检索结果-内蒙古大学图书馆

分析化学 2012年第3期40卷 331-338页

作者：王振宇杨军胡宁郑小林杨忠重庆大学生物工程学院生物流变科学与技术教育部重点实验室第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室

细胞电融合芯片技术是最近十几年来发展迅速的一种细胞融合方法,它可以广泛用于遗传学、动植物远缘杂交育种、发育生物学、免疫学、医药、食品以及农业等领域的基础研究和应用开发。由于其不仅具有可控性强、操作简便、对细胞无毒害等优... 详细信息

细胞电融合芯片技术是最近十几年来发展迅速的一种细胞融合方法,它可以广泛用于遗传学、动植物远缘杂交育种、发育生物学、免疫学、医药、食品以及农业等领域的基础研究和应用开发。由于其不仅具有可控性强、操作简便、对细胞无毒害等优点,还比传统细胞电融合技术更安全、快捷、高效、便携、集成度高,而且便于实验观察,样本消耗少,因此,在国内外广受关注。本文综述了细胞电融合芯片技术的基本原理、实现方法、研究进展,并对其未来发展作了展望。

关键词：细胞电融合芯片微电极微流控综述

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子宫脱垂患者骶主韧带MR三维重建模型的研究

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第三军医大学学报 2012年第6期34卷 546-550页

作者：杨晓红徐惠成陈伟梁志清谢兵谭立文第三军医大学西南医院妇产科重庆400038 第三军医大学西南医院放射科重庆400038 第三军医大学基础医学部人体解剖学教研室重庆市计算医学研究所重庆400038

目的通过盆底磁共振成像(MRI)建立三维重建模型,将子宫脱垂患者骶韧带(uterosacral ligaments,USL)和主韧带(cardinal ligaments,CL)测量各参数与健康女性比较,探讨骶主韧带解剖改变的主要几何参数,从MRI三维重建角度客观评价子宫脱垂... 详细信息

目的通过盆底磁共振成像(MRI)建立三维重建模型,将子宫脱垂患者骶韧带(uterosacral ligaments,USL)和主韧带(cardinal ligaments,CL)测量各参数与健康女性比较,探讨骶主韧带解剖改变的主要几何参数,从MRI三维重建角度客观评价子宫脱垂的各种盆底重建术。方法选择2010年10月至2011年10月确诊为子宫脱垂患者20例为研究对象,选取健康女性20例为对照组。对2组进行盆底MRI薄层扫描建立图像集,在计算机三维重建软件上行骶主韧带及盆腔器官三维重建,测量并比较2组骶主韧带起止点、长度、体积、骶韧带弯曲度、骶韧带之间角度、同侧骶主韧带角度等参数值的变化。结果子宫脱垂患者组骶韧带长度小于对照组(P<0.05),骶韧带角度大于对照组(P<0.05),主韧带测量参数无显著性差异。20例子宫脱垂患者中骶韧带起自骶骨2例(10%)、尾骨肌/骶棘韧带复合体16例(80%)、坐骨棘2例(10%);插入宫颈8例(40%)、阴道2例(10%)、宫颈和阴道10例(50%);主韧带起自同侧骨盆侧壁坐骨大孔,8例插入到宫颈(40%),4例到阴道(20%),8例到宫颈和阴道(40%);健康对照组中骶韧带起自骶骨6例(30%)、尾骨肌/骶棘韧带复合体13例(65%)、坐骨棘1例(5%);插入宫颈6例(30%)、阴道2例(10%)、宫颈和阴道12例(60%);主韧带起自同侧骨盆侧壁坐骨大孔,8例到宫颈(40%),2例到阴道(10%),10例到宫颈和阴道(50%)。结论 MRI三维重建能清楚显示盆底器官与子宫骶主韧带解剖关系及三维几何量化关系;骶韧带之间角度、骶韧带长度是子宫脱垂病变的重要参数,主韧带解剖几何参数变化与子宫脱垂无显著性意义,治疗子宫脱垂各种盆底重建术的中心是骶韧带重建。

关键词：磁共振成像子宫骶主韧带三维重建

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α/β干扰素通过上调SARI表达抑制淋巴瘤细胞的增殖

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第三军医大学学报 2012年第24期34卷 2465-2468页

作者：黄英辉张立黄艳黄刚杨朝辉何谐钟丹何凤田第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的初步探讨α/β干扰素抑制淋巴瘤细胞增殖的分子机制。方法用IFN-α/β处理淋巴瘤细胞(Namalwa、JeKo-1)和白血病细胞(Jurkat、THP-1)24 h,CCK-8法检测IFN-α/β对上述细胞的增殖抑制效果;RT-PCR、real-time PCR、Western blot检测其... 详细信息

