检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2004年第20期26卷 1834-1837页

作者：程赛宇阮怀珍吴喜贵张金海第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的　探讨几丁质 (chitin)在坐骨神经损伤后促进神经功能恢复中的作用。方法　实验动物采用完全随机分组法分为对照 (SAL)组和实验 (chitin)组 ,采用硅胶管套接大鼠切断的坐骨神经 ,硅胶管内给予生理盐水 (SAL)或chitin溶液 ,分别于术... 详细信息

目的　探讨几丁质 (chitin)在坐骨神经损伤后促进神经功能恢复中的作用。方法　实验动物采用完全随机分组法分为对照 (SAL)组和实验 (chitin)组 ,采用硅胶管套接大鼠切断的坐骨神经 ,硅胶管内给予生理盐水 (SAL)或chitin溶液 ,分别于术后 3 0或 90d ,应用电生理检测、HRP逆行示踪方法及轴突图像分析方法来检测损伤的神经在电传导、轴浆运输及髓鞘再生等方面的恢复情况。结果　术后 3 0和 90d :①chitin组损伤侧下肢复合肌肉动作电位 (CMAP)的潜伏期(LTP)分别为 1 79ms和 1 2 9ms ;神经传导速度分别为 16 0 0m/s和 2 2 0 0m/s ;波幅分别为 8 17mV和 12 42mV。②chitin组伤侧L5节段脊髓前角HRP阳性细胞百分率分别增加了 2 4 0 0 %和 72 90 %。③chitin组损伤侧的神经纤维数目分别为 2691个 /mm2 和 3 5 0 2个 /mm2 ;神经髓鞘厚度分别增加了 0 91μm和 1 5 5 μm。结论　几丁质对周围神经损伤后的神经再生及修复具有积极的促进作用。

关键词：几丁质外周神经损伤再生

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几种培养方法对ES/GFP小鼠胚胎干细胞系增殖和分化能力作用比较

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第三军医大学学报 2004年第19期26卷 1775-1777页

作者：曹娟徐海伟唐军范晓棠吴旋第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的　观察采用不同的饲养层和培养基对永久表达绿色荧光蛋白的小鼠胚胎干细胞系ES/GFP的增殖、分化和绿色荧光蛋白表达的影响。方法　分别采用小鼠胚胎成纤维细胞和人胚胎成纤维细胞为饲养层 ,采用含重组人白血病抑制因子的DMEM/FCS培... 详细信息

目的　观察采用不同的饲养层和培养基对永久表达绿色荧光蛋白的小鼠胚胎干细胞系ES/GFP的增殖、分化和绿色荧光蛋白表达的影响。方法　分别采用小鼠胚胎成纤维细胞和人胚胎成纤维细胞为饲养层 ,采用含重组人白血病抑制因子的DMEM/FCS培养基和Buffalo条件培养基培养ES/GFP细胞系。N2 无血清培养基诱导ES/GFP小鼠胚胎干细胞为神经前体细胞 ,Nestin免疫组化染色。结果　小鼠胚胎成纤维细胞和人胚胎成纤维细胞为饲养层 ,常规LIF培养液和Buffalo条件培养基均能较好维持ES/GFP细胞的高增殖能力和全能分化能力 ,对绿色荧光蛋白的表达和胚体形成、神经前体细胞的分化无明显差异。结论　人胚胎成纤维细胞可替代小鼠胚胎成纤维细胞作为ES/GFP饲养层 ,减少饲养层制备的工作量和污染的机会。Buffalo条件培养基可完全替代LIF培养基 ,降低细胞培养的成本。

关键词：干细胞 ES 饲养层分化增殖表达小鼠胚胎 GFP 人胚胎成纤维细胞条件培养基

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PD大鼠纹状体提取液诱导中脑神经干细胞分化为多巴胺能神经元的研究

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第三军医大学学报 2004年第1期26卷 18-21页

作者：余小强阮怀珍蔡文琴范晓棠姚忠祥杨辉第三军医大学基础医学部神经生物学教研室第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 第三军医大学新桥医院神经外科重庆400037

