检索结果-内蒙古大学图书馆

中国神经科学杂志 2003年第4期19卷 234-237页

作者：胡志安谭银玲罗峻黎海蒂蔡文琴李希成第三军医大学基础医学部生理学教研室第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

目的 :观察 2 6S蛋白酶复合体介导的蛋白降解对大鼠海马LTP产生的影响。方法 :利用 2 6S蛋白酶复合体特异抑制剂和本室制备的 2 6S蛋白酶复合体抗体灌流海马脑片 ,观察海马CA1区通路LTP的诱导情况。结果 :正常情况下 ,LTP诱出率为 86 ... 详细信息

目的 :观察 2 6S蛋白酶复合体介导的蛋白降解对大鼠海马LTP产生的影响。方法 :利用 2 6S蛋白酶复合体特异抑制剂和本室制备的 2 6S蛋白酶复合体抗体灌流海马脑片 ,观察海马CA1区通路LTP的诱导情况。结果 :正常情况下 ,LTP诱出率为 86 %。在 2 6S蛋白酶复合体抗体灌流脑片情况下 ,LTP诱出率显著下降 (18% ) ;在 2 6S蛋白酶复合体特异抑制剂lactacystin存在条件下 ,LTP诱出率也明显降低 (0 % )。结论 :本研究证明 2 6S蛋白酶复合体抗体及特异抑制剂能显著抑制LTP产生。这提示 ,2 6S蛋白酶复合体介导的蛋白降解过程在LTP中发挥了重要作用。

关键词： 26S蛋白酶复合体蛋白降解 LTP 长时程增强大鼠海马突触传递长时程增强海马

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贝氏柯克斯体中国分离株com1基因的序列分析

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第三军医大学学报 2002年第4期24卷 404-406页

作者：余全张国全 FUKUSHI Hideto YAMAGUCHI Tsuyoshi Hirai Katsuya 第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038 日本歧阜大学联合兽医学部微生物学教研室歧阜501-1193

目的　通过com1基因序列比较 ,了解贝氏柯克斯体中国分离株的一些遗传特征。方法　对贝氏柯克斯体中国分离株的com1基因进行扩增、测序和分析 ,将我们的结果与国外研究结果进行比较。结果　在 7个中国分离株中 ,可检测到 3种不同的com1... 详细信息

目的　通过com1基因序列比较 ,了解贝氏柯克斯体中国分离株的一些遗传特征。方法　对贝氏柯克斯体中国分离株的com1基因进行扩增、测序和分析 ,将我们的结果与国外研究结果进行比较。结果　在 7个中国分离株中 ,可检测到 3种不同的com1基因序列。除质粒型相同的分离株表现出类似的com1基因序列外 ,质粒型为QpRS的中国分离株可被单独划分成一个新的基因组。结论　本研究结果显示 ,根据com1基因序列进行的贝氏柯克斯体株基因分组与分离株所含质粒型有很大的相关性 ,而与以前报道的疾病形式和分离株的地理分布无关。

关键词：贝氏柯克斯体 com1基因 DNA序列序列分析 Q热

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Myosin-Vc特异性片段的原核表达及其抗血清的制备

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第三军医大学学报 2008年第7期30卷 600-602页

作者：陈宗涛刘丽梅徐小峰田衍平张俊磊王嘉丽安静第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038 第三军医大学西南医院病理学研究所重庆400038

目的原核表达Myosin-Vc(Myo5c)蛋白并纯化,制备小鼠、家兔多克隆抗体,为探索Myo5c在病毒感染中的作用提供研究工具。方法采用RT-PCR方法从人胃粘膜组织中克隆编码Myo5c特异性蛋白的基因片段,构建该片段与6×His标签的融合蛋白表达质... 详细信息

目的原核表达Myosin-Vc(Myo5c)蛋白并纯化,制备小鼠、家兔多克隆抗体,为探索Myo5c在病毒感染中的作用提供研究工具。方法采用RT-PCR方法从人胃粘膜组织中克隆编码Myo5c特异性蛋白的基因片段,构建该片段与6×His标签的融合蛋白表达质粒pQE-31/Myo5c,原核表达与蛋白纯化后,分别免疫BALB/c小鼠和新西兰兔,制备Myo5c抗血清。采用ELISA检测抗体效价,Westernblot和间接免疫荧光染色检验抗体特异性。结果获得Myo5c特异性片段约42×103的纯化蛋白。ELISA检测小鼠和家兔抗血清效价分别为1∶12800、1∶6400。Westernblot和间接免疫荧光染色显示所制备的抗体能特异性识别Myo5c。结论获得Myo5c特异性蛋白,并成功地制备了Myo5c特异性的小鼠和家兔抗血清。

