检索结果-内蒙古大学图书馆

免疫学杂志 2009年第3期25卷 235-238页

作者：赵韧倪兵贾正才田易付晓岚吴玉章第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所

目的确认并鉴定一个新发现的小鼠FR4剪切变异体,并在mRNA水平检测其在小鼠脾淋巴细胞亚群中的表达。方法PCR克隆FR4CDS区时发现存在一个新的剪切变异体,酶切和测序予以鉴定,Western blot检测脾细胞中变异体的表达,流式分选脾细胞中CD8+... 详细信息

目的确认并鉴定一个新发现的小鼠FR4剪切变异体,并在mRNA水平检测其在小鼠脾淋巴细胞亚群中的表达。方法PCR克隆FR4CDS区时发现存在一个新的剪切变异体,酶切和测序予以鉴定,Western blot检测脾细胞中变异体的表达,流式分选脾细胞中CD8+、CD4+CD25-、CD4+CD25+T淋巴细胞,RT-PCR检测新的变异体在各细胞亚群中的表达。结果凝胶电泳显示存在一个CDS区碱基数大于野生型FR4的条带,测序表明此条带在野生型外显子基础上包含一个内含子成分,Western blotting证实新发现的剪切体在蛋白水平也存在,脾细胞中不同T细胞亚群均表达此新型变异体。结论mRNA和蛋白水平均证实存在一种新型FR4剪切变异体,不同T细胞亚群均表达此变异体暗示其在淋巴细胞摄取叶酸功能上不可或缺。

关键词：叶酸受体剪切变异体 T细胞亚群

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特异性细胞毒性T细胞活化的研究进展

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第三军医大学学报 2000年第10期22卷 992-997页

作者：万瑛吴玉章第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所重庆400038

特异性细胞毒性T细胞(Cytotoxic T lymphocyte,CTL)的活化是现代细胞免疫的重要研究领域,是具有高度时空复杂性的生物学行为,是众多免疫细胞、免疫分子协同作用的结果.

关键词： CTL 活化抗原递呈 APC细胞

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Pokemon基因siRNA逆转录病毒的制备及其对Hela细胞增殖的影响

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免疫学杂志 2008年第3期24卷 259-263,267页

作者：石晶磊贾正才邓一静吴玉章倪兵第三军医大学全军免疫学基础医学部研究所重庆400038

目的针对多种肿瘤细胞高表达Pokemon基因的特性,制备表达针对Pokemon基因的siRNA的逆转录病毒,研究其对感染肿瘤细胞中Pokemon基因沉默情况,探讨肿瘤防治的新方法。方法首先利用siRNA预测软件得到4条siRNA编码DNA序列,再构建重组逆转录... 详细信息

目的针对多种肿瘤细胞高表达Pokemon基因的特性,制备表达针对Pokemon基因的siRNA的逆转录病毒,研究其对感染肿瘤细胞中Pokemon基因沉默情况,探讨肿瘤防治的新方法。方法首先利用siRNA预测软件得到4条siRNA编码DNA序列,再构建重组逆转录病毒siRNA表达质粒;利用RT-PCR技术筛选出高表达Pokemon基因的肿瘤靶细胞。然后,将重组质粒转染靶细胞,利用实时定量RT-PCR和MTT等方法筛选出沉默效果最佳的siRNA。利用逆转录病毒包装细胞制备重组病毒,鉴定病毒滴度及其对体外培养细胞中Pokemon基因的沉默效应。结果通过酶切鉴定和测序等方法证实了预测出的四条siRNA编码DNA片段成功地构建到逆转录病毒表达载体pSilencer5.1-H1中。通过将这些重组质粒转入高表达Pokemon基因的Hela肿瘤细胞中,抗生素压力筛选出相应表达各种siRNA的细胞株,再从中筛选出了1个有50%以上沉默效应的候选siRNA。利用这一条siRNA表达质粒,在逆转录病毒包装细胞中制备出了滴度为105cfu/mL的重组病毒。此重组病毒感染Hela细胞后能显著降低其中Pokemon基因的表达。结论成功制备了表达人Pokemon基因siRNA的重组逆转录病毒,并且在体外实验中证实了该病毒能对肿瘤细胞Hela的增殖产生明显的抑制作用,为下一步的体内抗肿瘤研究提供了有力的佐证。

关键词： Pokemon基因逆转录病毒 RNA 肿瘤治疗

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蛋白糖基化与细胞毒性T淋巴细胞应答

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第三军医大学学报 2000年第10期22卷 997-1003页

作者：周吉军吴玉章第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所重庆400038

糖基化是已知的蛋白最重要的翻译后修饰.已知的蛋白糖基化有多种类型,其中最常见的是发生在天冬酰胺(Asparagine,Asn)的N-糖基化(N-linked glycosylation)和发生在丝氨酸(Serine,Ser)和苏氨酸(Threonine,Thr)的O-糖基化(O-linked glycosylation).糖蛋白中糖基的结构大小不一,少者仅一个单糖,稍复杂的寡糖链可由12～15个单糖残基衍生物组成,甚至可多达20～30个单糖残基.糖链的结构类型与其在肽链上共价连接的氨基酸种类有关.