目的　研究PD大鼠纹状体提取液诱对中脑神经干细胞的诱导分化作用。方法　①体外分离、培养大鼠胚胎的中脑神经干细胞 ,并诱导其分化 ,巢素 (Nestin)、神经丝 2 0 0 (NF 2 0 0 )、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)免疫组化染色鉴定。②加入纹... 详细信息

目的　研究PD大鼠纹状体提取液诱对中脑神经干细胞的诱导分化作用。方法　①体外分离、培养大鼠胚胎的中脑神经干细胞 ,并诱导其分化 ,巢素 (Nestin)、神经丝 2 0 0 (NF 2 0 0 )、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)免疫组化染色鉴定。②加入纹状体提取液后 ,分化细胞用抗酪氨酸羟化酶 (TH)免疫组化鉴定 ,并用流式细胞技术检测分化比例。结果　①从大鼠胚胎的腹侧中脑部位分离获得了大量未分化、呈巢状悬浮生长的细胞团 ,且能分化为神经元和神经胶质细胞。②经纹状体提取液诱导后 ,能够分化出多巴胺能神经元 ,分化比例达 2 0 %左右。

关键词：中脑神经干细胞纹状体提取液分化

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Smad2,3,4,7蛋白在大鼠56肾切除肾衰模型中的定位和表达变化

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第三军医大学学报 2004年第13期26卷 1141-1144页

作者：张金海黄云剑蔡文琴第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 第三军医大学新桥医院肾内科

目的　研究Smad2 ,3 ,4,7蛋白在 5 6肾切除模型中的定位和表达变化。方法　Wistar大鼠行 5 6肾切除 ,分别于模型 4、8、12周处死大鼠。用免疫组化检测Smad2、Smad3、Smad4和Smad7蛋白的定位和表达 ;纤维化程度通过测定肾组织羟脯氨酸... 详细信息

目的　研究Smad2 ,3 ,4,7蛋白在 5 6肾切除模型中的定位和表达变化。方法　Wistar大鼠行 5 6肾切除 ,分别于模型 4、8、12周处死大鼠。用免疫组化检测Smad2、Smad3、Smad4和Smad7蛋白的定位和表达 ;纤维化程度通过测定肾组织羟脯氨酸含量来判断。结果　Smad2、Smad3和Smad4主要在肾小球和肾小管上皮细胞内有表达 ,而Smad7主要在肾小球表达。随着肾功能衰竭的加重 ,肾小球Smad2、Smad3和Smad4蛋白表达逐渐增加 ,而Smad7蛋白表达却逐渐下降 ,并伴有肾组织羟脯氨酸含量的明显增高。结论　TGF β Smad信号通路参与了肾间质纤维化进程 ,Smad2 ,3 ,4高表达和Smad7负调控不足是本模型TGF β高表达导致肾小球硬化加重的主要原因之一。

关键词： Smad 转化生长因子β 肾小球硬化慢性肾衰

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异丙酚麻醉对大鼠中枢神经核团c-jun基因表达的影响

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第三军医大学学报 2004年第21期26卷 1954-1956页

作者：文欣荣陶国才范晓棠张金海胡荣第三军医大学西南医院麻醉科第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的　通过检测异丙酚静脉全麻诱导大鼠中枢c jun基因的表达 ,了解异丙酚在大鼠中枢的可能作用位点。方法　 42只Wistar大鼠随机分成 6组 :空白对照组 (C组 )、小剂量异丙酚组 ( 5 0mg/kg ,P1组 )、中等剂量异丙酚组 ( 10 0mg/kg ,P2 ... 详细信息

