检索结果-内蒙古大学图书馆

中国修复重建外科杂志 2008年第9期22卷 1130-1134页

作者：刘登群粟永萍第三军医大学军事预防医学院防原教研室全军复合伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的对骨髓源性干细胞(bone marrow derived stem cells,BMDSCs)的异质性及其形成机制和意义进行综述,分析其在肠上皮重建中的作用和可能机制。方法查阅和分析近年有关BMDSCs异质性和其在肠上皮损伤修复中作用的相关文献,并作进一步综... 详细信息

目的对骨髓源性干细胞(bone marrow derived stem cells,BMDSCs)的异质性及其形成机制和意义进行综述,分析其在肠上皮重建中的作用和可能机制。方法查阅和分析近年有关BMDSCs异质性和其在肠上皮损伤修复中作用的相关文献,并作进一步综合分析。结果BMDSCs异质性可以解释其多向分化能力,可能以直接定植于肠道或通过和肠道干细胞融合以及促进损伤微环境的重建等多种机制参与肠上皮功能修复。结论BMDSCs在炎症性肠病等胃肠道损伤和修复中具有广阔的应用前景。

关键词：骨髓源性干细胞异质性肠上皮上皮下肌成纤维细胞炎症性肠病

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辐射损伤对巨核细胞造血调控因子IL-6和TNF-α的影响

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第三军医大学学报 2005年第18期27卷 1817-1819页

作者：韩京冉新泽粟永萍李启明郑怀恩第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室全军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的探讨辐射损伤对巨核细胞调控因子IL-6和TNF-α表达的影响。方法用RT-PCR和W estern b lot方法检测辐射后Dam i细胞IL-6、TNF-α表达水平的变化。结果辐射损伤3、5、10 Gy后,IL-6的mRNA水平和蛋白水平表达均显著低于对照组(P<0.0... 详细信息

目的探讨辐射损伤对巨核细胞调控因子IL-6和TNF-α表达的影响。方法用RT-PCR和W estern b lot方法检测辐射后Dam i细胞IL-6、TNF-α表达水平的变化。结果辐射损伤3、5、10 Gy后,IL-6的mRNA水平和蛋白水平表达均显著低于对照组(P<0.05),其变化趋势是随照射剂量增加而表达逐渐降低。TNF-α在mRNA水平变化无显著性差异,但在蛋白水平表达则显示,3个剂量组均显著高于对照组(P<0.05),并随剂量增加表达逐渐升高。结论不同剂量放射损伤所致造血功能障碍与巨核细胞调控因子IL-6和TNF-α的异常表达有关。

关键词：辐射巨核细胞 IL-6 TNF-α

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JAB1表达下调对LPS诱导炎性因子TNF-α和IL-6的影响

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第三军医大学学报 2007年第16期29卷 1552-1554页

作者：任泂粟永萍李洪涛李军王军平邹仲敏第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室全军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的初步探讨JAB1基因表达下调对炎症反应的影响。方法构建特异性针对小鼠JAB1基因的RNA干扰真核表达载体,转染到RAW264.7细胞中降低其JAB1基因的表达,观察LPS刺激后培养上清中炎性因子TNF-α和IL-6的浓度变化。结果成功得到小鼠JAB1基... 详细信息

目的初步探讨JAB1基因表达下调对炎症反应的影响。方法构建特异性针对小鼠JAB1基因的RNA干扰真核表达载体,转染到RAW264.7细胞中降低其JAB1基因的表达,观察LPS刺激后培养上清中炎性因子TNF-α和IL-6的浓度变化。结果成功得到小鼠JAB1基因的RNA干扰真核表达载体(pPUR/U6-siJAB1),将其转染RAW264.7细胞后使JAB1的蛋白表达水平显著下降,经LPS刺激后培养上清中炎性因子TNF-α和IL-6的浓度较正常细胞明显降低。结论小鼠JAB1基因的低表达使RAW264.7细胞在经LPS诱导后的炎性因子产生降低,推测其在炎症反应中对致炎因素的影响更大。