目的初步探讨α/β干扰素抑制淋巴瘤细胞增殖的分子机制。方法用IFN-α/β处理淋巴瘤细胞(Namalwa、JeKo-1)和白血病细胞(Jurkat、THP-1)24 h,CCK-8法检测IFN-α/β对上述细胞的增殖抑制效果;RT-PCR、real-time PCR、Western blot检测其SARI mRNA和蛋白水平的变化;对SARI基因启动子区的转录因子结合位点进行生物信息学预测。结果 IFN-α和IFN-β均可有效杀伤Namalwa和JeKo-1淋巴瘤细胞(P<0.05),且均能显著诱导淋巴瘤细胞SARI mRNA和蛋白的表达(P<0.05),但两种干扰素对Jurkat和THP-1白血病细胞的存活及SARI的表达均无显著影响(P>0.05);生物信息学分析显示,SARI启动子区含有转录因子STAT的结合位点。结论上调SARI表达可能是IFN-α/β抑制淋巴瘤细胞增殖的机制之一,而SARI的上调可能是由STAT介导的。

关键词：干扰素 SARI 淋巴瘤 STAT

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左旋棉酚通过ERK通路诱导Daudi细胞发生自噬及意义

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第三军医大学学报 2012年第23期34卷 2384-2387页

作者：倪振洪王滨丁雯程攀科连继勤何凤田第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的探讨左旋棉酚诱导淋巴瘤Daudi细胞发生自噬可能机制及对细胞存活率的影响。方法采用CCK-8法检测左旋棉酚在体外对Daudi细胞增殖抑制作用的影响;采用台盼蓝排斥实验检测不同处理对细胞存活率的影响;Western blot检测细胞中自噬相关蛋... 详细信息

目的探讨左旋棉酚诱导淋巴瘤Daudi细胞发生自噬可能机制及对细胞存活率的影响。方法采用CCK-8法检测左旋棉酚在体外对Daudi细胞增殖抑制作用的影响;采用台盼蓝排斥实验检测不同处理对细胞存活率的影响;Western blot检测细胞中自噬相关蛋白LC3、ERK和磷酸化ERK的表达情况;AO染色观察经左旋棉酚处理后Daudi细胞酸性小体的变化情况。结果左旋棉酚能剂量依赖性地抑制Daudi细胞的增殖和促进细胞死亡;AO染色后经左旋棉酚处理的细胞内可观察到大量的酸性小体形成;Western blot显示左旋棉酚能显著上调自噬相关蛋白LC3Ⅱ的表达及增强磷酸化ERK的水平,抑制ERK的磷酸化能下调LC3Ⅱ的表达;ERK抑制剂U0126及自噬抑制剂CQ和3-MA均能显著增强左旋棉酚的杀细胞效力。结论左旋棉酚可能通过ERK通路诱导Daudi细胞发生自噬,抑制ERK介导的自噬能够显著增强左旋棉酚的抗瘤效应。

关键词：左旋棉酚 Burkitt淋巴瘤细胞增殖自噬 ERK

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基于VEGFR靶点的小分子肿瘤靶向抑制肽的99Tcm标记及鉴定

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第三军医大学学报 2012年第1期34卷 24-28页

作者：冯世斌李前伟郑磊邹凌云查林任浩黄定德第三军医大学西南医院核医学科重庆400038 第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室

目的探讨基于血管内皮生长因子受体(vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)靶点的小分子肿瘤靶向抑制肽理想的放射性核素99Tcm标记方法。方法多肽QKRKRKKSRKKH、RKRKRKKSRYIVLS分别经双功能螯合剂S-acetyl-MAG3、GA(D)GG、HYNIC修饰后进行放射性核素99 Tcm标记,HPLC及纸层析法鉴定其标记率及放化纯度,3 H-TdR参入实验鉴定其抑制细胞增殖的能力,体外受体竞争结合实验鉴定其受体结合活性。结果以HYNIC为双功能螯合剂,这2条多肽的99Tcm标记率分别为(94.13±1.77)%、(93.79±3.53)%,明显高于S-acetyl-MAG3、GA(D)GG修饰多肽的标记率。经HYNIC修饰后的多肽对肿瘤细胞A549增殖的抑制率约为(32.86±3.36)%、(61.50±4.50)%,与修饰前无明显变化(P>0.05);多肽标记后仍保持了良好的VEGFR结合活性,室温下放置24 h后,放化纯度仍高达90%左右。结论以HYNIC为双功能螯合剂,以TPPTS为协同配体及还原剂,多肽QKRKRKKSRKKH、RKRKRKKSRYIVLS的99 Tcm标记率高,且仍具有良好的抑制肿瘤细胞增殖的能力和VEGFR结合活性。

