检索结果-内蒙古大学图书馆

西南大学学报（自然科学版） 2014年第7期36卷 1-7页

作者：孔德营商海涛刘福慧韩勇魏泓张家骅遵义医学院基础医学院生理学教研室贵州遵义563000 第三军医大学基础部实验动物学教研室重庆400038 遵义医学院附属医院输血科贵州遵义563000 西南大学动物科技学院重庆市草食动物资源保护与利用工程技术研究中心重庆400716

该文通过多指标正交实验设计对巴马香猪精液冷冻稀释液中低密度脂蛋白(LDL,因素A)、海藻糖(因素B)和甘油(因素C)等3种保护剂联合使用时的作用进行评价,并分别对3种物质的最佳体积质量分数、摩尔浓度和体积百分比进行优化.结果表明3种保... 详细信息

该文通过多指标正交实验设计对巴马香猪精液冷冻稀释液中低密度脂蛋白(LDL,因素A)、海藻糖(因素B)和甘油(因素C)等3种保护剂联合使用时的作用进行评价,并分别对3种物质的最佳体积质量分数、摩尔浓度和体积百分比进行优化.结果表明3种保护剂对精子活率(TMS)、质膜完整性(PMI)和彗星率(CR)作用的主次顺序均为A>C>B,对精子顶体完整性(AI)作用的主次顺序为B>A>C;3种保护剂对TMS和PMI均有极显著的保护作用(p<0.01),对CR均无显著性作用(p>0.05);LDL和海藻糖对AI有显著的保护作用(p<0.05),甘油对AI无显性作用(p>0.05);通过因素与指标关系趋势图的绘制,发现由各个指标得到的最佳组合均为A2B3C2,且指标间的相关性均达到了显著水平(p<0.05).因此,用TMS,PMI,AI和CR评价巴马香猪冷冻-解冻后精液质量时,指标间不存在矛盾,用9%(w/v)低密度脂蛋白、200mmol/L海藻糖和2%甘油为巴马香猪精液冷冻稀释液中最优组合.

关键词：巴马香猪精液冷冻多指标正交试验设计低密度脂蛋白甘油海藻糖

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不同限饲水平下巴马香猪血液生理、生化指标的比较

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第三军医大学学报 2013年第11期35卷 1111-1114页

作者：李亮刘宇商海涛魏泓第三军医大学基础医学部实验动物学教研室重庆400038

目的测定不同限饲水平下巴马香猪重要血液生理、生化指标,探讨限饲对血液生理生化指标的影响。方法将336头断奶巴马香猪根据不同限饲水平按完全随机法分为对照组、80%日粮组和50%日粮组,每组112头,在60日龄和90日龄前腔静脉采集血液样本... 详细信息

目的测定不同限饲水平下巴马香猪重要血液生理、生化指标,探讨限饲对血液生理生化指标的影响。方法将336头断奶巴马香猪根据不同限饲水平按完全随机法分为对照组、80%日粮组和50%日粮组,每组112头,在60日龄和90日龄前腔静脉采集血液样本,对重要的10项血液生理指标和7项血液生化指标进行测定,统计不同限饲水平下指标的差异。结果血液生化指标中ALT、TP、UREA和CREA指标值随着限饲水平的上升而上升;而TCHOL和GLU指标值随着限饲水平的上升而下降(P<0.05)。血液生理指标中RBC、HGB、HCT、MCH和MCHC指标含量随着限饲水平的上升而上升;而PLT、MCV、RDW-SD和RDW-CV指标含量随着限饲水平的上升而下降(P<0.05)。结论巴马香猪在3个限饲水平下,血液生理、生化指标存在明显差异;按80%日粮限饲的巴马香猪更能获得稳定标准的巴马香猪血液生理、生化指标。

关键词：巴马香猪限饲血液生理血液生化

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miR-145在间充质干细胞来源软骨细胞肥大化中的作用

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第三军医大学学报 2013年第11期35卷 1058-1061页

作者：康菲杨波闫演飞康夏郭洪峰窦策董世武第三军医大学基础医学部人体解剖学教研室重庆400038

目的探讨miR-145对间充质来源软骨细胞肥大化的调控作用。方法用肥大化完全诱导培养基对间充质干细胞进行软骨细胞肥大化诱导,检测肥大化相关基因表达,确定间充质来源软骨细胞肥大化诱导成功。实验分为转染antagomiR-145(miRNA拮抗剂)... 详细信息