关键词：蛋白糖基化 CTL 免疫应答免疫识别

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噬菌体呈现颗粒疫苗诱导抗肿瘤细胞毒性T细胞反应

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第三军医大学学报 2000年第10期22卷 946-948页

作者：万瑛吴玉章边疆赵建平王祥智周伟周丽芸唐燕贾正才第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所重庆400038

目的　构建呈现肿瘤相关抗原P815A的噬菌体颗粒 ,在体诱导针对肥大细胞瘤P815的特异性细胞毒性T细胞 (CTL)反应。方法　构建呈现CTL表位P1A35～ 4 3 的噬菌粒载体 ,大量制备呈现此表位的重组噬菌体颗粒 ,小剂量、无佐剂皮下免疫DBA/2小... 详细信息

目的　构建呈现肿瘤相关抗原P815A的噬菌体颗粒 ,在体诱导针对肥大细胞瘤P815的特异性细胞毒性T细胞 (CTL)反应。方法　构建呈现CTL表位P1A35～ 4 3 的噬菌粒载体 ,大量制备呈现此表位的重组噬菌体颗粒 ,小剂量、无佐剂皮下免疫DBA/2小鼠 (H 2 d) ,采用51Cr释放法、ELISPOT观察针对肥大细胞瘤P815的CTL反应。结果　重组噬菌体呈现颗粒疫苗在体诱导了针对弱抗原P815A的CTL反应。结论　丝状噬菌体呈现疫苗增强肿瘤相关抗原的免疫原性。

关键词：疫苗肿瘤丝状噬菌体免疫治疗 CTL

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多表位组合肽诱导HLA-A2^+人PBMC产生抗原特异性CD8^+T细胞应答的研究

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第三军医大学学报 2003年第12期25卷 1045-1048页

作者：石统东吴玉章周伟贾正才邹丽云第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所重庆400038

目的　探讨基于HBV抗原优势表位的治疗性多肽抗原组分、结构与体外诱导CD8+ T细胞应答之间的关系。方法　用计算机辅助分子设计技术 ,设计基于HBV抗原免疫优势性CTL表位、B细胞表位和破伤风类毒素通用Th细胞表位的 3种治疗性多肽候选疫... 详细信息

目的　探讨基于HBV抗原优势表位的治疗性多肽抗原组分、结构与体外诱导CD8+ T细胞应答之间的关系。方法　用计算机辅助分子设计技术 ,设计基于HBV抗原免疫优势性CTL表位、B细胞表位和破伤风类毒素通用Th细胞表位的 3种治疗性多肽候选疫苗分子 ,经Merrifield固相多肽合成技术合成 ,并经HPLC纯化、鉴定。以HLA A2 + 健康人和慢性乙型肝炎患者的PBMC为实验对象 ,进行体外诱导CD8+ T细胞应答的免疫学功能研究。结果　所设计治疗性多肽分子可在体外诱导较强的抗原特异性CD8+ CTL应答 ;“ AAA ”铰链区设计和“Th +B”细胞表位的引入可增强CTL表位肽的免疫原性。结论　提示在治疗性表位多肽疫苗的分子设计中 ,短而高柔性的“铰链区”设计和“Th +B”

关键词： HBV CTL 治疗性多肽表位分子设计

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人CD137分子基因克隆及其在COS-7细胞中表达的研究

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第三军医大学学报 2002年第11期24卷 1343-1345页

作者：黎万玲黄钢姜曼白云第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所重庆400038

目的　克隆人CD13 7分子的编码序列 ,将其重组入真核表达载体 ,并表达于COS 7细胞。方法　从活化的人T细胞cDNA文库中以PCR方法克隆编码人CD13 7的编码序列 ,对其序列进行测定。将测序正确的CD13 7编码序列克隆入真核表达载体PCI neo ,... 详细信息

