检索结果-内蒙古大学图书馆

空军军医大学学报 2024年第12期45卷 1406-1411页

作者：梁东冉张新超任凯刘芳芳赵琳武明媚延安大学医学院解剖学教研室陕西延安716099 空军军医大学基础医学院神经生物学教研室陕西西安710032

目的探讨地奥司明(DSM)通过线粒体途径对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)处理的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的保护效果。方法体外培养SH-SY5Y细胞,建立OGD/R模型,通过CCK-8细胞活性检测,确定DSM最佳作用浓度并进行后续实验。将细胞分为空白对照组(C... 详细信息

目的探讨地奥司明(DSM)通过线粒体途径对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)处理的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的保护效果。方法体外培养SH-SY5Y细胞,建立OGD/R模型,通过CCK-8细胞活性检测,确定DSM最佳作用浓度并进行后续实验。将细胞分为空白对照组(Control组)、OGD/R组和DSM组(DSM浓度分别为0.01、0.02、0.04 g/L)。CCK-8法检测细胞存活率,使用相差显微镜来观察细胞的形态,并通过分光光度测量法来测定细胞内的ATP水平和线粒体复合体Ⅱ活性,JC-1法检测线粒体膜电位,TUNEL法检测细胞凋亡状况。结果浓度为0.01、0.02、0.04 g/L的DSM均能促进OGD/R损伤的细胞存活,且药物浓度为0.02 g/L时SH-SY5Y细胞的存活率最高。与Control组相比,OGD/R组细胞形态皱缩,细胞ATP含量和线粒体复合体Ⅱ活性显著下降,线粒体膜电位降低,细胞凋亡率升高;而0.02 g/L DSM预先孵育3 h,再进行OGD/R损伤的细胞存活率增高,细胞形态基本正常,ATP含量和线粒体复合体Ⅱ活性显著提升,且线粒体膜电位水平显著提高,凋亡细胞减少。结论DSM对OGD/R的细胞具有显著保护作用,且在0.02 g/L时发挥最佳保护作用,其作用机制与维持线粒体正常功能和减少细胞凋亡状态密切相关。

关键词：地奥司明氧糖剥夺/复氧模型神经保护线粒体细胞凋亡

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NOD样受体在中枢神经系统相关疾病中的作用研究进展

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神经解剖学杂志 2023年第3期39卷 346-350页

作者：陈玉洁符帆帆刘芳芳吴兴安刘蓉蓉邝芳高枫延安大学医学院神经生物学教研室延安716000 空军军医大学基础医学院神经生物学教研室西安710032 空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室西安710032

NOD样受体(NLRs)家族是模式识别受体中一类拥有核苷酸寡聚结构域的固有免疫识别受体,能够识别进入细胞质内的异物、病原体或宿主损伤细胞的分子模式。不同的NLRs对炎性反应分别具有正向调控和负向调控的作用,广泛参与炎症、感染、肿瘤... 详细信息

NOD样受体(NLRs)家族是模式识别受体中一类拥有核苷酸寡聚结构域的固有免疫识别受体,能够识别进入细胞质内的异物、病原体或宿主损伤细胞的分子模式。不同的NLRs对炎性反应分别具有正向调控和负向调控的作用,广泛参与炎症、感染、肿瘤、和损伤等全身性疾病。中枢神经系统(CNS)疾病的发病机制与炎性反应的关系极为密切,因而有关NLRs参与CNS疾病的研究日益增多。本文对已发表的相关文献进行综述,分析总结了常见的CNS脱髓鞘疾病、退行性疾病、缺血缺氧和损伤等疾病中NLRs的研究报道,以加深对NOD样受体在CNS疾病中作用的理解,特别是其中对炎性反应起负向调控的NLRs,可能成为CNS疾病治疗的新靶点,为临床治疗提供新思路。

关键词： NOD样受体中枢神经系统疾病炎性反应正向调控负向调控

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隆纳霉素引起三阴性乳腺癌细胞周期阻滞基因表达谱及关键通路的生物信息学分析

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第二军医大学学报 2021年第6期42卷 585-595页

作者：薛佳兴孔杰卢小玲孙筱于豪冰梁珍珍徐尧邓博文焦炳华海军军医大学(第二军医大学)基础医学院生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的利用生物信息学方法分析隆纳霉素对人三阴性乳腺癌细胞系细胞周期阻滞的作用机制。方法利用隆纳霉素处理人三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-468细胞48、72 h,计算IC50,采用流式细胞术分析细胞周期变化。选取0.8μmol/L隆纳霉素处理48 h的M... 详细信息