目的探讨miR-145对间充质来源软骨细胞肥大化的调控作用。方法用肥大化完全诱导培养基对间充质干细胞进行软骨细胞肥大化诱导,检测肥大化相关基因表达,确定间充质来源软骨细胞肥大化诱导成功。实验分为转染antagomiR-145(miRNA拮抗剂)组和对照组,应用qRT-PCR检测miR-145对软骨细胞肥大化标志基因Ⅹ型胶原(ColⅩ)、成纤维细胞生长因子受体-1(FGFR-1)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)转录水平的影响。结果转染antagomiR-145可以延缓间充质来源软骨细胞肥大化进程。转染antagomiR-145后肥大化软骨细胞的标志物ColⅩ、FGFR-1、MMP-13的表达量与对照组相比显著降低(P<0.05),而ColⅡ的表达与对照组相比显著增多(P<0.05)。结论抑制miR-145的表达能有效地延缓间充质干细胞向肥大化软骨细胞分化进程。

关键词：间充质干细胞软骨细胞肥大化 miR-145 Sox 9

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DISC1基因过表达对星形胶质细胞质膜伸展的影响

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第三军医大学学报 2013年第10期35卷 938-942页

作者：刘淑宝田衍平陈显军吴锡艳肖岚第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038

目的构建精神分裂症断裂基因1(Disrupted-In-Schizophrenia 1,DISC1)蛋白表达质粒,检测其过表达后对星形胶质细胞(Astrocytes,ASTs)质膜伸展的影响。方法针对小鼠DISC1基因mRNA编码序列,设计合成可扩增全长引物;以小鼠脑白质cDNA为模板... 详细信息

目的构建精神分裂症断裂基因1(Disrupted-In-Schizophrenia 1,DISC1)蛋白表达质粒,检测其过表达后对星形胶质细胞(Astrocytes,ASTs)质膜伸展的影响。方法针对小鼠DISC1基因mRNA编码序列,设计合成可扩增全长引物;以小鼠脑白质cDNA为模板进行PCR扩增,构建全长表达质粒,命名为pEGFP-n1-DISC1。分别将过表达组pEGFP-n1-DISC1和空载体对照组pEGFP-n1电转染原代培养ASTs,以Western blot及免疫荧光染色检测DISC1-GFP融合蛋白的表达,利用Image-Pro Plus 5.0软件分析对照组与DISC1过表达组星形胶质细胞质膜伸展面积的大小。结果成功从cDNA中扩增出DISC1编码序列并插入pEGFP-n1载体,双酶切和测序结果证实,DISC1蛋白编码序列插入载体,并能正确读码翻译。构建质粒转染ASTs 60 h后,可见DISC1-GFP融合蛋白表达;与对照组相比,DISC1过表达组ASTs的质膜伸展面积明显增加(P<0.05)。结论成功构建小鼠DISC1全长基因表达载体,DISC1基因过表达后可促使ASTs质膜伸展面积增加。

关键词：精神分裂症断裂基因1 真核表达质粒星形胶质细胞质膜伸展

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亨廷顿舞蹈病一家系的基因诊断与产前诊断

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第三军医大学学报 2013年第17期35卷 1883-1885页

作者：郭洪张均胡华李黔宁姚红白云第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室重庆400038 第三军医大学妇产科重庆400038 第三军医大学神经内科重庆400038

目的对亨廷顿舞蹈病一家系进行遗传学分析,为家系成员提供遗传咨询和诊断,为研究舞蹈病的发病机制和治疗方法提供依据。方法对患者进行家系调查和系谱分析,收集家系成员的临床资料,提取家系成员的外周血以及羊水基因组DNA进行遗传学分... 详细信息

目的对亨廷顿舞蹈病一家系进行遗传学分析,为家系成员提供遗传咨询和诊断,为研究舞蹈病的发病机制和治疗方法提供依据。方法对患者进行家系调查和系谱分析,收集家系成员的临床资料,提取家系成员的外周血以及羊水基因组DNA进行遗传学分析。结果通过基因诊断确诊了家系中一早发型舞蹈病患者,检出了1名症状前患者,并经羊水DNA分析对1名22周胎儿进行了产前诊断。基因测序发现,先证者突变IT15基因CAG重复次数为66,症状前患者为48次,胎儿为69次。结论该家系具有亨廷顿舞蹈病典型的遗传学特征和临床特征,通过分子遗传学手段对家系成员进行基因确诊、症状前诊断乃至产前诊断有着非常重要的意义。

关键词：亨廷顿舞蹈病动态突变家系产前诊断基因诊断

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慢病毒介导shRNA沉默HDAC1表达对EC109细胞生长特性的影响

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第三军医大学学报 2013年第10期35卷 961-964页

作者：刘洋博何刚章波庞学利第三军医大学西南医院肿瘤科重庆400038 第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室重庆400038

