检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2007年第10期29卷 872-875页

作者：马玉新阴金波范晓棠徐海伟安宁万子兵李志方刘国龙张永海杨辉第三军医大学新桥医院神经外科重庆400037 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的建立红藻氨酸(kainite acid,KA)快速点燃癫痫模型,观察行为学、脑电图(electroencephalogrom,EEG)、海马病理改变及其神经发生。方法立体定向连续注射KA于侧脑室致痫。视频监测、深部EEG、Nissl染色、BrdU免疫组化染色。结果大鼠行... 详细信息

目的建立红藻氨酸(kainite acid,KA)快速点燃癫痫模型,观察行为学、脑电图(electroencephalogrom,EEG)、海马病理改变及其神经发生。方法立体定向连续注射KA于侧脑室致痫。视频监测、深部EEG、Nissl染色、BrdU免疫组化染色。结果大鼠行为学及深部EEG呈急性期、静止期和慢性期3个阶段性变化。根据Racine行为学分级法,Ⅴ级8只,Ⅳ级12只,Ⅲ级2只,Ⅱ级2只;深部电极描记出起始于海马并向杏仁核、额叶皮质等传导癫痫样波;病理变化提示长期癫痫发作会导致海马锥体细胞逐渐变性、坏死、丢失。BrdU标记细胞主要分布于海马齿状回,并在癫痫发作后显著增多(P<0.01)。结论KA快速点燃大鼠模型为模拟颞叶癫痫的理想动模型,癫痫发作后神经发生显著增高。

关键词：红藻氨酸颢叶癫痫立体定向神经发生

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

PNRC1剪接变异体的鉴定及其在辅激活核受体介导基因转录功能上的比较

引用

中国生物化学与分子生物学报 2007年第12期23卷 1019-1024页

作者：王元忠李渝萍陈敏陈彬陈健周度金第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

为分析富含脯氨酸核受体辅调节蛋白1(PNRC1)选择性剪接,及比较PNRC1剪接变异体在辅激活核受体介导基因转录功能上的差异,在生物信息学方法分析PNRC1剪接变异体的基础上,设计一定的特异性引物,采用RT-PCR结合克隆测序的方法对这些剪接变... 详细信息

为分析富含脯氨酸核受体辅调节蛋白1(PNRC1)选择性剪接,及比较PNRC1剪接变异体在辅激活核受体介导基因转录功能上的差异,在生物信息学方法分析PNRC1剪接变异体的基础上,设计一定的特异性引物,采用RT-PCR结合克隆测序的方法对这些剪接变异体进行验证.利用酵母双杂交和荧光素酶报告系统实验,分析它们与核受体的相互作用及比较它们在辅激活核受体介导基因转录功能上的差异.结果显示,生物信息学预测的几个剪接变异体真实存在于人的组织和细胞系中,这些剪接变异体在与雌激素受体α(ERα)、类固醇衍生因子1(SF1)等核受体的相互作用的强度及辅激活核受体介导基因转录功能上存在较大的差异.研究提示,PNRC1这些剪接变异体在体内可能发挥不同的功能.

关键词：富含脯氨酸核受体辅调节蛋白1(PNRC1) 选择性剪接雌激素受体类固醇衍生因子1

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人重组pEGFPC1-uPA ATF质粒的构建及表达的研究

引用

免疫学杂志 2007年第1期23卷 80-83页

作者：高强国符刚余瑾连小华杨恬第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038 第三军医大学西南医院血液科重庆400038

目的构建含人uPA ATF基因的真核表达质粒,并研究其对小鼠细胞株Pam212细胞的影响。方法设计引物,利用PCR从原核表达质粒中扩增人uPA ATF基因片断,并导入真核表达载体的绿色荧光蛋白pEGFPC1中,利用电泳和测序检测构建状况,荧光显微镜观... 详细信息

目的构建含人uPA ATF基因的真核表达质粒,并研究其对小鼠细胞株Pam212细胞的影响。方法设计引物,利用PCR从原核表达质粒中扩增人uPA ATF基因片断,并导入真核表达载体的绿色荧光蛋白pEGFPC1中,利用电泳和测序检测构建状况,荧光显微镜观察和免疫细胞化学检测转染情况,通过MTT、体外迁移实验检测对小鼠Pam212细胞株的影响。结果电泳和测序表明构建的质粒准确,uPA ATF cDNA阅读框完整,连接部位序列正确;质粒转染Pam212细胞株成功,并且能抑制细胞的增殖和迁移。结论成功构建了真核表达载体pEGFPC1-uPA ATF质粒,明确了人uPA ATF基因片断能降低小鼠细胞的增殖和迁移,为进一步在体实验研究打下了基础。

关键词： uPA ATF pGFPC1 Pam 212细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人HNF1α真核表达载体的构建及表达

