检索结果-内蒙古大学图书馆

中国临床康复 2006年第17期10卷 113-116,i0007页

作者：刘艳丽杨连甲王秦芳董绍忠侯晋2 解放军第四军医大学口腔医学院病理科陕西省西安市710032 解放军第四军医大学口腔医学院检验科陕西省西安市710032 解放军第四军医大学口腔医学院生物学教研室陕西省西安市710032

目的:分析可溶性肿瘤坏死因子受体及T淋巴细胞对炎性牙周膜细胞的作用。方法:实验于2005-03/09在解放军第四军医大学口腔医学院口内实验室完成。免疫磁珠分离CD3+T淋巴细胞于解放军第四军医大学唐都医院骨科实验室完成。CD3+T淋巴细胞... 详细信息

目的:分析可溶性肿瘤坏死因子受体及T淋巴细胞对炎性牙周膜细胞的作用。方法:实验于2005-03/09在解放军第四军医大学口腔医学院口内实验室完成。免疫磁珠分离CD3+T淋巴细胞于解放军第四军医大学唐都医院骨科实验室完成。CD3+T淋巴细胞取自正常人的外周血,牙周膜成纤维细胞和淋巴细胞培养液均购自美国Gbico公司,大肠杆菌内毒素购自Sigma公司,质粒引物合成及目的基因检测均于Takara公司完成。正常牙周膜成纤维细胞与CD3+T淋巴细胞共培养,加入大肠杆菌内毒素,实验组用PcDNA3.1(+)-可溶性肿瘤坏死因子受体转染细胞的培养液培养,对照组用转染空质粒的细胞培养液培养。空白组为正常牙周膜成纤维细胞加CD3+T淋巴细胞、正常牙周膜成纤维细胞加内毒素、正常牙周膜成纤维细胞。噻唑蓝法检测各组细胞24h和48h的活力变化;PcDNA3.1(+)-可溶性肿瘤坏死因子受体转染细胞后,免疫组化染色强阳性表达,转染培养液培养实验组细胞24h和48h后,噻唑蓝法检测实验组牙周膜细胞的活力变化。结果:①正常牙周膜成纤维细胞与CD3+T淋巴细胞共培养,内毒素刺激正常牙周膜成纤维细胞后,细胞活性降低;培养24h和48h后,噻唑蓝法检测各组的A值:正常牙周膜成纤维细胞和CD3+T淋巴细胞共培养组,加入内毒素刺激,24h为4.6±0.2,48h为3.7±0.1;用PcD-NA3.1(+)-可溶性肿瘤坏死因子受体转染细胞的培养液培养,24h为7.8±0.3,48h为6.9±0.5;正常牙周膜成纤维细胞用内毒素刺激,24h为9.0±0.4;48h为8.7±0.3;单纯正常牙周膜成纤维细胞与CD3+T细胞共培养,24h为10.1±0.2,48h为9.8±0.5;单纯培养牙周膜成纤维细胞,24h为10.0±0.5,48h为9.2±0.1。②转染空质粒PcDNA3.1(+)的牙周膜成纤维细胞其可溶性肿瘤坏死因子受体表达不明显,而转染质粒PcDNA3.1(+)-可溶性肿瘤坏死因子受体的牙周膜成纤维细胞其可溶性肿瘤坏死因子受体表达增强。结论:内毒素与T淋巴细胞刺激正常牙周膜成纤维细胞可以引起肿瘤坏死因子α水平升高;可溶性肿瘤坏死因子受体对于炎症牙周膜成纤维细胞有抑制肿瘤坏死因子α作用的功能。

关键词：受体肿瘤坏死因子 T淋巴细胞牙周膜成纤维细胞内毒素类噻唑类

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慢性癫痫大鼠脑组织GAT-1的表达变化及其与星形胶质细胞的相关性

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西南国防医药 2010年第6期20卷 605-607,698页

作者：胡远兵李红丽梁义杨忠武警四川总队医院成都分院神经内科成都610041 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室第三军医大学神经生物学教研室

目的研究γ-氨基丁酸转运体-1(GAT-1)与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)在戊四氮点燃的慢性癫痫大鼠脑中的变化。方法采用免疫组化技术分别标记正常SD大鼠和戊四氮点燃的慢性癫痫大鼠发作后海马及外侧皮质区GAT-1和GFAP,结合Western blot实验结... 详细信息