目的应用慢病毒介导的RNA干扰技术,有效沉默食管癌细胞株EC109的HDAC1表达并观察其对细胞生长的影响。方法以HDAC1为靶基因,合成寡核苷酸,退火形成双链DNA,与经AgeⅠ和EcoRⅠ酶切后的pGCSIL-PUR载体连接获得重组慢病毒载体;将其与病毒... 详细信息

目的应用慢病毒介导的RNA干扰技术,有效沉默食管癌细胞株EC109的HDAC1表达并观察其对细胞生长的影响。方法以HDAC1为靶基因,合成寡核苷酸,退火形成双链DNA,与经AgeⅠ和EcoRⅠ酶切后的pGCSIL-PUR载体连接获得重组慢病毒载体;将其与病毒复制包装质粒共感染293T细胞,收集并浓缩上清液获得重组病毒,测定病毒滴度;病毒颗粒转染EC109细胞,通过荧光显微镜等观察转染效率并经有限稀释法获得单克隆来源的细胞系;定量PCR及Western blot检测HDAC1的表达;并观察EC109细胞的生长特性。结果成功构建干扰HDAC1表达的慢病毒载体pGCSIL-SiHDAC1,并在293T细胞中包装获得病毒。重组病毒感染EC109细胞后,HDAC1mRNA和蛋白水平检测显示干扰组细胞的HDAC1的表达水平较对照组显著降低(P<0.05)。HDAC1下调的EC109细胞的增殖能力明显下降(P<0.05)。结论慢病毒介导的shRNA能有效的沉默食管癌细胞EC109中的HDAC1的表达,并且能抑制其细胞的增殖。

关键词： HDAC1 慢病毒食管癌细胞细胞生长

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数字人脑切片图像中小脑组织的连续自动分割

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仪器仪表学报 2013年第1期34卷 133-139页

作者：文丽丽罗洪艳张绍祥郑小林谭立文重庆大学生物工程学院重庆400044 第三军医大学基础医学部解剖学教研室重庆市计算机医学研究所重庆400038

提出了一种基于改进Snake模型的分割方法,用于数字人脑切片数据集中小脑组织的连续自动分割。在基本的Snake模型中添加了向心力、气球力,并采用自适应的能量约束项系数,根据相邻切片图像中小脑轮廓具有相似性,依次将单张切片的分割结果... 详细信息

提出了一种基于改进Snake模型的分割方法,用于数字人脑切片数据集中小脑组织的连续自动分割。在基本的Snake模型中添加了向心力、气球力,并采用自适应的能量约束项系数,根据相邻切片图像中小脑轮廓具有相似性,依次将单张切片的分割结果作为相邻切片分割的初始轮廓,进而实现整个数据集中小脑组织的连续自动分割。自动分割结果与专家手动分割结果的一致性较好,分割相似指数的平均值达到92.95%,最大为97.87%。结果表明该方法能够较为准确地从彩色人脑切片图像中提取出复杂的小脑组织,克服了现有方法对大量人工参与的依赖,并提高了分割的精度。

关键词：小脑自动分割 Snake模型贪婪算法切片图像图像处理

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Aβ1-42抑制少突胶质前体细胞增殖与分化的实验研究

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第三军医大学学报 2013年第12期35卷 1183-1187页

作者：张茂詹晓黎陈兴书蔡其燕徐妍姚忠祥第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆市神经科学研究所 400038

目的探讨在离体细胞培养条件下,Aβ1-42对SD乳鼠少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)增殖与分化的影响。方法采用条件培养液原代培养获得高纯度SD乳鼠OPCs,分为正常组、加入无菌水的对照组、加入Aβ1-42的实验组,采... 详细信息

目的探讨在离体细胞培养条件下,Aβ1-42对SD乳鼠少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)增殖与分化的影响。方法采用条件培养液原代培养获得高纯度SD乳鼠OPCs,分为正常组、加入无菌水的对照组、加入Aβ1-42的实验组,采用CCK-8检测存活细胞数量和增殖水平,Western blot检测细胞凋亡蛋白含量,免疫细胞化学染色观察细胞形态变化及分化情况。结果与对照组相比,实验组OPCs存活率显著降低(P<0.01),具体表现为:Aβ1-42作用OPCs 1 h后,细胞增殖明显受到抑制(P<0.01);药物浓度1 mol/L作用于OPCs时,增殖也受到影响(P<0.05),当Aβ1-42剂量增加至2.5 mol/L时,细胞增殖明显受到抑制(P<0.01),而对照组与正常组无显著差异(P>0.05)。对凋亡蛋白Caspase-3的检测发现,它们在对照组与正常组的表达水平基本相当(P>0.05),而在实验组明显升高(P<0.01),且呈现时间和浓度依赖性,具体表现为:Aβ1-42作用OPCs 2 h后,Caspase-3表达水平明显上调(P<0.01);药物浓度2.5 mol/L作用于OPCs时,蛋白表达水平有所升高(P<0.05),当Aβ1-42剂量增加至5 mol/L时,Caspase-3表达水平明显上调(P<0.01)。对成熟少突胶质细胞标记物髓鞘碱性蛋白的免疫染色发现,与对照组相比,实验组的细胞体积明显变小,突起明显减少。结论 Aβ1-42可能通过促使细胞凋亡而抑制OPCs增殖,并抑制了OPCs向成熟少突胶质细胞分化,从而影响中枢神经系统的髓鞘形成。

