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陆军军医大学学报 2000年第3期22卷 295-297页

作者：代佳平冯华刘昕王宪荣第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室!重庆400038 第三军医大学附属西南医院神经外科!重庆400038

目的 :为了深入研究SAH后CVS的发生机制及其治疗效果。方法 :42只大鼠随机分 :A组 :正常对照组 ;B组 :注射 0 9%氯化钠对照组 ;C组 :采用 0 1、0 2、0 3、0 4、0 5ml自体动脉血注入大鼠枕大池制作CVS模型。观察大鼠的存活、临床... 详细信息

目的 :为了深入研究SAH后CVS的发生机制及其治疗效果。方法 :42只大鼠随机分 :A组 :正常对照组 ;B组 :注射 0 9%氯化钠对照组 ;C组 :采用 0 1、0 2、0 3、0 4、0 5ml自体动脉血注入大鼠枕大池制作CVS模型。观察大鼠的存活、临床表现、血压、血气分析、rCBF测定及病理学检查等。结果 :B组大鼠均存活 ,临床表现典型及和病理学改变轻微 ,与A组差异不明显。C4 :大鼠均存活 ,但反应迟钝 ,自洁性差 ,血压短暂升高 ,rCBF下降明显 ,持续时间长 ;颅底出血 ,颅底动脉管壁破坏、层次结构消失 ,与B组差别显著。C1～ 3组大鼠死亡率高。C5组大鼠临床表现肌病理改变不明显。结论 :注射 0 2ml时 ,大鼠存活率高 ,临床表现典型 ,rCBF降低和病理改变明显 ,而且与慢性出血性脑血管痉挛相一致 ,是最理想的CVS模型。

关键词：蛛网膜下腔出血脑血管痉挛

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大鼠不同类型脑损伤后NO表达变化的比较研究

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第三军医大学学报 2000年第7期22卷 656-659页

作者：李红丽蔡文琴邓晓林赵士福第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038

目的　研究不同类型脑损伤后NO的表达变化。方法　建立大鼠 3种脑损伤模型 :脑皮质针刺伤、短暂性全脑缺血 /再灌注与模拟低压性脑缺氧 (海拔 5 0 0 0m) ,运用NADPH d组化 (NDP)、原位分子杂交、图像分析等方法对 3种脑损伤后NO的表达... 详细信息

目的　研究不同类型脑损伤后NO的表达变化。方法　建立大鼠 3种脑损伤模型 :脑皮质针刺伤、短暂性全脑缺血 /再灌注与模拟低压性脑缺氧 (海拔 5 0 0 0m) ,运用NADPH d组化 (NDP)、原位分子杂交、图像分析等方法对 3种脑损伤后NO的表达及其细胞来源进行对比观察。结果　①NDP阳性细胞数在脑皮质针刺伤后第 5～ 7d达高峰 ,且主要分布于海马、室周区等处 ;全脑缺血再灌注后 1～ 3d即达高峰 ,以颞叶皮质、海马与室周区明显 ;高原缺氧仅 2d有一过性增高。②表达NO的细胞以神经元样细胞、胶质细胞样细胞为主 ,有少数内皮细胞样细胞。结论　 3种不同类型脑损伤后NO表达的时空分布存在差异 ;NO的细胞来源可能有多种。

关键词：一氧化氮星形胶质细胞大鼠颅脑损伤

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TNFα在严重烫伤大鼠骨骼肌泛素依赖的蛋白质降解途径中的作用

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第三军医大学学报 2000年第4期22卷 341-344页

作者：唐新国董燕麟第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的探讨大鼠烫伤后骨骼肌蛋白质降解增强的机制和TNFα作用的关系。方法以30 %和37 %TBSA全层烫伤大鼠为模型 ,观察局部和远隔部位比目鱼肌泛素(Ub)含量、酪氧酸(Tyr)释放量、血清TNFα水平及TNFα作用下比目鱼肌Ub和UbmRNA表达水平。... 详细信息

目的探讨大鼠烫伤后骨骼肌蛋白质降解增强的机制和TNFα作用的关系。方法以30 %和37 %TBSA全层烫伤大鼠为模型 ,观察局部和远隔部位比目鱼肌泛素(Ub)含量、酪氧酸(Tyr)释放量、血清TNFα水平及TNFα作用下比目鱼肌Ub和UbmRNA表达水平。结果TNFα注射后24h内比目鱼肌Ub、UbmRNA、Tyr释放量均显著增加。烫伤后伤肢Ub含量、Tyr释放量皆显著增加 ,变化趋势一致 ;未伤肢Ub增加而Tyr释放量增加不明显 ;血清TNFα水平显著升高。TNFα处理后烫伤大鼠伤肢、未伤肢比目鱼肌Ub含量、Tyr释放量皆显著升高 ,且伤肢变化更显著。烫伤、TNFα的交互效应显著。结论烫伤可能借烫伤局部产生的TNFα作用于Ub依赖系统促进烫伤局部骨骼肌蛋白质降解。

