检索结果-内蒙古大学图书馆

中国人兽共患病杂志 2003年第4期19卷 93-95页

作者：胡晓梅胡福泉饶贤才黄建军金晓琳第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038

目的　从绿脓杆菌中提取染色体DNA ,PCR扩增及克隆外毒素A全长基因 ,为实现外毒素A的高效表达奠定基础。方法　从绿脓杆菌培养物中提取染色体DNA ,PCR扩增外毒素A全长基因 ,A -T克隆入本室自行构建的pSK -T载体中 ,对重组质粒进行酶切... 详细信息

目的　从绿脓杆菌中提取染色体DNA ,PCR扩增及克隆外毒素A全长基因 ,为实现外毒素A的高效表达奠定基础。方法　从绿脓杆菌培养物中提取染色体DNA ,PCR扩增外毒素A全长基因 ,A -T克隆入本室自行构建的pSK -T载体中 ,对重组质粒进行酶切与测序鉴定。结果与结论　成功地从高GC含量的绿脓杆菌染色体DNA中扩增到长片段的外毒素A全基因并进行了克隆与鉴定。

关键词：铜绿假单胞菌外毒素A全长基因扩增克隆

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

铜绿假单胞菌噬菌体PaP3一个结构蛋白的N-端测序及编码基因的确定

引用

第三军医大学学报 2003年第13期25卷 1140-1142页

作者：张克斌金晓琳朱军民陈志瑾饶贤才胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038

目的　确定铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的主要结构蛋白基因。方法　将噬菌体PaP3颗粒用CsCl梯度离心纯化 ,SDS PAGE电泳其结构蛋白后 ,电转印于PVDF膜上 ,再用Edman降解法对主要结构蛋白作N端测序 ,根据蛋白N端 5个氨基酸残基序列逆推其编... 详细信息

目的　确定铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的主要结构蛋白基因。方法　将噬菌体PaP3颗粒用CsCl梯度离心纯化 ,SDS PAGE电泳其结构蛋白后 ,电转印于PVDF膜上 ,再用Edman降解法对主要结构蛋白作N端测序 ,根据蛋白N端 5个氨基酸残基序列逆推其编码读框。结果　PaP3主要结构蛋白的N端 5个氨基酸残基顺序为 :Ala Thr Pro Thr Asn。结论据此推定其编码基因为ORF 3 63 5 4～ 3 73 0 7(负链 )编码的蛋白 ,该蛋白共有 3 18氨基酸 ,其等电点为 7 70 ,分子质量为3 5 0 2 4 46。

关键词：铜绿假单胞菌噬菌体蛋白质 N端测序

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

26S蛋白酶复合体介导的蛋白降解对LTP产生的影响

引用

中国神经科学杂志 2003年第4期19卷 234-237页

作者：胡志安谭银玲罗峻黎海蒂蔡文琴李希成第三军医大学基础医学部生理学教研室第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

目的 :观察 2 6S蛋白酶复合体介导的蛋白降解对大鼠海马LTP产生的影响。方法 :利用 2 6S蛋白酶复合体特异抑制剂和本室制备的 2 6S蛋白酶复合体抗体灌流海马脑片 ,观察海马CA1区通路LTP的诱导情况。结果 :正常情况下 ,LTP诱出率为 86 ... 详细信息

目的 :观察 2 6S蛋白酶复合体介导的蛋白降解对大鼠海马LTP产生的影响。方法 :利用 2 6S蛋白酶复合体特异抑制剂和本室制备的 2 6S蛋白酶复合体抗体灌流海马脑片 ,观察海马CA1区通路LTP的诱导情况。结果 :正常情况下 ,LTP诱出率为 86 %。在 2 6S蛋白酶复合体抗体灌流脑片情况下 ,LTP诱出率显著下降 (18% ) ;在 2 6S蛋白酶复合体特异抑制剂lactacystin存在条件下 ,LTP诱出率也明显降低 (0 % )。结论 :本研究证明 2 6S蛋白酶复合体抗体及特异抑制剂能显著抑制LTP产生。这提示 ,2 6S蛋白酶复合体介导的蛋白降解过程在LTP中发挥了重要作用。

