检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2004年第6期26卷 473-475页

作者：邱宗文郝宏兴张锡林徐文岳第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的　克隆大劣按蚊 (Andirus)前酚氧化酶 (prophenoloxidase ,PPO)基因部分序列。方法　根据已报道的多种昆虫以及冈比亚按蚊PPO基因编码的保守氨基酸序列设计简并引物 ,以大劣按蚊幼虫总RNA为模板进行RT PCR扩增 ,目的片段经TA克隆后... 详细信息

目的　克隆大劣按蚊 (Andirus)前酚氧化酶 (prophenoloxidase ,PPO)基因部分序列。方法　根据已报道的多种昆虫以及冈比亚按蚊PPO基因编码的保守氨基酸序列设计简并引物 ,以大劣按蚊幼虫总RNA为模板进行RT PCR扩增 ,目的片段经TA克隆后测定其核苷酸序列 ,然后进行序列查询与比对。结果　从大劣按蚊幼虫中获得的PPO4基因(AdPPO4)部分序列长 5 97bp ,编码 199个氨基酸 ;AdPPO4与冈比亚按蚊PPO4基因的核酸和氨基酸序列同源性分别达 84%和 90 %。结论　从大劣按蚊幼虫中成功地克隆出了AdPPO4基因的部分序列。

关键词：大劣按蚊前酚氧化酶基因克隆

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小鼠表皮TA细胞的细胞周期研究

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第三军医大学学报 1999年第12期21卷 871-873页

作者：杨恬王韵第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的：观察小鼠表皮ＴＡ细胞的增殖特性。方法：采用ＩＣＣ－ＴｄＲ双标技术，对成年小鼠和新生小鼠腹膜内注射５－溴尿嘧啶（ＢｒｄＵ），１２ｈ后注射３Ｈ－ＴｄＲ，再经１２ｈ后处死动物，取皮肤作切片，光镜下观察。结果：成年... 详细信息

目的：观察小鼠表皮ＴＡ细胞的增殖特性。方法：采用ＩＣＣ－ＴｄＲ双标技术，对成年小鼠和新生小鼠腹膜内注射５－溴尿嘧啶（ＢｒｄＵ），１２ｈ后注射３Ｈ－ＴｄＲ，再经１２ｈ后处死动物，取皮肤作切片，光镜下观察。结果：成年小鼠表皮未见ＩＣＣ－ＴｄＲ双标细胞；新生小鼠表皮上有大量的双标细胞；毛囊双标细胞集中在毛母质区域。结论：小鼠表皮ＴＡ细胞在增殖状态下细胞周期缩短到２４ｈ以内。

关键词： TA细胞表皮小鼠细胞周期

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大劣按蚊与烟草天蛾丝氨酸蛋白酶的交叉免疫活性

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第三军医大学学报 2008年第1期30卷 11-14页

作者：王英徐文岳陈继德段建华周桃莉黄复生第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的探讨大劣按蚊与烟草天蛾丝氨酸蛋白酶之间是否存在交叉免疫反应性。方法首先利用生物信息学方法分析不同昆虫间丝氨酸蛋白酶的氨基酸序列的保守性,尤其是大劣按蚊与烟草天蛾间丝氨酸蛋白酶的序列相似性;然后,PinPoint Xa-1表达载体... 详细信息

目的探讨大劣按蚊与烟草天蛾丝氨酸蛋白酶之间是否存在交叉免疫反应性。方法首先利用生物信息学方法分析不同昆虫间丝氨酸蛋白酶的氨基酸序列的保守性,尤其是大劣按蚊与烟草天蛾间丝氨酸蛋白酶的序列相似性;然后,PinPoint Xa-1表达载体对大劣按蚊丝氨酸蛋白酶进行体外原核表达,利用Western blot方法检测表达产物与烟草天蛾丝氨酸蛋白酶抗血清之间的免疫反应性。结果生物信息学分析结果显示,不同昆虫间(包括大劣按蚊与烟草天蛾)丝氨酸蛋白酶的氨基酸序列具有较高保守性;成功进行了大劣按蚊丝氨酸蛋白酶的体外原核表达,western blot结果显示,烟草天蛾丝氨酸蛋白酶抗血清能够能够识别表达产物。结论大劣按蚊与烟草天蛾丝氨酸蛋白酶具有交叉免疫活性,利用烟草天蛾丝氨酸蛋白酶抗血清研究大劣按蚊丝氨酸蛋白酶是可行的。这将为下一步从蛋白水平研究大劣按蚊丝氨酸蛋白酶的生物学特性奠定基础。

