检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 1998年第6期20卷 496-499页

作者：景德强陈尔瑜余争平程天民第三军医大学基础医学部神经生物学教研室第二军医大学基础医学部解剖学教研室第三军医大学预防医学系复合伤研究所

目的：观察梭曼急性中毒后脑干儿茶酚胺神经元的活动变化。方法：ＡＢＣ免疫组化法显示Ｆｏｓ蛋白的变化。结果：梭曼急性中毒后，脑干儿茶酚胺神经元内ｆｏｓ免疫阳性神经元急剧增加；ｃ－ｆｏｓ表达呈短暂一过性表达；Ｆｏｓ强阳性神... 详细信息

目的：观察梭曼急性中毒后脑干儿茶酚胺神经元的活动变化。方法：ＡＢＣ免疫组化法显示Ｆｏｓ蛋白的变化。结果：梭曼急性中毒后，脑干儿茶酚胺神经元内ｆｏｓ免疫阳性神经元急剧增加；ｃ－ｆｏｓ表达呈短暂一过性表达；Ｆｏｓ强阳性神经元在中毒１ｈ开始增加，２～３ｈ时达高峰，４ｈ开始下降。ｃ－ｆｏｓ表达与梭曼中毒剂量相关而与惊厥是否发生无关。结论：脑干儿茶酚胺神经元在梭曼中毒后发生广泛激活，可能是脑行为变化的先期事件，是惊厥发生以及呼吸。

关键词：梭曼中毒脑干儿茶酚胺神经元大鼠 c-fos

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绿脓杆菌外毒素A抗原的制备与纯化

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第三军医大学学报 1998年第2期20卷 177-178页

作者：刘启富汪正清张克斌胡晓梅周善章第三军医大学基础医学部微生物学教研室

目的：制备绿脓杆菌外毒素Ａ（ＰＥＡ）抗原。方法：用胰酶酪蛋白大豆肉汤（Ｔｒｙｐｔｉｃｓｏｙｂｒｏｔｈ，ＴＳＢ），于３２℃水浴１２０次／ｍｉｎ振荡培养绿脓杆菌ＰＡ１０３株，其培养物经７０００ｒ／ｍｉｎ离心，取上清用７０... 详细信息

目的：制备绿脓杆菌外毒素Ａ（ＰＥＡ）抗原。方法：用胰酶酪蛋白大豆肉汤（Ｔｒｙｐｔｉｃｓｏｙｂｒｏｔｈ，ＴＳＢ），于３２℃水浴１２０次／ｍｉｎ振荡培养绿脓杆菌ＰＡ１０３株，其培养物经７０００ｒ／ｍｉｎ离心，取上清用７０％饱和硫酸铵沉淀，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱层析，ＤＥＡＥ－５２（ＤＥ－５２）柱层析，羟基磷灰石柱层析制备ＰＥＡ。结果：纯化的ＰＥＡ经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）为一条带，分子量为Ｍｒ（６６～６８）×１０３ｕ。环状沉淀试验，琼脂双向扩散试验，酶联免疫吸附试验和免疫印迹分析表明本室纯化的ＰＥＡ，抗原性和分子量均与文献报道一致。结论：用本方法制备ＰＥＡ，避免了对ＤＥ－５２的反复再生，缩短了实验流程，对保持ＰＥＡ的生物活性有利。

关键词：绿脓杆菌外毒素A 抗原 PEA 制备纯化

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鞭毛染色法染色条件的探索

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第三军医大学学报 1998年第2期20卷 183-184页

作者：蹇锐李芹阶刘启富陈剑第三军医大学基础医学部微生物学教研室

目的：探索一套细菌鞭毛染色法的最佳化条件。方法：采用不同琼脂浓度的培养基中生长的变形杆菌，以不同菌液浓度制成涂片，染色，对比其在不同媒染剂、媒染时间、染色液和染色时间条件下的影响。结果：通过对不同染色条件进行优化筛选... 详细信息

