检索结果-内蒙古大学图书馆

肠出血性大肠杆菌O157∶H7志贺样毒素Ⅱ毒素亚单位Stx2A的表达与纯化

第三军医大学学报 2006年第15期28卷 1582-1584页

作者：马颖毛旭虎邹全明张卫军第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫学教研室重庆400038

目的克隆表达肠出血性大肠杆菌(Enterohem orrhagic Escherichia col,i EHEC)O157∶H7志贺样毒素A亚单位(Sh iga-like toxin,Stx2A),并对其初步纯化。方法设计引物采用PCR法自EHEC O157∶H7基因组扩增Stx2A的编码基因stx2 a,T-A克隆后构建原核表达质粒pET-11 c(+)-stx2 a,经测序鉴定后转化***21(DE3),IPTG诱导表达,以SDS-PAGE和W esten b lot分析目的蛋白的表达,并采用固相镍离子亲和层析纯化重组蛋白。结果扩增的stx2 a基因约950bp;原核表达质粒pET-11 c(+)-stx2 a经酶切和测序鉴定与预期序列一致;并在***21(DE3)中得到高效表达,蛋白表达率约30%;PAGE初步测定目的蛋白的相对分子质量约31×103;经固相镍离子亲和层析纯化后,蛋白纯度可达92.3%。结论EHEC O157∶H7 Stx2A的高效表达与初步纯化,为探讨O157∶H7菌的感染机制奠定基础。

关键词：肠出血性大肠杆菌0157:H7 毒素A亚单位表达纯化

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BalB/c小鼠口服重组幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的免疫应答

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第三军医大学学报 2002年第3期24卷 280-282页

作者：毛旭虎邹全明鲁东水曾玮锟郭刚王毅超解庆华第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫学教研室重庆400038

目的　评价重组尿素酶B亚单位 (rUreB)作为幽门螺杆菌 (Hp)口服疫苗成份的效果、探讨Hp的免疫保护机制。方法　采用重组Hp保护性抗原UreB与粘膜免疫佐剂霍乱毒素B亚单位 (CTB)共口服免疫BalB/c小鼠 ,ELISA分析血清、唾液和粪便、胃粘液... 详细信息

目的　评价重组尿素酶B亚单位 (rUreB)作为幽门螺杆菌 (Hp)口服疫苗成份的效果、探讨Hp的免疫保护机制。方法　采用重组Hp保护性抗原UreB与粘膜免疫佐剂霍乱毒素B亚单位 (CTB)共口服免疫BalB/c小鼠 ,ELISA分析血清、唾液和粪便、胃粘液中IgG、IgA抗体水平 ,体外培养脾淋巴细胞在Hp刺激下的增殖情况及IL 4、IFN γ的变化。结果　BalB/c小鼠口服rUreB和CTB混合制剂能有效激发机体产生全身和局部特异性的体液免疫应答和细胞免疫应答。

关键词：重组尿素酶B亚单位免疫应答幽门螺杆菌 BalB/c小鼠免疫保护机制

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口服聚乙二醇改性聚乳酸靶向分布实验

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第三军医大学学报 2002年第12期24卷 1415-1415,1419页

作者：曾韦锟任建敏邹全明第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫学教研室重庆400038

聚乙二醇改性聚乳酸（PELA）是能在生物体内被水解或酶解后睡并排出体外的高分子聚合物。它具有无毒、靶向、缓释性等优良性能，因此在载药方面显示出良好的应用前景。通过控制制造工艺，可以将其不同直径大小的微球，从而产生不同的定... 详细信息

聚乙二醇改性聚乳酸（PELA）是能在生物体内被水解或酶解后睡并排出体外的高分子聚合物。它具有无毒、靶向、缓释性等优良性能，因此在载药方面显示出良好的应用前景。通过控制制造工艺，可以将其不同直径大小的微球，从而产生不同的定位效果。本研究试采用与人在解剖结构上有较好可比性的小型猪为实验对象，采用造影剂示踪法，从大体上研究微球在动物胃肠道的靶向分布情况。

关键词：口服聚乙二醇改性聚乳酸靶向分布实验

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幽门螺杆菌全菌疫苗研究进展

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第三军医大学学报 2004年第20期26卷 1881-1883页

作者：刘开云邹全明第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫学教研室重庆400038

幽门螺杆菌(helicobacter pylori,p)是定植于人胃内的革兰染色阴性、螺杆状、微需氧菌,目前全球近50%的人口感染了Hp,在发展中国家,其感染率可高达70%以上.Hp的抗感染治疗存在较大问题,使用单剂药物根除率低,而使用多联药物费用昂贵,治... 详细信息

