检索结果-内蒙古大学图书馆

免疫学杂志 2005年第5期21卷 393-396页

作者：吴亚男邹全明罗萍郭刚王晓勤第三军医大学临床微生物学及免疫学教研室重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400038

目的制备抗幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(UreB)单克隆抗体,并检测其对尿素酶活性的抑制能力。方法以重组UreB蛋白为免疫原,通过杂交瘤技术制备抗UreB单克隆抗体,用ELISA检测mAb的效价、亲和常数;用Westernblot检测mAb的特异性。将尿素酶与... 详细信息

目的制备抗幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(UreB)单克隆抗体,并检测其对尿素酶活性的抑制能力。方法以重组UreB蛋白为免疫原,通过杂交瘤技术制备抗UreB单克隆抗体,用ELISA检测mAb的效价、亲和常数;用Westernblot检测mAb的特异性。将尿素酶与单克隆抗体预孵育后加入含有尿素和酚红的缓冲液,于550nm测定单克隆抗体对尿素酶活性的抑制能力。结果得到5株稳定分泌抗UreB的单克隆抗体的杂交瘤细胞1D5、9E1、3A2、1D6、6E6。测定抗体亚型1D5,9E1,3A2为IgG1,1D6、6E6为IgG2a,亲和常数分别为4×108、4.6×108、2.8×108、2×109、3×109L/mol。Westernblot鉴定5种单克隆抗体均能和重组UreB及全菌蛋白中的UreB抗原发生特异性结合,且均不与肠道常见菌发生交叉反应。5株单克隆抗体中只有6E6具有对尿素酶活性的抑制作用,且抑制率与单克隆抗体剂量相关。结论制备了5株稳定分泌抗UreB抗体的杂交瘤细胞株,产生的单克隆抗体效价高且特异性好,其中6E6能抑制尿素酶活性。本研究为探讨尿素酶的作用机制、UreB的纯化及Hp的临床诊断和治疗奠定了基础。

关键词：尿素酶B亚单位单克隆抗体尿素酶活性

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单纯疱疹病毒1型特异性表位的串联表达及免疫性质的研究

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中华男科学杂志 2006年第7期12卷 579-582页

作者：姬小薇毛旭虎邹全明于庆潭赵莉莉第三军医大学临床微生物学及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400038

目的:串联重组表达单纯疱疹病毒1型(HSV-1)特异性表位,以获得具有抗原反应性能用于HSV-1鉴别诊断的抗原。方法:采用DNA重组技术将HSV-1特异性表位gG112-127进行串联,获得不同倍数重复串联的基因片段。将含有不同重复倍数的基因片段与表... 详细信息

目的:串联重组表达单纯疱疹病毒1型(HSV-1)特异性表位,以获得具有抗原反应性能用于HSV-1鉴别诊断的抗原。方法:采用DNA重组技术将HSV-1特异性表位gG112-127进行串联,获得不同倍数重复串联的基因片段。将含有不同重复倍数的基因片段与表达载体连接,转化至宿主细胞JM109,异丙基-硫代-β-D-半乳糖苷诱导,SDS-PAGE分析其表达,W estern印迹分析其抗原反应性。结果:获得了4×、8×、16×、32×重复串联的阳性重组子。其中8×重组子在JM109细菌中得到了17.5%的表达,其表达产物主要以包涵体形式存在。W estern印迹显示此重组蛋白能与HSV-1抗血清发生抗原抗体反应,而不与HSV-2抗血清发生抗原抗体反应。结论:HSV-1-gG112-127重组蛋白可作为HSV-1特异性检测的抗原来鉴别诊断HSV-1和HSV-2的感染。

关键词：单纯疱疹病毒糖蛋白G DNA重组

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抗幽门螺旋杆菌尿素酶B亚单位(UreB)单克隆抗体抗原识别表位的初步鉴定

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免疫学杂志 2007年第2期23卷 184-186,190页

作者：李海侠吴亚男王宪灵张卫军罗平余抒陈洪章毛旭虎第三军医大学医学检验系临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400038

目的初步确定抗幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(UreB)单克隆抗体(mAb)6E6识别的抗原表位。方法采用截短法分段构建含UreB抗原的重组质粒,分别命名为U12,U13,U15,U16,U47。用IPTG诱导表达融合蛋白。对表达产物进行SDS-PAGE蛋白电泳及Westernblo... 详细信息

目的初步确定抗幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(UreB)单克隆抗体(mAb)6E6识别的抗原表位。方法采用截短法分段构建含UreB抗原的重组质粒,分别命名为U12,U13,U15,U16,U47。用IPTG诱导表达融合蛋白。对表达产物进行SDS-PAGE蛋白电泳及Westernblot分析。结果6E6能够分别识别1～300位氨基酸的U12片段,1～260位氨基酸的U16片段,1～230位氨基酸的U15片段,而不能识别1～200位氨基酸的U13片段和251～389位氨基酸的U47片段。结论mAb6E6抗体识别的抗原表位位于200～230位氨基酸。

