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中华医学会2012年医学遗传学年会暨全国第十一次医学遗传学学术会议

作者：张毅薛赓朱晓婷孙树汉第二军医大学基础部医学遗传学教研室上海200433

先兆子痫会引起孕产妇及胎儿死亡率增高。子宫胎盘供氧不足被认为是先兆子痫发病的主要机制之一,但具体哪些分子参与了缺氧应激以及如何影响胎盘的发育目前还不是很清楚。近来microRNAs作为一类新的缺氧应答分子被陆续报道。我们研究表... 详细信息

先兆子痫会引起孕产妇及胎儿死亡率增高。子宫胎盘供氧不足被认为是先兆子痫发病的主要机制之一,但具体哪些分子参与了缺氧应激以及如何影响胎盘的发育目前还不是很清楚。近来microRNAs作为一类新的缺氧应答分子被陆续报道。我们研究表明,microRNA-210在先兆子痫患者的胎盘组织及外周血中表达上调,在体外缺氧环境下培养的滋养层细胞中也观察到这种现象的发生。异常表达的microRNA-210抑制了滋养层细胞的迁移与侵袭能力,与细胞迁移与血管重塑相关的两个基因,Ephrin-A3与Homeobox-A9,随后被证实是microRNA-210的靶基因。除了文献报道的HIF 1α,我们还发现缺氧环境下过表达的microRNA-210可以被转录因子NF-κB p50调控。综上研究表明,异常表达的microRNA-210在先兆子痫的分子发病机制中具有重要作用,孕妇外周血中检测到的microRNA-210水平改变还可作为先兆子痫疾病诊断的候选分子标志物。

关键词： pre-eclampsia hypoxia microRNA trophoblast cell transcriptional regulation

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5-羟色胺与免疫系统的关系及其在免疫相关疾病中的作用

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第9期28卷 999-1001页

作者：魏伟隋秉东刘洁玮韩琳张赟第四军医大学口腔医学系陕西西安710032 第四军医大学免疫学教研室陕西西安710032

5-羟色胺(5-HT)是一种由色氨酸衍生而来的自体活性物质,主要作为神经递质影响神经系统的功能。近年来研究发现,5-HT通过结合表达在免疫细胞上的受体,调节免疫细胞功能,在机体神经免疫调节网络中发挥重要作用。本文主要综述了5-HT在免疫... 详细信息

5-羟色胺(5-HT)是一种由色氨酸衍生而来的自体活性物质,主要作为神经递质影响神经系统的功能。近年来研究发现,5-HT通过结合表达在免疫细胞上的受体,调节免疫细胞功能,在机体神经免疫调节网络中发挥重要作用。本文主要综述了5-HT在免疫细胞中的合成和储存,对固有免疫应答、适应性免疫应答的影响以及与免疫相关疾病的关系。

关键词： 5-羟色胺免疫系统神经免疫

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游离脂肪酸诱导小鼠肝实质细胞体外脂肪化并加速细胞凋亡

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肝脏 2013年第5期18卷 306-309页

作者：晏贤春胡彬王赫杨俊涛第四军医大学遗传与发育教研室西安710032 蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心国家蛋白质科学中心(北京)军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质药物国家工程研究中心

目的建立小鼠非酒精性脂肪肝病(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)体外细胞模型,为进一步体外药物高通量的筛选以及深入探讨NAFLD发生发展的分子机制奠定基础。方法胶原酶灌注分离并培养小鼠原代肝实质细胞,随后给予不同浓度的... 详细信息

