳定表达含核受体的真皮多能干细胞。设计、时间及地点:细胞基因学实验,于2007-03/12在解放军第三军医大学基础医学部病原生物学教研室完成。材料:成年SD大鼠1只,由解放军第三军医大学实验动物研究所提供;真皮多能干细胞由解放军第三军医大学全军复合伤研究所分离培养;质粒载体pEGFPN1及细菌DH5α由徐文岳教授惠赠。方法:首先以大鼠的大脑组织总RNA为模板,RT-PCR扩增出含核受体的编码cDNA序列,T/A克隆至pMDl8-T载体上,然后用BamHI、HindⅢ双酶切释放出经测序鉴定为阳性的重组质粒pMDl8-T-TLX中的含核受体片段,亚克隆到真核载体pEGFPN1中,从而构建真核重组表达质粒pEGFPN1-TLX,最后采用阳性脂质体将pEGFPN1-TLX转染到真皮多能干细胞中。主要观察指标:转染后24h荧光显微镜下观察绿色荧光,RT-PCR检测含核受体mRNA的表达,免疫组化染色观察向神经细胞的分化情况。结果:PCR、酶切和测序结果证明,成功地将含核受体全长cDNA克隆到pEGFPN1质粒中,并成功构建pEGFPN1-TLX重组质粒。与未转染真皮多能干细胞相比,10d后可见pEGFPN1-TLX转染的真皮多能干细胞继续生长,并于15d时形成抗性克隆,荧光显微镜下有绿色荧光蛋白表达;而未转染的真皮多能干细胞10d时已全部死亡。RT-PCR结果显示,pEGFPN1-TLX转染真皮多能干细胞表达TLXmRNA。诱导后3d与单纯真皮多能干细胞比较,pEGFPN1-TLX转染的真皮多能干细胞诱导成NF200阳性细胞数明显增加,诱导成GFAP阳性细胞数明显减少。结论:实验成功构建含核受体真核表达载体,并成功转染了真皮多能干细胞。转染后能明显提高真皮多能干细胞向神经元分化的效率,而向胶质细胞分化受到抑制。

关键词：核受体含核受体克隆真皮多能干细胞

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DNA聚合酶Polι的研究进展

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现代生物医学进展 2011年第2期11卷 365-367页

作者：周虎传杨劲中国人民解放军三二四医院神经内科重庆400020 第三军医大学细胞生物学教研室重庆400038

Y家族DNA聚合酶是一种跨损伤复制酶,即能以损伤的DNA为模板进行复制。Y家族DNA聚合酶广泛分布生物界,人类细胞中Y家族DNA聚合酶至少包括Rev1、Polκ、Polι、Polη四种,Polι在以DNA为模板进行复制时错配率很高而不同于其他跨损伤DNA聚... 详细信息

Y家族DNA聚合酶是一种跨损伤复制酶,即能以损伤的DNA为模板进行复制。Y家族DNA聚合酶广泛分布生物界,人类细胞中Y家族DNA聚合酶至少包括Rev1、Polκ、Polι、Polη四种,Polι在以DNA为模板进行复制时错配率很高而不同于其他跨损伤DNA聚合酶,Polι是目前发现的所有DNA聚合酶中保真性最低的DNA聚合酶。很高的错配率导致很高的突变率,最后基因的突变导致癌症的发生,因此Polι在各个国家被广泛的研究,并且对Polι的各个不同的特性进行了研究,取得了一系列成果,现对Polι的研究进展予以综述,并展望了未来的研究趋势。

关键词：跨损伤复制 DNA聚合酶 Polι

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CAR-T细胞治疗实体瘤临床转化的研究进展

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中国肿瘤生物治疗杂志 2017年第2期24卷 183-188页

作者：黄明燕张意曹雪涛第二军医大学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室上海200433

T细胞能够识别肿瘤抗原并特异性杀伤癌变细胞,是杀伤肿瘤的主要执行细胞,也是临床上研究最多的肿瘤治疗性免疫细胞。嵌合抗原受体基因修饰T(chimeric antigen receptor gene-modified T,CAR-T)细胞治疗能够绕过抗原提呈和MHC的限制,已在... 详细信息

T细胞能够识别肿瘤抗原并特异性杀伤癌变细胞,是杀伤肿瘤的主要执行细胞,也是临床上研究最多的肿瘤治疗性免疫细胞。嵌合抗原受体基因修饰T(chimeric antigen receptor gene-modified T,CAR-T)细胞治疗能够绕过抗原提呈和MHC的限制,已在B急性淋巴细胞白血病(B-acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)治疗中取得显著效果。近年来,越来越多的研究结果表明,CAR-T细胞同样可以用于实体瘤的治疗,如黑色素瘤、神经胶质瘤、卵巢癌、前列腺癌、肝细胞癌及其他常见实体瘤(转移性乳腺癌、胰腺癌)等。本文将对近年来CAR-T细胞免疫疗法在实体瘤临床转化的研究进展作一综述,主要从免疫抑制肿瘤微环境、脱靶毒性与细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome,CRS)、肿瘤的异质性三个方面阐述CAR-T细胞治疗实体瘤的瓶颈,并对未来的发展加以展望。

关键词：嵌合抗原受体基因修饰T(CAR-T)细胞黑色素瘤肝细胞癌神经胶质瘤卵巢癌

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神经营养因子与中枢神经系统再生研究

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西南军医 2000年第1期5卷 38-40页

作者：张伶俐华西医科大学基础医学院细胞生物学教研室成都610041

神经营养因子(NTFs)可以促进神经细胞的生存、生长与分化,并维持其功能的执行,对中枢神经系统(CNS)的再生修复起着重要作用。本文着重讨论NTFs对CNS损伤后的再生修复作用及对CNS退行性疾病的治疗作用。

关键词：神经营养因子中枢神经系统再生

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S-100和PTA1在垂体前叶共存的形态学证据

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医学研究生学报 2003年第2期16卷 94-96,T002页

作者：陈丽华张新海张金山金伯泉第四军医大学免疫学教研室陕西西安710032 第四军医大学组织胚胎学教研室陕西西安710032

目的 :观察S 10 0和血小板 T细胞活化抗原 1(PTA1)在正常大鼠垂体前叶细胞的表达和共存。　方法 :免疫荧光双标记结合激光扫描共聚焦显微镜技术进行观察。　结果 :首次证实PTA1免疫反应阳性物质主要位于脑垂体血窦壁 ,与S 10 0免疫反... 详细信息

目的 :观察S 10 0和血小板 T细胞活化抗原 1(PTA1)在正常大鼠垂体前叶细胞的表达和共存。　方法 :免疫荧光双标记结合激光扫描共聚焦显微镜技术进行观察。　结果 :首次证实PTA1免疫反应阳性物质主要位于脑垂体血窦壁 ,与S 10 0免疫反应阳性细胞密切接触 ,并有一定程度的共存关系。　结论

关键词： S-100 血小板T-细胞活化抗原1 垂体前叶激光共聚焦显微镜

来源：评论

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