关键词： Myosin—Vc 原核表达多克隆抗体

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重庆地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌主要流行克隆更替的机制研究

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第三军医大学学报 2014年第8期36卷 735-739页

作者：尚伟龙胡启文胡珍朱军民杨杰袁文常程航袁吉振张霞饶青饶贤才第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038

目的探讨重庆地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株ST239-MRSA-Ⅲ-t030替代ST239-MRSA-Ⅲ-t037克隆的机制。方法选择重庆地区分离的ST239-MRSA-Ⅲ-t030和ST239-MRSA-Ⅲ-t037临床株,检测各菌株的生长曲线,观察菌落形态,分析菌株的药物敏感谱... 详细信息

目的探讨重庆地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株ST239-MRSA-Ⅲ-t030替代ST239-MRSA-Ⅲ-t037克隆的机制。方法选择重庆地区分离的ST239-MRSA-Ⅲ-t030和ST239-MRSA-Ⅲ-t037临床株,检测各菌株的生长曲线,观察菌落形态,分析菌株的药物敏感谱;再通过体外、体内竞争实验和交叉抑制实验深入探讨ST239-MRSA-Ⅲ-t030替代ST239-MRSA-Ⅲ-t037的机制。结果 ST239-MRSA-Ⅲ-t030菌株较ST239-MRSA-Ⅲ-t037有更短的生长迟缓期,后者在固体培养基上生长的菌落相对较小,且都对复方新诺明耐药,对利福平敏感,这与ST239-MRSA-Ⅲ-t030菌株不同(大多数对复方新诺明敏感,对利福平都耐药)。ST239-MRSA-Ⅲ-t030菌株在体外和体内都表现出比ST239-MRSA-Ⅲ-t037菌株更强的生存竞争优势,但两克隆的菌株间并不存在明显的交叉抑制现象。结论 ST239-MRSA-Ⅲ-t030克隆的生存竞争优势和独特的耐药表型可能是其成功替代ST239-MRSA-Ⅲ-t037而成为第一流行克隆的原因。

关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌克隆替代生长曲线利福平耐药复方新诺明耐药

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人CR1-SCR1-3蛋白对急性大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

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第三军医大学学报 2013年第13期35卷 1323-1326页

作者：杨绍俊张璇路延之汪正清第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038

目的探讨补体活化在大鼠急性脑缺血再灌注中的作用及人补体受体1型SCR1-3蛋白(CR1-SCR1-3)的保护作用。方法健康雄性SD大鼠75只,采用完全随机设计分组法分为假手术组(n=15)、CI/R组(n=30)及CI/R+CR1-SCR1-3组(n=30)。线栓法建立大鼠大... 详细信息

目的探讨补体活化在大鼠急性脑缺血再灌注中的作用及人补体受体1型SCR1-3蛋白(CR1-SCR1-3)的保护作用。方法健康雄性SD大鼠75只,采用完全随机设计分组法分为假手术组(n=15)、CI/R组(n=30)及CI/R+CR1-SCR1-3组(n=30)。线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞模型,缺血1 h,再灌注24 h,对大鼠进行行为学检测,记录神经功能缺陷评分;TTC染色法测定脑梗死体积;制作脑匀浆测定大脑皮层髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醇(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;制备切片观察大脑皮质区补体C4b沉积及病理改变。结果缺血再灌注24 h后,CR1-SCR1-3蛋白可明显改善CI/R+CR1-SCR1-3组大鼠神经功能(P<0.05);脑梗死体积亦明显减少(P<0.01);与CI/R组比较,CI/R+CR1-SCR1-3组MPO活力、MDA含量显著降低(P<0.01),而SOD活性显著增高(P<0.01);缺血脑组织皮质区原位补体C4b沉积显著减少(P<0.01),病理损伤亦明显减轻。结论补体活化参与了脑缺血再灌注损伤过程,CR1-SCR1-3蛋白对大鼠急性CI/R损伤具有保护作用。