目的建立小鼠非酒精性脂肪肝病(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)体外细胞模型,为进一步体外药物高通量的筛选以及深入探讨NAFLD发生发展的分子机制奠定基础。方法胶原酶灌注分离并培养小鼠原代肝实质细胞,随后给予不同浓度的游离脂肪酸(free fatty acids,FFA)刺激,进行油红染色以及三酰甘油测定;通过MTS法以及流式细胞术分析游离脂肪酸对肝实质细胞增殖以及细胞凋亡的影响,使用Western印迹法检测肝实质细胞内的MAPK相关信号通路的变化,实时定量PCR检测细胞中bim与fas的表达。结果肝实质细胞内的脂质累积程度随加入的FFA浓度上升而呈明显增加(P<0.05);肝实质细胞的细胞增殖受到明显抑制,细胞凋亡明显增加,肝实质细胞内JNK信号通路随刺激时间延长强度增加,ERK信号通路随刺激时间延长强度减弱,细胞内bim和fas的表达量上升。结论成功建立了非酒精性脂肪肝病的体外细胞模型,能够很好地模拟体内肝实质细胞内脂肪累积以及细胞凋亡现象。

关键词：非酒精性脂肪性肝病体外模型肝实质细胞

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叶酸通过调节组蛋白甲基化进而抑制肝细胞上皮间质转化及肝癌的发生发展

叶酸通过调节组蛋白甲基化进而抑制肝细胞上皮间质转化及肝癌的发...

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中华医学会2012年医学遗传学年会暨全国第十一次医学遗传学学术会议

作者：朱晓婷张毅薛赓陈国梁孙树汉第二军医大学基础部医学遗传学教研室上海 200433

目的近年来流行病学调查资料显示,叶酸缺乏与多种肿瘤发生相关,但缺少后续实验支持且作用机制不清.本实验的目的即为探讨补充叶酸对肝癌发生是否有防护作用及作用的具体分子机制,为临床研究提供扎实的理论与实验基础.方法构建肝癌小... 详细信息

目的近年来流行病学调查资料显示,叶酸缺乏与多种肿瘤发生相关,但缺少后续实验支持且作用机制不清.本实验的目的即为探讨补充叶酸对肝癌发生是否有防护作用及作用的具体分子机制,为临床研究提供扎实的理论与实验基础.方法构建肝癌小鼠模型,检测叶酸对肝损伤、肝硬化及肝癌的发生发展情况的影响;realtime-PCR、Western Blot、免疫组化检测叶酸对小鼠肝组织及人肝细胞EMT标志分子的作用.CHIP检测叶酸对组蛋白甲基化水平的影响.结果补充叶酸可显著抑制药物诱发的小鼠肝纤维化、肝硬化及肝癌的发生.补充叶酸可抑制小鼠肝细胞及人肝细胞EMT.进一步的实验表明在人肝细胞及前述小鼠肝组织中,叶酸皆可调节EMT相关基因组蛋白甲基化水平.结论叶酸通过调节组蛋白甲基化水平,调节EMT相关基因的表达,从而抑制肝脏EMT,抑制肝癌的发生发展.证实叶酸对肝癌有着重要的预防作用.

关键词：叶酸组蛋白甲基化上皮间质转化

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太白楤木皂苷通过激活FOXO3a和Nrf2通路发挥抗衰老作用

太白楤木皂苷通过激活FOXO3a和Nrf2通路发挥抗衰老作用

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第四届中国衰老与抗衰老学术大会

作者：李影娜郭育奚苗苗海春旭李金钢秦绪军西安交通大学第二附属医院老年病科第四军医大学预防医学院毒理学教研室陕西师范大学生命科学院第四军医大学预防医学院毒理学教研室陕西师范大学生命科学院

目的:研究太白楤木皂苷对D-半乳糖(D-gal)致衰老大鼠的抗衰老作用并探讨其中可能的分子机制.方法:本研究选用D-gal(剂量为150mg/kg·d)皮下注射建立大鼠衰老模型,并用太白楤木皂苷(灌胃剂量为200mg/kg.d)作为药物干预.观察太白橡木... 详细信息