关键词： TNFα 烫伤蛋白质降解大鼠骨骼肌 Ub依赖

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缓慢牵伸肢体延长时周围神经损害及修复过程中生长相关蛋白43mRNA表达的实验研究

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第三军医大学学报 2000年第2期22卷 153-155页

作者：范少地许建中李起鸿吴康第三军医大学附属西南医院骨科重庆400038 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038

目的 :观察缓慢牵伸肢体延长时周围神经相应的脊髓及背根神经节(DRG)中生长相关蛋白 43(GAP 43)mRNA表达。方法 :29只日本大耳白兔胫骨以1mm/d的速度缓慢牵伸延长至20 %、40 %,停止延长后2、4周 ,用原位杂交技术观察坐骨神经相应背根... 详细信息

目的 :观察缓慢牵伸肢体延长时周围神经相应的脊髓及背根神经节(DRG)中生长相关蛋白 43(GAP 43)mRNA表达。方法 :29只日本大耳白兔胫骨以1mm/d的速度缓慢牵伸延长至20 %、40 %,停止延长后2、4周 ,用原位杂交技术观察坐骨神经相应背根神经节及脊髓中GAP 43mRNA的表达及定位 ,以图像分析仪进行半定量分析。结果 :缓慢牵伸至20 %时相应脊髓及神经节呈阳性表达 ,延长40 %时呈强阳性表达 ,停止延长4周恢复正常。结论 :缓慢牵伸周围神经虽无神经临床损害症状 ,但引起GAP 43mRNA表达的上调 ,并在停止延长后4周恢复正常 ;缓慢牵伸过程中神经的亚临床损害广泛存在 ,并存在着强烈的神经再生反应。

关键词：肢体延长周围神经损害 GAP-43 mRNA

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一种简单、高效的小分子量DNA沉淀法

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陆军军医大学学报 2000年第6期22卷 584-590页

作者：李小兵曹廷兵彭家和叶治家第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室!重庆400038

沉淀是浓缩核酸最常用的方法.通过核酸沉淀可以改变核酸的溶解缓冲液,重新调节核酸在溶液中的浓度,还可以去除溶液中某些盐离子与杂质,达到纯化核酸的目的[1].

关键词： DNA 沉淀法

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大鼠脾脏20S蛋白酶体的分离纯化及电镜观察

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第三军医大学学报 2000年第8期22卷 747-749页

作者：李蓉芬倪兵李渝萍周建新第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的　分离纯化正常大鼠脾脏 2 0S蛋白酶体 ,并观察其形态特征。方法　采用分级盐析、离子交换层析及凝胶过滤方法 ,分离纯化了正常大鼠脾脏 2 0S蛋白酶体 ,并进行透射电镜观察。结果　所制备的2 0S蛋白酶体纯度较高 ,非变性聚丙烯酰胺... 详细信息

目的　分离纯化正常大鼠脾脏 2 0S蛋白酶体 ,并观察其形态特征。方法　采用分级盐析、离子交换层析及凝胶过滤方法 ,分离纯化了正常大鼠脾脏 2 0S蛋白酶体 ,并进行透射电镜观察。结果　所制备的2 0S蛋白酶体纯度较高 ,非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)显示 1条带 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)显示 8条带 ,分子量为 ( 19.8～ 31.7)× 10 3;电镜观察显示 ,脾脏 2 0S蛋白酶体呈现典型的圆筒状 ,具有同其它细胞 2 0S蛋白酶体一样的形态特征。结论　这为进一研究 2 0S蛋白酶体结构与功能的关系奠定了基础。

关键词： 20S蛋白酶体纯化分离电镜脾脏大鼠

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GPPCR-RDB法对HPV感染的快速基因诊断

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第三军医大学学报 2000年第2期22卷 194-195页

作者：郭华阳汪江华周来新叶治家陈安第三军医大学医学检验系临床生物化学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的 :对人乳头瘤病毒(HPV)感染进行快速的基因诊断。方法 :采用通用引物介导的聚合酶链反应(GPPCR)扩增皮损组织DNA ,并同时将扩增产物标记上地高辛配基 ,再结合扩增产物的非放射性反向斑点杂交技术 ,对HPV亚临床感染和假性湿疣进行了... 详细信息

目的 :对人乳头瘤病毒(HPV)感染进行快速的基因诊断。方法 :采用通用引物介导的聚合酶链反应(GPPCR)扩增皮损组织DNA ,并同时将扩增产物标记上地高辛配基 ,再结合扩增产物的非放射性反向斑点杂交技术 ,对HPV亚临床感染和假性湿疣进行了快速的基因分型诊断及鉴别诊断。结果 :14例亚临床感染中HPV6阳性12例 ,HPV11阳性4例 ,HPV16阳性4例 ,HPV18未检测出 ,所用探针以外型别1例 ,混合感染5例 ;11例假性湿疣中仅有1例为HPV16阳性。结论 :该方法对HPV感染特别是亚临床感染和隐性感染的基因诊断是快速敏感特异的 ,值得推广应用。

