检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2003年第15期25卷 1311-1314页

作者：范晓棠蔡文琴徐海伟杨忠张金海第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038

目的　探讨noggin基因对成年海马BrdU标记细胞的调控。方法　原位杂交与RT PCR检测noggin基因在海马的表达 ,免疫组化检测BrdU标记细胞数 ,反义技术阻断内源性noggin基因表达。结果　侧脑室注射反义寡核苷酸后 ,成年大鼠海马内nogginmRN... 详细信息

目的　探讨noggin基因对成年海马BrdU标记细胞的调控。方法　原位杂交与RT PCR检测noggin基因在海马的表达 ,免疫组化检测BrdU标记细胞数 ,反义技术阻断内源性noggin基因表达。结果　侧脑室注射反义寡核苷酸后 ,成年大鼠海马内nogginmRNA阳性细胞数明显降低 ,而BMP4mRNA阳性细胞数无明显变化 ,同时大鼠海马齿回及齿回颗粒下区的BrdU阳性细胞数均较正常对照组明显降低 ,正义寡核苷酸无此效应。结论　内源性noggin可促进成年内海马神经前体细胞的增殖。

关键词： Noggin 海马 5-溴脱氧尿嘧啶核苷骨形成蛋白4 大鼠

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Noggin mRNA与BMP4 mRNA在不同发育年龄大鼠海马与大脑皮层的表达

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第三军医大学学报 2003年第16期25卷 1421-1423页

作者：范晓棠蔡文琴徐海伟杨忠张金海第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038

目的　观察不同发育年龄大鼠前皮质与海马内nogginmRNA与BMP4mRNA表达的变化特点。方法　应用RT PCR技术进行半定量分析。结果　在大鼠前皮质 ,nogginmRNA的表达在P1W明显降低 ,BMP4mRNA在P1M、P3M呈高表达。而在大鼠海马 ,nogginmRNA... 详细信息

目的　观察不同发育年龄大鼠前皮质与海马内nogginmRNA与BMP4mRNA表达的变化特点。方法　应用RT PCR技术进行半定量分析。结果　在大鼠前皮质 ,nogginmRNA的表达在P1W明显降低 ,BMP4mRNA在P1M、P3M呈高表达。而在大鼠海马 ,nogginmRNA的表达在胚胎期 (E13、E16)表达最高 ,随着发育的进行逐渐降低 ;BMP4在不同发育阶段大鼠海马内的表达模式和noggin相反 ,即在胚胎期及新生期呈弱阳性表达 ,生后 1周表达开始升高 ,生后 2周明显升高 ,并维持这一较高水平 ,在生后 18月大鼠仍维持较高的水平。结论　NogginmRNA与BMP4mRNA在不同发育年龄大鼠的海马与前皮质均有表达 ,表达水平与发育年龄密切相关。Noggin基因与BMP4基因与海马及皮层的发育密切相关。

关键词： noggin基因 BMP4基因海马皮层大鼠发育年龄大脑皮层

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大鼠海马和额叶皮层褪黑素限速酶N-乙酰基转移酶表达与年龄的关系

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第三军医大学学报 2002年第8期24卷 907-909页

作者：徐海伟黎海蒂范晓棠吴旋龚发云第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

目的　观察从胚胎期到老年期大鼠海马和额叶皮层中褪黑素 (Melatonin ,MT)合成限速酶N 乙酰基转移酶 (ArylalkylamineN acetyltransferase ,AANAT)表达的变化特点。方法　①引物设计 ,②RT PCR方法 ,③酶联法。结果　①大鼠额叶皮层和... 详细信息

目的　观察从胚胎期到老年期大鼠海马和额叶皮层中褪黑素 (Melatonin ,MT)合成限速酶N 乙酰基转移酶 (ArylalkylamineN acetyltransferase ,AANAT)表达的变化特点。方法　①引物设计 ,②RT PCR方法 ,③酶联法。结果　①大鼠额叶皮层和海马中AANAT在胚胎和幼年期表达较高 ,成年后有一定下降。②在老年大鼠 ,海马中AANATmRNA明显降低甚至消失。③大鼠额叶皮层和海马中褪黑素水平在胚胎和幼年期较高 ,老年大鼠海马中褪黑素水平降至最低。结论　胚胎期额叶皮层AANAT有较高的表达 ,生后 3周～18月组降低 ,而老年大鼠海马中AANAT表达的降低和消失 ,可能是老化时中枢神经系统褪黑素水平下降的原因之一。

关键词：额叶皮层年龄褪黑素 N-乙酰基转移酶海马老化逆转录-聚合酶链反应

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反义c-jun寡核苷酸对大鼠学习记忆和LTP的影响

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第三军医大学学报 2003年第3期25卷 187-189页

作者：熊鹰姚小红万子冰隋建峰李希成蔡文琴第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

目的　观察反义c jun寡核苷酸对大鼠学习记忆和长时程增强 (Long termpotentiation ,LTP)的影响。方法　采用脑内微量注射、主动回避反应训练 (AAR)、LTP记录等技术。结果　反义c jun寡核苷酸双侧海马 (5mol L)或脑室注射(8mol L) ,大鼠... 详细信息