幽门螺杆菌(helicobacter pylori,p)是定植于人胃内的革兰染色阴性、螺杆状、微需氧菌,目前全球近50%的人口感染了Hp,在发展中国家,其感染率可高达70%以上.Hp的抗感染治疗存在较大问题,使用单剂药物根除率低,而使用多联药物费用昂贵,治愈率不高且不能有效阻止Hp的再感染和复发.此外,耐药菌株的增加也使抗Hp治疗面临越来越复杂的难题,种种因素使Hp疫苗有望成为预防和治疗Hp感染最有效的途径.这也并不是说用有效的疫苗就能克服抗生素治疗缺点,但特定的疫苗治疗,可以根除感染,同时还能提供适当的免疫记忆,避免再感染,而这一点是抗生素永远不能办到的.……

关键词：幽门螺杆菌疫苗研究预防和治疗革兰染色药物费用胃内根除率定植使用耐药菌株

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重庆地区汉族人群HLA-DRB1等位基因多态性研究

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免疫学杂志 2012年第4期28卷 344-348页

作者：李宁一陈立李滨杨武晨章金勇毛旭虎吴超邹全明第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫学教研室重庆400038

目的了解中国重庆地区汉族人群人类白细胞抗原HLA-DRB1基因多态性及其分布特点。方法应用自行建立的聚合酶链式反应-测序为基础的分型方法(PCR-SBT)对190例重庆地区汉族人群进行HLA-DRB1基因分型和多态性分析。结果共检测出13种HLA-DRB... 详细信息

目的了解中国重庆地区汉族人群人类白细胞抗原HLA-DRB1基因多态性及其分布特点。方法应用自行建立的聚合酶链式反应-测序为基础的分型方法(PCR-SBT)对190例重庆地区汉族人群进行HLA-DRB1基因分型和多态性分析。结果共检测出13种HLA-DRB1等位基因,20种等位基因型。其中,HLA-DRB1*09:01(29.1%)等位基因频率最高,其次为HLA-DRB1*04:05(12.2%)、HLA-DRB1*08:03(9.3%),基因频率最低的是HLA-DRB1*12:01、HLA-DRB1*12:02、HLA-DRB1*14:05和HLA-DRB1*15:02,各占1.26%。此外,检出的20种HLA-DRB1等位基因型在男女性别间无显著差异。结论成功建立并优化了HLA-DRB1的PCR-SBT基因分型方法;重庆地区汉族人群HLA-DRB1等位基因呈现多态性,为群体遗传和疾病关联的研究提供了可靠的遗传学数据。

关键词： HLA-DRB1 PCR-SBT 基因多态性重庆汉族

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HP0318基因在幽门螺杆菌适应性定植中的作用研究

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第三军医大学学报 2007年第11期29卷 1006-1009页

作者：郭刚童文德邹全明吴超刘开云第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫学教研室重庆400038

目的通过构建幽门螺杆菌(Hp)HP0318缺失突变株,初步探明该基因在Hp适应性定植中的作用。方法通过基因克隆和重组技术在HP0318基因上下游片段之间连入氯霉素抗性基因(catGC)作为筛选标记,并克隆到质粒pBluescript SK中构建成缺失突变的... 详细信息

目的通过构建幽门螺杆菌(Hp)HP0318缺失突变株,初步探明该基因在Hp适应性定植中的作用。方法通过基因克隆和重组技术在HP0318基因上下游片段之间连入氯霉素抗性基因(catGC)作为筛选标记,并克隆到质粒pBluescript SK中构建成缺失突变的打靶载体,将其转化沙鼠适应株M13,经过同源重组,对出发菌的HP0318基因进行置换突变,然后用经氯霉素抗性筛选的突变菌株感染蒙古沙鼠,观察其与未突变的M13出发菌在定植能力和致病性上的差异。结果经PCR鉴定成功构建1株缺失HP0318基因的Hp菌株。突变株与非突变株对蒙古沙鼠的感染率相差显著(P<0.05),2个菌株在胃内的定植密度有显著性差异(P<0.05),突变株定植密度有约5倍的减少。结论HP0318基因在Hp的沙鼠适应性定植过程中发挥了重要的作用。

关键词：幽门螺杆菌 HP0318 同源重组突变体

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高原地区幽门螺杆菌的分离培养方法

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临床检验杂志 2011年第2期29卷 84-86页

作者：郭春亮李素芝孙红武廖亚玲任莉陈友伟卢永周邹全明郭刚第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫学教研室重庆400038