目的研究γ-氨基丁酸转运体-1(GAT-1)与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)在戊四氮点燃的慢性癫痫大鼠脑中的变化。方法采用免疫组化技术分别标记正常SD大鼠和戊四氮点燃的慢性癫痫大鼠发作后海马及外侧皮质区GAT-1和GFAP,结合Western blot实验结果分析其变化关系。结果 GAT-1和GFAP在慢性癫痫发作后,均有不同程度的表达增高,GAT-1增高更明显。结论 GAT-1和GFAP的同方向变化证明,在慢性癫痫发作后,GAT-1的表达增高并不只是由于星形胶质细胞的增生所致。

关键词： γ-氨基丁酸转运体-1 癫痫胶质纤维酸性蛋白戊四氮

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丙型肝炎病毒受体的研究进展

丙型肝炎病毒受体的研究进展

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第七次全国医学分子微生物学及生物技术研讨会

作者：姚敏吕欣第四军医大学基础部微生物学教研室西安710032

丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus，HCV)是引起人类严重肝脏疾病的主要病原体之一，初步估计全世界约有1.7亿感染者，约占全球人口总数的3％，其中大部分病例为慢性感染，可缓慢进展为肝硬化和肝衰竭，与肝细胞癌的发生也有密切关系。HC... 详细信息

丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus，HCV)是引起人类严重肝脏疾病的主要病原体之一，初步估计全世界约有1.7亿感染者，约占全球人口总数的3％，其中大部分病例为慢性感染，可缓慢进展为肝硬化和肝衰竭，与肝细胞癌的发生也有密切关系。HCV属于黄病毒科肝炎病毒属，有包膜的单正链RNA病毒，目前已经确证HCV包膜糖蛋白E1和E2是与受体结合的关键性分子，自然状态下E1-E2以二聚体形式表达在HCV表面，通过与靶细胞表面特定受体相互作用而使HCV病毒感染细胞，造成肝细胞损害。其中E2被认为是最重要的分子，在与受体的结合中发挥着关键作用。丙型肝炎病毒受体一直是HCV研究的热点之一，除了已经提出的可能受体：CD81、低密度脂蛋白受体、粘多糖、清道夫受体及C型(钙离子依赖型)凝集素DC/L-SIGN等，近来研究者又发现了新的受体：紧密连接蛋白claudin，occludin。本文就HCV受体分子的研究进展作一综述。

关键词：丙型肝炎病毒紧密连接蛋白 HCV受体分子靶细胞

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转化医学:十年回顾与展望

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实用口腔医学杂志 2011年第1期27卷 5-11页

作者：陈发明金岩施松涛赵铱民第四军医大学口腔医学院西安710032 美国南加州大学牙学院颅颌面分子生物学研究中心

转化医学作为一种新理念,旨在推动基础研究成果快速临床转化并用于疾病诊断、预防和治疗之中,其核心是在实验室与临床之间建立一个双向转化通道。近十年来,转化医学受到科学家和临床医生前所未有的重视和关注。在此期间,随着对转化医学... 详细信息

转化医学作为一种新理念,旨在推动基础研究成果快速临床转化并用于疾病诊断、预防和治疗之中,其核心是在实验室与临床之间建立一个双向转化通道。近十年来,转化医学受到科学家和临床医生前所未有的重视和关注。在此期间,随着对转化医学认识的不断深入,其理念已经渗透到生物医学研究的各个领域(包括口腔医学)。本文对转化医学的概念、近十年的进展情况进行了归纳和总结,对其当前所面临的困难和机遇进行了分析和展望,强调了干细胞治疗、组织工程和内源性再生医学技术作为转化医学的当代热点,值得深入研究。

关键词：转化医学基础医学临床医学干细胞治疗组织工程

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凋亡抑制蛋白XIAP的研究进展

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医学分子生物学杂志 2004年第2期1卷 113-115页

作者：李庆霞杨安钢第四军医大学生物化学与分子生物学教研室西安市710032

XIAP是IAP家族中抑制细胞凋亡的最主要成员,本文总结了近年来对XIAP结构与功能的研究进展, 基本明确了XIAP与caspase3、7、9的作用方式及其自身的调节方式,探讨了XIAP的抗凋亡机制,及其信号分子作用和在凋亡相关疾病中潜在的治疗价值.