目的:研究太白楤木皂苷对D-半乳糖(D-gal)致衰老大鼠的抗衰老作用并探讨其中可能的分子机制.方法:本研究选用D-gal(剂量为150mg/kg·d)皮下注射建立大鼠衰老模型,并用太白楤木皂苷(灌胃剂量为200mg/kg.d)作为药物干预.观察太白橡木皂苷对衰老相关指标一胸腺、脾脏系数、晚期糖基化终末产物(AGEs)、β-半乳糖苷酶,氧化应激相关指标一脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2),抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GR)和还原型谷胱甘肽(GSH)的影响.用Western Blot检测代表性脏器肝脏中Fox O家族转录因子3a(FOXO3a)、蛋白激酶B(Akt)、核因子2相关因子2(Nrf2)、细胞加氧合酶1(HO-1)、谷氨酸-半胱氨酸连接酶(GCL)、SOD1、SOD2、CAT蛋白表达的变化.EMSA方法检测FOXO3a的转录活性.结果及结论:D-gal能引起大鼠机体衰老样改变,太白楤木皂苷具有很好的抗衰老保护作用.太白楤木皂苷一方面可以通过调控Akt/FOXO3a通路抑制衰老大鼠机体中Akt的磷酸化水平,进而抑制FOXO3a的磷酸化水平,提高FOXO3a的转录活性,促进其下游抗氧化酶SOD2和CAT的表达;另一方面可以通过激活Nrf2通路促进衰老大鼠机体细胞核中Nrf2水平和其磷酸化水平,进而上调其下游抗氧化酶HO-1、GCLC和GCLM的表达.两条通路共同作用,提高了机体抗氧化能力,减轻了ROS的氧化损伤作用,从而达到抗衰老的生物学作用.

关键词：太白楤木皂苷抗衰老作用分子机制动物模型

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脓毒症合并弥散性血管内凝血患者血清G-CSF水平及意义

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中国急救医学 2013年第4期33卷 306-309页

作者：胡敦重宋景春林兆奋赵良解放军第二军医大学附属长征医院急救科上海200003 解放军第九四医院ICU 江西南昌330002

目的检测脓毒症及合并弥散性血管内凝血（DIC）患者血清中粒细胞集落刺激因子（G-CSF）水平，并判断其对脓毒症患者发展成为DIC的诊断意义。方法严重脓毒症患者28例（SS组），脓毒症合并DIC患者12例（SSD组），同期门诊体检者20例为对... 详细信息

目的检测脓毒症及合并弥散性血管内凝血（DIC）患者血清中粒细胞集落刺激因子（G-CSF）水平，并判断其对脓毒症患者发展成为DIC的诊断意义。方法严重脓毒症患者28例（SS组），脓毒症合并DIC患者12例（SSD组），同期门诊体检者20例为对照组，收集临床及实验室参数，计算APACHEⅡ评分和DIC评分；采用酶联免疫吸附测定（ELISA）方法检测血清G-CSF水平。结果ss组和SSD组患者血G-CSF水平较对照组明显升高（P〈0．05），但SS组和SSD组患者之间血清G-CSF水平差异无统计学意义（P〉0．05）。相关分析显示，G-CSF与WBC、PCT、APACHEⅡ评分呈显著正相关。ROC曲线图显示，血清G-CSF的AUC=0．887，95％CI为（0．825，0964）（P〈0．05）。结论血清G-CSF水平主要与脓毒症严重程度有关，与DIC的发病机制无明显相关性，可作为脓毒症严重程度判断的实验室证据。

关键词：粒细胞集落刺激因子(G-CSF) 降钙素原(PCT) 白细胞计数(WBC)

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RBP-J剔除小鼠的神经系统发育变化

RBP-J剔除小鼠的神经系统发育变化

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中国遗传学会第二届“模式生物与人类健康”研讨会

作者：高方邹海郑敏化胡抑扬李三中韩骅第四军医大学医学遗传与发育生物学教研室第四军医大学神经生物学教研室

Notch信号通路在哺乳动物中枢神经系统的发育过程中发挥着重要的作用,它可以参与神经发生的多个环节,例如可以维持神经干细胞的未分化状态,也可以调控子代细胞的最终成熟等。但是,关于Notch信号通路是如何实现在发育的不同阶段来发挥不... 详细信息