目的　观察反义c jun寡核苷酸对大鼠学习记忆和长时程增强 (Long termpotentiation ,LTP)的影响。方法　采用脑内微量注射、主动回避反应训练 (AAR)、LTP记录等技术。结果　反义c jun寡核苷酸双侧海马 (5mol L)或脑室注射(8mol L) ,大鼠AAR的习得均明显低于对照组 ;反义c junS ODN使大鼠LTP诱出率明显减少 ,串刺激后PS幅度和fEPSP斜率的增幅降低。结论　反义c jun寡核苷酸显著损害大鼠学习记忆和LTP能力。

关键词：反义c-jun 学习记忆长时程增强

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AANAT基因工程化ES细胞减少APP高表达PC12细胞Aβ的分泌

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第三军医大学学报 2003年第3期25卷 209-211页

作者：吴旋徐海伟黎海蒂范晓棠曹娟唐军第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

目的　构建AANAT基因工程化的胚胎干细胞 ,并探讨其在阿尔茨海默氏病治疗中的可能作用。方法　将外源性neo基因转染人胚胎成纤维细胞 ,作为饲养层细胞用于ES细胞转基因后筛选及增殖过程的培养。将pBK CMV AANAT真核表达质粒转染小鼠胚... 详细信息

目的　构建AANAT基因工程化的胚胎干细胞 ,并探讨其在阿尔茨海默氏病治疗中的可能作用。方法　将外源性neo基因转染人胚胎成纤维细胞 ,作为饲养层细胞用于ES细胞转基因后筛选及增殖过程的培养。将pBK CMV AANAT真核表达质粒转染小鼠胚胎干细胞 ,用RT PCR方法筛选阳性细胞克隆 ,用此工程细胞的条件培养液培养APP过量表达的PC12细胞 ,观察 β淀粉样蛋白分泌情况。结果　①转入neo基因的人胚胎成纤维细胞能很好维持ES细胞的未分化状态。②AANAT基因工程细胞培养液能减少 β淀粉样蛋白的分泌。③褪黑素能使PC12 APP细胞Aβ分泌明显减少。结论　首次构建AANAT基因工程化的胚胎干细胞。

关键词：褪黑素阿尔茨海默病工程细胞胚胎干细胞小鼠

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ACTH和吗啡对创伤痛大鼠海马锥体神经元NMDA受体通道的抑制

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第三军医大学学报 2003年第3期25卷 226-229页

作者：庞勇李希成黎海蒂阮怀珍熊鹰陈鹏辉第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

目的　探讨创伤痛大鼠海马锥体神经元NMDA受体通道动力学特性的变化及ACTH和吗啡的作用。方法　实验以双侧踝关节离断大鼠为创伤痛模型 ,应用细胞贴附式膜片钳技术。结果　在正常 7～ 10d大鼠急性分离的海马CA1区锥体神经元上 ,记录到... 详细信息

目的　探讨创伤痛大鼠海马锥体神经元NMDA受体通道动力学特性的变化及ACTH和吗啡的作用。方法　实验以双侧踝关节离断大鼠为创伤痛模型 ,应用细胞贴附式膜片钳技术。结果　在正常 7～ 10d大鼠急性分离的海马CA1区锥体神经元上 ,记录到多数膜片的NMDA受体通道有两个电导水平 ,分别为 5 0pS及 3 8pS ,以 5 0pS占多数 ,且以短开放为主 ,但也有长开放通道。 3 8pS电导仅有短开放通道。大鼠双侧踝关节完全离断后 2h ,5 0pS及 3 8pS短开放通道、5 0pS长开放通道的开放概率和开放时间均比正常对照组显著增加 ,还出现了 3 8pS长开放通道。在 5 0pS短开放通道的记录中 ,ACTH1 2 4 和吗啡可显著抑制创伤大鼠海马CA1区锥体神经元NMDA受体通道的开放概率和开放时间 ;预先加入阿片受体拮抗剂纳络酮能阻断上述的抑制效应。结论　ACTH和吗啡对伤害性信息传递的调制作用可能与其通过阿片受体抑制创伤大鼠海马NMDA受体通道动力学特性的变化有关。

关键词：创伤痛膜片钳技术 NMDA受体通道海马锥体神经元 ACTH 吗啡

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瘦素蛋白转基因约氏疟原虫对小鼠体质量的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2017年第1期35卷 36-41页

作者：李楷郑鸿朱锋付雍徐文岳第三军医大学基础医学部病原生物教研室重庆400038

目的探讨含瘦素(leptin)蛋白转基因约氏疟原虫(Plasmodium yoelli)对感染小鼠体质量的影响。方法设计并构建含小鼠瘦素基因的疟原虫CRISPR/Cas9重组质粒,该质粒两端带有约氏疟原虫17XNL株巨噬细胞迁移抑制因子(macrophage migration inh... 详细信息

