检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2008年第22期30卷 2065-2068页

作者：熊加祥白云宋敏许雪青王艳艳杨晓亚第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038

目的研究炎性介质脂多糖(LPS)、γ干扰素(IFN-γ)刺激离体星形胶质细胞的效应。方法LPS、IFN-γ刺激离体培养纯化的小鼠星形胶质细胞,ELISA检测细胞分泌TNF-α,Griess法测定NO浓度,激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)检测细胞内游离钙浓度([Ca2... 详细信息

目的研究炎性介质脂多糖(LPS)、γ干扰素(IFN-γ)刺激离体星形胶质细胞的效应。方法LPS、IFN-γ刺激离体培养纯化的小鼠星形胶质细胞,ELISA检测细胞分泌TNF-α,Griess法测定NO浓度,激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)检测细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)。结果LPS(500ng/ml)、IFN-γ(100U/ml)刺激星形胶质细胞24h后,NO和TNF-α的分泌显著升高,联合应用有协同作用;延长IFN-γ作用时间,分泌量升高。CLSM检测LPS、IFN-γ刺激24h后的星形胶质细胞[Ca2+]i的荧光值,显示荧光相对值比正常细胞明显升高;LPS、IFN-γ急性刺激正常培养细胞发现[Ca2+]i振荡上升;而作用于IFN-γ刺激24h后的细胞,[Ca2+]i上升明显减缓。结论LPS、IFN-γ可以活化星形胶质细胞,表现为[Ca2+]i升高,TNF-α和NO分泌上调。

关键词：脂多糖 γ干扰素星形胶质细胞活化

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PS1/APP双转基因阿尔茨海默病模型传代小鼠的基因型鉴定及其组织学分析

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第三军医大学学报 2006年第14期28卷 1453-1456页

作者：宋敏唐军李达兵徐海伟白云第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038

目的对所获的PS1/APP双转基因阿尔茨海默病(A lzhe im er d isease,AD)模型小鼠进行基因鉴定,进一步对其进行组织学分析,检测老年斑(sen ile p laque,SP)的形成情况。方法设计特定的引物,PCR扩增转入基因组DNA中的APP基因,对转入PS1/AP... 详细信息

目的对所获的PS1/APP双转基因阿尔茨海默病(A lzhe im er d isease,AD)模型小鼠进行基因鉴定,进一步对其进行组织学分析,检测老年斑(sen ile p laque,SP)的形成情况。方法设计特定的引物,PCR扩增转入基因组DNA中的APP基因,对转入PS1/APP的小鼠应用刚果红染色结合免疫组化观察Aβ沉积、小胶质细胞和星型胶质细胞的活化。结果与未转入的阴性对照相比,在PS1/APP双转基因的AD小鼠皮质和海马内可见Aβ斑块形成,围绕在Aβ斑块周围的小胶质细胞和星形胶质细胞处于活化状态,形成典型的SP结构。结论我们获得的PS1/APP双转基因小鼠能够模拟AD患者脑内的主要病理过程,提供有效的实验动物模型。

关键词：阿尔茨海默病转基因小鼠老年斑

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小胶质细胞表达B7-H1及LPS刺激对其表达影响的研究

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免疫学杂志 2006年第3期22卷 243-246,251页

作者：宋敏白云王艳艳熊加祥杨旭冉罗娜第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038

目的了解共刺激分子B7-H1在小鼠中枢神经系统小胶质细胞上的表达,及LPS刺激后的表达变化情况,探讨小胶质细胞在大脑炎症状态下的免疫功能变化。方法利用小鼠小胶质细胞株N9,以LPS刺激其活化,应用RT-PCR、定量PCR、流式细胞术、免疫组化... 详细信息

目的了解共刺激分子B7-H1在小鼠中枢神经系统小胶质细胞上的表达,及LPS刺激后的表达变化情况,探讨小胶质细胞在大脑炎症状态下的免疫功能变化。方法利用小鼠小胶质细胞株N9,以LPS刺激其活化,应用RT-PCR、定量PCR、流式细胞术、免疫组化检测B7-H1在刺激前后的表达变化规律;分离培养小鼠原代小胶质细胞并进行GSA-IB4染色鉴定,应用免疫组化检测原代小胶质细胞在LPS刺激前后的表达变化。结果①小鼠小胶质细胞株N9在未刺激状态下表达B7-H1的mRNA和蛋白分子;LPS刺激细胞活化后释放肿瘤坏死因子α,一氧化氮增加,同时B7-H1的mRNA和蛋白表达水平增加。②分离培养的小鼠原代小胶质细胞经GSA-IB4染色鉴定纯度在95%以上,免疫组化显示原代小胶质细胞组成性表达B7-H1,LPS刺激后表达明显上调。结论小鼠小胶质细胞株N9小胶质细胞组成性表达共刺激分子B7-H1,LPS刺激后表达上调,提示其参与了中枢神经系统免疫应答的调节。

