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登革病毒感染人原代树突状细胞(CD209,-139A/-336A)模型的建立

第三军医大学学报 2017年第4期39卷 323-327页

作者：杨裔方昕胡珍杨杰袁吉振尚伟龙饶贤才第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038

目的建立以人原代树突状细胞(dendritic cells,DCs)为宿主的登革病毒(dengue virus,DENV)感染模型。方法采集基因型为CD209,-139A/-336A的人抗凝血标本,分离获得DCs前体细胞,利用rh GM-CSF及rh IL-4诱导,获得未成熟DCs。瑞氏染色鉴定DC... 详细信息

目的建立以人原代树突状细胞(dendritic cells,DCs)为宿主的登革病毒(dengue virus,DENV)感染模型。方法采集基因型为CD209,-139A/-336A的人抗凝血标本,分离获得DCs前体细胞,利用rh GM-CSF及rh IL-4诱导,获得未成熟DCs。瑞氏染色鉴定DCs的形态,流式细胞术鉴定DCs的分化效率,淋巴细胞增殖实验鉴定DCs的生物学功能。以I型登革病毒GZ2002株为模式病毒进行病毒感染实验,建立并评估以人原代DCs为宿主的登革病毒感染模型。结果分离获得的DCs前体细胞经细胞因子刺激后成功分化为未成熟DCs,分化效率高达90%。获得的DCs具有典型的细胞形态及生物学功能,可有效刺激淋巴细胞增殖。登革病毒GZ2002株能成功感染诱导获得的原代DCs,促进DCs成熟,并复制产生感染性子代病毒,证明细胞感染模型成功建立。结论成功建立以DCs为宿主的登革病毒感染模型。

关键词：登革病毒树突状细胞细胞模型 CD209

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小鼠初级听皮层SOM中间神经元突触输入的时空特性研究

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第三军医大学学报 2017年第5期39卷 417-422页

作者：王丽娟陶璨张光伟周畅闫素梅熊鹰周艺第三军医大学基础医学部神经生物学教研室、重庆市神经生物学重点实验室、重庆市神经科学研究所重庆400038

目的研究小鼠初级听皮层SOM+神经元接受刺激后突触输入的时空特性。方法通过局部场电位记录方法对初级听皮层进行定位后,采用电压钳全细胞记录方法在离体脑片上分别记录SOM+神经元和锥体神经元在接受刺激后诱发的兴奋后突触后电流和抑... 详细信息

目的研究小鼠初级听皮层SOM+神经元接受刺激后突触输入的时空特性。方法通过局部场电位记录方法对初级听皮层进行定位后,采用电压钳全细胞记录方法在离体脑片上分别记录SOM+神经元和锥体神经元在接受刺激后诱发的兴奋后突触后电流和抑制性突触后电流。通过对两类神经元的兴奋性突触后电流和抑制性突触后电流时间特性以及幅度上的比较,从而分析SOM+神经元突触输入的时空特性。结果 SOM+神经元与锥体神经元的突触输入在时间特性上表现出相似的起始潜伏期。SOM+神经元的兴奋性突触后电流和抑制性突触后电流的峰值潜伏期[(14.35±2.74)ms,(18.26±3.24)ms]明显要短于锥体神经元的兴奋性突触后电流和抑制性突触后电流的峰值潜伏期[(18.81±3.76)ms,(21.08±3.93)ms],差异具有统计学意义(EPSC P<0.05,IPSC P<0.01)。在突触后电流的幅度上两类神经元差异没有统计学意义(P>0.05)。结论 SOM+中间神经元接受的突触输入与锥体神经元接受的突触输入在基本电生理特性上类似,但时间特性上的差异提示两者接受的突触输入在皮层内环路来源上可能存在一定差异。

关键词： SOM+神经元锥体细胞全细胞记录离体膜片钳初级听皮层

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教学导师培训制度促进青年教师快速成长有效性探讨

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现代医药卫生 2017年第12期33卷 1885-1886页

作者：蔡其燕李红丽田衍平李成仁陈兴书肖岚第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室/发育生物学教研室重庆400038

为了缩短青年教师的成长周期,快速提高青年教师的教学水平,该校基础医学部决定尝试大学培养硕士研究生、博士研究生的导师制模式,实施教学导师指导下的青年教师培训制度,遴选热爱教学和具备丰富教学经验的教学专家和资深教师组成导师团... 详细信息

