检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2006年第7期28卷 681-684页

作者：张恒周占松刘丽梅杨忠宋波第三军医大学西南医院全军泌尿外科中心第三军医大学西南医院病理学研究所第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的探讨P物质（P substance,SP）对脊髓星形胶质细胞活化和分泌炎性因子TNF-α、IL-1β的影响.方法体外培养脊髓星形胶质细胞,施加SP刺激后分别应用RT-PCR和Western blot测定胶质原纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFA... 详细信息

目的探讨P物质（P substance,SP）对脊髓星形胶质细胞活化和分泌炎性因子TNF-α、IL-1β的影响.方法体外培养脊髓星形胶质细胞,施加SP刺激后分别应用RT-PCR和Western blot测定胶质原纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）mRNA和蛋白的表达,ELISA法检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）分泌的变化.结果10^-7mol/L SP的作用下,星形胶质细胞GFAP mRNA和蛋白的表达在0～72 h逐渐升高,与正常对照组相比差异显著（P＜0.01）;SP在10^-9～10^-6mol/L浓度范围内呈浓度依赖性促进星形胶质细胞分泌TNF-α、IL-1β（12 h）,与对照组有显著差异（P＜0.01,P＜0.05）,但IL-1β在SP 10^-6mol/L作用组下降,与对照组无明显差异（P＞0.05）.结论 SP刺激下脊髓星形胶质细胞明显活化,分泌炎性致痛因子TNF-α、IL-1β增多,表明周围慢性疼痛可能通过致痛递质SP介导下星形胶质细胞的活化引起脊髓中枢神经炎性痛.

关键词：星形胶质细胞慢性疼痛 SP IL-1β TNF-α

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MPTP致小鼠黑质致密部多巴胺能神经元损伤及定量研究

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第三军医大学学报 2006年第5期28卷 454-457页

作者：梁亚杰李淑蓉苏炳银第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 成都医学院组织学与胚胎学教研室成都610083

目的建立正常小鼠黑质致密部部位细胞数量标准曲线,并以之判定MPTP损伤的小鼠PD模型中多巴胺能神经元的损失。方法根据小鼠大脑解剖图谱观察小鼠黑质致密部的走向,酪氨酸羟化酶免疫组化染色显示正常小鼠大脑黑质致密部及多巴胺能神经元... 详细信息

目的建立正常小鼠黑质致密部部位细胞数量标准曲线,并以之判定MPTP损伤的小鼠PD模型中多巴胺能神经元的损失。方法根据小鼠大脑解剖图谱观察小鼠黑质致密部的走向,酪氨酸羟化酶免疫组化染色显示正常小鼠大脑黑质致密部及多巴胺能神经元;观察计数MPTP处理小鼠的大脑黑质致密部多巴胺能神经元,与正常小鼠的相似部位进行比较。结果建立了正常小鼠黑质致密部部位细胞数量分布图,利用曲线对MPTP处理小鼠所得到的切片进行分析,发现样本中多巴胺能神经元明显减少,证明判定方法可行而有效。结论本实验成功建立了MPTP致小鼠黑质致密部多巴胺神经元损伤模型,并对其损伤判定进行了标准化。

关键词：帕金森病 MPTP 标准曲线酪氨酸羟化酶黑质致密部定量研究 C57/BL6小鼠

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大鼠骨髓间充质干细胞诱导分化为心肌样细胞内向钠电流的研究

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第三军医大学学报 2006年第5期28卷 435-437页

作者：农耀明宋治远陈鹏慧尹戴佳佳第三军医大学西南医院心血管内科重庆市介入心脏病学研究所第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的研究大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcell,MSCs)诱导分化为心肌样细胞内向钠电流的状态。方法取健康SD大鼠骨髓,经密度梯度离心和贴壁培养获得MSCs,传至第两代,以10μmol/L的5氮杂胞嘧啶(5aza)孵育诱导24h。培养4周,用免疫细... 详细信息