关键词： T细胞共刺激分子小胶质细胞 LPS B7-H1

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虫媒病防控研究与卫勤保障

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陆军军医大学学报 2022年第1期44卷 9-15页

作者：徐文岳徐小峰陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院病原生物学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院医学遗传学教研室重庆400038

虫媒病不但是全球公共卫生问题,而且也是影响世界各国军队卫勤保障的重要问题。媒介生物的有效控制和叮咬防护手段的研制能从群体水平上控制和预防各种虫媒病的流行和传播,而针对具体虫媒病的特异性疫苗和药物的研制则能有效预防特定虫... 详细信息

虫媒病不但是全球公共卫生问题,而且也是影响世界各国军队卫勤保障的重要问题。媒介生物的有效控制和叮咬防护手段的研制能从群体水平上控制和预防各种虫媒病的流行和传播,而针对具体虫媒病的特异性疫苗和药物的研制则能有效预防特定虫媒病的感染。虽然目前在媒介生物控制、驱避剂和疟疾疫苗研制等方面取得了显著的进展,但仍然缺乏安全、高效的虫媒病防控手段,有待于在基因驱动改造媒介生物种群、昆虫寻找宿主和机体抗虫媒病原体保护性免疫机制等方面展开深入研究。

关键词：虫媒病媒介生物防控叮咬防护疫苗卫勤保障

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应用双向启动子RNA干扰技术抑制ICOS表达

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免疫学杂志 2006年第1期22卷 13-16页

作者：许雪青白云王丰王璞王艳艳熊加祥第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室第三军医大学西南医院检验科重庆400038

目的应用双向启动子技术构建针对共刺激分子ICOS的逆转录病毒干扰载体,观察其对ICOS表达的影响。方法设计ICOS的干扰序列,构建基于双向启动子的逆转录病毒干扰载体MIW-ICOS,包装病毒后转染Hut78细胞,RT-PCR检测ICOS转录水平水平受抑制情... 详细信息

目的应用双向启动子技术构建针对共刺激分子ICOS的逆转录病毒干扰载体,观察其对ICOS表达的影响。方法设计ICOS的干扰序列,构建基于双向启动子的逆转录病毒干扰载体MIW-ICOS,包装病毒后转染Hut78细胞,RT-PCR检测ICOS转录水平水平受抑制情况,FACS检测细胞表面ICOS蛋白表达受抑制情况。结果构建了针对ICOS三段序列的逆转录病毒干扰载体MIW-ICOS,并证实其中的一个干扰载体能有效抑制ICOS的表达。结论基于双向启动子的编号为245的ICOS逆转录病毒干扰载体能有效抑制Hut78 T细胞上ICOS的表达,为干预ICOS-ICOSL共刺激通路提供了有效手段。

关键词： ICOS RNA干扰双向启动子

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人LIGHT基因的克隆及其在293T细胞中的表达

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第三军医大学学报 2004年第8期26卷 667-669页

作者：姜曼黄钢黎万玲白云第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所重庆400038 第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部:分子遗传学教研室重庆400038

目的　克隆人LIGHT分子的全长cDNA ,构建重组真核表达质粒pCI neo LIGHT并在 2 93T细胞上获得稳定表达。方法　从人T细胞cDNA文库中用PCR技术克隆人LIGHT全长cDNA ,装入T Easy载体 ,测序证实后 ,将LIGHTcDNA装入质粒pCI neo中构建真核... 详细信息

目的　克隆人LIGHT分子的全长cDNA ,构建重组真核表达质粒pCI neo LIGHT并在 2 93T细胞上获得稳定表达。方法　从人T细胞cDNA文库中用PCR技术克隆人LIGHT全长cDNA ,装入T Easy载体 ,测序证实后 ,将LIGHTcDNA装入质粒pCI neo中构建真核表达载体。用电穿孔法转染 2 93T细胞 ,经G418筛选后 ,用流式细胞仪检测LIGHT分子的表达。结果　测序证实克隆的LIGHT全长cDNA阅读框正确完整 ,酶切证实LIGHT pCI neo中LIGHT插入方向正确。转染的2 93T细胞经G418筛选 3个月后 ,流式细胞仪检测有 78 69%的细胞表达人LIGHT分子。结论　成功克隆LIGHT基因并获得稳定表达膜型LIGHT分子的 2 93T细胞系。

关键词： LIGHT 293T细胞基因克隆真核表达

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家族性肌萎缩性侧索硬化症一家系报道

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第三军医大学学报 2011年第11期33卷 1109-1109,1114页

作者：胡俊陈康宁史树贵范文辉许雪青第三军医大学西南医院神经内科重庆400038 第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室

肌萎缩侧索硬化（amyotrophic lateral sclerosis,ALS）是一种少见的神经系统变性疾病,以运动神经元的变性为特征,其中80%～90%的ALS患者为散发性ALS（sporadic ALS,SALS）,另外10%～20%的ALS患者具有家族遗传史,

