检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2005年第17期27卷 1735-1738页

作者：王英张锡林段建华许颖张艳玲张健黄复生第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038 第三军医大学西南医院神经内科重庆400038

目的获得并分析感染约氏疟原虫前后大劣按蚊血淋巴的差异表达蛋白。方法利用二维电泳方法分别分离感染约氏疟原虫前后的大劣按蚊血淋巴蛋白,进行考马斯亮蓝染色,并利用PDQuest 2D E lite软件分析和比较凝胶结果;对感染约氏疟原虫前后的... 详细信息

目的获得并分析感染约氏疟原虫前后大劣按蚊血淋巴的差异表达蛋白。方法利用二维电泳方法分别分离感染约氏疟原虫前后的大劣按蚊血淋巴蛋白,进行考马斯亮蓝染色,并利用PDQuest 2D E lite软件分析和比较凝胶结果;对感染约氏疟原虫前后的差异表达蛋白进行质谱分析,获得肽质量指纹图谱;利用M ascot软件系统,在Sw iss-Prot等数据库中检索和分析所获得的肽质量指纹图谱。预测差异表达蛋白的生物学特性和在卵囊黑化中的功能。结果获得了分辨率和重复性均较好的二维电泳图,感染组凝胶可见120个蛋白点,正常组凝胶可见95个蛋白点,二者比较分析后发现有37个差异蛋白点;质谱分析获得3个肽质量指纹图谱,于蛋白数据库检索后未发现匹配分值很高的相关蛋白,其中差异蛋白点1与冈比亚按蚊一蛋白具有较高的同源性。结论获得了感染约氏疟原虫前后大劣按蚊血淋巴的差异蛋白和部分差异蛋白的相关信息,这为从蛋白水平认识蚊媒和疟原虫的相互关系和更深入地利用大劣按蚊-约氏疟原虫模型开展卵囊黑化的相关研究奠定了基础。

关键词：二维电泳差异表达蛋白约氏疟原虫大劣按蚊

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内毒素预处理对大鼠全脑缺血后海马内生性IL-1Rα的影响

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第三军医大学学报 2005年第4期27卷 320-322页

作者：向强文亮楚军高强国刘明华第三军医大学西南医院急救部ICU 第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的　探讨内毒素预处理对大鼠全脑缺血再灌注后海马内生性白细胞介素 1受体拮抗剂 (IL 1Rα)的影响及意义。方法　采用大鼠全脑缺血再灌注模型 ,动态观察内毒素预处理后海马组织IL 1Rα的表达、含量及CA1区神经元计数的变化。结... 详细信息

目的　探讨内毒素预处理对大鼠全脑缺血再灌注后海马内生性白细胞介素 1受体拮抗剂 (IL 1Rα)的影响及意义。方法　采用大鼠全脑缺血再灌注模型 ,动态观察内毒素预处理后海马组织IL 1Rα的表达、含量及CA1区神经元计数的变化。结果　内毒素预处理后脑组织内生性IL 1Rα表达及含量显著增加 ,海马CA1区神经元计数下降幅度减少。结论　内毒素预处理对全脑缺血再灌注后神经元的损伤有明显保护作用 ;其机制可能与诱导了中枢神经系统内生性抗损伤蛋白IL 1Rα的合成有关。

关键词：脑缺血预处理内毒素 IL-1Rα

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运用3′RACE验证LongSAGE文库构建后白念珠菌不同菌相的差异表达基因

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第三军医大学学报 2005年第10期27卷 1009-1011页

作者：张宝军叶庆佾何凤田王鲁周村建郝飞第三军医大学西南医院皮肤科第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的　鉴定从LongSAGE文库筛选到的白念珠菌不同菌相表达基因差异表达标签JMD8和JSW10所代表基因。方法　诱导白念珠菌菌丝相的表达后,运用3′RACE技术扩增白念珠菌差异表达基因标签基因片段,纯化回收后,T/A连接,经氯化钙法转化大肠杆菌... 详细信息

目的　鉴定从LongSAGE文库筛选到的白念珠菌不同菌相表达基因差异表达标签JMD8和JSW10所代表基因。方法　诱导白念珠菌菌丝相的表达后,运用3′RACE技术扩增白念珠菌差异表达基因标签基因片段,纯化回收后,T/A连接,经氯化钙法转化大肠杆菌,X gal/IPTG诱导表达,在阳性菌株中抽提质粒后酶切、测序。结果　两个片段均能在GenBank中找到同源序列,Score值小于40 ,Evalue小于0 5。结论　鉴定了白念珠菌LongSAGE标签JMD8和JSW 10代表的基因分别为EFT2和SHMII。

关键词：白念珠菌 LongSAGE 3’RACE 菌相转换

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HEPC1和HEPC2真核表达载体的构建及其在NIH3T3细胞中的表达

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第三军医大学学报 2005年第9期27卷 834-836页