引用

第三军医大学学报 2007年第13期29卷 1273-1275页

作者：娄桂予陈敏陈彬陈健李渝萍周度金第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的构建人肝细胞核因子-1α(hepatocyte nuclear factor1α,HNF1α)真核表达载体,在体外表达并检测。方法提取HepG2总RNA,用RT-PCR方法制备HNF1α cDNA,进行T-A克隆。HindⅢ/EcoRⅠ双酶切测序正确的重组质粒,回收HNF1α cDNA片段,将其... 详细信息

目的构建人肝细胞核因子-1α(hepatocyte nuclear factor1α,HNF1α)真核表达载体,在体外表达并检测。方法提取HepG2总RNA,用RT-PCR方法制备HNF1α cDNA,进行T-A克隆。HindⅢ/EcoRⅠ双酶切测序正确的重组质粒,回收HNF1α cDNA片段,将其亚克隆于pcDNA3.1(+)载体的多克隆位点内。将构建好的真核表达质粒用脂质体法转染HepG2细胞,RT-PCR和免疫印迹法检测HNF1α的表达。结果正确构建了pcDNA3.1(+)-HNF1α重组载体,并且在转染该质粒的HepG2细胞中检测出了HNF1α的高表达。结论成功地构建了人HNF1α真核表达载体,其可以在体外表达。

关键词： HNF1α基因真核细胞表达载体转染

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

缺氧对大鼠皮层、海马NMDA受体NR1亚单位磷酸化的影响

引用

第三军医大学学报 2007年第18期29卷 1742-1745页

作者：吴喜贵赵延东阮怀珍第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的观察缺氧模型大鼠皮层、海马NMDA受体NR1亚单位酪氨酸磷酸化的变化。方法成年大鼠置于模拟海拔5500m高度的低压氧舱内,每天缺氧8h,分别缺氧3、7、14d和21d。采用免疫组化、Western blot+免疫共沉淀方法检测皮层、海马NR1及其酪氨酸... 详细信息

目的观察缺氧模型大鼠皮层、海马NMDA受体NR1亚单位酪氨酸磷酸化的变化。方法成年大鼠置于模拟海拔5500m高度的低压氧舱内,每天缺氧8h,分别缺氧3、7、14d和21d。采用免疫组化、Western blot+免疫共沉淀方法检测皮层、海马NR1及其酪氨酸磷酸化的变化。结果免疫组化显示缺氧皮层、海马NR1表达都明显高于对照组(P<0.01)。Western blot检测进一步证明NR1的表达显著高于对照组(P<0.01),且随着缺氧时间的延长而增加。缺氧各组酪氨酸磷酸化水平亦显著高于对照组(P<0.01),缺氧14d后酪氨酸磷酸化达到最高峰,而后开始下降,21d时仍显著高于对照组(P<0.01)。结论高原缺氧条件下大鼠皮层、海马NMDA受体NR1亚单位表达及酪氨酸磷酸化水平显著增加,酪氨酸磷酸化的变化可能是影响NMDA受体功能的主要原因。

关键词：缺氧皮层海马 NMDA受体NR1亚单位磷酸化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪链球菌2型溶血素sly基因的表达及其产物的纯化和活性研究

引用

中华流行病学杂志 2007年第12期28卷 1198-1202页

作者：刘丽娜胡福泉朱军民赵岩潘渠李明唐家琪第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038 南京军区军事医学研究所

目的克隆并表达猪链球菌2型(SS2)溶血素基因(sly),为筛选SS2疫苗保护性抗原奠定基础。方法用PCR方法从SS2临床分离株05ZYH33的基因组DNA中扩增出溶血素基因片段,将目的基因插入表达载体pET-30b(+)中,构建重组表达载体pET30b-sly。重组... 详细信息

目的克隆并表达猪链球菌2型(SS2)溶血素基因(sly),为筛选SS2疫苗保护性抗原奠定基础。方法用PCR方法从SS2临床分离株05ZYH33的基因组DNA中扩增出溶血素基因片段,将目的基因插入表达载体pET-30b(+)中,构建重组表达载体pET30b-sly。重组载体经限制性内切酶酶切和DNA测序鉴定后,转化大肠埃希菌(*** Rosetta)。IPTG诱导表达,镍离子亲和层析纯化重组蛋白,鉴定目的蛋白的免疫学活性以及溶血活性。结果PCR扩增的sly基因长度约为1500 bp,经测序分析,插入载体的sly基因序列准确并保持了正确的读框。经IPTG诱导的目的蛋白表达量约占总蛋白的30%,亲和层析纯化后,蛋白纯度达80%以上。Western blot检测证实该蛋白能与感染SS2的人血清发生特异性结合。溶血试验表明重组蛋白溶血素能使猪红细胞发生溶解,溶血价为256。结论成功构建了表达载体pET30b-sly,该载体可在大肠埃希菌中表达,表达蛋白具有免疫反应原性及溶血活性。