目的利用生物信息学方法分析隆纳霉素对人三阴性乳腺癌细胞系细胞周期阻滞的作用机制。方法利用隆纳霉素处理人三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-468细胞48、72 h,计算IC50,采用流式细胞术分析细胞周期变化。选取0.8μmol/L隆纳霉素处理48 h的MDA-MB-468细胞和未加药处理的对照细胞进行转录组测序,测序数据经质量控制过滤后,使用DESeq21.16.1软件进行差异表达基因分析,并进行基因本体和京都基因与基因组百科全书功能分析及基因集富集分析,用STRING工具进行蛋白质相互作用网络分析及用AutoDock 1.5.6软件进行分子对接预测。结果隆纳霉素干预MDA-MB-468细胞48、72 h的IC50分别为2.733和0.866μmol/L,且流式细胞术分析显示隆纳霉素干预48 h有明显G2/M阻滞作用。隆纳霉素干预后共筛选出1764个差异表达基因,主要定位于NF-κB介导的TNF-α通路和P53通路,G蛋白γ亚基7(GNG7)、G蛋白γ亚基11(GNG11)、C-X-C基序趋化因子配体8(CXCL8)、腺苷酸环化酶2(ADCY2)等基因可能是隆纳霉素作用基因网络中的关键节点。隆纳霉素与DNA分子、拓扑异构酶、基因表达调节蛋白[20S蛋白酶体β亚单位5(PSMB5)和含有SET结构域7的组蛋白赖氨酸甲基转移酶(SETD7)]有较好的结合及相互作用。结论隆纳霉素具有与蝴蝶霉素类似的功能,其通过与DNA-拓扑异构酶Ⅰ复合物中的DNA分子结合发挥抗肿瘤活性;还可通过与基因表达调节蛋白PSMB5和SETD7结合影响GNG7、GNG11、CXCL8、ADCY2等基因的表达水平,从而上调NF-κB介导的TNF-α通路和P53通路,最终导致乳腺癌细胞发生G2/M阻滞,发挥抗肿瘤作用。

关键词：隆纳霉素蝴蝶霉素类似物三阴性乳腺癌细胞周期阻滞

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干扰IGF2BP2下调MYC表达抑制结直肠癌细胞增殖、迁移并促进肿瘤免疫

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细胞与分子免疫学杂志 2023年第4期39卷 303-310页

作者：刘天玥韩晨颖胡尘辰毛司懿孙元杰杨舒雅杨琨空军军医大学基础医学院免疫学教研室陕西西安710032 空军军医大学基础医学院学员四大队陕西西安710032

目的探究胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(IGF2BP2)对结直肠癌细胞增殖、迁移能力和肿瘤免疫微环境的影响及其可能的分子机制.方法使用癌症基因图谱(TCGA)数据库分析结直肠癌及癌旁组织的IGF2BP2和MYC表达水平.采用RNA干扰技术(RNAi)沉... 详细信息

目的探究胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(IGF2BP2)对结直肠癌细胞增殖、迁移能力和肿瘤免疫微环境的影响及其可能的分子机制.方法使用癌症基因图谱(TCGA)数据库分析结直肠癌及癌旁组织的IGF2BP2和MYC表达水平.采用RNA干扰技术(RNAi)沉默HCT-116和SW480人结直肠癌细胞的IGF2BP2表达,实时定量PCR检测沉默效果.敲低IGF2BP2后,集落形成实验、CCK-8实验、5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)实验检测细胞集落形成和增殖能力,Transwell^(TM)实验检测细胞迁移能力,实时定量PCR检测IGF2BP2、MYC、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β(TGF-β)、白细胞介素10(IL-10)的mRNA表达.Western blot法测定IGF2BP2、MYC的蛋白表达,RNA免疫共沉淀后实时定量PCR(RIP-qPCR)检测HCT-116细胞中IGF2BP2与MYC mRNA结合能力.结果TCGA数据库结果表明,IGF2BP2和MYC在结直肠癌组织中的表达显著高于癌旁组织,且IGF2BP2高表达的结直肠癌患者生存期更短.沉默IGF2BP2后,HCT-116和SW480细胞的活力、增殖、迁移能力降低.IGF2BP2敲低组MYC、TGF-β、IL-10的mRNA表达显著降低,而TNF-αmRNA表达升高;MYC蛋白表达及mRNA稳定性均显著下降.RIP-qPCR结果表明IGF2BP2能够与MYC mRNA结合.结论干扰IGF2BP2下调MYC表达抑制结直肠癌细胞增殖、迁移并促进肿瘤免疫.