作者：王元忠周建新钟小林廖荣霞第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的　构建小鼠HEPC1和HEPC2基因的真核表达载体,并观察其分别稳定转染NIH 3T3细胞后的表达情况。方法　从小鼠肝组织中分离总RNA ,采用RT PCR获得小鼠HEPC1和HEPC2基因全长cDNA ,分别将其克隆至真核表达载体pcDNA3上,酶切和测序鉴定后... 详细信息

目的　构建小鼠HEPC1和HEPC2基因的真核表达载体,并观察其分别稳定转染NIH 3T3细胞后的表达情况。方法　从小鼠肝组织中分离总RNA ,采用RT PCR获得小鼠HEPC1和HEPC2基因全长cDNA ,分别将其克隆至真核表达载体pcDNA3上,酶切和测序鉴定后,用脂质体将重组子分别转染至NIH3T3细胞中,G418进行长期筛选,然后用RT PCR和dot ELISA检测HEPC1和HEPC2的表达。结果　RT PCR获得预期大小的片段,重组子pcDNA3 HEPC1和pcDNA3 HEPC2酶切正确,测序表明HEPC1有1个碱基与GenBank中报告的不同,但其位于密码子的第3位在此不改变编码的氨基酸,HEPC2则完全与GenBank中报道的一致,经RT PCR和dot ELISA检测HEPC1和HEPC2在其稳定转染的NIH3T3细胞中均有表达。结论　成功构建了小鼠HEPC1和HEPC2基因的真核表达载体,HEPC1和HEPC2在其稳定转染的NIH 3T3细胞中获得了表达,为下一步探讨HEPC1和HEPC2的功能及作用机制奠定了基础。

关键词： hepcidin pcDNA3 NIH3T3细胞转染小鼠

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法尼酯X受体的研究进展

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第三军医大学学报 2005年第20期27卷 2088-2089页

作者：娄桂予周度金第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

法尼酯X受体（farnesoid X receptor，FXR）是核受体超家族的成员，可被内源性配体胆汁酸激活，在胆汁酸、胆固醇及脂蛋白代谢中起着十分重要的作用。随着新配体及靶基因的发现，FXR展示了更多的生理或病理作用。本研究将对FXR研究进展... 详细信息

法尼酯X受体（farnesoid X receptor，FXR）是核受体超家族的成员，可被内源性配体胆汁酸激活，在胆汁酸、胆固醇及脂蛋白代谢中起着十分重要的作用。随着新配体及靶基因的发现，FXR展示了更多的生理或病理作用。本研究将对FXR研究进展作一综述。[第一段]

关键词：受体超家族 receptor 内源性配体脂蛋白代谢病理作用胆汁酸胆固醇靶基因

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小鼠24p3基因真核表达载体的构建及其在NIH3T3细胞中的表达

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第三军医大学学报 2005年第17期27卷 1725-1728页

作者：安江宏周建新陈彬第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的构建小鼠24p3基因真核表达载体并观察其稳定转染的NIH3T3细胞中24p3/SIP24蛋白的表达情况,初步鉴定24p3/SIP24蛋白介导铁向细胞内转运的生物学功能。方法RT-PCR自小鼠肺组织中克隆24p3 cDNA。用基因重组技术构建24p3-pcDNA3.0真核... 详细信息

目的构建小鼠24p3基因真核表达载体并观察其稳定转染的NIH3T3细胞中24p3/SIP24蛋白的表达情况,初步鉴定24p3/SIP24蛋白介导铁向细胞内转运的生物学功能。方法RT-PCR自小鼠肺组织中克隆24p3 cDNA。用基因重组技术构建24p3-pcDNA3.0真核表达载体并行酶切和测序鉴定。脂质体DOTAP方法转染NIH3T3细胞,48 h后用G418筛选阳性克隆并培养扩增至21 d。对阳性克隆的培养基上清中24p3/SIP24蛋白的表达用ELISA和W esternb lot分析,进一步用原子吸收分光光谱观察其介导铁向NIH3T3细胞内转运的生物学功能。结果成功克隆24p3 cDNA并构建24p3-pcDNA3.0真核表达载体,筛选出稳定表达24p3/SIP24蛋白的NIH3T3细胞株,24p3/SIP24蛋白在NIH3T3细胞上清中获得表达,并能介导铁向NIH3T3细胞内转运。结论24p3基因在NIH3T3细胞中获得表达,有良好的生物学活性,为进一步研究24p3/SIP24蛋白介导铁转运的生物学功能及作用机制奠定了基础。

关键词： 24p3/SIP24 稳定转染小鼠NIH3T3细胞

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肌钙蛋白I2的原核表达及与ERRα1的体外相互作用

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中国生物化学与分子生物学报 2005年第5期21卷 656-660页

作者：李渝萍陈敏陈彬陈健李强周度金第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

孤儿受体雌激素受体相关受体α1(ERRα1)与乳腺癌有密切的关系.酵母双杂交筛选发现乳腺组织中肌钙蛋白I2(TNNI2)与其有明显的相互作用.为进一步研究TNNI2与ERRα1的相互作用,融合表达了GST-TNNI2原核蛋白,并体外翻译了35S标记的ERRα1蛋... 详细信息