关键词：血管内皮生长因子双功能螯合剂核素标记肿瘤显像

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京尼平交联脱细胞猪膀胱的体外生物学性能研究

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第三军医大学学报 2012年第19期34卷 1985-1988页

作者：范雪梅王颖楠陈卫军徐惠成第三军医大学西南医院妇产科重庆400038 第三军医大学基础医学部解剖学教研室重庆市生物力学重点实验室重庆400038

目的探讨新型生物交联剂京尼平对脱细胞猪膀胱性能的影响,为女性盆底功能重建提供理想的组织工程补片。方法采用表面活性剂+酶消化法对猪膀胱进行脱细胞处理后,用0.625%京尼平溶液交联脱细胞膀胱72 h。通过HE、Weigert弹力纤维+VanGieso... 详细信息

目的探讨新型生物交联剂京尼平对脱细胞猪膀胱性能的影响,为女性盆底功能重建提供理想的组织工程补片。方法采用表面活性剂+酶消化法对猪膀胱进行脱细胞处理后,用0.625%京尼平溶液交联脱细胞膀胱72 h。通过HE、Weigert弹力纤维+VanGieson结缔组织(ET+VG)染色及扫描电镜进行组织形态观察,使用万能材料试验机检测材料生物力学性能,并对交联前后的脱细胞猪膀胱进行厚度、吸水性、体外胶原酶降解性能测定,以L929细胞为实验细胞,采用MTT法评估材料的细胞毒性。结果京尼平交联脱细胞猪膀胱后呈深蓝色,保持了天然组织构架的完整,胶原纤维更加致密,吸水性提高,力学性能良好,脱细胞猪膀胱在第7天已完全降解,交联后在第28天降解率为2%。交联前后材料的细胞毒性为0～1级。结论经天然交联剂京尼平交联的脱细胞猪膀胱吸水性好,具有良好的生物力学性能,抗酶解能力强且无细胞毒性,是一种较为理想的盆底重建材料。

关键词：京尼平脱细胞猪膀胱交联力学性能细胞毒性

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老年小鼠与青年小鼠眨眼条件反射双任务模型中行为学参数的比较

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第三军医大学学报 2012年第18期34卷 1826-1830页

作者：杨艺赵传东李轩吴广延姚娟隋建峰第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 济南军区总医院神经外科济南250031 第三军医大学基础医学部基础医学教学实验中心

目的研究老年昆明小鼠在眨眼条件反射双任务模型中的行为学特征参数变化。方法老年(15月龄)昆明小鼠组(n=5)及青年(3月龄)昆明小鼠组(n=5),采用不同音频(3、1 kHz)的正弦波纯音作为条件刺激(conditioned stimulus,CS),声音强度为70 dB... 详细信息

目的研究老年昆明小鼠在眨眼条件反射双任务模型中的行为学特征参数变化。方法老年(15月龄)昆明小鼠组(n=5)及青年(3月龄)昆明小鼠组(n=5),采用不同音频(3、1 kHz)的正弦波纯音作为条件刺激(conditioned stimulus,CS),声音强度为70 dB。以持续时间100 ms压强3 psi(1 psi=6.895 kPa)的束状氧气流作为非条件刺激(uncon-ditioned stimulus,US)进行CS-US配对训练,观察2组动物在双任务眨眼条件射模型训练中其行为学参数的差异,包括眨眼条件反应(eyeblink conditioned responses,CR)、峰幅度(amplitude of peak,AP)、潜伏期(latency of peak,TP)。结果经过12 d配对训练:老年组与青年组在痕迹性眨眼条件反射和延迟性眨眼条件反射模式中,CR习得率均随训练天数增加而增加,组间CR习得率均从第10天起出现显著差异(P<0.05);在痕迹性眨眼条件反射模式中,2组间峰幅度从第10天起出现显著差异(P<0.05),在延迟性眨眼条件反射模式中2组间峰幅度在第6天和第12天有显著差异(P<0.05);2组组内高音频(3 kHz)CS对应的TEBC模式其习得率都要高于低音频(1 kHz)CS的DEBC模式其CR习得率。结论老年昆明小鼠较青年昆明小鼠而言不能很好地学习双任务眨眼条件反射,说明老化对于小鼠的联想型学习记忆有着直接影响。

关键词：眨眼条件反射双任务小鼠老化

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基于可视人的帕金森病手术靶点核团定位初步研究

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第三军医大学学报 2012年第6期34卷 500-503页

作者：荣晶晶李七渝谭立文张绍祥第三军医大学基础医学部人体解剖学教研室重庆市计算医学研究所重庆400038

目的利用中国首例女性可视人(Chinese visible humanⅡ,CVH2)头部连续断层图像数据集,为帕金森病深部脑电刺激术前的底丘脑核定位提供参考。方法选取CVH2头部连续断层彩色图像并建立大脑标准空间坐标系,通过颅内常用定位标志-前后连合... 详细信息