关键词： 26S蛋白酶复合体蛋白降解 LTP 长时程增强大鼠海马突触传递长时程增强海马

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

采用PCR技术从高GC含量绿脓杆菌模板中扩增长片段外毒素A全基因

引用

第三军医大学学报 2003年第9期25卷 833-834页

作者：胡晓梅饶贤才黄建军金晓琳朱军民胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程重点实验室重庆400038

从高GC含量的模板中用PCR方法扩增长片段DNA序列是相当困难的。本室通过对PCR反应体系和条件的优化，成功地从绿脓杆菌高GC含量的染色体模板中扩增到了1 966 bp的外毒素A（Pseudomoneas aeruginosa exotoxin A, PEA）全长结构基因，为实... 详细信息

从高GC含量的模板中用PCR方法扩增长片段DNA序列是相当困难的。本室通过对PCR反应体系和条件的优化，成功地从绿脓杆菌高GC含量的染色体模板中扩增到了1 966 bp的外毒素A（Pseudomoneas aeruginosa exotoxin A, PEA）全长结构基因，为实现PEA的高效表达奠定了基础。

关键词： PCR技术高GC含量绿脓杆菌模板 DNA 外毒素A PCR扩增长片段基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

肽抗生素hPAB-β基因串联体的构建及原核细胞表达初探

引用

医学研究生学报 2003年第12期16卷 884-887,890页

作者：黎庶饶贤才胡金川金晓琳朱军民陈志瑾胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室

目的 :　构建肽抗生素hPAB β基因多拷贝串联体重组质粒 ,实现目的基因串联产物在大肠杆菌中的高效表达。　方法 :以表达质粒pQE 32为载体 ,利用同裂酶PstⅠ与AvaⅢ能产生相同粘端的特性 ,通过PCR扩增、酶切、连接、转化等操作 ,构建含... 详细信息

目的 :　构建肽抗生素hPAB β基因多拷贝串联体重组质粒 ,实现目的基因串联产物在大肠杆菌中的高效表达。　方法 :以表达质粒pQE 32为载体 ,利用同裂酶PstⅠ与AvaⅢ能产生相同粘端的特性 ,通过PCR扩增、酶切、连接、转化等操作 ,构建含不同数目hPAB β基因的串联体。对获得的重组菌用异丙基巯基半乳糖 (IPTG)诱导表达 ,Tricine SDS PAGE观察串联体融合蛋白的表达情况。　结果 :构建了一至八拷贝的串联体重组质粒 ,经酶切、DNA测序分析表明 ,各串联体的DNA序列及阅读框完全正确。Tricine蛋白电泳显示 ,各串联体的阳性转化菌株经IPTG诱导后均能表达出目的融合蛋白 ,相对分子质量与预期结果相符 ,表达量占细菌总蛋白的 1 0 %～2 2 %。但八拷贝较其他串联体表达率有所降低。　结论 :hPAB β基因串联体重组表达质粒的成功构建 ,为大量制备目的肽抗生素奠定了基础 ,并为其他小分子生物活性肽的制备提供了参考。

关键词：肽抗生素串联体构建表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

铜绿假单胞菌噬菌体PaP3基因组的初步注释

引用

第三军医大学学报 2002年第4期24卷 381-384页

作者：张克斌金晓琳朱军民胡晓梅饶贤才胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室

目的　对已完成测序的铜绿假单胞菌噬菌体PaP3基因组进行初步注释。方法　利用生物信息学软件和网上工具对噬菌体PaP3进行开发阅读框 (Openreadingframe ,ORFs)检索 ;编码序列鉴定 ;对公共数据库进行BLAST查询 ,分析基因的可能功能 ;对... 详细信息