关键词： HPV感染基因诊断 GPPCR-RDB法

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应用SoftLink^(TM)Soft Release Avidin树脂亲和层析纯化融合IL-16蛋白

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第三军医大学学报 2000年第7期22卷 703-704页

作者：曹廷兵甘立霞第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的　分离、纯化大肠杆菌中表达的融合IL 16蛋白。方法　采用SoftLinkTMSoftReleaseAvidinResin亲合树酯分离、纯化由大肠杆菌产生的生物素化融合IL 16蛋白。结果　融合IL 16蛋白成功地在该系统中被分离、纯化 ,每升细菌培养物可获得 1... 详细信息

目的　分离、纯化大肠杆菌中表达的融合IL 16蛋白。方法　采用SoftLinkTMSoftReleaseAvidinResin亲合树酯分离、纯化由大肠杆菌产生的生物素化融合IL 16蛋白。结果　融合IL 16蛋白成功地在该系统中被分离、纯化 ,每升细菌培养物可获得 1.4mg重组融合蛋白。纯化蛋白经SDS PAGE和毛细管电泳检测均为 1条蛋白质带。结论　此系统纯化IL 16融合蛋白操作方便、快捷 ,所得蛋白纯度和产率高。

关键词： IL-16 融合蛋白生物素亲和素纯化

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梭曼诱发惊厥后大鼠脑内兴奋性氨基酸的变化

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第三军医大学学报 2000年第1期22卷 22-25页

作者：景德强陈尔瑜余争平程天民第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038 第二军医大学解剖学教研室上海200433 第三军医大学预防医学系防原医学教研室全军复合伤研究所重庆400038

目的 :对脑内兴奋性氨基酸的变化进行定位研究。方法 :应用Beckman 6300氨基酸分析仪和601黄金系统色谱工作站 ,对梭曼惊厥后不同时相大鼠的新鲜脑组织进行定位检测。结果 :梭曼诱发惊厥后脑内谷氨酸和天门冬氨酸的水平显著降低 ,谷氨... 详细信息

目的 :对脑内兴奋性氨基酸的变化进行定位研究。方法 :应用Beckman 6300氨基酸分析仪和601黄金系统色谱工作站 ,对梭曼惊厥后不同时相大鼠的新鲜脑组织进行定位检测。结果 :梭曼诱发惊厥后脑内谷氨酸和天门冬氨酸的水平显著降低 ,谷氨酸下降最明显的是惊厥30min后的大脑皮质和海马 ,分别是正常组的53.2 %和52.6 % ,小脑的嗅球内谷氨酸水平显著下降 ,天门冬氨酸更易受梭曼中毒的影响 ,惊厥后5、30、90min3个时点测定的6个脑区(纹状体、大脑皮质、海马、中脑、小脑、间脑和嗅球)中均显著下降。结论 :梭曼中毒后脑内谷氨酸和天门冬氨酸水平显著降低 ,递质耗竭是递质活动增加的征象 ,因此 ,谷氨酸和天门冬氨酸递质活动增加可能在梭曼中毒性惊厥的发生和维持中起重要作用。

关键词：梭曼惊厥谷氨酸脑兴奋性氨基酸大鼠

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大鼠中枢神经系统结缔组织生长因子免疫反应阳性细胞的发育

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第三军医大学学报 2000年第12期22卷 1135-1138页

作者：苏炳银蔡文琴张成岗 Perbal.B 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 UniversiteParisⅦ ParisFrance

目的　研究E8～P30 0大鼠中枢神经系统 (CNS)结缔组织生长因子 (CTGF)免疫反应阳性细胞的发育规律。方法　应用免疫细胞化学方法检测大鼠中枢神经系统CTGF免疫反应阳性细胞在不同发育阶段的变化情况。结果　出生前大鼠CNS未检测到CTGF... 详细信息

目的　研究E8～P30 0大鼠中枢神经系统 (CNS)结缔组织生长因子 (CTGF)免疫反应阳性细胞的发育规律。方法　应用免疫细胞化学方法检测大鼠中枢神经系统CTGF免疫反应阳性细胞在不同发育阶段的变化情况。结果　出生前大鼠CNS未检测到CTGF免疫反应阳性细胞。出生后早期较少 ,而后逐渐增加。出生后 1～ 2月间出现发育高峰 :阳性细胞数量最多 ,分布范围广泛 ,阳性信号强。随年龄的增加阳性细胞数量逐渐减少 ,分布范围逐渐减小。阳性细胞主要是大脑扣带皮质、纹状皮质、海马、下丘脑、小脑的神经元和脊髓白质的星形胶质细胞、室管膜细胞。阳性细胞具长突起 ,且突起显示较强阳性信号。结论　CTGF在CNS的发育。

关键词：结缔组织生长因子中枢神经系统大鼠发育

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