检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2010年第18期32卷 1925-1928页

作者：陈芳王艾平申明强陈默许杨王崧粟永萍程天民王军平第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室全军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的探讨人α防御素-5（humanα-defensin-5,HD-5）多肽体外抗单纯疱疹Ⅱ型病毒（herpes simplex virustype2,HSV-2）的作用及其机制。方法以绿猴肾细胞（Vero）为宿主细胞,采用CCK-8法首先分析10-200μg/ml浓度范围内HD-5多肽的细胞毒... 详细信息

目的探讨人α防御素-5（humanα-defensin-5,HD-5）多肽体外抗单纯疱疹Ⅱ型病毒（herpes simplex virustype2,HSV-2）的作用及其机制。方法以绿猴肾细胞（Vero）为宿主细胞,采用CCK-8法首先分析10-200μg/ml浓度范围内HD-5多肽的细胞毒性,再以HSV-2感染Vero细胞,分别于感染前后和感染的同时加入100μg/ml的HD-5多肽,72h后测定细胞保护率,结合细胞病变效应观察,分析HD-5抗HSV-2的作用效果和起效环节,并通过改变培养基中血清的浓度,观察血清对HD-5抗病毒作用的影响。结果在100μg/ml浓度以内,HD-5多肽几乎无细胞毒性,提前或同时加入HD-5多肽可以显著抑制HSV-2病毒引起的细胞病变反应、提高细胞保护率（P〈0.01）,而在HSV-2感染2h后加入HD-5多肽对Vero细胞的保护作用不明显（P〉0.05）;血清浓度会显著影响HD-5多肽的抗HSV-2活性,血清浓度越高,HD-5多肽对细胞的保护率越低。结论HD-5多肽在体外具有显著的抗HSV-2感染活性,其作用机制主要是通过干扰病毒对细胞的粘附、侵入而发挥作用。

关键词：防御素类疱疹病毒2型,人 Vero细胞体外研究

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小鼠微小RNA miR-22真核表达载体的构建及功能初步研究

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第三军医大学学报 2007年第9期29卷 803-805页

作者：张炜炜王涛艾国平粟永萍王军平邹仲敏邓均董世武第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室全军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的从基因组DNA扩增miR-22前体对应的基因组片段并克隆到pIRES2-EGFP,构建miR-22的真核表达载体。方法利用PCR技术从基因组DNA扩增miR-22前体对应的基因组片段,克隆到质粒pUCm-T,测序正确后构建到真核表达载体pIRES2-EGFP中,经BamHⅠ和... 详细信息

目的从基因组DNA扩增miR-22前体对应的基因组片段并克隆到pIRES2-EGFP,构建miR-22的真核表达载体。方法利用PCR技术从基因组DNA扩增miR-22前体对应的基因组片段,克隆到质粒pUCm-T,测序正确后构建到真核表达载体pIRES2-EGFP中,经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后1.5%琼脂糖凝胶电泳鉴定,并进行序列测定。脂质体Li-pofectamin2000法转染Hela细胞后G418筛选获得稳定转染克隆,提取总RNA,通过RT-PCR方法对neo片段进行鉴定,采用Northern blot技术检测miR-22的表达。结果PCR扩增得到的334bp片段与预期的miR-22前体对应的基因组片段序列一致;成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP/miR-22,测序结果正确。重组质粒转染Hela细胞后,经G418筛选成功获得阳性克隆。Northern blot分析显示miR-22在Hela细胞内高效表达。结论本实验成功克隆了miR-22的前体对应的基因组片段,构建其真核表达载体,并在Hela细胞内获得高表达,为深入研究微小RNA miR-22的功能奠定了基础。

关键词：微小RNA 真核表达载体 miR-22 基因组片段 Hela Northern blot

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不同伤情血清可有效激活IEC-6细胞PI3K/Akt通路

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第三军医大学学报 2006年第6期28卷 518-520页