孤儿受体雌激素受体相关受体α1(ERRα1)与乳腺癌有密切的关系.酵母双杂交筛选发现乳腺组织中肌钙蛋白I2(TNNI2)与其有明显的相互作用.为进一步研究TNNI2与ERRα1的相互作用,融合表达了GST-TNNI2原核蛋白,并体外翻译了35S标记的ERRα1蛋白,将二者共同温育进行GST捕获实验.放射自显影结果显示,TNNI2能够捕获35S标记的ERRα1,证明TNNI2与ERRα1存在体外直接的相互结合,提示了肌钙蛋白I2在ERRα1参与的生理过程中可能有重要的作用.

关键词：肌钙蛋白Ⅰ 雌激素受体相关受体α1(ERRα1) 蛋白质一蛋白质相互作用

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ERR1突变体I240R对其转录活化功能的影响

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第三军医大学学报 2005年第6期27卷 514-516页

作者：李强陈敏陈彬李渝萍陈健钟小林周度金第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的　分析ERR1突变体I240R对ERR1转录活化功能的影响。方法　用重叠延伸PCR构建ERR1的缺失突变体ERR1 I240R到真核表达质粒pSG5上,通过荧光素酶报告基因表达系统检测ERR1 I240R对ERR1转录活化功能的影响。结果　测序证实成功构建... 详细信息

目的　分析ERR1突变体I240R对ERR1转录活化功能的影响。方法　用重叠延伸PCR构建ERR1的缺失突变体ERR1 I240R到真核表达质粒pSG5上,通过荧光素酶报告基因表达系统检测ERR1 I240R对ERR1转录活化功能的影响。结果　测序证实成功构建了ERR1的突变体pSG5 ERR1 I240R。报告基因表达系统检测显示ERR1 I240R激活的荧光素酶报告基因活性明显高于野生型的ERR1。结论　ERR1突变体ERR1 I240R转录活化功能明显高于野生型的ERR1,为进一步研究ERR1的结构与功能打下了基础。

关键词：雌激素受体相关受体1 突变体转录活化

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姜黄素-3单体脂质体的研制及评价

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华西药学杂志 2005年第5期20卷 421-422页

作者：宫亮杨和平王昆李剑明唐春兰第三军医大学第一附属医院呼吸科重庆400038 第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的制备包封率高、粒径均匀、稳定性好的姜黄素-3(双脱甲氧基姜黄素,demethoxycurcumin)单体脂质体。方法通过均匀设计筛选工艺,以乙醇注入法等制备姜黄素-3脂质体。结果制备姜黄素-3脂质体平均粒径为130.5nm,分布均匀,平均包封率为87.... 详细信息

目的制备包封率高、粒径均匀、稳定性好的姜黄素-3(双脱甲氧基姜黄素,demethoxycurcumin)单体脂质体。方法通过均匀设计筛选工艺,以乙醇注入法等制备姜黄素-3脂质体。结果制备姜黄素-3脂质体平均粒径为130.5nm,分布均匀,平均包封率为87.89%,稳定性好。结论以脂质体技术包裹姜黄素-3单体形成脂质体制剂可行,为进一步研究在肿瘤治疗中的应用提供了基础。

关键词：姜黄素-3 脂质体均匀设计包封率肿瘤治疗

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NOV在嗅鞘细胞中的表达及活性检测

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第三军医大学学报 2005年第7期27卷 596-599页

作者：梁涛李淑蓉邓其跃郭强苏炳银第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的　检测肾母细胞瘤过度表达基因(nephroblastomaoverexpressedgene ,nov)所编码产物(NOV蛋白)转染嗅鞘细胞(olfactoryensheathingcells ,OECs)后在OECs中的表达以及活性。方法　本研究用nov转染原代培养大鼠OECs ,用G418筛选,经过Westernblot检测c myc NOV的表达以及通过背根神经节(dorsalrootganglion ,DRG)与NOV转染后OECs联合培养来对表达的nov活性进行鉴定。结果　①Western blot结果显示,转染了NOVcDNA的OECs总蛋白c Myc抗体检测可见约2 8×10 3 条带,即c myc NOV融合蛋白。未转染质粒的OECs总蛋白做对照,结果为阴性,无条带出现。②与nov修饰的OECs联合培养DRG有许多DRG细胞向外迁移,细胞折光性强,突起较长而纤细,并形成复杂的网络。未修饰的OECs组只有少量的细胞迁移和突起生长,细胞迁移和突起生长都很局限。空白对照组DRG仅有细胞迁移。结论　nov转染OECs后,并能促进与OECs联合培养的DRG细胞的迁移生长,表明产生了具有促神经细胞生长活性的蛋白。

关键词：肾母细胞瘤过度表达基因嗅鞘细胞细胞培养背根神经节

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