检索结果-内蒙古大学图书馆

免疫学杂志 2007年第1期23卷 91-93页

作者：杨曌傅晓岚尚小云吴玉章赵建平王莉第三军医大学基础医学部全军免疫研究所重庆400038

目的探讨小鼠脾脏CD8^+ T细胞的免疫磁珠负性分选方法,并对分选后所得细胞进行纯度、活力及功能检测。方法以免疫磁珠负性分选法从小鼠脾脏细胞中分离CD8^+ T细胞,流式细胞术检测所得细胞的纯度,台盼蓝检测细胞活力并用ConA刺激检测增... 详细信息

目的探讨小鼠脾脏CD8^+ T细胞的免疫磁珠负性分选方法,并对分选后所得细胞进行纯度、活力及功能检测。方法以免疫磁珠负性分选法从小鼠脾脏细胞中分离CD8^+ T细胞,流式细胞术检测所得细胞的纯度,台盼蓝检测细胞活力并用ConA刺激检测增殖能力。结果经过流式细胞仪测定免疫磁珠负性分选后的小鼠脾脏CD8^+ T细胞纯度达到(91.6±3.6)%,台盼兰染色细胞活力为(94.9±3.2)%,ConA刺激72h后有(56.3±1.7)%的细胞增殖。结论免疫磁珠负性分选法能够分选出高纯度的CD8^+ T细胞,并且不影响分选靶细胞的细胞活力和功能。

关键词： CD8^+T细胞免疫磁珠负性分选

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一种新的FR4剪切变异体的确认和鉴定

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免疫学杂志 2009年第3期25卷 235-238页

作者：赵韧倪兵贾正才田易付晓岚吴玉章第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所

目的确认并鉴定一个新发现的小鼠FR4剪切变异体,并在mRNA水平检测其在小鼠脾淋巴细胞亚群中的表达。方法PCR克隆FR4CDS区时发现存在一个新的剪切变异体,酶切和测序予以鉴定,Western blot检测脾细胞中变异体的表达,流式分选脾细胞中CD8+... 详细信息

目的确认并鉴定一个新发现的小鼠FR4剪切变异体,并在mRNA水平检测其在小鼠脾淋巴细胞亚群中的表达。方法PCR克隆FR4CDS区时发现存在一个新的剪切变异体,酶切和测序予以鉴定,Western blot检测脾细胞中变异体的表达,流式分选脾细胞中CD8+、CD4+CD25-、CD4+CD25+T淋巴细胞,RT-PCR检测新的变异体在各细胞亚群中的表达。结果凝胶电泳显示存在一个CDS区碱基数大于野生型FR4的条带,测序表明此条带在野生型外显子基础上包含一个内含子成分,Western blotting证实新发现的剪切体在蛋白水平也存在,脾细胞中不同T细胞亚群均表达此新型变异体。结论mRNA和蛋白水平均证实存在一种新型FR4剪切变异体,不同T细胞亚群均表达此变异体暗示其在淋巴细胞摄取叶酸功能上不可或缺。

关键词：叶酸受体剪切变异体 T细胞亚群

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Pokemon基因siRNA逆转录病毒的制备及其对Hela细胞增殖的影响

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免疫学杂志 2008年第3期24卷 259-263,267页

作者：石晶磊贾正才邓一静吴玉章倪兵第三军医大学全军免疫学基础医学部研究所重庆400038

目的针对多种肿瘤细胞高表达Pokemon基因的特性,制备表达针对Pokemon基因的siRNA的逆转录病毒,研究其对感染肿瘤细胞中Pokemon基因沉默情况,探讨肿瘤防治的新方法。方法首先利用siRNA预测软件得到4条siRNA编码DNA序列,再构建重组逆转录... 详细信息

