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土家族迟发性脊椎骨骺发育不良一家系报告

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第三军医大学学报 2007年第2期29卷 172-172,175页

作者：郭洪章波许雪青王燕白云第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室重庆400038

脊椎骨骺发育不良(Spondyloepiphyseal dysplasia)是一种罕见的X性连锁隐性遗传病,脊柱发育障碍会引起短躯干性侏儒,患者智力正常,头面部无畸性。国内曾有报道,但土家族中尚少见报道。[第一段]

关键词：脊椎骨骺发育不良遗传性疾病家系

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PS1/APP双转基因阿尔茨海默病模型传代小鼠的基因型鉴定及其组织学分析

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第三军医大学学报 2006年第14期28卷 1453-1456页

作者：宋敏唐军李达兵徐海伟白云第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038

目的对所获的PS1/APP双转基因阿尔茨海默病(A lzhe im er d isease,AD)模型小鼠进行基因鉴定,进一步对其进行组织学分析,检测老年斑(sen ile p laque,SP)的形成情况。方法设计特定的引物,PCR扩增转入基因组DNA中的APP基因,对转入PS1/AP... 详细信息

目的对所获的PS1/APP双转基因阿尔茨海默病(A lzhe im er d isease,AD)模型小鼠进行基因鉴定,进一步对其进行组织学分析,检测老年斑(sen ile p laque,SP)的形成情况。方法设计特定的引物,PCR扩增转入基因组DNA中的APP基因,对转入PS1/APP的小鼠应用刚果红染色结合免疫组化观察Aβ沉积、小胶质细胞和星型胶质细胞的活化。结果与未转入的阴性对照相比,在PS1/APP双转基因的AD小鼠皮质和海马内可见Aβ斑块形成,围绕在Aβ斑块周围的小胶质细胞和星形胶质细胞处于活化状态,形成典型的SP结构。结论我们获得的PS1/APP双转基因小鼠能够模拟AD患者脑内的主要病理过程,提供有效的实验动物模型。

关键词：阿尔茨海默病转基因小鼠老年斑

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带有不同亚型HPVL_1基因片段的哺乳动物细胞克隆的建立

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第三军医大学学报 2006年第5期28卷 469-471页

作者：卓勤强刘昕钱春荣刘丽莎高玉梅第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室重庆400038

目的构建携带HPV亚型L1基因片段的标准细胞株。方法根据HPV通用引物GP5+/GP6+,用重叠延伸PCR方法合成HPV亚型L1基因中约150bp片段;插入真核细胞表达载体EGFPN1,用脂质体转染SPC细胞,筛选以获得带有不同HPVL1基因片段细胞克隆,并用定量PC... 详细信息

目的构建携带HPV亚型L1基因片段的标准细胞株。方法根据HPV通用引物GP5+/GP6+,用重叠延伸PCR方法合成HPV亚型L1基因中约150bp片段;插入真核细胞表达载体EGFPN1,用脂质体转染SPC细胞,筛选以获得带有不同HPVL1基因片段细胞克隆,并用定量PCR方法确认。结果重叠延伸PCR后得到约150bp的基因片段,测序结果经BLAST比对,分别与相应HPV亚型公开报告序列一致;将所获片段与EGFPN1载体连接后酶切及测序鉴定正确;经筛选获得了携带HPV6、11、16、18、31、35亚型L1基因片段的细胞株;并用定量PCR方法进行了确认。结论成功构建了带有不同HPV亚型L1基因片段的30个亚克隆和6个细胞株,为进一步的HPV分型检测研究提供了保证。

关键词： HPV 重叠延伸 GP5^+/GP6^+ 定量PCR

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小胶质细胞表达B7-H1及LPS刺激对其表达影响的研究

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免疫学杂志 2006年第3期22卷 243-246,251页

作者：宋敏白云王艳艳熊加祥杨旭冉罗娜第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038

目的了解共刺激分子B7-H1在小鼠中枢神经系统小胶质细胞上的表达,及LPS刺激后的表达变化情况,探讨小胶质细胞在大脑炎症状态下的免疫功能变化。方法利用小鼠小胶质细胞株N9,以LPS刺激其活化,应用RT-PCR、定量PCR、流式细胞术、免疫组化... 详细信息