关键词：结直肠癌胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(IGF2BP2) MYC 肿瘤细胞增殖肿瘤细胞迁移肿瘤免疫微环境

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小鼠肝组织经胶原酶Ⅳ不同时长原位消化后Kupffer细胞的分选效果及其肿瘤细胞吞噬功能观察

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山东医药 2022年第24期62卷 35-39页

作者：李洁翟克超刘永达袁继行海军军医大学基础医学院医学遗传学教研室上海200433

目的观察小鼠肝组织经胶原酶Ⅳ不同时长原位消化后Kupffer细胞的分选效果及其肿瘤细胞吞噬功能。方法用0.04%胶原酶Ⅳ进行小鼠肝脏原位灌注及肝脏组织消化,根据消化时间长短(5、10、20 min)分为5 min消化组、10 min消化组、20 min消... 详细信息

目的观察小鼠肝组织经胶原酶Ⅳ不同时长原位消化后Kupffer细胞的分选效果及其肿瘤细胞吞噬功能。方法用0.04%胶原酶Ⅳ进行小鼠肝脏原位灌注及肝脏组织消化,根据消化时间长短(5、10、20 min)分为5 min消化组、10 min消化组、20 min消化组。Percoll密度梯度离心后获取肝脏非实质细胞(NPC),通过台盼蓝染色计算细胞活率;免疫细胞磁珠分选(MACS)分选Kupffer细胞后通过台盼蓝染色计数Kupffer细胞总数,除以NPC总数,获得Kupffer细胞MACS分选后占比;光学显微镜观察Kupffer细胞形态学变化;流式细胞术分析Kupffer细胞在MACS分选前占NPC总数的比例,再用Kupffer细胞MACS分选后占比除以分选前占比得到MACS分选得率。体外共培养MACS分选所得Kupffer细胞与肿瘤细胞,流式细胞术检测Kupffer细胞对肿瘤细胞的吞噬功能。结果胶原酶Ⅳ灌注后的肝组织在0.04%胶原酶Ⅳ中于37℃继续消化5 min时NPC总活率、MACS分选的Kupffer细胞数目及Kupffer细胞占NPC的比例、MACS分选得率和细胞形态分析都显示提取效果更佳;且消化5 min时Kupffer细胞对肿瘤细胞的吞噬活性显著高于消化10 min和20 min消化组。结论适当的胶原酶Ⅳ消化时间对Kupffer细胞肝脏原位灌注结合MACS提取是有利的,而且也更有助于Kupffer细胞对肿瘤细胞的吞噬作用。

关键词：胶原酶Ⅳ 肝组织消化方法 Kupffer细胞分选方法 Kupffer细胞吞噬功能

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小鼠抗人腺病毒55型六邻体(HAdV55 Hexon)蛋白单克隆抗体的制备

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细胞与分子免疫学杂志 2023年第6期39卷 544-551页

作者：袁若栋董阳超武福星段甜薛潘张剑袁明城薛智丰张海军张欠欠高小朋雷迎峰延安大学生命科学学院陕西延安716000 空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室陕西西安710032

目的制备特异性小鼠抗人腺病毒55型六邻体蛋白(HAdV55 Hexon)单克隆抗体(mAb)。方法以化学合成HAdV 55、3、4、7、16、21的Hexon基因为模板,PCR扩增后分别构建原核表达质粒pET28a-HAdV55 Hexon与真核表达质粒pCAGGS-HAdV3、4、7、16、21... 详细信息

