检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2006年第4期28卷 298-300页

作者：熊加祥许雪青白云陈雪丹王璞宋敏第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室

目的构建SIRNA稳定表达载体,抑制B7-H1分子在星形胶质细胞上的表达,为研究大脑内B7-H1分子的功能提供有效实验工具。方法设计合成带有双向启动子具有转录功能性SIRNA载体,转入小鼠星形胶质细胞株CRL-2541内,干扰免疫分子B7-H1的表达,利... 详细信息

目的构建SIRNA稳定表达载体,抑制B7-H1分子在星形胶质细胞上的表达,为研究大脑内B7-H1分子的功能提供有效实验工具。方法设计合成带有双向启动子具有转录功能性SIRNA载体,转入小鼠星形胶质细胞株CRL-2541内,干扰免疫分子B7-H1的表达,利用荧光载体N1平行观察转染效果,RT-PCR方法检测B7-H1的MRNA表达,免疫组化检测蛋白表达水平,以观察干扰效率。结果星形胶质细胞株CRL-2541经RNAI沉默后B7-H1MRNA表达下调,免疫组化发现其蛋白水平下降。结论成功建立具有双向启动子的SIRNA载体,并在星形胶质细胞中抑制B7-H1的表达。

关键词： RNAi B7-H1 星形胶质细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

大鼠骨骼肌胰岛素受体的部分纯化及其特征

引用

第三军医大学学报 1998年第6期20卷 548-550页

作者：毛琼国张波第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室

目的：对大鼠骨骼肌胰岛素受体的结构和特征进行分析。方法：采用麦胚凝集素琼脂糖凝胶（ＷＧＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ）部分纯化骨骼肌胰岛素受体；通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、胰岛素结合实验以及受体自身磷酸化和外源性底物磷酸化实验... 详细信息

目的：对大鼠骨骼肌胰岛素受体的结构和特征进行分析。方法：采用麦胚凝集素琼脂糖凝胶（ＷＧＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ）部分纯化骨骼肌胰岛素受体；通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、胰岛素结合实验以及受体自身磷酸化和外源性底物磷酸化实验，分析受体的结构，并研究其特征。结果：ＳＤＳ－ＰＡＧＥ证明骨骼肌胰岛素受体由两处分子量分别为１３５×１０３ｕ和９５×１０３ｕ亚基组成；受体结合实验经Ｓｃａｔｃｈａｒｄ作图分析表明受体与胰岛素结合呈负协同效应，最大结合容量为（０．９６±０．３４）ｐｍｏｌ／ｍｇ，受体β－亚基能自身磷酸化，且能激活受体内在酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）活性，并呈胰岛素剂量依赖关系。结论：ＷＧＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ纯化的骨骼肌胰岛素受体纯度和活性较好。

关键词：骨骼肌胰岛素受体纯化大鼠 TPK

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

食管鳞状细胞癌survivin表达与其CpG岛甲基化的研究

引用

第三军医大学学报 2010年第1期32卷 13-15页

作者：胡华梅杨晓亚熊刚王凯陈雪丹白云第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室重庆400038 第三军医大学西南医院胸心外科重庆400038

目的探讨食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)肿瘤组织survivin基因的表达与其CpG岛甲基化状态的关系。方法采用RT-PCR的方法检测ESCC细胞株、ESCC肿瘤组织及对应的远癌组织中的sur-vivin基因mRNA的表达;采用亚硫... 详细信息

目的探讨食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)肿瘤组织survivin基因的表达与其CpG岛甲基化状态的关系。方法采用RT-PCR的方法检测ESCC细胞株、ESCC肿瘤组织及对应的远癌组织中的sur-vivin基因mRNA的表达;采用亚硫酸氢钠修饰后测序法(BSP)检测survivin基因CpG岛甲基化状态。结果ESCC肿瘤组织survivin mRNA表达阳性率为65.5%,而绝大部分远癌组织表达阴性;20例survivin表达阳性的肿瘤组织、survivin表达阴性的远癌组织及5株ESCC细胞所扩增片段中的CpG位点均呈非甲基化状态。结论ESCC组织中survivin的表达与否与其CpG岛的甲基化状态无关,提示该区域的甲基化修饰未参与调控survivin基因的转录。