目的建立适合高海拔、低气压、低氧含量等高原环境特点的幽门螺杆菌(Hp)分离培养方法。方法随机收集186例知情同意的西藏军区总医院胃病患者胃窦、胃体、胃底部黏膜组织各1份,匀浆法研碎混匀后分别用常规法和根据高原环境特点改进的减... 详细信息

目的建立适合高海拔、低气压、低氧含量等高原环境特点的幽门螺杆菌(Hp)分离培养方法。方法随机收集186例知情同意的西藏军区总医院胃病患者胃窦、胃体、胃底部黏膜组织各1份,匀浆法研碎混匀后分别用常规法和根据高原环境特点改进的减量法、加氧法、加压加氧法同时进行培养,比较各培养方法的差异,同时分析培养结果与藏汉民族、性别、不同胃病间的相关性。结果各培养方法中,常规法阳性率最低(1.1%),减量法最高(38.2%)。常规法培养阳性率显著低于减量法、加氧法、加压加氧法(P<0.01)。Hp培养阳性率的差异在藏汉民族、性别间无统计学意义(P>0.05),而在不同胃病间具有统计学意义(P<0.05)。结论根据高原环境特点改进的减量培养方法更适合高原地区Hp的分离培养;Hp感染率的高低与藏汉民族、性别无关,而与不同种类胃病相关。

关键词：幽门螺杆菌高原地区阳性率分离培养

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重组幽门螺杆菌热休克蛋白A的纯化研究

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免疫学杂志 2005年第4期21卷 285-287,291页

作者：郭鹰邹全明朱永红吴超张卫军第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫学教研室重庆400038

目的对重组幽门螺杆菌热休克蛋白A大肠杆菌工程菌表达的rHspA蛋白进行纯化研究。方法酵后的重组大肠杆菌进行高压破菌后,采用镍离子亲和柱层析和凝胶过滤柱层析相结合的方法分离纯化rHspA,使用SDS-PAGE和HPLC鉴定蛋白纯度,注射免疫家兔... 详细信息

目的对重组幽门螺杆菌热休克蛋白A大肠杆菌工程菌表达的rHspA蛋白进行纯化研究。方法酵后的重组大肠杆菌进行高压破菌后,采用镍离子亲和柱层析和凝胶过滤柱层析相结合的方法分离纯化rHspA,使用SDS-PAGE和HPLC鉴定蛋白纯度,注射免疫家兔检测纯化后的rHspA的免疫学活性。结果所纯化获得的rHspA蛋白纯度>98%,总回收率为60%,并且保持了良好的免疫学活性。结论建立了从重组大肠杆菌中纯化高纯度rHspA的工艺,为Hp疫苗的进一步研究提供了材料。

关键词：幽门螺杆菌热休克蛋白柱层析

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单链抗体及其在生物医学中的应用

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免疫学杂志 2006年第Z1期22卷 1-5页

作者：马颖邹全明第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫学教研室重庆400038

单链抗体是一种小分子基因工程抗体,以其独有的优势在显像定位诊断、靶向治疗和基因治疗等方面展示了乐观的应用前景。本文对单链抗体的构建、表达及在生物医学中的应用作一综述。

关键词：单链抗体(ScFv) 噬菌体抗体库靶向治疗

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大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位融合表达载体的构建及应用

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第三军医大学学报 2003年第14期25卷 1275-1277页

作者：鲁东水毛旭虎吴超邹全明第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫学教研室重庆400038

目的　构建大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位的融合表达载体。方法　PCR扩增LTB基因 ,并在其 3′端去掉终止密码子 ,引入编码TAPI接头 ,通过EcoRⅠ和EcoRⅤ酶切位点重组于PinpointXa Ⅰ载体上 ,将幽门螺杆菌尿素酶B亚单位与之融合 ,转化E .c... 详细信息

目的　构建大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位的融合表达载体。方法　PCR扩增LTB基因 ,并在其 3′端去掉终止密码子 ,引入编码TAPI接头 ,通过EcoRⅠ和EcoRⅤ酶切位点重组于PinpointXa Ⅰ载体上 ,将幽门螺杆菌尿素酶B亚单位与之融合 ,转化E .coliJM10 9,SDS PAGE及Westernblotting分析其表达。结果　成功构建了LTB融合表达质粒 ,并获得了幽门螺杆菌尿素酶B亚单位与之融合表达。结论　LTB融合表达载体的成功构建为研究分子内佐剂疫苗奠定了实验基础。

关键词：不耐热肠毒素B亚单位融合表达载体幽门螺杆菌尿素酶B亚单位

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