目的利用中国首例女性可视人(Chinese visible humanⅡ,CVH2)头部连续断层图像数据集,为帕金森病深部脑电刺激术前的底丘脑核定位提供参考。方法选取CVH2头部连续断层彩色图像并建立大脑标准空间坐标系,通过颅内常用定位标志-前后连合将21例健康成年人头部横断位和冠状位3.0T核磁共振成像T2序列图像配准到CVH2大脑标准空间中,利用与底丘脑核毗邻的红核中心坐标来检验配准精度以及该定位方法的可行性。结果使用该方法定位21例核磁共振成像图像中左右红核的X、Y、Z坐标平均误差(及标准差)为:X方向上为0.33 mm(0.21)、0.40 mm(0.25),Y方向上为0.52 mm(0.39)、0.44 mm(0.36),Z方向上为0.64 mm(0.43)、0.64 mm(0.41)。经配准后两者红核中心的X、Y、Z坐标值均无显著性差异(P>0.05)。结论利用CVH2头部连续断层图像数据集,经与核磁共振成像图像进行空间配准后对定位与底丘脑核毗邻的红核中心具有较高精度,能够为帕金森病深部脑电刺激术前的底丘脑核定位提供参考。

关键词：可视人帕金森病底丘脑核立体定位

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微电极阵列芯片的脂质体电融合研究

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分析化学 2012年第4期40卷 551-555页

作者：蒋凤杨军王振宇胡宁郑小林谢琳杨忠陈洁重庆大学生物工程学院生物流变科学与技术教育部重点实验室第三军医大学大坪医院野战外科研究所眼科第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆医科大学附属儿童医院儿童营养研究中心

利用旋转蒸发法制作基于大豆卵磷脂的一种大型脂质体,在微电极阵列芯片上进行脂质体电融合实验研究。在电融合过程中,利用介电电泳力实现脂质体在微流控芯片中的排队,再利用高场强的电脉冲使脂质体膜发生可逆性电穿孔,在持续的介电电泳... 详细信息

利用旋转蒸发法制作基于大豆卵磷脂的一种大型脂质体,在微电极阵列芯片上进行脂质体电融合实验研究。在电融合过程中,利用介电电泳力实现脂质体在微流控芯片中的排队,再利用高场强的电脉冲使脂质体膜发生可逆性电穿孔,在持续的介电电泳力作用下,使穿孔的脂质体实现融合。芯片上脂质体的融合率可以达到20%左右。而且,玻璃基底材料和低深宽比的通道结构更有利于脂质体融合过程的观察与控制。

关键词：微流控脂质体介电电泳电融合微电极

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人补体受体1型SCR1-3功能域基因的克隆表达及生物活性鉴定

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免疫学杂志 2012年第1期28卷 64-68页

作者：杨绍俊张璇汪正清第三军医大学基础医学部微生物教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038

目的实现人补体受体1型功能域SCR1-3基因的克隆、表达及生物学活性鉴定。方法从人外周血中提取总RNA,通过逆转录获得cDNA,PCR扩增获得编码CR1-SCR1-3基因序列;克隆到毕赤酵母分泌表达质粒pPIC9K,构建重组质粒pPIC9K-CR1-SCR1-3,菌落PCR... 详细信息

目的实现人补体受体1型功能域SCR1-3基因的克隆、表达及生物学活性鉴定。方法从人外周血中提取总RNA,通过逆转录获得cDNA,PCR扩增获得编码CR1-SCR1-3基因序列;克隆到毕赤酵母分泌表达质粒pPIC9K,构建重组质粒pPIC9K-CR1-SCR1-3,菌落PCR、双酶切鉴定后测序;线性化重组质粒电转化毕赤酵母KM71基因组中,经菌落PCR技术筛选在G418平板上生长的多拷贝阳性转化子;摇瓶发酵和甲醇诱导,SDS-PAGE和Western-blot鉴定目的蛋白表达;镍柱亲和层析纯化目的蛋白;用体外抑制补体溶血反应实验测定目的蛋白的生物活性。结果获得了人CR1-SCR1-3编码区序列,测序结果与与GenBank中的相应序列一致;SDS-PAGE和Western-blot表明目的基因在毕赤酵母中实现了分泌表达;体外实验证实经纯化后的CR1-SCR1-3能够明显抑制补体溶血。结论成功构建重组表达质粒pPIC9K-CR1-SCR1-3,在毕赤酵母中实现了CR1-SCR1-3的分泌表达,该蛋白具有较高的抑制补体生物活性。

关键词：人补体受体1型毕赤酵母分泌表达补体抑制活性

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