目的制备特异性小鼠抗人腺病毒55型六邻体蛋白(HAdV55 Hexon)单克隆抗体(mAb)。方法以化学合成HAdV 55、3、4、7、16、21的Hexon基因为模板,PCR扩增后分别构建原核表达质粒pET28a-HAdV55 Hexon与真核表达质粒pCAGGS-HAdV3、4、7、16、21、55 Hexon;将pET28a-HAdV55 Hexon质粒转化至大肠杆菌(***)感受态细胞BL21(DE3)中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,将纯化的包涵体经过变性与复性后利用切向流膜过滤系统获得纯化蛋白;将pCAGGS-HAdV55 Hexon用于拔罐免疫BALB/c小鼠,HAdV55 Hexon蛋白用于加强免疫,通过杂交瘤技术制备抗HAdV55 Hexon的mAb,并进行抗体效价测定、抗体亚类鉴定;对上述抗体利用pCAGGS-HAdV55 Hexon转染HEK293T细胞和BHK细胞分别进行Western blot法和免疫荧光法(IFA)以鉴定其特异性;选择其中效价高的两株抗体,进一步利用pCAGGS-HAdV3、4、7、16、21、55 Hexon转染细胞分别进行Western blot法和IFA做交叉反应性分析。结果成功构建pET28a-HAdV55 Hexon和pCAGGS-HAdV55 Hexon、3、4、7、16、21表达质粒;IPTG诱导pET28a-HAdV55 Hexon转化的BL21细菌,HAdV55 Hexon蛋白主要以包涵体形式表达,经过变性及复性后超滤得到纯化的HAdV55 Hexon蛋白;筛选得到6株可分泌HAdV55 Hexon mAb的杂交瘤细胞株,抗体亚类分析显示2株为IgG2a亚型,4株为IgG2b;获得与HAdV3 Hexon、HAdV4 Hexon、HAdV7 Hexon、HAdV16 Hexon、HAdV21 Hexon无交叉反应性的2株高效价的特异性HAdV55 Hexon抗体。结论获得的特异性小鼠抗HAdV55 Hexon的mAb为建立其抗原检测方法提供了实验基础。

关键词：人腺病毒55型(HAdV55) 六邻体蛋白(Hexon) 单克隆抗体(mAb)

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程序性细胞死亡蛋白1配体1(PD-L1)的翻译后修饰调控及其在肿瘤免疫治疗中的应用进展

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细胞与分子免疫学杂志 2022年第11期38卷 1036-1043页

作者：苏媛媛王秦豪茹懿董健李霞张正祥延安大学医学院药理学教研室陕西延安716000 空军军医大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室肿瘤生物学国家重点实验室陕西西安710032

程序性细胞死亡蛋白1配体1/程序性细胞死亡蛋白1(PD-L1/PD-1)免疫检查点是最有前景的肿瘤免疫治疗靶点之一。肿瘤等细胞表面过度表达的PD-L1通过与T细胞表面的PD-1结合,抑制T细胞活化,导致肿瘤免疫逃逸;靶向PD-1/PD-L1的治疗策略主要通... 详细信息

程序性细胞死亡蛋白1配体1/程序性细胞死亡蛋白1(PD-L1/PD-1)免疫检查点是最有前景的肿瘤免疫治疗靶点之一。肿瘤等细胞表面过度表达的PD-L1通过与T细胞表面的PD-1结合,抑制T细胞活化,导致肿瘤免疫逃逸;靶向PD-1/PD-L1的治疗策略主要通过阻断二者结合,恢复免疫细胞对肿瘤的杀伤作用。肿瘤细胞中PD-L1的水平与功能受到多层次的调控,其中,PD-L1的翻译后修饰(PTM)近年来备受关注,主要包括糖基化、磷酸化、泛素化、乙酰化以及棕榈酰化修饰等,这些修饰方式能够影响PD-L1的稳定性、细胞内定位或功能,进而调控T细胞活化和肿瘤免疫,因而干预PD-L1的PTM亦可作为新的抗肿瘤免疫逃逸治疗手段。

关键词：肿瘤免疫治疗程序性细胞死亡蛋白1配体1(PD-L1) 翻译后修饰综述

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干扰素刺激基因鸟苷酸结合蛋白2(GBP2)质粒的构建及其抗汉滩病毒感染的作用

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细胞与分子免疫学杂志 2023年第10期39卷 917-923页

作者：屈思瑞王芳张俊梅应旗康赵瑞华古天乐吴兴安延安大学生命科学学院陕西延安716000 空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室陕西西安710032

目的构建pCMV-GBP2-3tag6真核表达质粒,研究鸟苷酸结合蛋白2(GBP2)在汉滩病毒(HTNV)感染过程中的作用。方法利用一步定向克隆(In-fusion)方法构建pCMV-GBP2-3tag6质粒,并用双酶切和测序方法进行鉴定。将构建成功的pCMV-GBP2-3tag6质粒转... 详细信息