目的：探索一套细菌鞭毛染色法的最佳化条件。方法：采用不同琼脂浓度的培养基中生长的变形杆菌，以不同菌液浓度制成涂片，染色，对比其在不同媒染剂、媒染时间、染色液和染色时间条件下的影响。结果：通过对不同染色条件进行优化筛选，确定了一套最佳条件。结论：改进后的染色法所需试剂少，染色时间短，操作简单，鞭毛着色清晰，重复性好。

关键词：细菌鞭毛染色法染色条件

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胰岛素对蛋白激酶C亚型在人动脉平滑肌细胞中分布和含量的影响

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第三军医大学学报 1998年第2期20卷 118-120页

作者：王旭开王梅刘光耀杨成明万瑛第三军医大学附属大坪医院心血管内科第三军医大学基础医学部分子生物学教研室解放军324医院心血管内科

目的：了解动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）的蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）含量及亚型分布，以及与细胞增殖的关系。方法：采用点印迹技术及ＭＴＴ方法，检测了人ＡＳＭＣ颗粒部分与胞浆部分ＰＫＣ的６种亚型的含量和分布。结果：①人ＡＳＭＣ细胞... 详细信息

目的：了解动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）的蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）含量及亚型分布，以及与细胞增殖的关系。方法：采用点印迹技术及ＭＴＴ方法，检测了人ＡＳＭＣ颗粒部分与胞浆部分ＰＫＣ的６种亚型的含量和分布。结果：①人ＡＳＭＣ细胞中主要有ＰＫＣα、ＰＫＣβ、ＰＫＣζ３种亚型分布，并发现６３％分布在胞浆中；②人ＡＳＭＣ细胞ＰＫＣ总量随着佛波酯（ＰＭＡ）、胰岛素浓度的增加而增加，人ＡＳＭＣ细胞增加数量也随着ＰＭＡ、胰岛素的浓度增加而增加。结论：人ＡＳＭＣ细胞中以ＰＫＣα、ＰＫＣβ、ＰＫＣζ３型含量较多，胰岛素可能是通过激活ＰＫＣ信号传导途径引起细胞的基因表达增高，导致ＡＳＭＣ细胞增殖。

关键词：平滑肌胰岛素蛋白激酶C亚型高血压

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人抗甲肝噬菌体抗体重链可变区基因的序列分析

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第三军医大学学报 1997年第5期19卷 418-420页

作者：万泽生王海涛姜绍谆第三军医大学基础医学部微生物学教研室

目的：对人抗甲肝病毒噬菌体抗体阳性克隆５９７和６４６，进行重链ＤＮＡ序列分析。方法：用Ｓａｎｇｅｒ末端终止法测定序列，计算机软件进行分析。结果：经同源性分析，这两个克隆的同源基因均来源于人免疫球蛋白重链基因序列。氨基... 详细信息

目的：对人抗甲肝病毒噬菌体抗体阳性克隆５９７和６４６，进行重链ＤＮＡ序列分析。方法：用Ｓａｎｇｅｒ末端终止法测定序列，计算机软件进行分析。结果：经同源性分析，这两个克隆的同源基因均来源于人免疫球蛋白重链基因序列。氨基酸序列推导可知，克隆６４６重链Ｆｄ基因和克隆５９７重链可变区基因均为单一开放读框，各编码２２５个氨基酸和１１９个氨基酸。２株克隆重链可变区含有明确的四个框架区和３个抗原决定互补区。

关键词：噬菌体抗体基因序列甲肝病毒克隆重链可变区

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人凝血因子Ⅸ基因直接注射入小鼠骨骼肌内表达的进一步研究

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第三军医大学学报 1997年第5期19卷 415-417页

作者：郭华阳刘昕王传松王燕纪贤文许平庆吕银慧王仁鹏谭骏汪江华第三军医大学基础医学部分子生物学教研室

目的：观察人凝血因子ⅨｃＤＮＡ直接注入小鼠骨骼肌后的存在和表达部位。方法：采用免疫组化和核酸杂交技术检测人Ⅸ因子ｃＤＮＡ注入小鼠肌肉后的存在和表达情况。结果：免疫组化和斑点杂交显示肌注４周时有Ⅸ因子的蛋白质和ｍＲＮＡ... 详细信息