目的针对多种肿瘤细胞高表达Pokemon基因的特性,制备表达针对Pokemon基因的siRNA的逆转录病毒,研究其对感染肿瘤细胞中Pokemon基因沉默情况,探讨肿瘤防治的新方法。方法首先利用siRNA预测软件得到4条siRNA编码DNA序列,再构建重组逆转录病毒siRNA表达质粒;利用RT-PCR技术筛选出高表达Pokemon基因的肿瘤靶细胞。然后,将重组质粒转染靶细胞,利用实时定量RT-PCR和MTT等方法筛选出沉默效果最佳的siRNA。利用逆转录病毒包装细胞制备重组病毒,鉴定病毒滴度及其对体外培养细胞中Pokemon基因的沉默效应。结果通过酶切鉴定和测序等方法证实了预测出的四条siRNA编码DNA片段成功地构建到逆转录病毒表达载体pSilencer5.1-H1中。通过将这些重组质粒转入高表达Pokemon基因的Hela肿瘤细胞中,抗生素压力筛选出相应表达各种siRNA的细胞株,再从中筛选出了1个有50%以上沉默效应的候选siRNA。利用这一条siRNA表达质粒,在逆转录病毒包装细胞中制备出了滴度为105cfu/mL的重组病毒。此重组病毒感染Hela细胞后能显著降低其中Pokemon基因的表达。结论成功制备了表达人Pokemon基因siRNA的重组逆转录病毒,并且在体外实验中证实了该病毒能对肿瘤细胞Hela的增殖产生明显的抑制作用,为下一步的体内抗肿瘤研究提供了有力的佐证。

关键词： Pokemon基因逆转录病毒 RNA 肿瘤治疗

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蛋白糖基化与细胞毒性T淋巴细胞应答

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第三军医大学学报 2000年第10期22卷 997-1003页

作者：周吉军吴玉章第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所重庆400038

糖基化是已知的蛋白最重要的翻译后修饰。已知的蛋白糖基化有多种类型 ,其中最常见的是发生在天冬酰胺 (Ａｓｐａｒａｇｉｎｅ ,Ａｓｎ)的Ｎ糖基化 (Ｎｌｉｎｋｅｄｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ)和发生在丝氨酸 (Ｓｅｒｉｎｅ ,Ｓｅｒ... 详细信息

糖基化是已知的蛋白最重要的翻译后修饰。已知的蛋白糖基化有多种类型 ,其中最常见的是发生在天冬酰胺 (Ａｓｐａｒａｇｉｎｅ ,Ａｓｎ)的Ｎ糖基化 (Ｎｌｉｎｋｅｄｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ)和发生在丝氨酸 (Ｓｅｒｉｎｅ ,Ｓｅｒ)和苏氨酸 (Ｔｈｒｅｏｎｉｎｅ ,Ｔｈｒ)的Ｏ糖基化 (Ｏｌｉｎｋｅｄｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ)。糖蛋白中糖基的结构大小不一 ,少者仅一个单糖 ,稍复杂的寡糖链可由 12～ 15个单糖残基衍生物组成 ,甚至可多达 2 0～ 30个单糖残基。糖链的结构类型与其在肽链上共价连接的氨基酸种类有关。蛋白 (肽 )糖基化后不仅亲水性增加 ,对蛋白酶耐受能力 (酶稳定

关键词：蛋白糖基化 CTL 免疫应答免疫识别

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特异性细胞毒性T细胞活化的研究进展

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第三军医大学学报 2000年第10期22卷 992-997页

作者：万瑛吴玉章第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所重庆400038

特异性细胞毒性Ｔ细胞 (ＣｙｔｏｔｏｘｉｃＴｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ,ＣＴＬ )的活化是现代细胞免疫的重要研究领域 ,是具有高度时空复杂性的生物学行为 ,是众多免疫细胞、免疫分子协同作用的结果。毫无疑问 ,此领域的研究进展将影响我... 详细信息

特异性细胞毒性Ｔ细胞 (ＣｙｔｏｔｏｘｉｃＴｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ,ＣＴＬ )的活化是现代细胞免疫的重要研究领域 ,是具有高度时空复杂性的生物学行为 ,是众多免疫细胞、免疫分子协同作用的结果。毫无疑问 ,此领域的研究进展将影响我们对抗感染免疫、肿瘤免疫、移植免疫、免疫发育、自身免疫疾病等乃至整个细胞免疫的理解。其中抗原的递呈处理和抗原递呈细胞 (Ａｎｔｉｇｅｎｐｒｏｃｅｓｓｃｅｌｌ,ＡＰＣ)与ＣＴＬ相互作用作为ＣＴＬ活化的初始阶段 ,决定了　　作者简介 :万　瑛 (1 972 - ) ,男 ,湖北省沙市人 ,博士研究生 ,助教 ,主要从事分子免疫学方面的研究 ,发表论文 1 1篇。电话 :(0