关键词：补体人补体受体1型短同源重复1—3 大脑中动脉栓塞脑缺血再灌注损伤炎症

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弗氏枸橼酸杆菌脂多糖突变株发生鞭毛合成异常

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第三军医大学学报 2006年第3期28卷 220-222页

作者：丛延广徐启旺第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038 第三军医大学医学检验系生物医学研究室重庆400038

目的探讨弗氏枸橼酸杆菌群集运动的分子机制。方法用M in i-Tn5 Km转座子诱导获得弗氏枸橼酸杆菌群集运动突变株;通过反向PCR扩增突变基因并测序,从而确定发生突变的基因;观察突变株的运动和形态等特征。结果研究表明有7株突变株涉及3... 详细信息

目的探讨弗氏枸橼酸杆菌群集运动的分子机制。方法用M in i-Tn5 Km转座子诱导获得弗氏枸橼酸杆菌群集运动突变株;通过反向PCR扩增突变基因并测序,从而确定发生突变的基因;观察突变株的运动和形态等特征。结果研究表明有7株突变株涉及3个与脂多糖合成有关的基因突变,分别为wzxB、waaW、waaL,导致弗氏枸橼酸杆菌群集运动能力显著下降。同时,这些突变株的鞭毛合成也出现异常,即培养的细菌中仅有小部分呈现正常的鞭毛合成,而大多数菌体聚集在一起,且鞭毛合成呈抑制状态,电镜观察发现多数聚集的菌体没有鞭毛或只有很少的鞭毛。与之相对应的是,野生株没有这个现象。结论脂多糖结构的缺失影响弗氏枸橼酸杆菌鞭毛的生成,进而影响其群集运动能力。

关键词：弗氏枸橼酸杆菌脂多糖鞭毛合成群集运动

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人补体受体1型活性片段SCR15-18在毕赤酵母中的表达、纯化及活性鉴定

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第三军医大学学报 2009年第6期31卷 470-473页

作者：刘高科何莉杨永涛汪正清第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038

目的实现人补体受体1型(complement receptor type 1,CR1)活性片段SCR15-18在毕赤酵母中的分泌表达。方法用PCR从原核表达质粒pET32a-sCR1-SCR15-18上扩增CR1-SCR15-18的编码基因,并克隆到毕赤酵母分泌表达质粒pPIC9,构建重组质粒pPIC9-CR1-SCR15-18,鉴定后测序;重组质粒电转化整合到毕赤酵母GS115基因组中,菌落PCR技术筛选阳性转化株;经摇瓶发酵和甲醇诱导,SDS-PAGE和Western blot鉴定目的蛋白的表达;Ni2+-NTA agarose亲和层析纯化目的蛋白,并用体外抑制补体溶血反应实验测定目的蛋白的生物活性。结果成功构建重组表达质粒pPIC9-CR1-SCR15-18;SDS-PAGE和Western blot证实目的基因在毕赤酵母中成功分泌表达;表达产物经镍柱快速纯化后,能够明显抑制补体的体外溶血。结论在毕赤酵母中成功实现了CR1-SCR15-18蛋白的分泌表达,该蛋白具有较高的抑制补体溶血的生物活性。

关键词：补体受体1型毕赤酵母分泌表达补体溶血

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登革病毒特异性T细胞在DHF/DSS发病中作用的研究

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第三军医大学学报 2004年第21期26卷 1940-1943页

作者：万颖杰张俊磊王嘉丽安静第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038

目的　研究登革病毒特异性T细胞在登革病毒致病中的作用。方法　首先把培养的HepG2移植到严重联合免疫功能不全 (SCID)小鼠体内 ,建立HepG2 graftedSCID (HepG2 SCID) ,然后将该小鼠分为 3组 :①A组 :登革病毒特异性T细胞 ( 2D42 )接... 详细信息

目的　研究登革病毒特异性T细胞在登革病毒致病中的作用。方法　首先把培养的HepG2移植到严重联合免疫功能不全 (SCID)小鼠体内 ,建立HepG2 graftedSCID (HepG2 SCID) ,然后将该小鼠分为 3组 :①A组 :登革病毒特异性T细胞 ( 2D42 )接种后次日 ,腹腔内接种 10 6pfu的Ⅱ型登革病毒 (DEN2 ) ;②B组 :正常小鼠胸腺细胞 (NMT)接种后次日 ,腹腔内接种DEN2 ;③C组 :腹腔内接种DEN2。观察感染后各组动物的死亡率、病毒血症及主要脏器的病理变化。结果　接种 2D42细胞 +感染的小鼠 ,80 %出现明显的临床表现 ,并在感染后 12 8d死亡 ,剩余的 2 0 %小鼠有一过性的临床表现 ,然后从疾病中恢复 ,并存活在 3个月以上。而接种NMT +感染或单纯感染的小鼠 ,死亡率均为 10 0 %。A组和B组小鼠血清中的病毒滴度和主要脏器的病理变化发生率明显高于C组。结论　DEN T细胞有保护机体免受病毒侵害和加重病情进展的双重作用 ,而NMT细胞只有加重病情的单一作用。