关键词：大劣按蚊丝氨酸蛋白酶原核表达交叉免疫活性

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小鼠皮肤器官培养模型的建立及存活状况的研究

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第三军医大学学报 2004年第18期26卷 1690-1692页

作者：崔志鸿杨恬高强国第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的　检测皮肤器官培养模型中细胞的生长及存活状况 ,建立稳定的小鼠皮肤体外培养模型。方法　将小鼠皮肤培养于transwell的内室 ,培养液加至皮肤的表真皮交界处 ,于培养后的 2 ,4,8d取皮片固定、切片后于光镜、共聚焦显微镜及透射式... 详细信息

目的　检测皮肤器官培养模型中细胞的生长及存活状况 ,建立稳定的小鼠皮肤体外培养模型。方法　将小鼠皮肤培养于transwell的内室 ,培养液加至皮肤的表真皮交界处 ,于培养后的 2 ,4,8d取皮片固定、切片后于光镜、共聚焦显微镜及透射式电镜下进行观察。结果　培养 2 ,4d的皮片与未经培养的皮片在形态结构与细胞的存活数量上没有显著差异 ;培养 8d的皮片光镜下的形态结构没有发生明显改变 ,但共聚焦显微镜下 ,细胞存活数量有所下降 ,透射式电镜下细胞的超微结构显示胞质及线粒体肿胀 ,溶酶体增多等退化性改变。结论　体外培养 4d以下的皮肤与在体生长的皮肤在形态结构及细胞生长方面没有显著差异。

关键词：皮肤器官培养激光共聚焦显微镜透射式电镜

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约氏疟原虫卵囊与唾液腺子孢子不同时相点的CSP与MAEBL基因表达研究

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第三军医大学学报 2006年第8期28卷 757-759页

作者：陈继德张锡林段建华宋蓓第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的为研究约氏疟原虫在蚊体内发育过程中,卵囊子孢子与唾液腺子孢子不同时相点的环子孢子蛋白(circumsporozoiteprotein,CSP)与红细胞结合蛋白(erythrocytebindingprotein,MAEBL)基因表达水平的变化。方法分别在约氏疟原虫感染斯氏按蚊... 详细信息

目的为研究约氏疟原虫在蚊体内发育过程中,卵囊子孢子与唾液腺子孢子不同时相点的环子孢子蛋白(circumsporozoiteprotein,CSP)与红细胞结合蛋白(erythrocytebindingprotein,MAEBL)基因表达水平的变化。方法分别在约氏疟原虫感染斯氏按蚊后5、7、10d取蚊腹部、12、15、18d取蚊头胸部分离疟原虫总RNA,以rRNA28S为对照,通过RTPCR法半定量分析CSP与MAEBLmRNA表达量。结果蚊期疟原虫子孢子CSP与MAEBL转录显著上调(P<0.01),在侵入唾液腺后达到峰值。结论疟原虫唾液腺子孢子CSP和MAEBLmRNA高水平表达,提示CSP和MAEBL可能与侵入脊椎动物宿主密切相关。

关键词： CSP MAEBL 约氏疟原虫斯氏按蚊

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uPAR在人毛囊发育中的表达及其规律

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第三军医大学学报 2001年第11期23卷 1279-1281页

作者：高强国杨恬杨进第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的　探讨人胚胎毛囊形成发育进程中 ,尿激酶型纤溶酶原激活剂受体 (uPAR)的表达及其规律。方法　用免疫细胞化学和原位杂交分别对人胚胎毛囊起始期、延长期、分化期和胎毛阶段的表皮及毛囊的uPAR蛋白及mRNA的表达进行了检测 ,用图像... 详细信息