关键词： CTL 活化抗原递呈 APC细胞

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Fucoidan选择性抑制LPS诱导巨噬细胞分泌IL-12

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免疫学杂志 2006年第2期22卷 117-119页

作者：徐文岳吴玉章王莉王惠明王沂芹赵婷婷梁云飞牛微第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所重庆400038

目的探讨配体fucoidan活化清道夫受体后能否抑制LPS刺激巨噬细胞分泌IL-12。方法不同剂量的fu-coidan(以多价阴离子chondroitin为阴性对照)与RAW264.7作用10 min后,加入等量的LPS刺激,检测上清中IL-12p70I、L-6和TNF-α;同时观察不同剂... 详细信息

目的探讨配体fucoidan活化清道夫受体后能否抑制LPS刺激巨噬细胞分泌IL-12。方法不同剂量的fu-coidan(以多价阴离子chondroitin为阴性对照)与RAW264.7作用10 min后,加入等量的LPS刺激,检测上清中IL-12p70I、L-6和TNF-α;同时观察不同剂量fucoidan对RAW264.7贴壁的影响。结果不同剂量的fucoidan能不同程度促进LPS诱导RAW264.7分泌炎症因子IL-6和TNF-α,但却能明显地抑制IL-12的分泌;随着所加fucoidan量的增加,RAW264.7细胞的贴壁能力逐渐下降。结论Fucoidan可能通过与清道夫受体SR-A(scavenger receptor A)结合发挥其特异抑制LPS诱导巨噬细胞分泌IL-12的作用。

关键词：岩藻依聚糖 IL-12 RAW264.7 LPS

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MAGE-12 mRNA在肺癌中的表达及其意义

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第三军医大学学报 2002年第10期24卷 1146-1148页

作者：李艳秋吴玉章倪兵贾正才第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所重庆400038

目的　探讨肺癌组织中MAGE 12mRNA的表达及其意义。方法　采用RT PCR技术 ,检测了MAGE 12在 5 0例临床病人肺癌标本中mRNA水平的表达。结果　 5 0例临床肺癌标本中有 17例表达 (17 5 0 ,3 4% ) ,且肺鳞癌 (15 3 3 ,45 5 % )与肺腺癌 (... 详细信息

目的　探讨肺癌组织中MAGE 12mRNA的表达及其意义。方法　采用RT PCR技术 ,检测了MAGE 12在 5 0例临床病人肺癌标本中mRNA水平的表达。结果　 5 0例临床肺癌标本中有 17例表达 (17 5 0 ,3 4% ) ,且肺鳞癌 (15 3 3 ,45 5 % )与肺腺癌 (2 17,11 8% )有显著差异 (P <0 0 5 )。结论　MAGE 12基因在肺癌有较高的表达率 ,基于MAGE

关键词：肿瘤抗原 MAGE-12 肺癌逆转录-聚合酶链反应

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人CD137分子基因克隆及其在COS-7细胞中表达的研究

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第三军医大学学报 2002年第11期24卷 1343-1345页

作者：黎万玲黄钢姜曼白云第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所重庆400038

目的　克隆人CD13 7分子的编码序列 ,将其重组入真核表达载体 ,并表达于COS 7细胞。方法　从活化的人T细胞cDNA文库中以PCR方法克隆编码人CD13 7的编码序列 ,对其序列进行测定。将测序正确的CD13 7编码序列克隆入真核表达载体PCI neo ,... 详细信息