关键词： JAB1 RNA干扰巨噬细胞炎性因子 IL-6 TNF-α

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长期接触贫铀对大鼠遗传毒性的初步研究

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第三军医大学学报 2006年第9期28卷 869-871页

作者：冷言冰李蓉艾国平徐辉粟永萍程天民冉新泽第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室全军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的研究贫铀植入/摄入3个月后对大鼠的毒性作用。方法观察大鼠精子畸形率,骨髓微核率的改变,睾丸的超微结构和病理形态学改变以及采用显性致死突变试验观察贫铀对大鼠的生殖毒性。结果植入/摄入贫铀后大鼠精子畸形率和微核率均有增加,... 详细信息

目的研究贫铀植入/摄入3个月后对大鼠的毒性作用。方法观察大鼠精子畸形率,骨髓微核率的改变,睾丸的超微结构和病理形态学改变以及采用显性致死突变试验观察贫铀对大鼠的生殖毒性。结果植入/摄入贫铀后大鼠精子畸形率和微核率均有增加,睾丸超微结构均有不同程度的改变,而病理形态学观察则未见显著影响。植入组大鼠受孕率明显低于对照组。结论贫铀长时间暴露可对大鼠产生生殖毒性损害以及超微结构的损伤。

关键词：贫铀精子微核毒性

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人TALL-1基因在毕赤酵母中的分泌表达与鉴定

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第三军医大学学报 2007年第6期29卷 494-497页

作者：王蒙杨媛杨峥嵘李广阔刘晓红粟永萍程天民第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室全军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的研究在毕赤酵母(Pichia Pastoris)系统中人TALL-1基因的分泌表达,获得具有生物活性的重组TALL-1。方法将人TALL-1基因插入含AOX1启动子和α分泌信号肽序列的酵母表达载体pPIC9K中,用SacⅠ将重组质粒线性化,电转化Pichia Pastoris GS... 详细信息

目的研究在毕赤酵母(Pichia Pastoris)系统中人TALL-1基因的分泌表达,获得具有生物活性的重组TALL-1。方法将人TALL-1基因插入含AOX1启动子和α分泌信号肽序列的酵母表达载体pPIC9K中,用SacⅠ将重组质粒线性化,电转化Pichia Pastoris GS115感受态细胞,筛选阳性整合子并进行甲醇诱导表达,采用MTT对表达产物进行初步的生物活性检测。结果经过诱导表达条件的优化,人TALL-1在酵母培养基BMMY中实现了分泌表达;免疫印迹和酶联免疫检测结果显示,重组产物可以结合其特异抗体;生物学活性检测证实其可抑制Hela细胞增殖。结论在毕赤酵母系统中实现了人TALL-1的分泌表达,具有生物学活性的重组TALL-1分子可以用于进一步的结构与功能研究。

关键词： TALL-1 分泌表达毕赤酵母

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ERp29基因的克隆及其在IEC-6细胞中的表达

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第三军医大学学报 2005年第18期27卷 1830-1832页

作者：章波粟永萍艾国平第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室全军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的克隆小鼠ERp29基因并在IEC-6细胞中表达。方法采用RT-PCR方法从小肠上皮细胞克隆该基因的编码区,经T-载体克隆并测序证实后构建真核表达载体,并转染IEC-6细胞,RT-PCR分析外源基因的表达。结果从小肠上皮细胞总RNA中成功地克隆了ERp2... 详细信息

目的克隆小鼠ERp29基因并在IEC-6细胞中表达。方法采用RT-PCR方法从小肠上皮细胞克隆该基因的编码区,经T-载体克隆并测序证实后构建真核表达载体,并转染IEC-6细胞,RT-PCR分析外源基因的表达。结果从小肠上皮细胞总RNA中成功地克隆了ERp29基因,序列测定结果表明克隆的序列与数据库中序列完全一致。构建的真核表达载体与预期一致,表达质粒转染细胞后的RT-PCR分析结果表明:外源的质粒得到了有效的表达。结论成功地克隆了ERp29基因,并获得真核表达。