Notch信号通路在哺乳动物中枢神经系统的发育过程中发挥着重要的作用,它可以参与神经发生的多个环节,例如可以维持神经干细胞的未分化状态,也可以调控子代细胞的最终成熟等。但是,关于Notch信号通路是如何实现在发育的不同阶段来发挥不同作用的问题还有待于进一步的研究。我们在前期成功构建NesCre转基因小鼠的基础上,

关键词：神经系统发育 Notch 信号通路 RBP-J

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CDCA在C57BL/6小鼠中上调肝脏成纤维细胞生长因子21表达及其效应

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第三军医大学学报 2012年第18期34卷 1831-1834页

作者：刘小花王永超李良鹏彭家和江渝刘智敏重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 第三军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的研究法尼酯X受体(farnesoid X receptor,FXR)的激活对C57BL/6小鼠肝脏中纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor 21,FGF21)基因表达的影响。方法将18只3～4周龄C57BL/6小鼠随机分为3组,分别使用不同浓度鹅脱氧胆酸(chenodeoxy cholic acid,CDCA,0、10 mg/kg和50 mg/kg)给小鼠灌胃7 d,处死后分别提取小鼠肝脏总RNA和总蛋白,采用RT-PCR法和Western blot法检测各组小鼠FGF21RNA和蛋白表达水平的变化;同时用酶法测定检测小鼠血甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)及血糖(GLU)变化。结果 C57BL/6小鼠肝脏中FGF21 RNA和蛋白的表达水平呈CDCA剂量依赖型增高;小鼠血脂及血糖测定结果显示:TG,TC和血糖随CDCA浓度的升高而下降。结论 CDCA可上调C57BL/6小鼠肝脏中FGF21的表达并导致血TG、TC及GLU下降。

关键词：法尼酯X受体成纤维细胞生长因子21 鹅脱氧胆酸血脂血糖

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凝集素化昔萘酸沙美特罗纳米粒-微粒的药效和药动学研究

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第二军医大学学报 2013年第11期34卷 1220-1224页

作者：李慧董文凤杜丽董新威谢敏强李凤前江苏大学药学院药剂学教研室镇江212013 上海市第八人民医院药剂科上海200235 浙江大学医学院国家食品药品监督管理局浙江呼吸药物研究实验室杭州310058

目的研究小鼠体内干粉吸入麦胚凝集素(WGA)化修饰的昔萘酸沙美特罗(SalX)纳米粒-微粒(NiMS)的药效学及药动学。方法通过皮下和腹腔注射卵清蛋白(OVA)建立小鼠肺哮喘病理模型,经气道干粉吸入给予WGA-SalXNiMS粉末,采用对照实验法,检测给... 详细信息

目的研究小鼠体内干粉吸入麦胚凝集素(WGA)化修饰的昔萘酸沙美特罗(SalX)纳米粒-微粒(NiMS)的药效学及药动学。方法通过皮下和腹腔注射卵清蛋白(OVA)建立小鼠肺哮喘病理模型,经气道干粉吸入给予WGA-SalXNiMS粉末,采用对照实验法,检测给药后的肺组织及气道炎症情况,并对药物在小鼠血浆和肺组织中的药代动力学行为进行研究。数据用Sigma State统计软件包处理。结果与模型组相比,SalX-NiMS组和WGA-SalX-NiMS组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数、嗜酸粒细胞、淋巴细胞及巨噬细胞数目呈下降趋势。WGA-SalX-NiMS组小鼠BALF中淋巴细胞及巨噬细胞数与SalX-NiMS组相比减少(P<0.05)。在小鼠血浆中,SalX-NiMS组的tmax为1.500h,Cmax为57.366mg/L,t1/2β为69.315h,AUC0-∞为2 427.205mg·L-1·h,MRT0-∞为55.294h;WGA-SalX-NiMS组的tmax为1.000h,Cmax为62.581mg/L,t1/2β为69.315h,AUC0-∞为4 071.838mg·L-1·h,MRT0-∞为75.094h。在小鼠肺组织中,SalXNiMS组的tmax为0.083h,Cmax为0.497μg/mg,t1/2β为11.231h,AUC0-∞为3.936μg·mg-1·h,MRT0-∞为13.854h;WGASalX-NiMS组的tmax为0.083h,Cmax为0.796μg/mg,t1/2β为27.294h,AUC0-∞为5.578μg·mg-1·h,MRT0-∞为26.330h。WGA-SalX-NiMS组的血浆及肺组织药物浓度均高于SalX-NiMS组(P<0.05)。结论 WGA修饰后的SalX-NiMS在小鼠体内易于释药,血浆和肺组织中药物浓度较高,有利于哮喘发作时炎症的控制与改善。