目的　通过检测异丙酚静脉全麻诱导大鼠中枢c jun基因的表达 ,了解异丙酚在大鼠中枢的可能作用位点。方法　 42只Wistar大鼠随机分成 6组 :空白对照组 (C组 )、小剂量异丙酚组 ( 5 0mg/kg ,P1组 )、中等剂量异丙酚组 ( 10 0mg/kg ,P2 组 )、大剂量异丙酚组 ( 15 0mg/kg ,P3 组 )、断尾刺激组 (S1组 )、异丙酚作用后断尾刺激组 (S2 组 )。免疫组织化学法(ABC法 )检测JUN核蛋白 ,统计各组大鼠脑片的JUN免疫反应阳性神经元的分布。结果　C组 :JUN免疫反应阳性神经元散在分布在视上核、外侧隔核及外侧缰核等神经核团。P1、P2 、P3 组 :JUN免疫反应阳性神经元表达较对照组明显增多 ,主要分布在伏核、外侧隔核、下丘脑室旁核、膝状体腹下核、背外侧膝状核、视上核、视交叉上核、视前腹侧核、弧束核、杏仁基底外侧核、丘脑室旁核、外侧缰核、海马回嗅觉小岛及乳头状核等核团 ,表达的阳性神经元数量与异丙酚剂量正相关。结论　异丙酚在大鼠中枢神经系统有与其静脉麻醉作用相关的神经核团。

关键词：异丙酚中枢神经系统 c-jun基因

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移植诱导中脑NSCs分化的多巴胺能神经元对PD大鼠治疗作用的实验研究

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第三军医大学学报 2004年第9期26卷 749-752页

作者：余小强阮怀珍蔡文琴范晓棠姚忠祥杨辉第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 第三军医大学新桥医院神经外科重庆400037

目的　研究移植诱导中脑神经干细胞分化出的多巴胺能神经元对PD大鼠的治疗作用。方法　利用纹状体提取液诱导大鼠胚胎中脑神经干细胞 ,使其部分分化为酪氨酸羟化酶 (TH)阳性的多巴胺能神经元 ,继而把分化后的细胞移植到PD大鼠的纹状体... 详细信息

目的　研究移植诱导中脑神经干细胞分化出的多巴胺能神经元对PD大鼠的治疗作用。方法　利用纹状体提取液诱导大鼠胚胎中脑神经干细胞 ,使其部分分化为酪氨酸羟化酶 (TH)阳性的多巴胺能神经元 ,继而把分化后的细胞移植到PD大鼠的纹状体内 ,免疫组化法证实移植细胞的存活并以诱发旋转行为的改善来观察其治疗作用。结果　纹状体提取液能够诱导中脑神经干细胞分化出多巴胺能神经元而且这种经诱导后产生的细胞能够在PD大鼠体内长期存活并改善阿卟吗啡诱导的旋转行为。

关键词：帕金森病神经干细胞神经移植

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小鼠脑发育中CDK5 mRNA表达变化的研究

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第三军医大学学报 2004年第24期26卷 2223-2226页

作者：李红丽杨忠李泽桂陈活彝蔡文琴第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 香港中文大学医学院解剖系

目的　观察周期素依赖性蛋白激酶 5 (CDK5 )mRNA在脑发育中的表达与分布。方法　采用胚胎期至老年期小鼠全胚胎及脑切片的原位杂交染色。结果　①全胚胎原位杂交染色发现脑内CDK5mRNA从胚胎 10 5d(E10 .5 )开始表达 ,主要分布于神经上... 详细信息

目的　观察周期素依赖性蛋白激酶 5 (CDK5 )mRNA在脑发育中的表达与分布。方法　采用胚胎期至老年期小鼠全胚胎及脑切片的原位杂交染色。结果　①全胚胎原位杂交染色发现脑内CDK5mRNA从胚胎 10 5d(E10 .5 )开始表达 ,主要分布于神经上皮的套层细胞内 ;②脑切片的原位杂交染色观察到从E14到成年期脑内均见CDK5mRNA阳性信号 ,主要定位于神经元的胞浆与核周 ,于新生期前后表达达高峰 ;分布于包括大脑皮层、海马、丘脑、下丘脑、小脑及许多神经核团。在老年期上述区域CDK5表达均有减弱 ,部分区域呈阴性。结论　表明脑内CDK5作用贯穿了整个脑的发育阶段 ,且主要参与了神经系统的早期发育 ;成年后CDK5可能继续保持对某些区域中神经元的功能调节。