作者：王锋超王涛艾国平王军平冉新泽杜智勇李军徐辉粟永萍第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室全军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的检测不同伤情血清对肠上皮细胞PI3K/Akt通路的激活。方法将对数生长期的IEC-6细胞无血清培养基培养24 h后,加入单放、单烧和复合伤24 h大鼠血清,并设正常大鼠血清组和无血清组作对照,刺激12 h后检测细胞AKT磷酸化水平。利用SELD I(s... 详细信息

目的检测不同伤情血清对肠上皮细胞PI3K/Akt通路的激活。方法将对数生长期的IEC-6细胞无血清培养基培养24 h后,加入单放、单烧和复合伤24 h大鼠血清,并设正常大鼠血清组和无血清组作对照,刺激12 h后检测细胞AKT磷酸化水平。利用SELD I(surfaced enhanced laser desorption/ion ization)蛋白质芯片技术对单放、单烧、复合伤24 h大鼠血清差异蛋白进行筛选和分析。结果单放、单烧和复合伤24 h大鼠血清刺激后的IEC-6细胞Akt磷酸化水平较正常大鼠血清刺激的高,其中烧伤组最高。单放组血清与单烧血清比较有11个差异峰,复合伤组与单烧组相比有6个差异峰。结论单放、单烧和复合伤血清均可有效激活IEC-6细胞的PI3K/Akt通路,烧伤组最强,可能和烧伤组血清特殊变化有关。

关键词： P13K/Akt IEC-6 血清烧伤放射复合伤 SELDI

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长期摄入低剂量贫铀对大鼠血象与肝肾功能的影响

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第三军医大学学报 2007年第17期29卷 1643-1646页

作者：李蓉冷言冰艾国平徐辉粟永萍程天民第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室全军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的研究长期摄入低剂量贫铀对大鼠的血象、肝肾功能的影响。方法给予初断乳大鼠含贫铀饲料,摄入贫铀的剂量分别为0、0.4、4、40mg·kg-1·d-1,随后的14个月内,临床生化自动检测仪测定外周血、肝肾功能的变化。结果F0代:小剂量... 详细信息

目的研究长期摄入低剂量贫铀对大鼠的血象、肝肾功能的影响。方法给予初断乳大鼠含贫铀饲料,摄入贫铀的剂量分别为0、0.4、4、40mg·kg-1·d-1,随后的14个月内,临床生化自动检测仪测定外周血、肝肾功能的变化。结果F0代:小剂量组在14个月、中剂量组在10个月、高剂量组在7个月;F1代:中、高剂量组在10个月时出现白细胞显著降低,并由这些时相点开始出现各项血液学指标持续下降。随摄入贫铀剂量的增加,摄入时间的延长,白细胞和红细胞计数出现下降的时间越早,降幅越大;同一剂量组同一时相点,F1代比F0代降得更低。实验组肝功能与正常组没有显著差异(P>0.05)。肾功能指标仅有某个时相点血清肌酐上升,其余变化不显著(P>0.05)。结论长期摄入低剂量贫铀,只有在较长期或剂量较大时,可使外周血白细胞下降,继而红细胞、血小板计数下降;肾功能影响轻微,肝功能无影响。

关键词：贫铀血常规肝功能肾功能

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辐射损伤对巨核细胞造血调控因子IL-6和TNF-α的影响

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第三军医大学学报 2005年第18期27卷 1817-1819页

作者：韩京冉新泽粟永萍李启明郑怀恩第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室全军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的探讨辐射损伤对巨核细胞调控因子IL-6和TNF-α表达的影响。方法用RT-PCR和W estern b lot方法检测辐射后Dam i细胞IL-6、TNF-α表达水平的变化。结果辐射损伤3、5、10 Gy后,IL-6的mRNA水平和蛋白水平表达均显著低于对照组(P<0.0... 详细信息