目的研究大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcell,MSCs)诱导分化为心肌样细胞内向钠电流的状态。方法取健康SD大鼠骨髓,经密度梯度离心和贴壁培养获得MSCs,传至第两代,以10μmol/L的5氮杂胞嘧啶(5aza)孵育诱导24h。培养4周,用免疫细胞化学染色方法鉴定心肌样细胞(cardiomyocytelikecells);用全细胞膜片钳技术,检测胞膜内向钠电流,并与未经诱导的MSCs和急性分离的心肌细胞进行比较。结果MSCs经5aza诱导后部分表达心肌特异性肌钙蛋白T,在诱导后4周记录到快速激活和失活的膜内向钠电流。与急性分离的心肌细胞比较,相同刺激脉冲下心肌样细胞所产生的电流幅值较小,IV曲线向右偏移。结论经5aza诱导后,MSCs可分化成具有兴奋性内向钠电流的心肌样细胞。

关键词：骨髓间充质干细胞 5-氮杂胞苷膜片钳内向电流大鼠

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绿色荧光蛋白作为神经干细胞示踪标记的实验研究

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第三军医大学学报 2006年第7期28卷 691-693页

作者：谭新杰胡长林蔡文琴重庆医科大学附属第二医院神经内科重庆400010 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的研究携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的腺病毒感染神经干细胞(neural stem cells,NSCs)后的荧光稳定性和持久性及其对NSCs生物学特性的影响;探讨利用其作为NSCs示踪标记的可行性。方法利用GFP-腺病毒空载体感染NSC... 详细信息

目的研究携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的腺病毒感染神经干细胞(neural stem cells,NSCs)后的荧光稳定性和持久性及其对NSCs生物学特性的影响;探讨利用其作为NSCs示踪标记的可行性。方法利用GFP-腺病毒空载体感染NSCs(NSCs-GFP),经G418筛选并连续传代,在相差显微镜下观察未感染NSCs和感染NSCs的形态以及在荧光显微镜下观察感染NSCs及其诱导分化后的GFP表达情况;并检测NSCs-GFP的细胞活性和细胞周期。调整GFP标记神经干细胞浓度为1×105/μl,将其植入大鼠侧脑室内,观察其在脑内的表达。结果未感染NSCs和感染NSCs的形态学、细胞活性和细胞周期等无明显差异(P>0.05)。GFP在诱导分化后的NSCs-GFP子代细胞中有高表达,并且第1代和第20代NSCs-GFP的绿色荧光无明显差别。在植入侧侧脑室周围可见绿色荧光的强表达,且持续时间较长。结论GFP荧光稳定持久,对转染细胞的生物学特征无明显影响,并且移植后的荧光呈长时间强表达,因此可以将其作为神经干细胞的示踪标记,这将有利于神经干细胞移植后的可塑性研究。

关键词：绿色荧光蛋白神经干细胞移植示踪

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成年大鼠局灶性脑梗死后齿状回神经元前体细胞的发生研究

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第三军医大学学报 2006年第15期28卷 1575-1577页

作者：谭新杰胡长林蔡文琴杨忠重庆医科大学附属第二医院神经内科重庆400010 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的初步探讨脑缺血后神经元前体细胞的发生机制。方法建立一侧大脑中动脉缺血再灌注模型,应用神经元前体细胞的标志物DCX(Doub lecortin)检测缺血再灌注后不同时相点海马齿状回神经元前体细胞的增殖情况。结果再灌注后第7天梗死侧及非... 详细信息

目的初步探讨脑缺血后神经元前体细胞的发生机制。方法建立一侧大脑中动脉缺血再灌注模型,应用神经元前体细胞的标志物DCX(Doub lecortin)检测缺血再灌注后不同时相点海马齿状回神经元前体细胞的增殖情况。结果再灌注后第7天梗死侧及非梗死侧齿状回DCX阳性细胞数达到最高峰,与相应假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05);同时各个时相点梗死侧与非梗死侧比较,差异均有统计学意义(P<0.05);再灌注后第21天双侧齿状回DCX阳性细胞数基本恢复至正常水平。结论局灶性脑缺血可以诱导成年大鼠神经元前体细胞的发生,这对于脑缺血后的神经修复可能起关键性作用;其机制可能是缺血区域产生的一些神经发生调节因子弥散到神经发生区域所致。