关键词：猪链球菌2型 sly基因表达活性研究

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一种适合膜片钳研究的成年大鼠DRG神经元急性分离方法

引用

第三军医大学学报 2007年第5期29卷 460-461页

作者：黄华阮怀珍蔡文琴吴喜贵陈鹏慧第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的建立一种适合膜片钳研究的成年大鼠DRG神经元急性分离方法。方法采用结合酶消化及机械分离的方法，急性分离成年大鼠DRG神经元，用于膜片钳研究。结果本方法可分离2-3个月的成年大鼠，不损伤神经元的基本结构和电生理学特性，形态... 详细信息

目的建立一种适合膜片钳研究的成年大鼠DRG神经元急性分离方法。方法采用结合酶消化及机械分离的方法，急性分离成年大鼠DRG神经元，用于膜片钳研究。结果本方法可分离2-3个月的成年大鼠，不损伤神经元的基本结构和电生理学特性，形态上易于区分。结论本方法步骤单一，操作简单，分离效率高，适合膜片钳研究。

关键词：膜片钳 DRG神经元急性分离

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

视神经损伤后上丘BMP4 mRNA与Noggin mRNA表达的变化

引用

第三军医大学学报 2007年第8期29卷 695-698页

作者：黄艳明范晓棠吴喜贵张金海蔡文琴第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的探讨大鼠视神经损伤后上丘BMP4 mRNA与Noggin mRNA的表达变化。方法采用单侧眼球摘除的视神经损伤动物模型,将大鼠分成正常对照组、眼球摘除后24 h、1周、2周、3周组,原位杂交检测对侧上丘BMP4 mRNA与Noggin mRNA的表达变化,免疫组... 详细信息

目的探讨大鼠视神经损伤后上丘BMP4 mRNA与Noggin mRNA的表达变化。方法采用单侧眼球摘除的视神经损伤动物模型,将大鼠分成正常对照组、眼球摘除后24 h、1周、2周、3周组,原位杂交检测对侧上丘BMP4 mRNA与Noggin mRNA的表达变化,免疫组化检测MAP2和GFAP阳性细胞数量和形态的变化。结果BMP4 mRNA在损伤后24 h显著升高(P<0.01),1周组的表达较24 h降低;Noggin mRNA在损伤后各组的表达水平与正常对照组相比无明显变化(P>0.05)。GFAP阳性细胞在损伤后24 h即明显增加(P<0.01),MAP2阳性细胞在损伤后1周数量减少(P<0.01)。结论单侧眼球摘除后大鼠对侧上丘BMP4 mRNA与Noggin mRNA的表达水平可能是导致损伤后星形胶质细胞反应性增生和神经元退行性死亡的因素之一。

关键词：单侧眼球摘除 BMP4 Noggin 上丘 GFAP MAP2

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

法尼酯X受体对脂肪酸合酶表达的影响

引用

第三军医大学学报 2007年第22期29卷 2142-2144页

作者：申丽丽彭家和刘红彭彦孟甘淋鲁立张迁江渝第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038 第三军医大学新桥医院血液内科重庆400037 第三军医大学学员旅重庆400038

目的探讨法尼酯X受体(farnesoid X receptor,FXR)对脂肪酸合酶(fatty acid synthetase,FAS)表达的影响。方法用FXR激动剂CDCA作用人肝癌细胞株(HepG2),应用RT-PCR和Western blotting分别从mRNA水平和蛋白质水平检测FAS的表达情况。结果用不同浓度的CDCA(25、50、75μmol/L)分别作用于HepG2细胞,6、12、24、48h后,FASmRNA和蛋白质水平呈时间和剂量依赖性下调。结论FXR激动剂可抑制脂肪酸合酶的表达。

关键词：法尼酯X受体脂肪酸合酶动脉粥样硬化甘油三酯胆汁酸

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

重组人可溶性补体受体1型SCR15-18片段表达纯化及生物活性鉴定

引用

第三军医大学学报 2007年第10期29卷 892-895页

作者：谭兵张德纯汪正清第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室

目的获得高表达、高纯度和高活性的可溶性补体受体1型SCR15-18(sCR1-SCR15-18)蛋白。方法重组原核表达载体pET32a-sCR1-SCR15-18在大肠杆菌BL21中经不同IPTG浓度、诱导时间和温度诱导表达,超声破菌,提取包含体,经Ni2+-NTA亲和层析后,选... 详细信息

目的获得高表达、高纯度和高活性的可溶性补体受体1型SCR15-18(sCR1-SCR15-18)蛋白。方法重组原核表达载体pET32a-sCR1-SCR15-18在大肠杆菌BL21中经不同IPTG浓度、诱导时间和温度诱导表达,超声破菌,提取包含体,经Ni2+-NTA亲和层析后,选择不同氧化还原条件进行复性,进而检测其生物学活性。结果得到了有较高表达量、较高纯度和较好生物学活性的sCR1-SCR-15-18蛋白。结论优化了sCR1-SCR15-18蛋白的表达、纯化和复性的参数,所获结果为进一步动物体内保护实验研究奠定了基础。

关键词：可溶性补体1型受体表达包含体纯化复性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：