关键词： ERp29 真核表达载体 IEC-6细胞 RT-PCR

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RNAi抑制IEC-6细胞中ERp29表达

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第三军医大学学报 2006年第11期28卷 1135-1137页

作者：杨媛章波王蒙王军平粟永萍第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室全军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的构建抑制大鼠ERp29基因表达的重组质粒,并在IEC-6细胞中发挥作用。方法根据大鼠ERp29的基因序列,设计合成含有发夹结构的寡核苷酸片段,经退火形成双链后克隆至pAVU6+27载体质粒中,对阳性重组子进行酶切和测序鉴定后转染正常IEC-6细... 详细信息

目的构建抑制大鼠ERp29基因表达的重组质粒,并在IEC-6细胞中发挥作用。方法根据大鼠ERp29的基因序列,设计合成含有发夹结构的寡核苷酸片段,经退火形成双链后克隆至pAVU6+27载体质粒中,对阳性重组子进行酶切和测序鉴定后转染正常IEC-6细胞,通过PCR方法对siERp29干扰片段进行鉴定,并采用W estern b lot检测ERp29蛋白水平的表达变化。结果重组质粒经双酶切后,有目的条带出现,提示ERp29干扰片段已克隆至pAVU6+27载体质粒中,DNA测序结果显示插入序列与预先设计完全一致。重组质粒转染IEC-6细胞后经G418筛选,成功获得阳性克隆,W estern b lot结果显示ERp29的蛋白水平表达显著下降。结论成功构建ERp29基因RNA干扰表达质粒,并在IEC-6细胞中发挥抑制作用,这为深入研究该基因在电离辐射中的作用奠定了基础。

关键词： ERp29 RNAi IEC-6 转染表达

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人乳头瘤病毒假病毒体外感染模型的建立及人α防御素5抗病毒作用

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第三军医大学学报 2012年第6期34卷 473-476页

作者：耿放王艾平陈芳申明强陈默粟永萍程天民王军平第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室全军复合伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的建立用人乳头瘤病毒16亚型假病毒(HPV-16 Psv)感染宫颈癌细胞模型,并研究3种不同构型人α防御素5(HD-5)抗HPV的作用。方法将表达HPV-16假病毒衣壳蛋白的重组质粒P16L1L2和含绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的质粒Pfwb共转染293FT细胞,分... 详细信息

目的建立用人乳头瘤病毒16亚型假病毒(HPV-16 Psv)感染宫颈癌细胞模型,并研究3种不同构型人α防御素5(HD-5)抗HPV的作用。方法将表达HPV-16假病毒衣壳蛋白的重组质粒P16L1L2和含绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的质粒Pfwb共转染293FT细胞,分离、纯化病毒颗粒后感染宫颈癌细胞株C-33a,同时分别给予20μg/ml的HD-5/N(天然构型)、HD-5/Acm(半胱氨酸被Acm修饰)或HD-5/Abu(半胱氨酸被Abu替换)处理,培养48 h后荧光显微镜观察和流式细胞分析病毒感染率。结果 Pfwb与P16L1L2成功转染293FT细胞并获得滴度达2.5×108TU/ml的HPV-16假病毒液,镜检和流式细胞术检测显示宫颈癌细胞C-33a能够被假病毒感染并表达GFP。HD-5/N、HD-5/Acm和HD-5/Abu对HPV-16感染C-33a细胞的抑制率分别为(96.48±5.67)%、(69.02±7.88)%和(2.71±1.53)%。与HD-5/N相比,HD-5/Acm和HD-5/Abu的抗病毒作用显著降低(P<0.01)。结论建立了基于流式细胞分析的HPV-16假病毒感染模型并将其用于抗病毒药物活性检测。发现HD-5的空间结构和分子中半胱氨酸对其抗HPV感染的活性有重要作用。