目的了解共刺激分子B7-H1在小鼠中枢神经系统小胶质细胞上的表达,及LPS刺激后的表达变化情况,探讨小胶质细胞在大脑炎症状态下的免疫功能变化。方法利用小鼠小胶质细胞株N9,以LPS刺激其活化,应用RT-PCR、定量PCR、流式细胞术、免疫组化检测B7-H1在刺激前后的表达变化规律;分离培养小鼠原代小胶质细胞并进行GSA-IB4染色鉴定,应用免疫组化检测原代小胶质细胞在LPS刺激前后的表达变化。结果①小鼠小胶质细胞株N9在未刺激状态下表达B7-H1的mRNA和蛋白分子;LPS刺激细胞活化后释放肿瘤坏死因子α,一氧化氮增加,同时B7-H1的mRNA和蛋白表达水平增加。②分离培养的小鼠原代小胶质细胞经GSA-IB4染色鉴定纯度在95%以上,免疫组化显示原代小胶质细胞组成性表达B7-H1,LPS刺激后表达明显上调。结论小鼠小胶质细胞株N9小胶质细胞组成性表达共刺激分子B7-H1,LPS刺激后表达上调,提示其参与了中枢神经系统免疫应答的调节。

关键词： T细胞共刺激分子小胶质细胞 LPS B7-H1

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B7-H4——免疫调控以及肿瘤治疗的新靶点

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免疫学杂志 2006年第z1期22卷 6-9页

作者：段文元白云第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室重庆400038

B7-H4又称B7s1或B7x,是B7家族中的最新发现的一个新成员,它能通过抑制T细胞的增殖、细胞因子的产生和细胞周期的进程来负性调控T细胞的免疫应答,同时大量表达B7-H4还可以促进上皮细胞的恶性转化,保护表皮细胞免于失巢凋亡,在肿瘤的发生... 详细信息

B7-H4又称B7s1或B7x,是B7家族中的最新发现的一个新成员,它能通过抑制T细胞的增殖、细胞因子的产生和细胞周期的进程来负性调控T细胞的免疫应答,同时大量表达B7-H4还可以促进上皮细胞的恶性转化,保护表皮细胞免于失巢凋亡,在肿瘤的发生,进展和转归中发挥重要作用。对B7-H4信号通路的进一步的研究必将为自身免疫性疾病、病毒感染性疾病和器官移植后排斥反应中T细胞介导的免疫应答调控提供了新的途径,同时也为肿瘤的诊断、治疗提供崭新的策略。

关键词： B7-H4 免疫逃逸共刺激信号

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一个肌萎缩侧索硬化家系D21S223微卫星位点遗传连锁分析

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第三军医大学学报 2006年第4期28卷 363-365页

作者：史树贵李露斯刘昕倪兵陈康宁第三军医大学西南医院神经内科重庆400038 第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所重庆400038

目的对重庆地区1例肌萎缩侧索硬化家系进行遗传连锁分析。方法采用位于21号染色体上的D21S223微卫星位点,经PCR扩增后进行基因型分析,应用GENEHUNTER软件包进行连锁分析。结果最大LOD值为3.06(Θ=0.10),说明该家系致病基因与21号染色体... 详细信息

目的对重庆地区1例肌萎缩侧索硬化家系进行遗传连锁分析。方法采用位于21号染色体上的D21S223微卫星位点,经PCR扩增后进行基因型分析,应用GENEHUNTER软件包进行连锁分析。结果最大LOD值为3.06(Θ=0.10),说明该家系致病基因与21号染色体上的D21S223位点连锁。结论SOD1基因突变可能是引起该家系发病的原因。

关键词：家族性肌萎缩侧索硬化连锁分析微卫星

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大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛模型的制备

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陆军军医大学学报 2000年第3期22卷 295-297页

作者：代佳平冯华刘昕王宪荣第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室!重庆400038 第三军医大学附属西南医院神经外科!重庆400038

目的 :为了深入研究SAH后CVS的发生机制及其治疗效果。方法 :42只大鼠随机分 :A组 :正常对照组 ;B组 :注射 0 9%氯化钠对照组 ;C组 :采用 0 1、0 2、0 3、0 4、0 5ml自体动脉血注入大鼠枕大池制作CVS模型。观察大鼠的存活、临床... 详细信息

目的 :为了深入研究SAH后CVS的发生机制及其治疗效果。方法 :42只大鼠随机分 :A组 :正常对照组 ;B组 :注射 0 9%氯化钠对照组 ;C组 :采用 0 1、0 2、0 3、0 4、0 5ml自体动脉血注入大鼠枕大池制作CVS模型。观察大鼠的存活、临床表现、血压、血气分析、rCBF测定及病理学检查等。结果 :B组大鼠均存活 ,临床表现典型及和病理学改变轻微 ,与A组差异不明显。C4 :大鼠均存活 ,但反应迟钝 ,自洁性差 ,血压短暂升高 ,rCBF下降明显 ,持续时间长 ;颅底出血 ,颅底动脉管壁破坏、层次结构消失 ,与B组差别显著。C1～ 3组大鼠死亡率高。C5组大鼠临床表现肌病理改变不明显。结论 :注射 0 2ml时 ,大鼠存活率高 ,临床表现典型 ,rCBF降低和病理改变明显 ,而且与慢性出血性脑血管痉挛相一致 ,是最理想的CVS模型。

