检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2005年第24期27卷 2422-2424页

作者：熊刚吴蔚杨康白云第三军医大学西南医院胸心外科第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038

目的探讨hLIGHTFc基因对人乳腺癌细胞的体外抑制效应。方法以DOTAP脂质体介导hLIGHTFc基因转染人乳腺癌细胞株MCF7,通过绘制细胞生长曲线、MTT比色法以及流式细胞仪检测观察hLIGHTFc转染对MCF7细胞生长的影响。结果hLIGHTFc基因的表达... 详细信息

目的探讨hLIGHTFc基因对人乳腺癌细胞的体外抑制效应。方法以DOTAP脂质体介导hLIGHTFc基因转染人乳腺癌细胞株MCF7,通过绘制细胞生长曲线、MTT比色法以及流式细胞仪检测观察hLIGHTFc转染对MCF7细胞生长的影响。结果hLIGHTFc基因的表达可以抑制MCF7细胞的体外生长。在5%血清培养时,MCF7/LIGHT细胞的生长曲线较对照组明显降低;MTT比色显示MCF7/LIGHT的细胞活力与对照组相比有显著性差异(P<0.05);流式细胞检测显示,在IFNγ协同下基因转染使瘤细胞的生长滞留在G0+G1期,S期细胞明显减少,并观察到部分瘤细胞的凋亡。结论hLIGHTFc基因转染对MCF7细胞具有体外抑制作用,但全面评价有待进一步的研究。

关键词： hLIGHT-Fc 转染 MCF-7细胞基因治疗

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COL10A1基因新突变导致Schmid型干骺端软骨发育不全

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陆军军医大学学报 2023年第8期45卷 842-846页

作者：李百青朱芯潼郭洪陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院医学遗传学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院妇产科重庆400037

目的对2021年1月陆军军医大学第二附属医院接诊的1例Schmid型干骺端软骨发育不全(Schmid type metaphyseal chondrodysplasia,SMCD)家系进行疾病表型与基因型分析,结合文献复习探讨其防治手段。方法对先证者进行家系调查及系谱分析,收... 详细信息

目的对2021年1月陆军军医大学第二附属医院接诊的1例Schmid型干骺端软骨发育不全(Schmid type metaphyseal chondrodysplasia,SMCD)家系进行疾病表型与基因型分析,结合文献复习探讨其防治手段。方法对先证者进行家系调查及系谱分析,收集先证者及家系成员的临床资料,采用全外显子组测序明确突变基因,并通过Sanger测序验证和家系共分离分析,同时结合ACMG指南进行生物信息学分析来评价变异的致病性。结果在家系患者中发现COL10A1基因存在新的杂合错义突变c.1843T>G(***615Asp),该位点所在区域在不同物种之间高度保守,此突变可能通过影响X型胶原(α1)蛋白的三聚化及其与细胞外基质分子结合导致疾病发生。结论发现了1种SMCD的新突变,丰富了SMCD患者的突变谱,为SMCD的预防、诊断及治疗提供理论依据。

关键词： SMCD COL10A1基因内质网应激,X型胶原,基因诊断

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一个肌萎缩侧索硬化家系D21S223微卫星位点遗传连锁分析

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第三军医大学学报 2006年第4期28卷 363-365页

作者：史树贵李露斯刘昕倪兵陈康宁第三军医大学西南医院神经内科重庆400038 第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所重庆400038

目的对重庆地区1例肌萎缩侧索硬化家系进行遗传连锁分析。方法采用位于21号染色体上的D21S223微卫星位点,经PCR扩增后进行基因型分析,应用GENEHUNTER软件包进行连锁分析。结果最大LOD值为3.06(Θ=0.10),说明该家系致病基因与21号染色体... 详细信息

目的对重庆地区1例肌萎缩侧索硬化家系进行遗传连锁分析。方法采用位于21号染色体上的D21S223微卫星位点,经PCR扩增后进行基因型分析,应用GENEHUNTER软件包进行连锁分析。结果最大LOD值为3.06(Θ=0.10),说明该家系致病基因与21号染色体上的D21S223位点连锁。结论SOD1基因突变可能是引起该家系发病的原因。

关键词：家族性肌萎缩侧索硬化连锁分析微卫星

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小鼠胚胎神经干细胞海马移植对APP/PS1双转基因AD小鼠的治疗作用

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第三军医大学学报 2007年第10期29卷 915-918页

作者：武强李露斯范文辉宋敏杨忠第三军医大学西南医院神经内科重庆400038 第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的在APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)小鼠观察神经干细胞(nerual stem cells,NSCs)移植后细胞的存活、迁移以及对小鼠记忆功能的影响。方法增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)质粒转染... 详细信息