关键词： survivin基因食管鳞状细胞癌甲基化亚硫酸氢钠修饰后测序法(BSP)

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

慢病毒介导shRNA沉默HDAC1表达对EC109细胞生长特性的影响

引用

第三军医大学学报 2013年第10期35卷 961-964页

作者：刘洋博何刚章波庞学利第三军医大学西南医院肿瘤科重庆400038 第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室重庆400038

目的应用慢病毒介导的RNA干扰技术,有效沉默食管癌细胞株EC109的HDAC1表达并观察其对细胞生长的影响。方法以HDAC1为靶基因,合成寡核苷酸,退火形成双链DNA,与经AgeⅠ和EcoRⅠ酶切后的pGCSIL-PUR载体连接获得重组慢病毒载体;将其与病毒... 详细信息

目的应用慢病毒介导的RNA干扰技术,有效沉默食管癌细胞株EC109的HDAC1表达并观察其对细胞生长的影响。方法以HDAC1为靶基因,合成寡核苷酸,退火形成双链DNA,与经AgeⅠ和EcoRⅠ酶切后的pGCSIL-PUR载体连接获得重组慢病毒载体;将其与病毒复制包装质粒共感染293T细胞,收集并浓缩上清液获得重组病毒,测定病毒滴度;病毒颗粒转染EC109细胞,通过荧光显微镜等观察转染效率并经有限稀释法获得单克隆来源的细胞系;定量PCR及Western blot检测HDAC1的表达;并观察EC109细胞的生长特性。结果成功构建干扰HDAC1表达的慢病毒载体pGCSIL-SiHDAC1,并在293T细胞中包装获得病毒。重组病毒感染EC109细胞后,HDAC1mRNA和蛋白水平检测显示干扰组细胞的HDAC1的表达水平较对照组显著降低(P<0.05)。HDAC1下调的EC109细胞的增殖能力明显下降(P<0.05)。结论慢病毒介导的shRNA能有效的沉默食管癌细胞EC109中的HDAC1的表达,并且能抑制其细胞的增殖。

关键词： HDAC1 慢病毒食管癌细胞细胞生长

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

组蛋白乙酰化修饰对IEC-6恶性转化细胞细胞周期和p53、p21^(WAF1)基因表达的调控

引用

第三军医大学学报 2007年第4期29卷 300-303页

作者：王燕郭乔楠章波许雪青白云第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室第三军医大学西南医院病理学研究所重庆400038

目的分析和探讨IEC-6恶性转化细胞不同时期组蛋白乙酰化修饰对肿瘤发生相关基因表达的影响。方法采用我们已建立的3个转化期(化学致癌剂MNNG和诱导剂PMA共同作用6、12、24次)的IEC-6转化细胞进行培养,提取不同转化时期的IEC-6转化细胞... 详细信息

目的分析和探讨IEC-6恶性转化细胞不同时期组蛋白乙酰化修饰对肿瘤发生相关基因表达的影响。方法采用我们已建立的3个转化期(化学致癌剂MNNG和诱导剂PMA共同作用6、12、24次)的IEC-6转化细胞进行培养,提取不同转化时期的IEC-6转化细胞的细胞核蛋白,采用免疫印迹检测H3乙酰化水平;并用ChIP及RT-PCR检测组蛋白H3乙酰化对p21WAF1表达的影响。结果24次IEC-6恶性转化细胞组蛋白H3乙酰化水平高于6次IEC-6转化细胞,而组蛋白H3去乙酰化水平低于6次IEC-6转化细胞;同时发现p21WAF1的启动子区PCR产物减少。在6、12次IEC-6转化细胞中均有较弱的p53、p21WAF1表达;在24次IEC-6恶性转化细胞中仍可检测到较弱的p53表达,但p21WAF1表达缺如。结论IEC-6恶性转化细胞过程中,组蛋白H3乙酰化水平增高,导致p21WAF1基因表达受抑,近而可能影响转化细胞的细胞周期。