关键词：大脑中动脉栓塞再灌注神经元前体细胞:齿状回

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LMO3 mRNA在小鼠中枢神经系统的表达定位

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第三军医大学学报 2006年第13期28卷 1367-1369页

作者：惠玲蔡文琴吕同德第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 兰州军区兰州总医院医学科学实验中心兰州730050

目的观察神经特异性转录因子LMO3mRNA在小鼠中枢神经系统中的定位。方法原位杂交组织化学染色。结果LMO3mRNA阳性神经元可见于大脑、小脑、丘脑、脑干、脊髓，在小鼠中枢神经系统中，LMO3mRNA阳性反应产物主要位于细胞质和突起内。强... 详细信息

目的观察神经特异性转录因子LMO3mRNA在小鼠中枢神经系统中的定位。方法原位杂交组织化学染色。结果LMO3mRNA阳性神经元可见于大脑、小脑、丘脑、脑干、脊髓，在小鼠中枢神经系统中，LMO3mRNA阳性反应产物主要位于细胞质和突起内。强阳性信号主要出现于大脑皮质的Ⅱ一Ⅵ层、梨状皮质、内嗅皮质、海马的CA1区、齿状回、中脑的黑质致密部、红核、室旁核、巨细胞网状核、外侧网状核、三叉神经脑桥核、面神经核、三叉神经运动核、舌下神经核等部位；中等强度着色主要分布于扣带前皮质、嗅球、海马的CA2区、梨状内核、杏仁核等部位；海马的CA3区、尾壳核、苍白球、杏仁复合体、丘脑、三叉神经脊束核、疑核、中缝核团、小脑间置核及外侧核、浦肯野细胞可见弱的阳性细胞。结论LMO3基因在CNS的广泛分布提示它除了在多巴胺神经递质的活动中起作用外，还参与了机体的学习记忆、嗅觉的调节。

关键词： LMO3 LIM-only 中枢神经系统原位杂交组织化学小鼠

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NOV在嗅鞘细胞中的表达及活性检测

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第三军医大学学报 2005年第7期27卷 596-599页

作者：梁涛李淑蓉邓其跃郭强苏炳银第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的　检测肾母细胞瘤过度表达基因(nephroblastomaoverexpressedgene ,nov)所编码产物(NOV蛋白)转染嗅鞘细胞(olfactoryensheathingcells ,OECs)后在OECs中的表达以及活性。方法　本研究用nov转染原代培养大鼠OECs ,用G418筛选,经过Westernblot检测c myc NOV的表达以及通过背根神经节(dorsalrootganglion ,DRG)与NOV转染后OECs联合培养来对表达的nov活性进行鉴定。结果　①Western blot结果显示,转染了NOVcDNA的OECs总蛋白c Myc抗体检测可见约2 8×10 3 条带,即c myc NOV融合蛋白。未转染质粒的OECs总蛋白做对照,结果为阴性,无条带出现。②与nov修饰的OECs联合培养DRG有许多DRG细胞向外迁移,细胞折光性强,突起较长而纤细,并形成复杂的网络。未修饰的OECs组只有少量的细胞迁移和突起生长,细胞迁移和突起生长都很局限。空白对照组DRG仅有细胞迁移。结论　nov转染OECs后,并能促进与OECs联合培养的DRG细胞的迁移生长,表明产生了具有促神经细胞生长活性的蛋白。

关键词：肾母细胞瘤过度表达基因嗅鞘细胞细胞培养背根神经节

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大鼠海马CA1区神经元P2X受体对ATP、suramin的反应

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第三军医大学学报 2005年第16期27卷 1674-1677页

作者：赵延东阮怀珍第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的研究大鼠海马CA1区神经元P2X受体对ATP的反应和suram in、iverm ectin(IVM)及低pH值对诱发电流的影响。方法采用酶加机械分离法分离后7 d的W istar大鼠海马CA1区锥体细胞,用膜片钳全细胞记录技术测定P2X受体激动剂ATP,阻断剂suram ... 详细信息