目的在APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)小鼠观察神经干细胞(nerual stem cells,NSCs)移植后细胞的存活、迁移以及对小鼠记忆功能的影响。方法增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)质粒转染培养胚胎NSCs,小鼠海马内移植,水迷宫实验检测小鼠认知功能。结果EGFP转染NSCs海马内移植2个月后可观察到GFP阳性细胞,大部分分布在针道附近,部分向同侧皮层迁移,亦有部分通过胼胝体向对侧大脑迁移,同时小量细胞发出类似于神经元的长突起。AD小鼠的记忆功能明显改善。结论胚胎NSCs海马内移植后能存活、迁移并分化为神经组织细胞,并能显著改善APP/PS1双转基因AD小鼠的认知功能障碍。

关键词：阿尔茨海默病胚胎神经干细胞转基因小鼠移植

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人STAT3重组腺病毒的制备及其对胃癌细胞株SGC-7901增殖的影响

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第三军医大学学报 2013年第8期35卷 764-768页

作者：董宗明赵永亮余佩武黄钢第三军医大学西南医院全军普通外科中心微创胃肠外科中心重庆400038 第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室重庆400038

目的制备可表达人转录因子STAT3的重组腺病毒,检测该基因在胃癌细胞株SGC-7901的表达活性及对其增殖的影响。方法以人胎盘组织cDNAs为模板通过PCR获得hSTAT3完整阅读框,T/A克隆测序证实后,亚克隆至穿梭载体pAdTrack-CMV中,PmeⅠ线性化... 详细信息

目的制备可表达人转录因子STAT3的重组腺病毒,检测该基因在胃癌细胞株SGC-7901的表达活性及对其增殖的影响。方法以人胎盘组织cDNAs为模板通过PCR获得hSTAT3完整阅读框,T/A克隆测序证实后,亚克隆至穿梭载体pAdTrack-CMV中,PmeⅠ线性化与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在BJ5183细菌同源重组,经PacⅠ线性化后转染293FT细胞包装,同时包装空载体腺病毒,进行病毒滴度测定。取AdV-STAT3、AdV-GFP分别感染SGC-7901细胞,设空白对照,Western blot检测3组细胞STAT3蛋白表达,MTT法检测对细胞增殖的影响。结果获得hSTAT3完整阅读框,T载体中测序无突变,亚克隆至pAdTrack-CMV,并与pAdEasy-1成功重组后包装AdV-STAT3,测定滴度为2.8×1010pfu/mL,AdV-GFP滴度为3.2×1010pfu/mL。与AdV-GFP组及空白对照组比,Western blot示AdV-STAT3组蛋白明显表达(P<0.05);MTT示AdV-1-STAT3组明显促进细胞增殖(P<0.05)。结论成功制备hSTAT3的重组腺病毒,感染胃癌细胞株SGC-7901后高表达并促进其增殖。

关键词： STAT3 重组腺病毒胃癌增殖

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草麻黄中补体抑制成分抑制大鼠异种心脏移植超急性排斥反应的实验研究

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第三军医大学学报 2005年第17期27卷 1773-1775页

作者：李军杨康白云吴蔚熊刚第三军医大学西南医院胸心外科重庆400038 第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038

目的初步探讨草麻黄中补体抑制成分(comp lem ent inh ib iting component,C IC)对异种心脏移植超急性排斥反应的作用。方法按是否给予C IC灌胃处理,将动物模型分为对照组和实验组,观察对照组和实验组术后供心存活时间,在术后早期及供... 详细信息

目的初步探讨草麻黄中补体抑制成分(comp lem ent inh ib iting component,C IC)对异种心脏移植超急性排斥反应的作用。方法按是否给予C IC灌胃处理,将动物模型分为对照组和实验组,观察对照组和实验组术后供心存活时间,在术后早期及供心失活时取两组心脏组织行光镜、电镜病理检查,并在术后固定时间分别抽鼠血行血清学检查,用微量法测定CH50、APH50,用透射比浊法测定C3。结果实验组移植心脏存活时间为(51.00±3.46)m in,与对照组(30.30±3.46)m in比较差异极显著(P<0.01)。结论豚鼠至大鼠异种心脏移植后,补体的经典途径和替代途径均被激活。C IC能明显抑制补体活性,延缓超急性排斥反应的发生,从而使移植心脏的存活时间延长。

关键词：异种心脏移植超急性排斥反应补体补体抑制剂草麻黄

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人T细胞基因组随机MARs的分离、克隆及序列分析

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第三军医大学学报 2004年第15期26卷 1342-1345页

作者：毛琼国白云张波黄钢王燕代佳平第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038 第三军医大学西南医院检验科重庆400038

目的　分离、克隆人基因组随机MARs片段 ,分析其序列特征 ,为进一步研究MARs在真核细胞DNA复制及基因表达调控中的作用与机制奠定基础。方法　用DNaseⅠ、高盐和蛋白酶K处理细胞核 ,分离人T细胞基因组随机MARs片段 ,并将其克隆进入PUC1... 详细信息