关键词： IEC-6细胞组蛋白乙酰化 p53 p21WAF1

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Bax基因P53结合位点多态性与食管鳞癌易感性的关联研究

引用

第三军医大学学报 2012年第10期34卷 963-966页

作者：刘波涛王凯许雪青熊刚郭洪官兴颖白云第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室重庆400038 西南医院胸心外科

目的探讨Bax基因P53结合位点多态性与我国西南地区食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carci-noma,ESCC)发病的关联性。方法利用SNaPshot技术检测201例食管鳞癌病例组及183例健康对照的Bax基因rs1009316位点多态性的分布情况,分... 详细信息

目的探讨Bax基因P53结合位点多态性与我国西南地区食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carci-noma,ESCC)发病的关联性。方法利用SNaPshot技术检测201例食管鳞癌病例组及183例健康对照的Bax基因rs1009316位点多态性的分布情况,分析不同基因型与食管鳞癌易感性的关联。结果食管鳞癌病例组和对照组中rs1009316的CC和CT/TT基因型频率分别为59.2%、40.8%和73.2%、26.8%,CT/TT相比CC增加食管鳞癌的发病风险(OR值为1.884,95%CI为1.224～2.901),T等位基因增加食管鳞癌的发病风险(OR值1.620,95%CI为1.103～2.379)。分层分析发现,无吸烟史群体中,T等位基因(OR值为1.858,95%CI为1.050～3.288)及CT/TT基因型(OR值为2.178,95%CI为1.143～4.147)分别增加食管鳞癌的发病风险。结论在中国西南地区人群中,Bax基因P53结合区域的多态性位点rs1009316是食管鳞癌的危险因素之一。

关键词： Bax P53 单核苷酸多态性(SNP) 食管鳞状细胞癌危险因素

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人重组CD137-Fc分子的构建与真核表达

引用

第三军医大学学报 2003年第24期25卷 2185-2188页

作者：黄钢黎万玲姜曼白云第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部免疫学研室所重庆400038

目的　构建人CD13 7 Fc基因的真核表达质粒 ,并表达有生物学活性的纯化人CD13 7 Fc融合蛋白。方法　从cDNA文库中用PCR扩增CD13 7全长编码基因 ,并导入真核表达载体pcDNA3中。测序证实后 ,继续用PCR扩增其膜外区cDNA ,,酶切后与hIgG1Fc... 详细信息

目的　构建人CD13 7 Fc基因的真核表达质粒 ,并表达有生物学活性的纯化人CD13 7 Fc融合蛋白。方法　从cDNA文库中用PCR扩增CD13 7全长编码基因 ,并导入真核表达载体pcDNA3中。测序证实后 ,继续用PCR扩增其膜外区cDNA ,,酶切后与hIgG1Fc基因一起装入真核表达载体pcDNA3中 ,转染 2 93T细胞瞬时表达 ,用夹心ELISA检测其表达情况 ,经蛋白A亲和纯化 ,用SDS PAGE与免疫印迹进行鉴定。结果　测序证实构建的CD13 7与CD13 7 FccDNA阅读框完整 ,连接部位序列正确 ;ELISA证实CD13 7 Fc蛋白的表达 ;SDS PAGE与免疫印迹证实其为人CD13 7 Fc蛋白。结论　获得了纯化的hCD13 7 Fc融合蛋白 ,为探讨CD13 7在免疫自稳调节中的地位 ,以及探索CD13 7的其它生物学功能奠定了坚实的实验基础。

关键词：人 CD137 CD137-Fc 真核表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Separase上调对肿瘤细胞染色体分离作用的研究及条件表达载体的构建