关键词：肌萎缩侧索硬化症家系致病基因

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原代培养的小鼠星形胶质细胞CD46、CD55、CD59的表达及炎症刺激因子对其的影响

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第三军医大学学报 2006年第10期28卷 1029-1031页

作者：陈雪丹白云熊加祥宋敏第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室重庆400038 第三军医大学生理学教研室重庆400038

目的通过体外培养小鼠大脑皮层星形胶质细胞,明确补体调节蛋白CD46、CD55、CD59在原代小鼠大脑皮层星形胶质细胞上的表达情况,及炎症因子对CD46、CD55、CD59表达的影响,为研究补体系统在AD中的作用打下基础。方法原代纯化培养小鼠星形... 详细信息

目的通过体外培养小鼠大脑皮层星形胶质细胞,明确补体调节蛋白CD46、CD55、CD59在原代小鼠大脑皮层星形胶质细胞上的表达情况,及炎症因子对CD46、CD55、CD59表达的影响,为研究补体系统在AD中的作用打下基础。方法原代纯化培养小鼠星形胶质细胞,用RT PCR,免疫荧光的方法,分别在mRNA水平、蛋白质水平,检测炎症因子刺激前以及LPS、IFNγ单独或协同刺激后,CD46、CD55、CD59的表达情况。结果RT PCR检测到CD59mRNA的表达,CD46、CD55的表达不明确,未刺激组和刺激组无明显差别;免疫荧光结果示CD59阳性,CD46、CD55弱阳性。结论保护素CD59在原代小鼠星形胶质细胞上显著表达,可能可以保护星形胶质细胞免受补体的溶破效应的杀伤。

关键词：原代培养小鼠星形胶质细胞 CD46 CD55 CD59 炎症刺激因子

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星形胶质细胞抑制T细胞增殖及机制探讨

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第三军医大学学报 2005年第20期27卷 2020-2023页

作者：熊加祥白云宋敏许雪青王艳艳杨晓亚第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室

目的初步探讨星形胶质细胞影响T细胞增殖作用及机制。方法利用分离培养小鼠原代星形胶质细胞,以LPS和IFNγ刺激细胞活化,用RTPCR方法检测非活化与活化状态的星形胶质细胞B7.2、B7.1、MHCⅡ和B7H1等免疫分子的表达情况;将不同状态的细胞... 详细信息

目的初步探讨星形胶质细胞影响T细胞增殖作用及机制。方法利用分离培养小鼠原代星形胶质细胞,以LPS和IFNγ刺激细胞活化,用RTPCR方法检测非活化与活化状态的星形胶质细胞B7.2、B7.1、MHCⅡ和B7H1等免疫分子的表达情况;将不同状态的细胞分别与PHA刺激活化的小鼠T细胞进行共培养,观测其对T细胞增殖的影响,并分析可能的机制。结果小鼠原代星形胶质细胞在非活化状态下组成性表达B7.2和B7H1mRNA,在LPS和IFNγ刺激活化24h后B7H1的表达减少,而同时诱导表达MHCⅡ和B7.1mRNA,而TNFα作用不明显;非活化的星形胶质细胞对PHA刺激活化的T细胞增殖具有明显的抑制作用,而活化的星形胶质细胞的抑制作用减弱。结论小鼠星形胶质细胞在非活化及活化状态下对T细胞增殖具有不同的作用,其机制可能与其表达不同的免疫分子有关。

关键词：星形胶质细胞免疫分子 T细胞增殖

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CVF在大鼠移植心脏缺血再灌注损伤中的保护作用研究

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第三军医大学学报 2007年第4期29卷 357-359页

作者：兰纲杨康吴蔚白云蒋彬李军熊刚第三军医大学西南医院胸心外科第三军医大基础医学部医学遗传学教研室重庆400038

目的研究中华眼镜蛇毒因子(cobra venom factor,CVF)对同种大鼠移植心脏缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法近交系雄性B/N大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,建立腹腔异位心脏移植模型。实验组术前给予CVF尾静脉注射,观察移植心的存活时间,并... 详细信息

目的研究中华眼镜蛇毒因子(cobra venom factor,CVF)对同种大鼠移植心脏缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法近交系雄性B/N大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,建立腹腔异位心脏移植模型。实验组术前给予CVF尾静脉注射,观察移植心的存活时间,并设B/N大鼠同系对照组。免疫组化法测定各组术后第1、3、5天移植心脏的C3沉积,并观察移植心的病理变化。结果接受CVF20μg/kg,2d1次,尾静脉给药的大鼠,移植心存活时间明显延长,平均达(11.69±0.72)d,而对照组为(6.65±0.35)d(P<0.01),组织内C3沉积较对照组同期明显减轻,病理损害程度减轻,优于同期对照组。结论CVF消耗补体显著延长移植心脏存活时间,能明显减轻近交系大鼠移植心脏缺血再灌注损伤。

关键词：眼镜蛇毒因子心脏移植缺血再灌注补体大鼠

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