目的　分离、克隆人基因组随机MARs片段 ,分析其序列特征 ,为进一步研究MARs在真核细胞DNA复制及基因表达调控中的作用与机制奠定基础。方法　用DNaseⅠ、高盐和蛋白酶K处理细胞核 ,分离人T细胞基因组随机MARs片段 ,并将其克隆进入PUC19质粒 ;用体外结合实验筛选能与核基质蛋白结合的克隆并测序 ,生物信息学分析其序列的特征。结果　从人T细胞基因组中分离得到大量的MARs片段 ,构建成MARs库 ,初步任意挑选 5 8个克隆 ,体外结合实验证实其具有与核基质蛋白结合活性 ,对其中 1个克隆的序列分析表明 ,其序列AT含量较高 ,不仅含有AC 和ATAT基序 ,还包含有多个转录复制起点、增强子序列、弯曲DNA和扭结DNA基序以及多个反向重复序列。结论　分离获得的DNA片段具有MAR的特性 ,同一DNA序列中存在不同的元件组合 ,其参与基因表达调控的功能应该是复杂。

关键词：核基质核基质附着区基因组DNA

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小鼠peroxiredoxin基因家族的生物信息学分析

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第三军医大学学报 2005年第9期27卷 847-849页

作者：章波向渝梅白云许雪青王燕第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038 第三军医大学科研部重庆400038

目的　分析小鼠peroxiredoxin基因家族的基因组结构和进化。方法　利用已经公布的小鼠基因组数据库,采用BLAST程序检索该基因家族各成员的编码基因和假基因,并利用ClusterW软件进行序列联配,绘制其分子进化树。结果　分析表明该家族半... 详细信息

目的　分析小鼠peroxiredoxin基因家族的基因组结构和进化。方法　利用已经公布的小鼠基因组数据库,采用BLAST程序检索该基因家族各成员的编码基因和假基因,并利用ClusterW软件进行序列联配,绘制其分子进化树。结果　分析表明该家族半数成员具有多个假基因序列,为返转座类型假基因。这些假基因的形成时间有先后,所具有返转座假基因的典型结构也各不相同。分析该家族的进化表明PrxⅠ Ⅳ有共同的祖先,归为一个亚类,而PrxⅤ和Ⅵ与前者的相似性较差,归为另一个亚类。结论　该家族每个成员长期进化所形成的多样性提示其功能具有独特性。

关键词： pemxiredoxin 基因家族进化生物信息学

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LIGHT-Fc基因转染对食管癌细胞株Eca109抑制作用的初步研究

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第三军医大学学报 2004年第8期26卷 686-689页

作者：熊刚杨康白云第三军医大学西南医院胸心外科重庆400038 第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038

目的　探讨LIGHT对人食管癌细胞的体外抑制效应。方法　以DOTAP脂质体介导LIGHT Fc基因转染人食管癌细胞株Eca10 9,通过绘制细胞生长曲线及MTT比色法观察LIGHT Fc转染对Eca10 9细胞生长的影响 ,用RT PCR法检测LIGHT受体在Eca10 9细胞上... 详细信息

目的　探讨LIGHT对人食管癌细胞的体外抑制效应。方法　以DOTAP脂质体介导LIGHT Fc基因转染人食管癌细胞株Eca10 9,通过绘制细胞生长曲线及MTT比色法观察LIGHT Fc转染对Eca10 9细胞生长的影响 ,用RT PCR法检测LIGHT受体在Eca10 9细胞上的表达。结果　LIGHT Fc基因的表达可以抑制Eca10 9细胞的生长。在低血清培养时 ,Eca10 9 LIGHT细胞的生长曲线较对照组明显降低 ;MTT比色显示Eca10 9 LIGHT的细胞活力与对照组相比有显著性差异 (P<0 .0 5 )。结论　LIGHT Fc基因转染对人食管癌Eca10 9细胞具有体外抑制作用。

关键词： LIGHT 转染 Eca109细胞基因治疗

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大鼠肠上皮细胞系IEC-6的恶性转化研究

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第三军医大学学报 2006年第4期28卷 291-293页

作者：王燕郭乔楠章波刘昕白云第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038 第三军医大学西南医院病理科重庆400038

目的建立N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(N-METHYL-N’-NITRO-N-NITROSOGUANIDINE,MNNG)、佛波酯(12-O-TET-RADECANOYLPHORBOL-13-ACETATE,PMA)对大鼠肠上皮细胞系IEC-6的恶性转化模型。方法通过克隆形成率实验确定MNNG、PMA对IEC-6细胞转化浓度,对IEC-6细胞进行分阶段多次干预。用软琼脂集落形成实验和裸鼠体内致瘤实验鉴定细胞恶性转化程度。结果经MNNG、PMA多次处理IEC-6细胞至24次后,细胞生长速度加快,排列紊乱,失去接触抑制,出现复层生长,并可在软琼脂上生长,且呈剂量反应关系,但在第24次之前的细胞则不能在软琼脂上生长。转化细胞在裸鼠体内形成瘤,病理组织学证实为低分化肠上皮细胞癌。结论MNNG、PMA具有使IEC-6细胞发生恶性转化的能力。

关键词： MNNG PMA 肠上皮细胞系恶性转化大鼠

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