为了缩短青年教师的成长周期,快速提高青年教师的教学水平,该校基础医学部决定尝试大学培养硕士研究生、博士研究生的导师制模式,实施教学导师指导下的青年教师培训制度,遴选热爱教学和具备丰富教学经验的教学专家和资深教师组成导师团队,有针对性地对青年教师进行为期两年的教学培训。其组织形式包括团队式课前辅导、双向随堂听课、教学技能专项培训及教学能力的考核评价。实践表明,教学导师培训制度增强了青年教师的责任感和教学热情,是"传、帮、带"的新方法。教学导师培训制度推进了青年教师的培养进程,是促进青年教师快速成长的有效途径。

关键词：教学方法教学导师制教学能力青年教师基础医学

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白藜芦醇对孤独症大鼠病症行为的改善作用

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第三军医大学学报 2017年第13期39卷 1360-1365页

作者：戴旭芳秦利燕连继勤重庆师范大学教育科学学院重庆市特殊儿童心理诊断与教育技术重点实验室重庆400047 重庆师范大学教育科学学院特殊教育系重庆400047 第三军医大学西南医院输血科重庆400038 第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的探讨白藜芦醇(resveratrol)改善孤独症大鼠病症行为的作用及可能机制。方法于大鼠孕12.5 d丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)腹腔一次性注射制备孤独症幼鼠模型。白藜芦醇处理组从母鼠怀孕后第6天开始按照3.6 mg/kg体质量在孕鼠皮下... 详细信息

目的探讨白藜芦醇(resveratrol)改善孤独症大鼠病症行为的作用及可能机制。方法于大鼠孕12.5 d丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)腹腔一次性注射制备孤独症幼鼠模型。白藜芦醇处理组从母鼠怀孕后第6天开始按照3.6 mg/kg体质量在孕鼠皮下注射白藜芦醇,持续注射13 d。将幼鼠分为4组:对照组、白藜芦醇处理组、VPA处理组、VPA联合白藜芦醇处理组,每组3只。出生后35 d对幼鼠进行重复行为、神经行为与社会交往行为检测,通过Western blot检测脑组织中自噬标志蛋白LC3及SIRT1表达变化。结果成功获得孤独症模型大鼠。与对照组相比,VPA组重复行为增强、社会交往能力下降、中央区活动时间与距离增加、站立次数减少(P<0.05),符合孤独症行为特征;白藜芦醇组无明显行为学变化;但白藜芦醇联合处理可显著改善VPA处理引起的孤独症行为症状(P<0.05),包括重复行为减弱,社会交往能力增强,中央区活动时间与距离减少、站立次数增加。Western blot检测结果显示,与对照组相比,VPA处理可降低大鼠脑组织中SIRT1表达,并抑制LC3-Ⅱ表达水平;而白藜芦醇联合处理则可增强大脑组织中SIRT1与LC3-Ⅱ的表达。结论白藜芦醇能改善孤独症模型大鼠的病症行为,机制可能与增强细胞自噬及SIRT1表达相关。

关键词：白藜芦醇孤独症自噬 SIRT1

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髋关节应力分析三维有限元模型的构建

髋关节应力分析三维有限元模型的构建

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第二十四届全国中西医结合骨伤科学术年会

作者：陈光兴杨柳李恺何锐王志军余宾宁姜哲第三军医大学西南医院关节外科中心第三军医大学基础医学部人体解剖学教研室重庆大学土木工程学院

目的基于中国可视化人体数据集准确构建包括髋关节骨、软骨及盂唇完整结构的三维有限元应力分析模型。方法利用中国可视化人体数据库高分辨率磨片图像,采用轮廓提取法,在AutoCAD工作平台及Solidworks软件辅助下,通过实体加减法建立髋... 详细信息

关键词：髋三维有限元可视化人体生物力学

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髋关节应力分析三维有限元模型的构建

髋关节应力分析三维有限元模型的构建

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第二十四届中国中西医结合骨伤科学术年会

作者：陈光兴杨柳李恺何锐王志军余宾宁姜哲第三军医大学西南医院关节外科中心第三军医大学基础医学部人体解剖学教研室重庆大学土木工程学院

目的基于中国可视化人体数据集准确构建包括髋关节骨、软骨及盂唇完整结构的三维有限元应力分析模型。方法利用中国可视化人体数据库高分辨率磨片图像,采用轮廓提取法,在AutoCAD工作平台及Solidworks软件辅助下,通过实体加减法建立髋臼... 详细信息