关键词：幽门螺杆菌 UreB分段抗原分子单克隆抗体抗原表位

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幽门螺杆菌napA基因克隆及高效表达与鉴定

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中国人兽共患病学报 2006年第9期22卷 882-883,887页

作者：高原邹全明吴超第三军医大学检验系临床微生物学及临床免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400038

世界上约有超过50%的人口感染幽门螺杆菌。目前,已证实这种革兰氏阴性的微需氧菌与慢性浅表性胃炎(胃黏膜炎症)、慢性活动性胃炎(胃黏膜炎症伴有分叶核白细胞浸润)、胃溃疡疾病(胃及十二指肠溃疡)和胃癌密切相关。幽门螺杆菌产生一系列... 详细信息

世界上约有超过50%的人口感染幽门螺杆菌。目前,已证实这种革兰氏阴性的微需氧菌与慢性浅表性胃炎(胃黏膜炎症)、慢性活动性胃炎(胃黏膜炎症伴有分叶核白细胞浸润)、胃溃疡疾病(胃及十二指肠溃疡)和胃癌密切相关。幽门螺杆菌产生一系列独特的毒力因子,其中包括尿素酶、细胞空泡毒素和中性粒细胞激活蛋白(H矿NAP)。Hp-NAP可以激起中性粒细胞的天然免疫反应,[第一段]

关键词：幽门螺杆菌高效表达基因克隆中性粒细胞激活蛋白胃及十二指肠溃疡慢性浅表性胃炎慢性活动性胃炎胃黏膜炎症

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Th17细胞及IL-17在病原微生物感染中的研究进展

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中国免疫学杂志 2009年第9期25卷 854-857页

作者：刘晓斐石云邹全明郭刚第三军医大学医学检验系临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400038

在机体的适应性免疫应答中,CD4^+T细胞作为效应T细胞的重要成员之一,参与免疫应答的各个阶段,能协调固有免疫和适应性免疫系统的功能活性,并在免疫调节中发挥着关键作用。根据产生细胞因子和生物功能的不同,传统上将CD4^+T细胞分为Th1和... 详细信息

在机体的适应性免疫应答中,CD4^+T细胞作为效应T细胞的重要成员之一,参与免疫应答的各个阶段,能协调固有免疫和适应性免疫系统的功能活性,并在免疫调节中发挥着关键作用。根据产生细胞因子和生物功能的不同,传统上将CD4^+T细胞分为Th1和Th2两类细胞亚群,它们在免疫过程中相互调节并相互制约。Th1细胞分泌IFN-γ和IL-2,清除胞内病原微生物;Th2细胞分泌IL-4、IL-5和IL-13,清除细胞外病原微生物并参与变态反应。[第一段]

关键词： CD4^+T细胞病原微生物感染 IL-17 适应性免疫系统免疫应答细胞分泌 IFN-γ 固有免疫

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肠出血性大肠杆菌(EHEC) O157∶H7志贺毒素研究进展

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中国人兽共患病学报 2007年第1期23卷 83-85页

作者：陈洪章邹全明第三军医大学医学检验系临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400038

肠出血性大肠杆菌(EHEC)0157:H7于1975年被首次分离,为革兰氏阴性杆菌,对酸耐受性强,在pH3－5条件下,可长期生存,能产生致死性志贺毒素(Shiga toxin,Stx),1982年被确认为严重致病菌。其感染具有暴发流行趋势、强烈的致病性与致死性和抗... 详细信息

肠出血性大肠杆菌(EHEC)0157:H7于1975年被首次分离,为革兰氏阴性杆菌,对酸耐受性强,在pH3－5条件下,可长期生存,能产生致死性志贺毒素(Shiga toxin,Stx),1982年被确认为严重致病菌。其感染具有暴发流行趋势、强烈的致病性与致死性和抗生素治疗可加剧病情的危险性等特点,已经成为全球性的公共卫生问题,对人们的健康构成了巨大威胁。据报道,美国每年感染STEC约有10万例.其中O157:H7感染约有7.3万例。近年来,美国、日本、加拿大、英国等发达国家EHEC O157:H7发病呈上升趋势,许多国家已把它列为法定报告传染病。我国江苏、安徽省曾于1999年暴发流行大肠杆菌O157感染性腹泻,患者超过2万例,死亡177例,流行时间7个月。[第一段]

关键词：肠出血性大肠杆菌志贺毒素 O157:H7 O157:H7感染大肠杆菌O157 革兰氏阴性杆菌法定报告传染病公共卫生问题

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比较蛋白质组学在幽门螺杆菌及其宿主细胞的研究进展

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中国人兽共患病学报 2008年第9期24卷 882-884页

作者：刘晓斐郭刚邹全明第三军医大学医学检验系临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400038

自1982年澳大利亚学者Warren等成功地在人胃黏膜组织中分离出幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）以来，有关Hp的研究进展迅速。研究发现，Hp是全球人群感染最广泛的致病菌之一，是公认的慢性胃炎和消化性溃疡的重要致病因子，并与... 详细信息