关键词：昔萘酸沙美特罗纳米粒-微粒系统麦胚凝集素药物效应动力学药代动力学

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电磁脉冲对BV-2细胞形态和分泌功能的影响及其机制探讨

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中华劳动卫生职业病杂志 2012年第3期30卷 163-167页

作者：杨龙龙周艳李海娟郭娟张琰君丁桂荣郭国祯第四军医大学军事预防医学院放射医学教研室西安710032

目的研究电磁脉（electromagneticpulse，EMP）对小鼠BV-2小胶质细胞形态及分泌功能的影响，并初步探讨其作用机制。方法离体培养的BV．2细胞经200kV，mEMP辐照200次，分别在辐照后1、6、12、24h收集细胞培养上清及细胞。倒置显微镜下... 详细信息

目的研究电磁脉（electromagneticpulse，EMP）对小鼠BV-2小胶质细胞形态及分泌功能的影响，并初步探讨其作用机制。方法离体培养的BV．2细胞经200kV，mEMP辐照200次，分别在辐照后1、6、12、24h收集细胞培养上清及细胞。倒置显微镜下观察细胞形态变化，ELISA法检测培养上清中肿瘤坏死因子-a（TNF-a）、白细胞介素（IL）．1p、IL-10等细胞因子水平的变化，硝酸还原酶法检测培养上清中-氧化氮（N0）水平，***探针检测活性氧，免疫印迹（***）法检测细胞外信号调节激酶（ERK）、c-Jun氨基末端激酶（JNK）、p38磷酸化水平和蛋白表达量的变化。应用p38抑制剂（SB203580）预处理细胞后再进行EMP辐照，然后检测培养上清中NO水平和活性氧的生成。结果EMP辐照后1、6和12h，部分小胶质细胞出现胞体变大、突触变粗变短，且活化细胞比例与假辐照组相比明显增加，差异有统计学意义（P〈0．05）；EMP辐照后细胞培养上清中TNF-a、IL-1β、IL-10等细胞因子水平未发生明显改变，但活性氧检测结果显示，与假辐照组（小胶质细胞平均荧光强度10．34）相比，EMP辐照后1h小胶质细胞荧光强度（平均荧光强度21．56）明显增加，6h达峰值（平均值为32．46），12h开始恢复（平均荧光强度24．36），差异均有统计学意义（P〈0．05），24h恢复至假辐照水平；EMP辐照后NO水平的变化与活性氧一致，辐照后1h开始增加，6h达峰值，12h开始恢复，24h恢复至假辐照组水平；蛋白杂交结果显示，EMP辐照后1、6h，p38的磷酸化水平和蛋白水平较假辐照组明显增加，差异有统计学意义（P〈0．05），ERK和JNK无明显变化。应用p38抑制剂SB203580预处理细胞，明显抑制了EMP诱导的小胶质细胞对活性氧和NO的产生，活性氧水平除6h组未恢复至假辐照水平外，其他各组均恢复至假辐照水平，NO水平各组均恢复至假辐照组水平。结论EMP辐照可活化小胶质细胞并且促进其对NO和活性氧的生成，p38信号通路参与了此过程。

关键词：电磁场神经胶质细胞活性氧组分一氧化氮有丝分裂素激活蛋白激酶类

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