关键词：人乳头瘤病毒假病毒防御素绿色荧光蛋白抗病毒作用

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颈交感神经阻滞对小鼠烧伤早期肝组织核因子-κB及其辅活化子的影响

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第三军医大学学报 2007年第8期29卷 655-657页

作者：李军粟永萍王军平艾国平邹仲敏第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室全军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的观察颈交感神经阻滞（sympathetic block，SB）对烧伤小鼠早期炎症介质核因子-κB（NF-κB）及其辅活化子的影响，初步探讨SB在严重创伤中治疗作用的分子机制。方法将雄性昆明小鼠分为正常对照组、烧伤对照组、LSB组（烧伤后使用利... 详细信息

目的观察颈交感神经阻滞（sympathetic block，SB）对烧伤小鼠早期炎症介质核因子-κB（NF-κB）及其辅活化子的影响，初步探讨SB在严重创伤中治疗作用的分子机制。方法将雄性昆明小鼠分为正常对照组、烧伤对照组、LSB组（烧伤后使用利多卡冈进行SB治疗）、RSB组（烧伤后使用罗哌卡因进行SB治疗），每组5只。烧伤为TBSA15％～20％m度。烧伤后6h采用Western blotting测定肝组织NF-κBP65、类同醇受体辅活化子-3（SRC-3）的蛋白表达及核转位。结果烧伤对照组肝组织NF-κBP65、SRC-3蛋白表达水平及核转位显著增加；与烧伤对照组相比，LSB组NF-κBP65蛋白表达无显著变化，SRC-3蛋白表达及NF-κBP65、SRC-3核转位显著下调；RSB组NF-κBP65、SRC-3蛋白表达及核转位均显著低于烧伤对照组，且比LSB组下调更明显。结论烧伤早期（6h）NF-κB及其辅活化子SRC-3蛋白表达水平及核转位显著上调，SB在严重创伤中的治疗作用可能是通过抑制NF-κB功能活性，降低炎症反应程度而实现的。

关键词：颈交感神经阻滞烧伤核因子-κB 类固醇受体辅活化子-3

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重组小鼠凝血因子Ⅶ毕赤酵母表达载体的构建及整合体的筛选

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第三军医大学学报 2005年第20期27卷 2009-2011页

作者：项贵明杨峥嵘粟永萍程天民第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室全军复合伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室

目的构建无凝血活性的重组小鼠凝血因子Ⅶ(rmFⅦ)毕赤酵母分泌型表达载体,获得高拷贝稳定整合菌株,为大量获得rmFⅦ蛋白,进行功能研究及其临床应用奠定基础。方法PCR扩增得到mFⅦ基因片段,插入酵母表达载体pPIC9K的α分泌信号开放阅读... 详细信息

目的构建无凝血活性的重组小鼠凝血因子Ⅶ(rmFⅦ)毕赤酵母分泌型表达载体,获得高拷贝稳定整合菌株,为大量获得rmFⅦ蛋白,进行功能研究及其临床应用奠定基础。方法PCR扩增得到mFⅦ基因片段,插入酵母表达载体pPIC9K的α分泌信号开放阅读框的下游,再经定点突变(K341A)得到pPIC9KrmFⅦ,测序正确的质粒用SacⅠ线性化后电穿孔转化毕赤酵母GS115,G418梯度筛选转化菌,PCR鉴定目的基因的整合。结果获得了rmFⅦ毕赤酵母表达载体pPIC9KrmFⅦ,G418抗性筛选得到高拷贝菌株,PCR证实目的基因已整合到毕赤酵母染色体中。结论成功构建了rmFⅦ毕赤酵母表达载体,获得了高拷贝稳定整合菌株,为大规模表达纯化rmFⅦ蛋白及后续研究奠定了基础。

关键词：小鼠凝血因子Ⅶ 毕赤酵母基因重组

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