自1982年澳大利亚学者Warren等成功地在人胃黏膜组织中分离出幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）以来，有关Hp的研究进展迅速。研究发现，Hp是全球人群感染最广泛的致病菌之一，是公认的慢性胃炎和消化性溃疡的重要致病因子，并与胃腺癌和胃粘膜相关淋巴组织淋巴瘤的形成密切相关，已被世界卫生组织列为Ⅰ类致癌因子，给人类的健康带来严重威胁。

关键词：幽门螺杆菌比较蛋白质组学宿主细胞胃粘膜相关淋巴组织淋巴瘤世界卫生组织胃黏膜组织消化性溃疡澳大利亚

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肠出血性大肠杆菌O157：H7基因工程疫苗免疫小鼠的实验研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2008年第9期28卷 828-832页

作者：程建平邹全明毛旭虎易勇王庆旭马颖徐州医学院附属淮安医院检验科 233002 第三军医大学临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400038

目的研究肠出血性大肠杆菌O157：H7基因工程疫苗免疫小鼠后对该菌感染的保护能力。方法将60只BALB／c小鼠平均分为5组，分别为3种抗原单独免疫、三抗原联合免疫和PBS对照组，用注射方式免疫3次，抗原和佐剂均为每次100μg／只。采集免... 详细信息

目的研究肠出血性大肠杆菌O157：H7基因工程疫苗免疫小鼠后对该菌感染的保护能力。方法将60只BALB／c小鼠平均分为5组，分别为3种抗原单独免疫、三抗原联合免疫和PBS对照组，用注射方式免疫3次，抗原和佐剂均为每次100μg／只。采集免疫前和各次免疫后7d的小鼠血清检测抗体，末次免疫10d后以10^9CFU的O157全菌液经口感染小鼠。观察小鼠临床症状及死亡情况，检测粪便与肠道带菌情况，并作病理组织学检测。结果各抗原免疫组小鼠特异抗体明显增加，感染后各组小鼠均有死亡，IntiminC300、Stx2B、HlyAN436和联合免疫组保护率分别为73％、64％、36％和91％。未病死小鼠粪便排菌情况：对照组22d，实验组为5—14d。肠道带菌情况：对照组阳性率为100％，实验组为25％-83％。病死小鼠肺脏、肝脏均有明显组织病理学改变。结论IntiminC300、Stx2B和HlyAN436疫苗对于O157感染具有一定的预防作用，而联合免疫效果又大于单独免疫。

关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7 紧密黏附素志贺毒素ⅡB亚单位 EHEC溶血素基因工程疫苗

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幽门螺杆菌疫苗的研究进展

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胃肠病学 2007年第9期12卷 567-570页

作者：邹全明第三军医大学临床微生物学及免疫学教研室重庆市生物制药工程技术研究中心 400038

幽门螺杆菌(***)是人类上消化道疾病的重要致病菌,为慢性胃炎、胃溃疡和十二指肠溃疡的主要病因。目前临床治疗尚存在诸多不足,研制疫苗对预防和控制***感染具有十分重要的意义。经过20余年的发展,***疫苗在动物模型建立、候选抗原的选... 详细信息

幽门螺杆菌(***)是人类上消化道疾病的重要致病菌,为慢性胃炎、胃溃疡和十二指肠溃疡的主要病因。目前临床治疗尚存在诸多不足,研制疫苗对预防和控制***感染具有十分重要的意义。经过20余年的发展,***疫苗在动物模型建立、候选抗原的选择、佐剂和投递方式的优化等方面均已取得了较大突破。本文主要就全菌疫苗、亚单位疫苗(基因工程疫苗)、活载体疫苗和DNA疫苗四种类型的***疫苗的研究现状作一概述。

关键词：螺杆菌幽门疫苗进展

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幽门螺杆菌尿素酶B亚单位功能片段的纯化及活性研究

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南方医科大学学报 2007年第7期27卷 959-962页

作者：袁小澎邹全明柏杨杨珺郭鹰张卫军刘正祥南方医科大学珠江医院检验科广东广州510282 第三军医大学生物临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心重庆430038

目的建立一种有效的尿素酶功能片段的纯化方法。方法应用已构建的尿素酶B功能片段表达载体,IPTG诱导表达,包涵体鉴定试验判断目的蛋白表达形式,AKTA100上分别采用亲和层析和离子层析等多级纯化方式优化纯化条件,HPLC检测纯化蛋白纯度,... 详细信息

目的建立一种有效的尿素酶功能片段的纯化方法。方法应用已构建的尿素酶B功能片段表达载体,IPTG诱导表达,包涵体鉴定试验判断目的蛋白表达形式,AKTA100上分别采用亲和层析和离子层析等多级纯化方式优化纯化条件,HPLC检测纯化蛋白纯度,尿素酶活性阻断试验对纯化后功能片段进行活性鉴定。结果IPTG诱导后目的蛋白高表达,包涵体鉴定试验证实目的蛋白以可溶形式存在宿主细胞中,优化后方案得到目的蛋白纯度>90%且能被尿素酶B免疫的兔血清识别,纯化后蛋白免疫家兔后产生兔抗血清能够特异性中和Hp尿素酶活性。结论成功建立了尿素酶功能片段的纯化方法。

关键词：幽门螺杆菌蛋白纯化尿素酶B

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