目的探讨辐射损伤对巨核细胞调控因子IL-6和TNF-α表达的影响。方法用RT-PCR和W estern b lot方法检测辐射后Dam i细胞IL-6、TNF-α表达水平的变化。结果辐射损伤3、5、10 Gy后,IL-6的mRNA水平和蛋白水平表达均显著低于对照组(P<0.05),其变化趋势是随照射剂量增加而表达逐渐降低。TNF-α在mRNA水平变化无显著性差异,但在蛋白水平表达则显示,3个剂量组均显著高于对照组(P<0.05),并随剂量增加表达逐渐升高。结论不同剂量放射损伤所致造血功能障碍与巨核细胞调控因子IL-6和TNF-α的异常表达有关。

关键词：辐射巨核细胞 IL-6 TNF-α

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对急性贫铀中毒的促排措施研究

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第三军医大学学报 2008年第6期30卷 461-464页

作者：李蓉任泂冷言冰杨峥嵘艾国平徐辉粟永萍程天民第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室全军复合伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的比较常见的几种贫铀促排剂,寻找高效低毒的药物或组合方案。方法分别在给予贫铀溶液前1h、立即、延迟4h给予碳酸氢钠、Tiron、dimethylthiourea(DMTU)和diethylenetriaminepenta-methylene phosphonic acid(DTPMP)及相应的组合方案,并在3d后进行肾功能检测及病理学观察。结果提前给药,血清尿素氮和肌酐浓度下降程度显著(P<0·05),下降最明显的是NaHCO3+DMTU组和单用DTPMP组;立即给药,尿素氮和肌酐显著降低的是NaHCO3+DM-TU组、单用NaHCO3组和单用Tiron组(P<0·05);延后给药,肾功能均未见明显改善(P>0·05)。提前给药和立即给药,NaHCO3+DMTU组肾脏病变最轻;延后给药,病变比提前给药和立即给药的严重,其中以单用Tiron组肾脏病变最轻。结论急性贫铀中毒时,提前1h和立即给药时,NaHCO+DMTU合用效果较好;延后4h给药,单用Tiron的效果相对较好。

关键词：贫铀促排肾功能碳酸氢钠

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重组融合蛋白rTMP—GH促进放射损伤小鼠血小板生成的实验研究

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中华放射医学与防护杂志 2009年第6期29卷 583-585页

作者：许杨王军平陈芳申明强陈默王崧冉新泽粟永萍开丽第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室、全军复合伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的研究TPO模拟肽（TMP）与人生长激素（GH）的重组融合蛋白rTMP-GH对放射损伤小鼠血小板生成的促进作用。方法^60Coγ射线全身一次性均匀照射5Gy，照后皮下注射200μg／kg的rTMP—GH或rhGH，每日1次，连续用药7d，对照组给予同等体积... 详细信息

目的研究TPO模拟肽（TMP）与人生长激素（GH）的重组融合蛋白rTMP-GH对放射损伤小鼠血小板生成的促进作用。方法^60Coγ射线全身一次性均匀照射5Gy，照后皮下注射200μg／kg的rTMP—GH或rhGH，每日1次，连续用药7d，对照组给予同等体积生理盐水。尾静脉取血检测血小板数量变化；照后16d取小鼠股骨，组织切片观察骨髓病理变化。结果照后10d起，rTMP-GH处理组各时相的外周血血小板数明显高于rhGH处理组和生理盐水对照组，尤其是血小板的最低值显著升高（P〈0．01），照后22d已升至正常水平的80％，对照组仅为30％。骨髓病理观察显示，rTMP—GH处理组骨髓造血重建明显，并见大量不同时期巨核细胞；rTMP-GH处理组骨髓组织切片每个视野下的巨核细胞平均数（3．07±0．32）明显高于rhGH处理组（2．20±0．22，P〈0．05）和生理盐水对照组（0．87±0．19，P〈0．01）。结论rTMP-GH能快速、有效地促进放射损伤小鼠骨髓巨核细胞增年和向小析年矗．

关键词： TPO模拟肽生长激素放射损伤血小板生成

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hPDGF-A／hBD2双基因转染对大鼠骨髓间充质干细胞生物学特性的影响

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第三军医大学学报 2008年第6期30卷 472-476页