目的　克隆人CD13 7分子的编码序列 ,将其重组入真核表达载体 ,并表达于COS 7细胞。方法　从活化的人T细胞cDNA文库中以PCR方法克隆编码人CD13 7的编码序列 ,对其序列进行测定。将测序正确的CD13 7编码序列克隆入真核表达载体PCI neo ,构建重组表达载体。采用脂质体法转染COS 7细胞 ,用流式细胞仪检测CD13 7分子的表达。结果　PCR方法扩增出一 80 0bp左右的基因片段 ,插入PCI neo构建重组表达载体后 ,经序列测定证实扩增的片段为人CD13 7编码序列。将重组子转染COS 7细胞 ,流式细胞仪检测显示有 2 7.11%的细胞表达人CD13 7分子。结论　成功地克隆并在COS 7细胞中表达了CD13 7分子。

关键词： CD137 COS-7细胞基因表达基因克隆

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小鼠肥大细胞瘤基因疫苗的免疫治疗作用研究

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第三军医大学学报 2002年第10期24卷 1140-1142页

作者：倪兵吴玉章李艳秋林治华唐艳王莉邹丽云贾正才周伟第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所重庆400038

目的　探讨α 病毒RNA复制酶对基因疫苗的免疫学效应的加强作用 ,寻找更好的基因疫苗形式。方法　将小鼠肥大细胞瘤P815的肿瘤特异抗原P1A基因克隆到含SFV的RNA复制酶的真核表达载体pSMART2a中 ,以此作为肿瘤基因疫苗 ,观察该疫苗对P81... 详细信息

目的　探讨α 病毒RNA复制酶对基因疫苗的免疫学效应的加强作用 ,寻找更好的基因疫苗形式。方法　将小鼠肥大细胞瘤P815的肿瘤特异抗原P1A基因克隆到含SFV的RNA复制酶的真核表达载体pSMART2a中 ,以此作为肿瘤基因疫苗 ,观察该疫苗对P815种植瘤的防治作用、特异细胞毒T淋巴细胞激活和抗体的生成情况。结果　该重组基因疫苗在体外有很好的表达 ,注射后CTL的最大杀伤效率为 60 % ,而普通载体疫苗形式pCI neo P1A则只有 40 %的杀伤活性 ;在观察期限内 ,前者的动物成瘤率和动物生存率分别为 2 0 %和 40 % ,后者则分别为 60 %和 2 0 %。两种情况下都不能检测到任何特异抗体的产生。结论　α 病毒RNA复制酶对基因疫苗的免疫学效应有加强作用。

关键词：基因疫苗肥大细胞瘤 RNA复制酶基因治疗 PIA基因

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MAGE-12 mRNA在肺癌中的表达及其意义

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第三军医大学学报 2002年第10期24卷 1146-1148页

作者：李艳秋吴玉章倪兵贾正才第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所重庆400038

目的　探讨肺癌组织中MAGE 12mRNA的表达及其意义。方法　采用RT PCR技术 ,检测了MAGE 12在 5 0例临床病人肺癌标本中mRNA水平的表达。结果　 5 0例临床肺癌标本中有 17例表达 (17 5 0 ,3 4% ) ,且肺鳞癌 (15 3 3 ,45 5 % )与肺腺癌 (... 详细信息

目的　探讨肺癌组织中MAGE 12mRNA的表达及其意义。方法　采用RT PCR技术 ,检测了MAGE 12在 5 0例临床病人肺癌标本中mRNA水平的表达。结果　 5 0例临床肺癌标本中有 17例表达 (17 5 0 ,3 4% ) ,且肺鳞癌 (15 3 3 ,45 5 % )与肺腺癌 (2 17,11 8% )有显著差异 (P <0 0 5 )。结论　MAGE 12基因在肺癌有较高的表达率 ,基于MAGE

关键词：肿瘤抗原 MAGE-12 肺癌逆转录-聚合酶链反应

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以病毒样颗粒为平台的分子载体和疫苗设计

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免疫学杂志 2006年第1期22卷 110-113页

作者：王惠明吴玉章第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所重庆400030

病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)在形态结构上类似于病毒,但不含病毒基因组。依据来源可分为源于病毒VLPs和人工VLPs。前者主要通过基因工程制备,后者由人工化学合成而来。VLPs的表面组分可进行灵活多样的修饰改造以满足不同需求... 详细信息

病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)在形态结构上类似于病毒,但不含病毒基因组。依据来源可分为源于病毒VLPs和人工VLPs。前者主要通过基因工程制备,后者由人工化学合成而来。VLPs的表面组分可进行灵活多样的修饰改造以满足不同需求;在适宜条件下VLPs可以包裹核酸或其它小分子物质。作为分子运载工具,VLPs可靶向性地递送基因、药物或其它小分子物质。VLPs具有独特的免疫学特性,不但能通过影响APC发挥佐剂效应,还可以作为其它佐剂、肽疫苗和核酸疫苗的整合平台设计多种形式的疫苗。VLPs在载体和疫苗设计中具有良好的应用前景。

关键词：病毒样颗粒载体疫苗设计

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