关键词： XIAP 细胞凋亡基因治疗

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miRNA-144靶向调节钙粘蛋白11对间充质干细胞成骨分化的抑制效应

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第三军医大学学报 2013年第10期35卷 922-926页

作者：康夏康菲杨波郭洪峰权毅董世武第三军医大学基础医学部人体解剖学教研室重庆市生物力学重点实验室重庆400038 成都军区总医院骨科成都610083

目的证实miRNA-144靶向调节钙粘蛋白11(Cad-11)表达,抑制间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSCs)的成骨分化。方法通过双荧光素酶报告系统对Cad-11与miRNA-144的靶基因关系进行鉴定;将pre-miR-144及anti-miR-144分别转染MSCs,成骨诱导7、14 d后,实时定量PCR和蛋白印迹方法检测细胞中Cad-11及成骨标志物Runx2、ALP的表达情况,分析其与MSCs成骨分化的变化关系。黏附实验检测miRNA-144对MSCs成骨分化过程中黏附的影响。结果 Cad-11是miRNA-144的靶基因;miRNA-144在成骨诱导第7、14天可明显抑制Cad-11、Runx2和ALP的表达(P<0.05),同时降低MSCs的黏附性。结论 miRNA-144通过抑制Cad-11的表达对间充质干细胞的成骨分化起负向调控的作用。

关键词： miRNA-144 钙粘蛋白11 间充质干细胞骨生成

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过表达PNRC对MCF-7乳腺癌细胞生长的影响

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现代肿瘤医学 2007年第6期15卷 748-751页

作者：陈彬陈敏李渝萍陈健李强周度金第三军医大学生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的:探讨核受体辅活化子(coactivator)PNRC(proline-rich nuclear receptor coregulatory protein)对乳腺癌细胞生长的影响。方法:以pACT2/PNRC为模板,采用PCR扩增全长PNRC编码序列,将BclI和XhoI消化的PCR产物插入pCMVtaq2c,构建pCMVtaq2c/PNRC真核表达质粒。酶切和测序鉴定后,采用脂质体转染法,分别将pCMVtaq2c/PNRC表达质粒和pCMVtaq2c空质粒转染MCF-7细胞,经G418筛选4周后,分别采用RT-PCR、Northernblot和WesternBlot鉴定稳定表达PNRC的MCF-7细胞株。最后,采用MTT法和3H-胸腺嘧啶掺入法观察了过表达PNRC的MCF-7乳腺癌细胞和pCMVtaq2c空质粒转染的MCF-7乳腺癌细胞生长速率和增殖的差异。结果:成功构建了PNRC的真核表达质粒pCMVtaq2c/PNRC,并筛选到稳定表达PNRC的MCF-7乳腺癌细胞株,转染PNRC的MCF-7细胞的生长速率和增殖明显慢于对照组细胞。结论:过表达的PNRC对MCF-7乳腺癌细胞的生长具有抑制作用。

关键词： PNRC 乳腺癌信号传导辅活化子

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pWPT-GFP慢病毒载体的改构及鉴定

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现代生物医学进展 2010年第3期10卷 447-449页

作者：韩腾龙王立峰张璟刘新平药立波第四军医大学生物化学与分子生物学教研室陕西西安710032

目的:为实现慢病毒感染后可用抗生素筛选外源基因稳定整合的细胞,我们对慢病毒载体质粒(pWPT-GFP)进行了改构。方法:将三种抗生素抗性基因(puro、hygro、neo)连同其启动子分别克隆入慢病毒载体(pWPT-GFP)。酶切鉴定载体构建正确后,将这... 详细信息

目的:为实现慢病毒感染后可用抗生素筛选外源基因稳定整合的细胞,我们对慢病毒载体质粒(pWPT-GFP)进行了改构。方法:将三种抗生素抗性基因(puro、hygro、neo)连同其启动子分别克隆入慢病毒载体(pWPT-GFP)。酶切鉴定载体构建正确后,将这三种改构载体分别与辅助质粒psPAX2、pMD2.G共转染293T包装细胞,收获病毒上清并感染靶细胞,使用相应抗生素筛选细胞验证抗性基因的插入。结果:成功构建了重组慢病毒载体pWPT-GFP-puro、pWPT-GFP-hygro、pWPT-GFP-neo,通过调整病毒上清的用量可以达到靶细胞100%的感染效率;用相应抗生素筛选细胞证明了抗性基因的表达。结论:我们成功改构了慢病毒载体(pWPT-GFP),从而使病毒感染后用抗生素筛选稳定整合的细胞成为可能。