关键词：登革病毒登革病毒特异性T细胞 SCID小鼠

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旁路活化补体对枯否细胞吞噬杀菌功能影响的实验研究

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第三军医大学学报 1999年第2期21卷 90-92页

作者：熊杰汪正清周善章刘启富第三军医大学基础医学部微生物学教研室成都军区总医院检验科

目的：证明一定条件下，旁路活化补体可使ＫＣ吞噬杀菌功能失常。方法：观测定量培养的ＫＣ在ＺＡＨＳ作用下吞噬杀菌及分泌杀菌致炎物质功能的动态水平；观察大鼠肠系膜注射ＺＡＨＳ后肝组织的病理改变；以抗人Ｃ３、Ｃ５血清中和的Ｚ... 详细信息

目的：证明一定条件下，旁路活化补体可使ＫＣ吞噬杀菌功能失常。方法：观测定量培养的ＫＣ在ＺＡＨＳ作用下吞噬杀菌及分泌杀菌致炎物质功能的动态水平；观察大鼠肠系膜注射ＺＡＨＳ后肝组织的病理改变；以抗人Ｃ３、Ｃ５血清中和的ＺＡＨＳ进行反证。结果：①ＺＡＨＳ处理组，ＫＣ的ＰＩ和ＩＣＢＡ以及胞内Ｏ－２水平先升后降，胞内ＡＣＰ水平只降无升；ＩＣＢＡ与Ｏ－２和ＡＣＰ的水平均显著相关；各指标至６ｈ降至最低；②阻断组Ｏ－２、ＡＣＰ、ＩＣＢＡ在６ｈ水平保持在正常对照组的９７％、８３％和７９％，显著高于ＺＡＨＳ处理组；③肠系膜静脉注射ＺＡＨＳ１２ｈ后，大鼠肝组织轻度变性，部分ＫＣ线粒体受损，与ＫＣ相邻肝细胞出现凋亡改变，阻断组肝组织无明显病变。结论：ＺＡＨＳ中过量的Ｃ３、Ｃ５碎片持续作用能使ＫＣ吞噬杀菌功能下降，对肝组织结构亦有一定间接破坏作用。

关键词：补体枯否细胞胞内杀菌力旁路活化补体

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整合素在病毒感染宿主细胞过程中的作用

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第三军医大学学报 2004年第2期26卷 176-178页

作者：张俊磊安静第三军医大学基础医学部微生物学教研室，重庆市微生物工程实验室，重庆400038

病毒感染细胞的第一个关键步骤是病毒与被感染细胞表面病毒受体结合 ,在病毒受体的介导下 ,病毒颗粒通过细胞的内吞等过程进入细胞内复制。因此病毒受体是决定病毒宿主特异性和组织嗜性的主要因素之一。过去认为病毒受体是存在于细胞表... 详细信息

病毒感染细胞的第一个关键步骤是病毒与被感染细胞表面病毒受体结合 ,在病毒受体的介导下 ,病毒颗粒通过细胞的内吞等过程进入细胞内复制。因此病毒受体是决定病毒宿主特异性和组织嗜性的主要因素之一。过去认为病毒受体是存在于细胞表面的、一种特异性识别病毒的分子。随着病毒研究的不断进展 ,对病毒受体的认识也更加深入。目前认为 ,病毒受体是指由宿主基因组所编码、控制和表达的一组能参与病毒结合、相互作用、便于病毒感染宿主细胞 ,位于细胞表面的蛋白质分子复合物。也就是说病毒受体是膜蛋白 ,它可以是结构和功能尚未为人所知的膜蛋白 ,也可以是具有细胞信号传导功能的表面受体 ,参与细胞分化、移行、细胞与细胞相互作用等

关键词：整合素病毒病毒受体

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