目的构建pCMV-GBP2-3tag6真核表达质粒,研究鸟苷酸结合蛋白2(GBP2)在汉滩病毒(HTNV)感染过程中的作用。方法利用一步定向克隆(In-fusion)方法构建pCMV-GBP2-3tag6质粒,并用双酶切和测序方法进行鉴定。将构建成功的pCMV-GBP2-3tag6质粒转染A549细胞,CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。A549细胞转染GBP2质粒24 h后感染HTNV。实时定量PCR检测HTNV S、β干扰素(IFN-β)、黏病毒抗性蛋白1(MX1)、干扰素诱导蛋白四肽重复序列1(IFIT1)、CXC趋化因子配体10(CXCL10)基因mRNA表达水平,Western blot法检测GBP2和HTNV核衣壳蛋白(NP)表达,病灶形成实验检测细胞上清中HTNV滴度。结果成功构建pCMV-GBP2-3tag6真核表达质粒,并在A549细胞中成功表达GBP2蛋白;过表达GBP2对细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡无影响,但是可以显著降低细胞中HTNV S基因mRNA水平和NP蛋白含量以及细胞上清中HTNV滴度,调控HTNV感染后IFN通路相关基因的表达。结论GBP2可能通过调控IFN的反应抑制HTNV感染。

关键词：鸟苷酸结合蛋白2(GBP2) 汉滩病毒(HTNV) 抗病毒 IFN

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育人理念为核心的细胞生物学教学设计——以“海洋生物毒素与离子通道”为例

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中文科技期刊数据库（全文版）教育科学 2022年第4期 1-3页

作者：孙平新汪超朱海英李文林海军军医大学基础医学院细胞生物学教研室上海200433

为战育人是军校教育的根本任务,而课程思政是落实这一任务的重要手段。细胞生物学是生命科学和医学专业的基础学科和前沿学科。在课程思政背景下,通过讨论式教学、翻转课堂、线上线下教学等多种教学方式的结合互补,将“海洋生物毒素”... 详细信息

为战育人是军校教育的根本任务,而课程思政是落实这一任务的重要手段。细胞生物学是生命科学和医学专业的基础学科和前沿学科。在课程思政背景下,通过讨论式教学、翻转课堂、线上线下教学等多种教学方式的结合互补,将“海洋生物毒素”相关的军事前沿问题融入到“离子通道”的章节中。该教学模式实现了细胞生物学专业课与课程思政的同向同行,不仅提高了学员的学习积极性和科研素养、创新能力,还突出了为战育人的理念和向海为战的海军特色,为创新型和应用型人才的培养提供重要参考。

关键词：细胞生物学离子通道海洋生物毒素课程思政为战育人

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脐带来源的华通氏胶间充质干细胞的分离、特性及应用前景

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癌变．畸变．突变 2022年第3期34卷 233-236页

作者：丁赛张红霞朱海英海军军医大学基础医学院细胞生物学教研室上海200433

间充质干细胞(MSCs)的来源非常广泛。虽然各种组织来源的MSCs生物学特性不尽相同,但在标准培养条件下该类细胞均可以贴壁生长;细胞群体中有95%以上的细胞表达典型的间充质标记分子,如CD73、CD90和CD105,但缺乏造血标记分子CD14、CD19、C... 详细信息

间充质干细胞(MSCs)的来源非常广泛。虽然各种组织来源的MSCs生物学特性不尽相同,但在标准培养条件下该类细胞均可以贴壁生长;细胞群体中有95%以上的细胞表达典型的间充质标记分子,如CD73、CD90和CD105,但缺乏造血标记分子CD14、CD19、CD34、CD45和CD79a的表达;特别是均具有分化为成脂细胞、成骨细胞和成软骨细胞的能力。这些性质是国际细胞治疗协会给出的定义该类细胞的最低标准。脐带间充质干细胞是指来源于新生儿脐带组织中的多能干细胞。目前来看,从脐带不同解剖学部位(区室)获得的MSCs的生物学性质也存在差异,其中从脐带华通氏胶中分离获得的华通氏胶间充质干细胞,在增殖能力、分化潜能、免疫调节能力等方面均明显优于其他区室来源的间充质干细胞,是用于组织器官损伤修复及免疫调节的一种理想的“种子”细胞,被认为具有更好的临床应用前景。本文围绕近年来华通氏胶间充质干细胞的分离建系、增殖特性、分化潜能以及临床应用方面的研究进展进行了综述,其中重点介绍了化学诱导分化方案的建立和优化,认为与通过遗传改变诱导重编程方法相比,化学诱导分化方法具有更好的临床应用潜力。

关键词：脐带华通氏胶间充质干细胞分化潜能分离增殖特性

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