引用

第三军医大学学报 2005年第6期27卷 497-499页

作者：由莉越刘昕第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038

目的　研究esp1在肺腺癌细胞株spc细胞中对染色体分离的作用,为肿瘤的基因治疗探索新的方法。方法　将已有的含esp1基因的EGFP N1质粒转染spc细胞,检测其转染效率及对染色体分裂相的影响。同时构建能依赖四环素调控的含有esp1基因... 详细信息

目的　研究esp1在肺腺癌细胞株spc细胞中对染色体分离的作用,为肿瘤的基因治疗探索新的方法。方法　将已有的含esp1基因的EGFP N1质粒转染spc细胞,检测其转染效率及对染色体分裂相的影响。同时构建能依赖四环素调控的含有esp1基因的pTRE- d2EGFP质粒载体。结果　表达载体EGFP N1 esp1转染成功,染色体异常分裂相减少。表达载体pTRE -d2EGFP esp1构建成功。结论　esp1的上调表达对于肿瘤的异常染色体分裂相有一定的抑制作用,对于肿瘤治疗有潜在的应用价值。

关键词： spe细胞 esp1 转染四环素

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

PTTG1基因上调表达对A549细胞增殖和凋亡的影响

引用

第三军医大学学报 2006年第9期28卷 961-963页

作者：钱春荣刘昕刘丽莎卓勤强程英第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038

目的研究人垂体瘤转化基因1(hum an p itu itary tumor transform ing gene 1,PTTG1)上调表达对肺腺癌细胞株(A549)增殖和凋亡的影响。方法构建含PTTG1基因的真核表达载体,脂质体法转染A549细胞并用G418筛选出高表达的阳性克隆株,实时... 详细信息

目的研究人垂体瘤转化基因1(hum an p itu itary tumor transform ing gene 1,PTTG1)上调表达对肺腺癌细胞株(A549)增殖和凋亡的影响。方法构建含PTTG1基因的真核表达载体,脂质体法转染A549细胞并用G418筛选出高表达的阳性克隆株,实时荧光定量PCR(real-tim e fluorescent quantitation PCR)和免疫细胞化学(immunocytochem ical assay,ICA)分别检测PTTG1 mRNA及蛋白表达的改变,3H胸腺嘧啶核甙(3H-TdR)掺入法检测细胞增殖活性,AnnexinⅤ异硫氢酸荧光素(FITC)试剂盒检测凋亡情况。结果成功构建含PTTG1基因的真核表达载体,获得上调表达PTTG1的A549细胞,转染含PTTG1基因重组质粒的A549细胞增殖活性较未转染组细胞及转染空白质粒组细胞均显著增强(P<0.05);3组细胞间的凋亡率无显著差异。结论PTTG1基因能显著促进A549细胞的增殖,而对细胞凋亡没有影响。

关键词：垂体瘤转化基因1 真核表达载体 A549细胞增殖凋亡

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

ICOS:一种重要的新型诱导共刺激分子

引用

第三军医大学学报 2003年第4期25卷 351-354页

作者：许雪青第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038

抗原特异性T淋巴细胞免疫应答的有效产生及维持需要2种信号——MHC-肽提供的特异性的抗原信号，以及由APC表面共刺激分子提供的共刺激信号（Costimulatory signal）。随着研究的深入，这一观点逐渐得到广泛认可[1，2]。在T细胞活化的不... 详细信息

抗原特异性T淋巴细胞免疫应答的有效产生及维持需要2种信号——MHC-肽提供的特异性的抗原信号，以及由APC表面共刺激分子提供的共刺激信号（Costimulatory signal）。随着研究的深入，这一观点逐渐得到广泛认可[1，2]。在T细胞活化的不同时空阶段，多种共刺激分子发挥着不同的调控作用。CD28/CTLA-4-B7-1/B7-2共刺激途径是研究最早深入的共刺激途径之一，来自该途径的共刺激信号对T细胞的活化和耐受发挥着重要调节作用，但众多证据，例如CD28缺失的小鼠仍能产生一定的免疫应答[3]，表明CD28并不是惟一的共刺激分子.

关键词：综述抗原特异性T淋巴细胞免疫应答共刺激信号 IC0S

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：