目的：观察人凝血因子ⅨｃＤＮＡ直接注入小鼠骨骼肌后的存在和表达部位。方法：采用免疫组化和核酸杂交技术检测人Ⅸ因子ｃＤＮＡ注入小鼠肌肉后的存在和表达情况。结果：免疫组化和斑点杂交显示肌注４周时有Ⅸ因子的蛋白质和ｍＲＮＡ表达。原位杂交显示肌注４周时局部肌细胞内仍有Ⅸ因子ｃＤＮＡ存在。

关键词：基因治疗人凝血因子Ⅸ 骨骼肌直接注射

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抗肺炎衣原体种特异性单克隆抗体的制备及其免疫学特性的研究

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第三军医大学学报 1997年第5期19卷 398-400页

作者：朱瑾俞树荣张雪饶贤才第三军医大学附属西南医院肝胆外科中心第三军医大学基础医学部微生物学教研室

目的：研究肺炎衣原体（Ｃｐｎ）保护性抗原组分。方法：利用杂交瘤技术制备了２株能稳定分泌抗Ｃｐｎ单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经间接免疫荧光法和免疫印迹法鉴定单抗效价和特异性，并作单抗２Ｇ５的体外中和实验。结果；单抗２Ｇ５... 详细信息

目的：研究肺炎衣原体（Ｃｐｎ）保护性抗原组分。方法：利用杂交瘤技术制备了２株能稳定分泌抗Ｃｐｎ单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经间接免疫荧光法和免疫印迹法鉴定单抗效价和特异性，并作单抗２Ｇ５的体外中和实验。结果；单抗２Ｇ５和４Ｆ７效价分别为１：１０２４００、１：５１２００（ＥＬＩＳＡ），且均为识别Ｍｒ９８×１０３蛋白的种特异性单抗。体外中和实验表明，单抗２Ｇ５具有明显的补体依赖中和作用，其中和效价为１１３０（０．０４ｍｇ／ｍｌ）。结论：Ｃｐｎ种特异性单抗２Ｇ５对ＣｐｎＭｒ９８×１０３蛋白具有中和作用。这对进一步研究Ｃｐｎ的抗原性，研制有效疫苗具有重要意义。

关键词：肺炎衣原体单克隆抗体中和作用制备

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粒-巨噬细胞集落刺激因子cDNA在造血祖细胞中的表达

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第三军医大学学报 1997年第5期19卷 395-397页

作者：杜楠王庆余第三军医大学附属新桥医院血液科第三军医大学基础医学部分子生物学教研室

目的：探索逆转录病毒介导的ＧＭ－ＣＳＦｃＤＮＡ在造血祖细胞中转移与表达。方法：采用电穿孔法将小鼠ＧＭ－ＣＳＦｃＤＮＡ重组逆转录病毒ｐＬＸＳＮ／ＧＭ和空载体ｐＬＸＳＮ转染病毒包装细胞ＰＡ３１７，再将含有ＧＭ－ＣＳＦ重组... 详细信息

目的：探索逆转录病毒介导的ＧＭ－ＣＳＦｃＤＮＡ在造血祖细胞中转移与表达。方法：采用电穿孔法将小鼠ＧＭ－ＣＳＦｃＤＮＡ重组逆转录病毒ｐＬＸＳＮ／ＧＭ和空载体ｐＬＸＳＮ转染病毒包装细胞ＰＡ３１７，再将含有ＧＭ－ＣＳＦ重组逆转录病毒的细胞培养上清液感染富含造血干祖细胞群体，采用ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析培养细胞基因组中外源基因的整合，用Ｄｅｘｔｅｒ培养体系检测培养３周的各组细胞增殖数。结果：在含Ｇ４１８的体外半固体造血祖细胞培养中，转染细胞表现出较多的抗Ｇ４１８的粒－巨噬细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ），用ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法分别检测出转染细胞基因组中整合有ＮｅｏＲ基因和ＧＭ－ＣＳＦｃＤＮＡ，在Ｄｅｘｔｅｒ培养中，ＧＭ－ＣＳＦ修饰组的成熟非粘附细胞计数明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）。结论：ＧＭ－ＣＳＦ重组逆转录病毒成功地转入造血祖细胞并获得了表达。