目的基于中国可视化人体数据集准确构建包括髋关节骨、软骨及盂唇完整结构的三维有限元应力分析模型。方法利用中国可视化人体数据库高分辨率磨片图像,采用轮廓提取法,在AutoCAD工作平台及Solidworks软件辅助下,通过实体加减法建立髋臼骨、软骨、盂唇和股骨头骨、软骨的三维实体模型,并导入ABAQUS分析系统中作为装配的模型部件,设定材料属性后进行网格化,获得三维有限元模型组件。将髋臼骨、软骨、盂唇和股骨头骨、软骨部件分别组装,定义股骨近端相对髋臼屈髋5°、外旋20°,以股骨头中心施加垂直向上应力400N,分析验证其软骨部位的应力分布。结果采用实体加减法获得的组件在ABAQUS分析系统中装配准确,骨、软骨和盂唇连接界面未出现影响应力分析的间隙或实体重叠,网格化过程顺利。获得的软骨及盂唇接触区域的应力分布、软骨应力集中区域与传统研究方法结果相近。结论利用中国可视化人体数据库磨片能准确构建包括髋关节完整结构的三维有限元应力分析模型,同时避免了其它构建方法无盂唇结构的缺陷。

关键词：髋三维有限元可视化人体生物力学

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链非编码RNA H19调节let-7a对类风湿关节炎成纤维滑膜细胞增殖的影响

链非编码RNA H19调节let-7a对类风湿关节炎成纤维滑膜细胞增殖的...

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中华医学会第二十二次全国风湿病学学术会议

作者：吕细林第三军医大学附属新桥医院第三军大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室

目的探讨长链非编码RNA H19(long non-coding RNA H19,H19)调节let-7a对类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)滑膜细胞增殖的影响。

关键词：类风湿关节炎 lncRNA H19 Let-7a 细胞增殖

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Gsdermin A3基因在小鼠皮肤角质形成细胞中对Krt6b基因表达的影响

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第三军医大学学报 2016年第3期38卷 238-244页

作者：刘颖新白秀峰赖向东郭海英罗燕余裕连小华第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038 第三军医大学西南医院肝胆外科重庆400038

目的初步探讨Gsdermin A3(Gsdma3)基因对Krt6b基因表达的影响。方法通过组织切片的免疫荧光观察、RT-PCR、Q-PCR、Western blot等方法检测毛囊生长期[出生后8 d(P8d)]、毛囊退化期(P16d)、毛囊静止期(P25d)的Gsdma3基因突变鼠(AE鼠)和... 详细信息

目的初步探讨Gsdermin A3(Gsdma3)基因对Krt6b基因表达的影响。方法通过组织切片的免疫荧光观察、RT-PCR、Q-PCR、Western blot等方法检测毛囊生长期[出生后8 d(P8d)]、毛囊退化期(P16d)、毛囊静止期(P25d)的Gsdma3基因突变鼠(AE鼠)和野生型鼠(WT鼠)背部皮肤Krt6b基因的表达情况。利用免疫荧光进一步观察注射有Gsdma3和RFP腺病毒的Gsdma3基因突变鼠和野生型鼠的Krt6b基因的表达情况。结果 Gsdma3基因突变鼠的Krt6b基因表达量在各个时相点均高于野生型鼠(P<0.05)。其中,在出生后16 d Krt6b基因表达量达到最高,而在出生后25 d降至最低。对Gsdma3基因突变鼠进行基因回补后,免疫荧光、实时定量PCR及Western blot检测结果显示Krt6b基因表达减弱。同时,对野生型鼠过表达Gsdma3基因后,免疫荧光、实时定量PCR及Western blot结果显示Krt6b基因表达量降低。结论小鼠皮肤角质形成细胞中,Krt6b基因的表达受Gsdma3基因抑制。

关键词： Gsdermin A3基因 Krt6b基因角质形成细胞小鼠

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稳定高表达miR-449c的5637膀胱癌细胞株的建立

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细胞与分子免疫学杂志 2016年第6期32卷 760-763,769页

作者：万鹏飞黄亚琴王志王欢欢石家仲杨劲陈志文第三军医大学第一附属医院全军泌尿外科研究所重庆400038 第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的构建稳定表达miR-449c的人膀胱癌细胞株。方法以HEK293细胞基因组DNA作为模板,采用高保真酶进行扩增得到pre-miR-449c序列,将所得目的片段克隆到Ftet UGW-T载体上;经测序鉴定后,感染5637人膀胱癌细胞;经嘌呤霉素筛选后,利用倒置荧... 详细信息