关键词：蛛网膜下腔出血脑血管痉挛

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提高转基因表达策略研究进展

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中国生物工程杂志 2004年第10期24卷 9-12页

作者：毛琼国白云第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038

随着转基因技术在各个应用领域的深入和发展 ,转基因沉默现象已引起越来越多人的关注。在介绍转基因沉默的概念、分子机理的基础上 ,着重对提高转基因表达的方法、策略及其研究进展进行综述。分别阐述内含子、组织特异性启动子、增强子... 详细信息

随着转基因技术在各个应用领域的深入和发展 ,转基因沉默现象已引起越来越多人的关注。在介绍转基因沉默的概念、分子机理的基础上 ,着重对提高转基因表达的方法、策略及其研究进展进行综述。分别阐述内含子、组织特异性启动子、增强子、定点整合、DNA大片段、反式作用因子以及基因组调控元件核基质附着区对转基因表达的影响。为克服转基因失活。

关键词：转基因表达核基质表达效率反式作用因子分子机理研究进展启动子转基因沉默内含子调控元件

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T细胞表达CD137L分子介导对血管内皮细胞的活化刺激效应

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第三军医大学学报 2005年第16期27卷 1671-1673页

作者：张利永傅晓岚肖宇宏黄钢张立群白云第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038 第三军医大学高原军事医学系中心实验室重庆400038

目的探讨活化T细胞表面表达的CD137L分子对内皮细胞功能的影响。方法将活化的T细胞与内皮细胞共培养,ELISA检测共培养上清中IL-1、IL-8的含量;流式细胞仪检测内皮细胞表面粘附分子ICAM-1的表达变化,并观察用融合蛋白CD137-Fc阻断CD137-C... 详细信息

目的探讨活化T细胞表面表达的CD137L分子对内皮细胞功能的影响。方法将活化的T细胞与内皮细胞共培养,ELISA检测共培养上清中IL-1、IL-8的含量;流式细胞仪检测内皮细胞表面粘附分子ICAM-1的表达变化,并观察用融合蛋白CD137-Fc阻断CD137-CD137L共刺激通路后内皮细胞分泌细胞因子的变化。结果活化的T细胞刺激了内皮细胞活化,诱导了内皮细胞合成和分泌细胞因子IL-1、IL-8以及粘附分子ICAM-1的表达;可溶性融合蛋白CD137-Fc成功地阻断了CD137-CD137L的相互作用,内皮细胞合成和分泌细胞因子的能力降低。结论证明CD137-CD137L的相互作用在内皮细胞与T细胞的相互作用中发挥了重要的作用,提示CD137与其配体交联具有刺激内皮细胞活化的生物学功能。

关键词： CD137 CD137L CD137-Fc 共刺激分子

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PS1/APP双转基因AD模型小鼠与Aβ_(1-40)海马注射AD模型大鼠的组织病理学比较

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第三军医大学学报 2006年第16期28卷 1648-1651页

作者：李达兵唐军范晓棠宋敏徐海伟周光纪白云第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038

目的对PS1/APP双转基因阿尔茨海默病(alzheimerdisease,AD)模型小鼠进行基因鉴定和组织学分析,探讨其与老化态Aβ1-40单侧海马注射AD模型大鼠之间的组织病理学差异。方法对Tg小鼠和AD大鼠模型应用改进刚果红染色法、Nissl’s染色结合免... 详细信息

目的对PS1/APP双转基因阿尔茨海默病(alzheimerdisease,AD)模型小鼠进行基因鉴定和组织学分析,探讨其与老化态Aβ1-40单侧海马注射AD模型大鼠之间的组织病理学差异。方法对Tg小鼠和AD大鼠模型应用改进刚果红染色法、Nissl’s染色结合免疫组织化学方法观察脑内Aβ沉积和星形胶质细胞的活化情况。结果①PS1/APP双转基因AD小鼠刚果红染色显示皮质和海马内广泛圆形Aβ沉积,周围绕以胶质细胞带,免疫组化显示GFAP阳性细胞活化呈团块聚集。②AD大鼠刚果红染色显示单侧海马齿回区有Aβ斑块状沉积,Nissl’s染色显示注射针道附近海马锥体层细胞丢失,注射侧海马GFAP阳性细胞增多。结论Aβ1-40单侧海马注射AD模型大鼠尽管可以模拟人类AD疾病的部分特征病理改变,但是不能模拟疾病渐进性的病理学改变。PS1/APP双转基因小鼠能够模拟AD病人脑内的主要病理改变与渐进性过程,是较为理想的实验动物模型,但该模型未发现细胞丢失。

关键词：阿尔茨海默病转基因小鼠大鼠 β淀粉样多肽

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