关键词：逆转录病毒载体造血祖细胞 GM-CSF 基因治疗

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成人肠系膜动脉平滑肌细胞增殖模型的稳定性研究

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第三军医大学学报 1997年第5期19卷 411-414页

作者：王旭开王梅刘光耀杨成明何多芬王燕万瑛第三军医大学附属大坪医院心血管内科第三军医大学基础医学部分子生物学教研室

目的：研究动脉血管平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）的生长特性和体外血管活性物质对ＡＳＭＣ增殖作用的影响。方法：应用复合酶法和贴块法成功地进行了成人ＡＳＭＣ分离，经低浓度的人胰岛素样生长因子Ｉ（ＨＩＬＧＦ－Ｉ）作用，成人ＡＳＭＣ... 详细信息

目的：研究动脉血管平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）的生长特性和体外血管活性物质对ＡＳＭＣ增殖作用的影响。方法：应用复合酶法和贴块法成功地进行了成人ＡＳＭＣ分离，经低浓度的人胰岛素样生长因子Ｉ（ＨＩＬＧＦ－Ｉ）作用，成人ＡＳＭＣ呈典型的“谷”与“峰”样生长，经历了１０多个月传代培养至３５代，并用ＰＭＡ作ＭＴＴ细胞毒性实验。结果：该细胞生长活性未见异常改变。结论：此方法能使分离下来的ＡＳＭＣ的休眠期缩短，传代后生长特征稳定性强，培养与纯化能同步进行。

关键词：动脉平滑肌细胞动脉粥样硬化细胞增殖

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地塞米松对补体介导的PMN功能损害的保护实验研究

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第三军医大学学报 1997年第6期19卷 523-526页

作者：张克斌汪正清刘启富周善章第三军医大学基础医学部微生物学教研室附属新桥医院呼吸内科研究所

目的：研究地塞米松对活化补体介导的ＰＭＮ功能损害的保护作用。方法：用酵母多糖活化人血清（ＺＡＨＳ）作用于人体外ＰＭＮ及小鼠体内ＰＭＮ，选择地塞米松（Ｄｅｘ）起显著保护作用的浓度和时间；进行体内、外保护效能试验。结果：... 详细信息

目的：研究地塞米松对活化补体介导的ＰＭＮ功能损害的保护作用。方法：用酵母多糖活化人血清（ＺＡＨＳ）作用于人体外ＰＭＮ及小鼠体内ＰＭＮ，选择地塞米松（Ｄｅｘ）起显著保护作用的浓度和时间；进行体内、外保护效能试验。结果：①低剂量Ｄｅｘ（０．０８μｇ／ｍｌ）预处理，对极效量ＺＡＨＳ导致正常人、鼠ＰＭＮ功能损害无明显保护作用；大剂量Ｄｅｘ（１．２～１．６μｇ／ｍｌ）在ＰＭＮ应激后的第５小时前表现出明显保护作用（Ｐ＜０．０５），但此后却使ＰＭＮ细胞死亡、脱落；中等剂量Ｄｅｘ（０．４～０．８μｇ／ｍｌ）能使ＰＭＮ的ＩＣＢＡ、Ｏ－２和ＳＧ三项指标水平均显著高于实验组（Ｐ＜０．０５）；②Ｄｅｘ在小鼠体内保护效能同体外实验基本一致；③Ｄｅｘ的临界保护剂量：０．４μｇ／ｍｌ（体外）或２．５μｇ／２０ｇ鼠（体内），它对ＰＭＮ杀菌力的保护效能分别为２５．０３％（体外）和１９．０５％（体内）。结论：中等量Ｄｅｘ（０．４～０．８μｇ／ｍｌ）对体外ＰＭＮ的预处理，能显著而安全地保护ＺＡＨＳ所激化的ＰＭＮ的胞内杀菌功能。鼠体内的情况基本同体外一致（体内Ｄｅｘ剂量为２．５μｇ／２０ｇ小鼠，ＺＡＭＳ为０．５ｍｌ／２０ｇ小鼠）。

关键词：地塞米松补体杀菌力烧伤并发症感染 PMN

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