目的构建稳定表达miR-449c的人膀胱癌细胞株。方法以HEK293细胞基因组DNA作为模板,采用高保真酶进行扩增得到pre-miR-449c序列,将所得目的片段克隆到Ftet UGW-T载体上;经测序鉴定后,感染5637人膀胱癌细胞;经嘌呤霉素筛选后,利用倒置荧光显微镜观察筛选后的细胞增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达强度,采用荧光实时定量PCR检测miR-449c的表达,Western blot法检测其下游靶基因C-myc蛋白的水平。结果成功构建了Ftet UGW-T/miR-449c慢病毒载体,慢病毒包装后感染5637人膀胱癌细胞成功表达EGFP,感染后的细胞中高表达miR-449c,在稳定表达的膀胱癌细胞中C-myc蛋白表达较对照组显著降低。结论成功构建了稳定高表达miR-449c的5637膀胱癌细胞株。

关键词： microRNA miR-449c 膀胱癌 C-myc 稳定细胞株

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严重烧伤患者创面分离泛耐药鲍氏不动杆菌噬菌体的建库及相关特征分析

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中华烧伤杂志 2016年第9期32卷 517-522页

作者：杨子晨邓柳洋龚雅利殷素鹏姜北姜广涛彭毅志胡福泉第三军医大学西南医院全军烧伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038 第三军医大学基础医学部微生物学教研室

目的建立烧伤ICU住院患者创面分离泛耐药鲍氏不动杆菌噬菌体库并分析相关特征。方法2014、2015年，重庆市1家医院烧伤ICU住院患者创面分离出131株泛耐药鲍氏不动杆菌；2015年，广东省6家医院烧伤ICU住院患者创面分离出98株泛耐药鲍氏不... 详细信息

目的建立烧伤ICU住院患者创面分离泛耐药鲍氏不动杆菌噬菌体库并分析相关特征。方法2014、2015年，重庆市1家医院烧伤ICU住院患者创面分离出131株泛耐药鲍氏不动杆菌；2015年，广东省6家医院烧伤ICU住院患者创面分离出98株泛耐药鲍氏不动杆菌。收集前述229株菌进行如下实验。（1）分析重庆市、广东省来源菌株的多位点序列分型（MLST）。（2）采用污水共培养法选用上述菌株及两地来源污水分离噬菌体，记录分离噬菌体的数量及成功次数、失败次数。（3）根据2015年重庆市和广东省分型比例最大的菌株，选用其对应噬菌体与来源地所有菌株进行交叉感染，观察噬菌体与同型或不同型菌株交叉感染时的裂解情况并计算裂解比。（4）任取一型别噬菌体液等分为3份，通过倍比稀释法测定噬菌体的滴度。将每份噬菌体液再分为3小份，分别于－20 ℃、4 ℃、室温条件下采用LB液体培养基保存，保存1、2个月时检测噬菌体滴度，评价噬菌体的稳定性。对数据行Fisher确切概率法检验、χ^2检验、单因素方差分析。结果（1）2014年重庆市来源的菌株以序列型368（45%，31/69）为主，2015年重庆市来源的菌株以序列型75（26%，16/62）、序列型195（24%，15/62）为主。2015年广东省来源的菌株以序列型977（46%，45/98）为主。（2）以重庆市来源的菌株为基础使用当地来源的污水分离噬菌体的效果（成功分离8次、分离失败1次、分离9株噬菌体）明显优于使用广东省来源的污水（成功分离1次、分离失败7次、分离1株噬菌体），以广东省来源的菌株为基础使用当地来源的污水分离噬菌体的效果（分离8次均成功，分离6株噬菌体）明显优于使用重庆市来源的污水（分离7次均失败，分离0株噬菌体），差异均有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。以两地来源菌株为基础使用各自来源地的污水分离噬菌体的效果比较，差异无统计学意义（P〉0.05）。（3）序列型75、序列型977泛耐药鲍氏不动杆菌噬菌体对同型菌株的裂解比分别为13/16、8/9，均明显高于它们对不同型菌株的裂解比（分别为11/115、3/53, χ^2值分别为48.23、68.46，P值均小于0.001）。（4）与保存前比较，－20 ℃、4 ℃和室温条件保存1个月噬菌体滴度降低约1个数量级，保存2个月噬菌体滴度降低约2个数量级。保存1、2个月，3种储存条件噬菌体的滴度相近（F值分别为1.29、1.07，P值均大于0.05）。结论本研究成功建立229株泛耐药鲍氏不动杆菌噬菌体库。不同地域、不同时间的泛耐药鲍氏不动杆菌的MLST各异，使用与菌株同一地区来源的污水分离噬菌体的效果好，噬菌体的裂解能力与菌株MLST关系密切，可按照地域划分建立噬菌体库。此外，噬菌体在LB液体培养基中稳定性良好且对储存条件无特殊要求。

关键词：烧伤重症监护病房鲍氏不动杆菌细菌噬菌体细菌分型技术泛耐药

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