关键词：慢病毒载体改构抗生素筛选

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GW112基因逆转录病毒载体的构建及在胃癌SGC-7901细胞的表达研究

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重庆医学 2009年第12期38卷 1456-1458,I0001页

作者：杨梅华熊鸿燕杨华安曾昭淳黄轶第三军医大学预防医学院流行病学教研室重庆400038 第三军医大学新桥医院神经外科重庆400037 重庆市渝北区人民医院脑外科 401120 重庆医科大学生化与分子生物学教研室 400016 重庆医科大学附属儿童医院临床分子医学中心 400014

目的构建人GW112基因的逆转录病毒载体,并通过病毒介导其在人胃癌SGC-7901细胞的稳定表达。方法采用DNA重组技术构建并鉴定重组逆转录病毒载体pLEGFP-N1-GW112;以脂质体PT67细胞包装病毒,经病毒感染的SGC-7901细胞通过G418筛选及荧光定... 详细信息

目的构建人GW112基因的逆转录病毒载体,并通过病毒介导其在人胃癌SGC-7901细胞的稳定表达。方法采用DNA重组技术构建并鉴定重组逆转录病毒载体pLEGFP-N1-GW112;以脂质体PT67细胞包装病毒,经病毒感染的SGC-7901细胞通过G418筛选及荧光定量PCR鉴定,建立GW112稳定过表达SGC-7901细胞株。结果成功构建了pLEGFP-N1-GW112逆转录病毒表达载体,经病毒包装的重组转录病毒成功感染SGC-7901细胞,Real-Time PCR结果显示实验组中GW112基因是对照组细胞中的4.2倍。结论逆转录病毒介导的GW112基因在胃癌SGC-7901细胞获得了稳定过表达,为进一步研究GW112在胃癌中的功能奠定了良好基础。

关键词： GW112基因逆转录病毒胃癌 SGC-7901

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丙戊酸钠通过激活miR-148a-3p/Mcl-1通路促进SH-SY5Y细胞凋亡

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第三军医大学学报 2020年第12期42卷 1195-1200页

作者：戴旭芳闫小晶谢鹏连继勤重庆师范大学教育科学学院特殊教育系重庆400047 重庆师范大学重庆市特殊儿童心理诊断与教育技术重点实验室重庆400047 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的探讨抗癫痫药丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)对神经细胞的凋亡诱导作用及相关机制。方法将人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)用不同剂量VPA处理,流式分析细胞凋亡水平变化,Western blot检测Mcl-1蛋白水平变化,定量PCR分析Mcl-1 mRNA与mi... 详细信息

目的探讨抗癫痫药丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)对神经细胞的凋亡诱导作用及相关机制。方法将人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)用不同剂量VPA处理,流式分析细胞凋亡水平变化,Western blot检测Mcl-1蛋白水平变化,定量PCR分析Mcl-1 mRNA与miR-148a-3p水平变化,报告基因实验检测Mcl-1启动子活性变化。用miR-148a-3p抑制剂联合VPA处理细胞,观察miR-184a-3p在VPA下调Mcl-1表达中的作用及对VPA促SH-SY5Y细胞凋亡效果的影响。结果VPA可促进SH-SY5Y细胞凋亡,并抑制SH-SY5Y细胞中Mcl-1的蛋白和mRNA水平(P<0.05)。VPA处理不影响SH-SY5Y细胞中Mcl-1的启动子活性(P>0.05)。VPA可显著增强SH-SY5Y细胞中miR-148a-3p的表达(P<0.05),使用miR-148a-3p抑制剂可减轻VPA对Mcl-1表达的抑制作用,并减弱VPA的促细胞凋亡效果。结论VPA可能通过激活miR-148a-3p/Mcl-1信号通路促进SH-SY5Y细胞凋亡。

关键词：丙戊酸钠 SH-SY5Y细胞 Mcl-1 miR-148a-3p 凋亡

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