目的　探讨人胚胎毛囊形成发育进程中 ,尿激酶型纤溶酶原激活剂受体 (uPAR)的表达及其规律。方法　用免疫细胞化学和原位杂交分别对人胚胎毛囊起始期、延长期、分化期和胎毛阶段的表皮及毛囊的uPAR蛋白及mRNA的表达进行了检测 ,用图像分析系统进行了定量测定。结果　uPAR在起始期和延长期的整个毛囊中有表达 ,在分化期和胎毛前期毛囊的外根鞘有表达。在起始期、延长期、分化期和胎毛阶段前期表皮的基底层、最外层细胞有阳性表达。阳性表达在延长期最高 ,呈现出先增后减的趋势。结论　uPAR与角质形成细胞的增殖和迁移密切相关。

关键词：毛囊 uPAR 细胞增殖角质形成细胞

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吸血和约氏疟原虫感染对AdPPOs基因家族转录水平的影响

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第三军医大学学报 2004年第6期26卷 479-481页

作者：郝宏兴黄复生徐文岳段建华况明书第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的　观察血餐和约氏疟原虫感染对AdPPO1、AdPPO2和AdPPO3基因转录水平的影响。方法　同批 3～ 5d龄大劣按蚊分为不吸血组 (N)、吸正常血组 (NB)和吸感染血组 (IB) ,在血餐后 2 4h分别制备各组蚊总RNA ,所有样品进行RT PCR后 ,各吸取 ... 详细信息

目的　观察血餐和约氏疟原虫感染对AdPPO1、AdPPO2和AdPPO3基因转录水平的影响。方法　同批 3～ 5d龄大劣按蚊分为不吸血组 (N)、吸正常血组 (NB)和吸感染血组 (IB) ,在血餐后 2 4h分别制备各组蚊总RNA ,所有样品进行RT PCR后 ,各吸取 10 μlPCR产物进行琼脂糖凝胶电泳 ,凝胶图像分析系统扫描并读取数据 ,并对所得数据进行统计学处理。结果　与不吸血组比较 ,吸血组和感染组AdPPO1的转录水平显著下降 (P <0 0 5 ) ,但吸血组和感染组间没有显著性差异 (P >0 0 5 )。吸血组AdPPO2的转录则明显上调 (P <0 0 5 ) ,但与感染组间没有显著性差异 (P >0 0 5 ) ;AdPPO3基因的转录水平在 3组间均没有显著性差别 (P >0 0 5 )。结论　血餐明显抑制AdPPO1基因的转录 ,但明显上调AdPPO2基因的转录水平 ;约氏疟原虫感染后 2 4h ,AdPPO1。

关键词：大劣按蚊约氏疟原虫前酚氧化酶

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大劣按蚊差异表达蛋白与约氏疟原虫卵囊黑化关系的研究

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第三军医大学学报 2004年第6期26卷 494-497页

作者：杨松黄复生段建华况明书王英第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的　探讨大劣按蚊差异表达蛋白与约氏疟原虫卵囊黑化的相互关系。方法　将雌大劣按蚊成蚊分为吸糖水组、正常小白鼠血组和约氏疟原虫感染血组 ,以挤压法收集各组的血淋巴 ,解剖中肠并利用超声波提取其蛋白 ,继而对血淋巴和中肠蛋白进... 详细信息