目的研究大鼠海马CA1区神经元P2X受体对ATP的反应和suram in、iverm ectin(IVM)及低pH值对诱发电流的影响。方法采用酶加机械分离法分离后7 d的W istar大鼠海马CA1区锥体细胞,用膜片钳全细胞记录技术测定P2X受体激动剂ATP,阻断剂suram in,调节剂iverm ectin(IVM)及低pH值(pH=6.5)对跨膜电流的作用。结果分离神经元对P2X受体激动剂和阻断剂反应明显,P2X受体调节剂对不同细胞有不同的作用。结论大鼠海马CA1区锥体细胞有丰富的P2X受体表达。细胞间P2X受体的表达类型有一定差别。

关键词： P2X受体海马膜片钳 ATP suramin

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DAT1基因在大鼠神经干细胞分化中作用的初步研究

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第三军医大学学报 2005年第7期27卷 588-591页

作者：惠玲刘建军姚忠祥蔡文琴第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的　研究DAT1转染后不同诱导条件下DAT1在神经干细胞的表达以及DAT1过表达对神经干细胞分化的影响。方法　构建真核表达载体pEGFP C1 DAT1、pcDNA4/hisA DAT1,采用lipofectamine2 0 0 0脂质体介导法转染培养的胚胎大鼠皮层神经干细胞(... 详细信息

目的　研究DAT1转染后不同诱导条件下DAT1在神经干细胞的表达以及DAT1过表达对神经干细胞分化的影响。方法　构建真核表达载体pEGFP C1 DAT1、pcDNA4/hisA DAT1,采用lipofectamine2 0 0 0脂质体介导法转染培养的胚胎大鼠皮层神经干细胞(neuralstemcells ,NSCs) ,免疫组化染色,荧光显微镜观察。结果　DAT1瞬时转染神经干细胞后的诱导分化实验表明,DAT1转染可使NSCs分化为Mash 1阳性的细胞增加,DAT1的高表达有促进NSCs向神经元方向分化的作用;血清诱导分化及自然分化后DAT1在分化细胞中的表达定位发生了变化,同时这种变化也反映在NSCs分化的不同阶段。结论　不同的外界诱导因素或在NSCs分化的不同时期,DAT1可能通过与不同的转录因子的结合,从而在不同的信号通路中影响NSCs的分化。

关键词： DAT1 神经干细胞分化大鼠

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大鼠星形胶质细胞体外分泌雌激素的检测

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第三军医大学学报 2004年第19期26卷 1748-1750页

作者：吴喜贵杨忠胡荣蔡文琴第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的　测定大鼠星形胶质细胞 (astrocyte ,AST)培养液中雌激素的浓度。方法　取新生 2d大鼠大脑皮层进行AST原代及传代培养 ,分别于传代培养的第 0、7、14、2 1天进行细胞计数 ,同时ELISA方法测定培养液中雌二醇 (E2 )浓度。结果　细胞... 详细信息

目的　测定大鼠星形胶质细胞 (astrocyte ,AST)培养液中雌激素的浓度。方法　取新生 2d大鼠大脑皮层进行AST原代及传代培养 ,分别于传代培养的第 0、7、14、2 1天进行细胞计数 ,同时ELISA方法测定培养液中雌二醇 (E2 )浓度。结果　细胞数量分别为 1× 10 4/ml、1.1× 10 6/ml、1.4× 10 6/ml、1.5× 10 6/ml;培养液中雌激素 (E2 )浓度分别为 (pg/ml) :0、( 117 0 3± 2 1 3 2 )、( 2 66 91± 2 2 0 3 )、( 2 5 2 62± 2 7 99)。第 0天 (换液当天 )培养液中未检测出雌激素 ,随着培养时间的延长雌激素浓度迅速增加 ,14d左右达到高峰 ,以后逐渐降低 ,但 2 1d时培养液中雌激素仍然保持较高的浓度。结论　体外培养新生大鼠大脑皮层AST可以分泌雌激素。

关键词：雌激素大鼠星形胶质细胞 AST 分泌体外大脑皮层培养液浓度传代培养

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