作者：冯一梅徐辉邹仲敏郝磊王涛邓均董世武粟永萍程天民第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室全军复合伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的探讨hPDGF-A/hBD2腺病毒双基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)后,对BMSCs本身生物学特性的影响。方法体外分离培养大鼠BMSCs,应用GFP标记的腺病毒表达载体系统Adv-hPDGF-A-IRES-hBD2,以脂质... 详细信息

目的探讨hPDGF-A/hBD2腺病毒双基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)后,对BMSCs本身生物学特性的影响。方法体外分离培养大鼠BMSCs,应用GFP标记的腺病毒表达载体系统Adv-hPDGF-A-IRES-hBD2,以脂质体法转染293细胞,再以病毒上清液感染BMSCs,对转染目的基因后的BMSCs进行形态学观察,绘制生长曲线,测定其细胞周期以及向成脂、成骨、成肌诱导分化和鉴定。结果hPDGF-A/hBD2双基因成功转入BMSCs后,未发现其对细胞活性有明显作用,基因修饰后的BMSCs仍具有成体干细胞所具备的增殖能力,以及向成脂、成骨、成肌等方向分化的潜能。结论BMSCs是重组腺病毒转染的良好靶细胞,hPDGF-A/hBD2基因修饰的BMSCs仍可作为满意的细胞治疗的种子细胞。

关键词：骨髓间充质干细胞基因转染细胞生物学特性

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JAB1表达下调对LPS诱导炎性因子TNF-α和IL-6的影响

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第三军医大学学报 2007年第16期29卷 1552-1554页

作者：任泂粟永萍李洪涛李军王军平邹仲敏第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室全军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的初步探讨JAB1基因表达下调对炎症反应的影响。方法构建特异性针对小鼠JAB1基因的RNA干扰真核表达载体,转染到RAW264.7细胞中降低其JAB1基因的表达,观察LPS刺激后培养上清中炎性因子TNF-α和IL-6的浓度变化。结果成功得到小鼠JAB1基... 详细信息

目的初步探讨JAB1基因表达下调对炎症反应的影响。方法构建特异性针对小鼠JAB1基因的RNA干扰真核表达载体,转染到RAW264.7细胞中降低其JAB1基因的表达,观察LPS刺激后培养上清中炎性因子TNF-α和IL-6的浓度变化。结果成功得到小鼠JAB1基因的RNA干扰真核表达载体(pPUR/U6-siJAB1),将其转染RAW264.7细胞后使JAB1的蛋白表达水平显著下降,经LPS刺激后培养上清中炎性因子TNF-α和IL-6的浓度较正常细胞明显降低。结论小鼠JAB1基因的低表达使RAW264.7细胞在经LPS诱导后的炎性因子产生降低,推测其在炎症反应中对致炎因素的影响更大。

关键词： JAB1 RNA干扰巨噬细胞炎性因子 IL-6 TNF-α

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长期接触贫铀对大鼠遗传毒性的初步研究

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第三军医大学学报 2006年第9期28卷 869-871页

作者：冷言冰李蓉艾国平徐辉粟永萍程天民冉新泽第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室全军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的研究贫铀植入/摄入3个月后对大鼠的毒性作用。方法观察大鼠精子畸形率,骨髓微核率的改变,睾丸的超微结构和病理形态学改变以及采用显性致死突变试验观察贫铀对大鼠的生殖毒性。结果植入/摄入贫铀后大鼠精子畸形率和微核率均有增加,... 详细信息

目的研究贫铀植入/摄入3个月后对大鼠的毒性作用。方法观察大鼠精子畸形率,骨髓微核率的改变,睾丸的超微结构和病理形态学改变以及采用显性致死突变试验观察贫铀对大鼠的生殖毒性。结果植入/摄入贫铀后大鼠精子畸形率和微核率均有增加,睾丸超微结构均有不同程度的改变,而病理形态学观察则未见显著影响。植入组大鼠受孕率明显低于对照组。结论贫铀长时间暴露可对大鼠产生生殖毒性损害以及超微结构的损伤。

关键词：贫铀精子微核毒性

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