目的　克隆人CD13 7分子的编码序列 ,将其重组入真核表达载体 ,并表达于COS 7细胞。方法　从活化的人T细胞cDNA文库中以PCR方法克隆编码人CD13 7的编码序列 ,对其序列进行测定。将测序正确的CD13 7编码序列克隆入真核表达载体PCI neo ,构建重组表达载体。采用脂质体法转染COS 7细胞 ,用流式细胞仪检测CD13 7分子的表达。结果　PCR方法扩增出一 80 0bp左右的基因片段 ,插入PCI neo构建重组表达载体后 ,经序列测定证实扩增的片段为人CD13 7编码序列。将重组子转染COS 7细胞 ,流式细胞仪检测显示有 2 7.11%的细胞表达人CD13 7分子。结论　成功地克隆并在COS 7细胞中表达了CD13 7分子。

关键词： CD137 COS-7细胞基因表达基因克隆

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噬菌体呈现颗粒疫苗诱导抗肿瘤细胞毒性T细胞反应

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第三军医大学学报 2000年第10期22卷 946-948页

作者：万瑛吴玉章边疆赵建平王祥智周伟周丽芸唐燕贾正才第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所重庆400038

目的　构建呈现肿瘤相关抗原P815A的噬菌体颗粒 ,在体诱导针对肥大细胞瘤P815的特异性细胞毒性T细胞 (CTL)反应。方法　构建呈现CTL表位P1A35～ 4 3 的噬菌粒载体 ,大量制备呈现此表位的重组噬菌体颗粒 ,小剂量、无佐剂皮下免疫DBA/2小... 详细信息

目的　构建呈现肿瘤相关抗原P815A的噬菌体颗粒 ,在体诱导针对肥大细胞瘤P815的特异性细胞毒性T细胞 (CTL)反应。方法　构建呈现CTL表位P1A35～ 4 3 的噬菌粒载体 ,大量制备呈现此表位的重组噬菌体颗粒 ,小剂量、无佐剂皮下免疫DBA/2小鼠 (H 2 d) ,采用51Cr释放法、ELISPOT观察针对肥大细胞瘤P815的CTL反应。结果　重组噬菌体呈现颗粒疫苗在体诱导了针对弱抗原P815A的CTL反应。结论　丝状噬菌体呈现疫苗增强肿瘤相关抗原的免疫原性。

关键词：疫苗肿瘤丝状噬菌体免疫治疗 CTL

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非洲爪蟾TGF-β5和小鼠TRP-2联合免疫诱导产生抗肿瘤免疫应答

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第三军医大学学报 2005年第3期27卷 189-191页

作者：贾正才吴玉章邹丽云万瑛吕燕波第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所重庆400038

目的　研究非洲爪蟾转化生长因子 β5 (aTGF β5 )基因免疫对肿瘤治疗性质粒DNA疫苗诱导抗肿瘤免疫应答的效能的影响 ,探讨所诱导免疫应答的抗肿瘤机制。方法　用aTGF β5真核表达质粒和小鼠酪氨酸酶相关蛋白 2 (mTRP 2 )真核表达质粒... 详细信息

目的　研究非洲爪蟾转化生长因子 β5 (aTGF β5 )基因免疫对肿瘤治疗性质粒DNA疫苗诱导抗肿瘤免疫应答的效能的影响 ,探讨所诱导免疫应答的抗肿瘤机制。方法　用aTGF β5真核表达质粒和小鼠酪氨酸酶相关蛋白 2 (mTRP 2 )真核表达质粒联合免疫野生型C5 7BL/6小鼠、CD4缺陷的C5 7BL/6小鼠和CD8缺陷的C5 7BL/6小鼠 ,于免疫前或免疫后接种黑色素瘤细胞B16F10 ,观测肿瘤生长和小鼠存活情况。结果　两种质粒联合免疫能在野生型C5 7BL/6小鼠体内诱导产生保护性和治疗性抗肿瘤免疫 ,而mTRP 2真核表达质粒单独免疫野生型C5 7BL/6小鼠及两种质粒联合免疫CD4或CD8缺陷的C5 7BL/6小鼠均不能诱导产生抗肿瘤免疫应答。结论　aTGF β5基因免疫能增强编码mTRP 2的肿瘤治疗性质粒DNA疫苗诱导抗肿瘤免疫应答的能力 ;T细胞免疫应答的诱导是抗小鼠黑色素瘤免疫应答所必需的。

关键词：转化生长因子—β DNA疫苗酪氨酸酶相关蛋白2 细胞毒性T淋巴细胞肿瘤

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