关键词：周期素依赖性蛋白激酶5(CDK5)mRNA 脑发育全胚胎原位杂交小鼠

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NT3基因的克隆、鉴定及高表达胚胎干细胞的构建与筛选

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第三军医大学学报 2004年第9期26卷 763-766页

作者：钟小林秦茂林第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的　从小鼠肝脏组织中克隆神经营养因子NT3基因 ,在此基础上构建能稳定表达NT3的MESPU3 5细胞株。方法　RT PCR扩增目的基因 ,克隆入穿梭载体pExchange 1neo ,酶切及测序鉴定。重组载体转染MESPU3 5胚胎干细胞株 ,G418长期筛选 ,RT PC... 详细信息

目的　从小鼠肝脏组织中克隆神经营养因子NT3基因 ,在此基础上构建能稳定表达NT3的MESPU3 5细胞株。方法　RT PCR扩增目的基因 ,克隆入穿梭载体pExchange 1neo ,酶切及测序鉴定。重组载体转染MESPU3 5胚胎干细胞株 ,G418长期筛选 ,RT PCR检测转染细胞NT3水平。结果　RT PCR得到长度为 777bp的基因片段 ,克隆后酶切鉴定正确 ,测序结果经BLAST对比 ,与GenBank中小鼠NT 3序列完全一致。成功构建了NT3真核表达载体及高表达细胞株。结论　从小鼠肝脏组织中PCR克隆了正确的NT3基因 ,所获得的NT3稳定表达MESPU3 5

关键词： NT3 克隆胚胎干细胞小鼠

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应用高密度基因芯片筛选中枢神经系统发育和损伤相关基因的研究

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第三军医大学学报 2004年第24期26卷 2218-2222页

作者：刘运来黄明辉姚忠祥袁碧波孙榆张彦琦伍亚洲杨梦苏蔡文琴重庆第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆市神经科学研究所香港城市大学生物化学系重庆第三军医大学预防医学院卫生统计学教研室重庆400038

目的　探讨中枢神经系统 (CNS)发育、损伤相关基因 ,为基因工程治疗CNS损伤提供以一些可能的靶基因。方法　采用高密度的发育表达谱基因芯片 ,检测了在视神经发育、损伤共 8个不同的时相点上视神经的第一级投射站———外侧膝状体的基... 详细信息

目的　探讨中枢神经系统 (CNS)发育、损伤相关基因 ,为基因工程治疗CNS损伤提供以一些可能的靶基因。方法　采用高密度的发育表达谱基因芯片 ,检测了在视神经发育、损伤共 8个不同的时相点上视神经的第一级投射站———外侧膝状体的基因表达情况。结果　以正常成年小鼠作为对照 ,共找到差异表达基因 2 0 41个 :高表达 (ratio≥ 2 )的基因 10 95个 ,其中在发育期间高表达的基因 5 60个 ,在损伤后高表达的基因 416个 ,在发育期间和损伤后均有高表达的基因119个 ;低表达 (ratio≤ 0 5 )的基因 946个 ,其中在发育期间低表达的基因 2 75个 ,在损伤后低表达的基因 45 8个 ,在发育期间和损伤后均有低表达的基因 2 13个。对高表达的 10 95个基因进行了功能检索、分组 ,共分为转录调节、信号转导、代谢和物质转运等 17组 ,其中在发育阶段数量最多的功能组是转录调节组和信号转导组 ,在损伤过程数量最多的功能组是代谢组和物质转运组。一些和轴突生长、导向、突触形成相关的基因Efnb3、Ptn、Nrp、Dbn1只在发育期间表达 ,抑制轴突生长的基因Rtn4只在损伤后表达 ,一个和神经元的迁移、轴突的生长相关的基因———Mdk在发育和损伤过程中均有高表达。结论　上述这些基因可能是视神经发育以及损伤。

关键词：基因芯片中枢神经系统损伤发育

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