关键词：少突胶质前体细胞细胞增殖分化 Aβ1-42 阿尔兹海默症

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人STAT3重组腺病毒的制备及其对胃癌细胞株SGC-7901增殖的影响

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第三军医大学学报 2013年第8期35卷 764-768页

作者：董宗明赵永亮余佩武黄钢第三军医大学西南医院全军普通外科中心微创胃肠外科中心重庆400038 第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室重庆400038

目的制备可表达人转录因子STAT3的重组腺病毒,检测该基因在胃癌细胞株SGC-7901的表达活性及对其增殖的影响。方法以人胎盘组织cDNAs为模板通过PCR获得hSTAT3完整阅读框,T/A克隆测序证实后,亚克隆至穿梭载体pAdTrack-CMV中,PmeⅠ线性化... 详细信息

目的制备可表达人转录因子STAT3的重组腺病毒,检测该基因在胃癌细胞株SGC-7901的表达活性及对其增殖的影响。方法以人胎盘组织cDNAs为模板通过PCR获得hSTAT3完整阅读框,T/A克隆测序证实后,亚克隆至穿梭载体pAdTrack-CMV中,PmeⅠ线性化与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在BJ5183细菌同源重组,经PacⅠ线性化后转染293FT细胞包装,同时包装空载体腺病毒,进行病毒滴度测定。取AdV-STAT3、AdV-GFP分别感染SGC-7901细胞,设空白对照,Western blot检测3组细胞STAT3蛋白表达,MTT法检测对细胞增殖的影响。结果获得hSTAT3完整阅读框,T载体中测序无突变,亚克隆至pAdTrack-CMV,并与pAdEasy-1成功重组后包装AdV-STAT3,测定滴度为2.8×1010pfu/mL,AdV-GFP滴度为3.2×1010pfu/mL。与AdV-GFP组及空白对照组比,Western blot示AdV-STAT3组蛋白明显表达(P<0.05);MTT示AdV-1-STAT3组明显促进细胞增殖(P<0.05)。结论成功制备hSTAT3的重组腺病毒,感染胃癌细胞株SGC-7901后高表达并促进其增殖。

关键词： STAT3 重组腺病毒胃癌增殖

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盐酸青藤碱诱导***926细胞自噬及其在抗炎中的作用

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第三军医大学学报 2013年第11期35卷 1084-1087页

作者：杨亭倪振洪龚薇何凤田第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的探讨中药单体提取物盐酸青藤碱诱导人内皮细胞***926自噬的机制及其在抗炎中发挥的作用。方法Western blot检测分别以终浓度为50、100μg/mL的盐酸青藤碱处理12h后的***926细胞中自噬相关蛋白LC3Ⅱ、ERK2、磷酸化ERK2及炎症细胞因子... 详细信息

目的探讨中药单体提取物盐酸青藤碱诱导人内皮细胞***926自噬的机制及其在抗炎中发挥的作用。方法Western blot检测分别以终浓度为50、100μg/mL的盐酸青藤碱处理12h后的***926细胞中自噬相关蛋白LC3Ⅱ、ERK2、磷酸化ERK2及炎症细胞因子HMGB1表达变化情况;荧光显微镜观察吖啶橙染色的经盐酸青藤碱诱导后***926细胞酸性小体变化情况。结果经终浓度为50、100μg/mL的盐酸青藤碱处理***926细胞后,与对照组比较,100μg/mL的盐酸青藤碱可使自噬相关蛋白LC3Ⅱ表达(0.67±0.05)及ERK2的磷酸化水平(1.08±0.05)上调(P<0.05),ERK抑制剂U0126可使LC3Ⅱ表达下调(P<0.05)及***926细胞中酸性小体减少;盐酸青藤碱可抑制***926中LPS诱导的HMGB1表达,自噬抑制剂氯喹可逆转该细胞中盐酸青藤碱对LPS诱导HMGB1表达的抑制作用(P<0.05)。结论盐酸青藤碱可通过ERK通路诱导***926细胞自噬,该自噬过程是盐酸青藤碱下调炎症细胞因子HMGB1进而发挥抗炎活性的机制之一。

关键词：盐酸青藤碱自噬 HMGB1 ERK 抗炎

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