目的　探讨大劣按蚊差异表达蛋白与约氏疟原虫卵囊黑化的相互关系。方法　将雌大劣按蚊成蚊分为吸糖水组、正常小白鼠血组和约氏疟原虫感染血组 ,以挤压法收集各组的血淋巴 ,解剖中肠并利用超声波提取其蛋白 ,继而对血淋巴和中肠蛋白进行SDS PAGE分离 ,Westernblot检测丝氨酸蛋白酶和前酚氧化酶的表达差异 ,并利用免疫组织化学进行血细胞丝氨酸蛋白酶与前酚氧化酶的定位检测。结果　SDS PAGE显示吸糖水大劣按蚊有 3 4条蛋白带 ,而吸正常小鼠血和吸感染血蚊血淋巴有 3 5条蛋白带 ,而且在分子量约 160× 10 3和 66× 10 3的蛋白差异带显著 ,吸正常血及感染血后表达增强。吸糖水和吸正常小白鼠血组血淋巴丝氨酸蛋白酶呈现 2条带 ,分子量分别约 160× 10 3和 15 0× 10 3,3组蚊血淋巴前酚氧化酶呈现 1条带 ,分子量约 66× 10 3,吸正常小鼠血和吸感染血组蚊 1d后血淋巴丝氨酸蛋白酶和前酚氧化酶表达均显著上调 ,尤其疟原虫感染后表达最强。感染 1d后中肠前酚氧化酶带型明显增宽。免疫酶化学显示 ,丝氨酸蛋白酶和前酚氧化酶在血细胞内均呈颗粒状分布 ,血细胞外血淋巴液内有少许散在颗粒分布。结论　约氏疟原虫卵囊黑化期间 ,大劣按蚊血淋巴丝氨酸蛋白酶和前酚氧化酶表达增强 ,提示二者可能参与了卵囊黑化包裹?

关键词：大劣按蚊约氏疟原虫黑化 westerm印迹免疫组织化学

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表皮干细胞体外诱导转分化为角膜上皮细胞的实验研究

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第三军医大学学报 2006年第7期28卷 671-673页

作者：杨珂余瑾杨恬第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的探讨表皮干细胞向角膜上皮细胞转分化的可塑性。方法用Ⅳ型胶原筛选的方法培养并鉴定表皮干细胞,经体外与角膜缘基质细胞共培养诱导分化,免疫组化检测角膜上皮细胞特异标志物K12表达。结果获得的表皮干细胞表现出很强的增殖潜能,光... 详细信息

目的探讨表皮干细胞向角膜上皮细胞转分化的可塑性。方法用Ⅳ型胶原筛选的方法培养并鉴定表皮干细胞,经体外与角膜缘基质细胞共培养诱导分化,免疫组化检测角膜上皮细胞特异标志物K12表达。结果获得的表皮干细胞表现出很强的增殖潜能,光镜下为原始细胞形态特征,能强表达K19和β1-integrin,共培养2周后可见细胞分化,细胞表达角膜上皮特征性K12。结论在本实验的体外诱导条件下,表皮干细胞能转分化为角膜上皮细胞。

关键词：表皮干细胞角膜上皮转分化

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CCAAT/增强子结合蛋白在皮脂腺发育中的表达及意义

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第三军医大学学报 2005年第7期27卷 646-648页

作者：郑业华杨恬向明明王韵第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的　检测皮脂腺中C/EBPα和C/EBPβ的表达,探讨其与皮脂腺分化的关系。方法　利用RT PCR和免疫组化染色,分别检测C/EBPα和C/EBPβmRNA及蛋白在胚胎和成人皮脂腺中的表达情况。结果　C/EBPαmRNA的表达在胚胎期较弱,随着分化的进行逐... 详细信息

目的　检测皮脂腺中C/EBPα和C/EBPβ的表达,探讨其与皮脂腺分化的关系。方法　利用RT PCR和免疫组化染色,分别检测C/EBPα和C/EBPβmRNA及蛋白在胚胎和成人皮脂腺中的表达情况。结果　C/EBPαmRNA的表达在胚胎期较弱,随着分化的进行逐渐升高。C/EBPβmRNA的表达则维持在同一水平。免疫组化检测到C/EBPα和C/EBPβ在胚胎期皮脂腺细胞核内均有表达,在成人皮脂腺则表达在基底层细胞的胞核内。结论　C/EBPα和C/EBPβ的蛋白表达与皮脂腺分化密切的关系。

关键词： C/EBPs 皮脂腺分化

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