目的　对已完成测序的铜绿假单胞菌噬菌体PaP3基因组进行初步注释。方法　利用生物信息学软件和网上工具对噬菌体PaP3进行开发阅读框 (Openreadingframe ,ORFs)检索 ;编码序列鉴定 ;对公共数据库进行BLAST查询 ,分析基因的可能功能 ;对存在高度同源性序列的推定蛋白进行多重序列比对和系统发生树分析。结果　利用生物信息学软件在PaP3基因组中检索到2 5 2个大于 10 0bp的ORFs ,其中有 69个ORFs可确认为推定基因 ;核苷酸对核苷酸的BLASTn分析未发现有意义的同源性核苷酸序列 ;核苷酸对蛋白质的BLASTx分析共发现了 4个在公共数据库中有高度同源性序列的ORFs ,根据其同源性蛋白的功能推定ORF13 0 5 2 14 761编码产物为引物酶解旋酶 ,ORF40 2 80 4172 8编码产物为末端酶大亚单位 ,ORF4172 8 42 2 2 5编码产物为溶菌酶 ,ORF16912 185 49编码产物为DNA聚合酶 ;绘制出了上述这四种蛋白的系统发生树。结论　噬菌体PaP3具有 2 5 2个大于 10 0bp的ORFs ,其中 69个为推定基因 ,有 4个推定基因的功能被确认为分别编码引物酶解旋酶 ,末端酶大亚单位 ,溶菌酶及DNA聚合酶。

关键词：噬菌体基因组一级注释铜绿假单胞菌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

登革病毒在中枢神经系统传播机制的研究

引用

第三军医大学学报 2002年第4期24卷 396-400页

作者：周德山安静王嘉丽第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038

目的　分析登革 (DEN)病毒感染后中枢神经系统 (CNS)的病理变化及病毒在CNS内的传播方式。方法　用 2型登革病毒 (DEN 2 )对严重联合免疫缺陷 (SCID)小鼠进行脑内接种 ,电镜观察感染后不同时间 ,DEN病毒在CNS的分布、增殖及感染细胞的... 详细信息

目的　分析登革 (DEN)病毒感染后中枢神经系统 (CNS)的病理变化及病毒在CNS内的传播方式。方法　用 2型登革病毒 (DEN 2 )对严重联合免疫缺陷 (SCID)小鼠进行脑内接种 ,电镜观察感染后不同时间 ,DEN病毒在CNS的分布、增殖及感染细胞的病变特点。结果　在感染早期 ,脊髓中央管上皮细胞胞浆内可见数量不等的病毒颗粒 ,随着感染的进展 ,子代病毒主要分布在神经元的粗面内质网和高尔基体内。在感染晚期 ,典型的神经突触及有髓和无髓的神经纤维中均可见病毒颗粒 ,其中有些病毒颗粒有与突触前膜融合倾向。在感染过程中 ,被感染的神经元逐渐出现空泡变性 ,进而溶解、死亡。结论　经脑内接种的登革病毒可能通过脑脊液播散 ,侵入脊髓灰质 ,并在神经元内增殖 ;并且 ,除组织间隙外 ,从神经元到神经元的传播途径可能参与登革病毒在CNS内的传播。

关键词：登革病毒严重联合免疫缺陷小鼠神经元中枢神经系统

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

经脑感染后登革病毒在小鼠脊髓分布特点的研究

引用

第三军医大学学报 2002年第4期24卷 401-403页

作者：安静周德山张俊磊第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038

目的　分析登革 (DEN)病毒在中枢神经系统 (CNS)内的生长规律和分布特点。方法　用 2型登革病毒 (DEN 2 )对严重联合免疫缺陷 (SCID)小鼠进行脑内接种 ,应用空斑法和免疫荧光染色分别检测感染后小鼠CNS和血清中的病毒滴度及病毒抗原的... 详细信息

目的　分析登革 (DEN)病毒在中枢神经系统 (CNS)内的生长规律和分布特点。方法　用 2型登革病毒 (DEN 2 )对严重联合免疫缺陷 (SCID)小鼠进行脑内接种 ,应用空斑法和免疫荧光染色分别检测感染后小鼠CNS和血清中的病毒滴度及病毒抗原的分布。结果　感染后小鼠逐渐出现皮毛不整、脊柱侧凸及弛缓性麻痹。从感染后 3d到麻痹发生日 ,可在小鼠的脑皮质和脊髓中检测到滴度较高的DEN 2病毒 ,而血清中则检测不到病毒。免疫荧光染色显示DEN病毒抗原大量存在于大脑海马、基底核和脊髓灰质的神经元内。登革病毒抗原在感染早期和晚期在脊髓灰质的分布也存在差异。结论　感染后DEN在脊髓灰质内的分布不同提示脊髓不同部位的神经元对登革病毒的易感性可能不同。病毒在大脑、脊髓神经细胞内的增殖造成的细胞损害可能是登革病毒感染某些临床表现的病理基础。

关键词：登革病毒严重联合免疫缺陷小鼠脊髓脑感染

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的密码使用偏嗜性与tRNA基因

引用

第三军医大学学报 2002年第4期24卷 385-388页

作者：张克斌金晓琳陈志瑾朱军民饶贤才胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆微生物工程重点实验室重庆400038

目的　检索分析铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的遗传密码使用偏嗜性及其tRNA基因的关系。方法　利用生物信息学软件和网上生物信息学工具 ,检索分析PaP3的遗传密码使用偏嗜性 ;并与铜绿假单胞菌PAO1的遗传密码使用偏嗜性进行对比分析 ;检索PaP... 详细信息

目的　检索分析铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的遗传密码使用偏嗜性及其tRNA基因的关系。方法　利用生物信息学软件和网上生物信息学工具 ,检索分析PaP3的遗传密码使用偏嗜性 ;并与铜绿假单胞菌PAO1的遗传密码使用偏嗜性进行对比分析 ;检索PaP3基因组中tRNA基因并分析其与遗传密码使用偏嗜性的关系。结果　遗传密码偏嗜性分析发现噬菌体PaP3和铜绿假单胞菌优势码一致的氨基酸有F uuc ,I auc ,V guc ,A gcc ,Y uac ,H cac ,N aac ,K aag和T acc ;PaP3单独具有偏嗜性密码的氨基酸有A gcu ,G ggu ,T acu和V gua ;铜绿假单胞菌PAO1单独具有偏嗜性密码的氨基酸有L cug ,V gug ,P ccg ,V gcg ,Q cag ,D gac ,E gag ,C ugc ,R cgc ,S agc和G ggc。tRNA基因查询发现了PaP3基因组中存在三段tRNA编码序列 ,分别编码tRNAAsn,tRNAAsp,tRNAPro;它们的反密码子分别为“gtt” ,“gtc”和“tgg” ,分析结果没有表明这三个tRNA基因与优势转运氨基酸有关。结论　铜绿假单胞菌PAO1的遗传密码偏嗜性更为明显 ,而PaP3的遗传密码偏嗜性相对较弱 ,两者在遗传密码偏嗜性方面并未表现出一致性 ;

关键词：噬菌体 PaP3 基因组密码偏嗜性 tRNA基因铜绿假单胞菌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

贝氏柯克斯体中国分离株com1基因的序列分析

引用

第三军医大学学报 2002年第4期24卷 404-406页

作者：余全张国全 FUKUSHI Hideto YAMAGUCHI Tsuyoshi Hirai Katsuya 第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038 日本歧阜大学联合兽医学部微生物学教研室歧阜501-1193

目的　通过com1基因序列比较 ,了解贝氏柯克斯体中国分离株的一些遗传特征。方法　对贝氏柯克斯体中国分离株的com1基因进行扩增、测序和分析 ,将我们的结果与国外研究结果进行比较。结果　在 7个中国分离株中 ,可检测到 3种不同的com1... 详细信息

目的　通过com1基因序列比较 ,了解贝氏柯克斯体中国分离株的一些遗传特征。方法　对贝氏柯克斯体中国分离株的com1基因进行扩增、测序和分析 ,将我们的结果与国外研究结果进行比较。结果　在 7个中国分离株中 ,可检测到 3种不同的com1基因序列。除质粒型相同的分离株表现出类似的com1基因序列外 ,质粒型为QpRS的中国分离株可被单独划分成一个新的基因组。结论　本研究结果显示 ,根据com1基因序列进行的贝氏柯克斯体株基因分组与分离株所含质粒型有很大的相关性 ,而与以前报道的疾病形式和分离株的地理分布无关。

关键词：贝氏柯克斯体 com1基因 DNA序列序列分析 Q热

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：