目的探讨含瘦素(leptin)蛋白转基因约氏疟原虫(Plasmodium yoelli)对感染小鼠体质量的影响。方法设计并构建含小鼠瘦素基因的疟原虫CRISPR/Cas9重组质粒,该质粒两端带有约氏疟原虫17XNL株巨噬细胞迁移抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)的5′和3′同源序列,将外源的小鼠瘦素基因经同源重组插入至MIF基因编码区下游,构建重组质粒PYC-MIF-Leptin。将该重组质粒电转入体外培养的约氏疟原虫成熟裂殖体内,通过尾静脉注射该裂殖体感染雌性昆明小鼠1只,经乙胺嘧啶筛选和PCR鉴定获得转基因约氏疟原虫克隆。将转基因疟原虫和野生型疟原虫感染C57BL/6小鼠各1只,取眼球血和尾静脉血,通过RTPCR和免疫荧光检测瘦素在疟原虫内是否成功表达。将含转基因疟原虫和野生型疟原虫(1×104接种量)的200μl PBS尾静脉注射感染C57BL/6小鼠各5只,阴性对照组注射等量PBS。每两天记录并统计小鼠原虫血症及体质量变化。采用SPSS 19.0软件进行统计学分析。结果构建了含瘦素基因和疟原虫MIF同源重组序列的重组质粒PYC-MIF-Leptin。转基因疟原虫DNA测序结果证实,瘦素基因整合入MIF基因下游,并在疟原虫中成功转录。免疫荧光实验结果表明,转基因疟原虫能够表达小鼠瘦素蛋白。转基因疟原虫组17 d体质量下降尤其明显,为(17.26±1.40)g。野生型疟原虫组和阴性对照组小鼠体质量无明显变化,而转基因疟原虫组体质量下降达10.7%(P<0.05)。两种疟原虫都在原虫血症达到10%左右时开始下降,但是转基因疟原虫增殖速度较快,最终在23 d左右均消失。结论表达瘦素基因的转基因约氏疟原虫可降低感染小鼠的体质量。

关键词： CRISPR/Cas9技术转基因约氏疟原虫瘦素体质量下降

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长时连续作业对大鼠下丘脑及背缝核orexin-A和受体的影响

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第三军医大学学报 2006年第10期28卷 1046-1048页

作者：王臻谌小维张春青樊宏孝程赛宇阮怀珍胡志安第三军医大学基础医学部神经生物学教研室第三军医大学基础医学部基础医学教学实验中心重庆400038

目的研究长时连续作业对大鼠促觉醒肽orexin- A及受体表达的影响。方法使用长时连续作业动物模型,采用免疫组织化学方法结合图像分析技术测定orexin -A及受体OX1R在下丘脑外侧区,背缝核的变化。结果经过长时连续作业训练后,跑台组与对... 详细信息

目的研究长时连续作业对大鼠促觉醒肽orexin- A及受体表达的影响。方法使用长时连续作业动物模型,采用免疫组织化学方法结合图像分析技术测定orexin -A及受体OX1R在下丘脑外侧区,背缝核的变化。结果经过长时连续作业训练后,跑台组与对照组相比,orexin- A阳性细胞在下丘脑外侧区、orexin- A阳性纤维在背缝核及OX1R在背缝核均显著减少。结论长时连续作业可造成促觉醒肽orexin- A和OX1R的表达降低。

关键词：长时连续作业 orexin-A 疲劳觉醒免疫组织化学背缝核下丘脑

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大鼠嗅球成鞘细胞的分离、培养与鉴定

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第三军医大学学报 2002年第3期24卷 261-263页

作者：吴喜贵阮怀珍袁碧波程赛宇第三军医大学基础医学部神经生物学教研室 400038

目的　探讨大鼠嗅球成鞘细胞 (Olfactoryensheatingcells ,OECs)分离与培养的方法。方法　无菌条件下嗅球置于少量人工脑脊液中 ,用眼科镊子直接将嗅球撕烂、挤压 ,得片状组织块 ,胰酶消化 ,吹打 ,细胞悬液进行培养。结果　本方法分离... 详细信息

目的　探讨大鼠嗅球成鞘细胞 (Olfactoryensheatingcells ,OECs)分离与培养的方法。方法　无菌条件下嗅球置于少量人工脑脊液中 ,用眼科镊子直接将嗅球撕烂、挤压 ,得片状组织块 ,胰酶消化 ,吹打 ,细胞悬液进行培养。结果　本方法分离、培养的OECs具有双极或多极突起 ,且突起十分细长 ,神经生长因子受体和胶质纤维酸性蛋白免疫组化呈阳性。结论　该方法简便易行 ,为深入研究OECs神经生物学特性。

关键词：嗅球嗅球成鞘细胞细胞培养免疫组织化学大鼠

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大鼠离体海马脑片NO变化与LTP产生的关系

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第三军医大学学报 2003年第20期25卷 1837-1839页

作者：胡志安罗峻黎海蒂阮怀珍李希成第三军医大学基础医学部生理学教研室神经生物学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

目的　观察离体脑片突触传递长时程增强 (LTP)中一氧化氮 (NO)变化的特点。方法　采用胞外记录方法检测LTP产生和维持。原位杂交技术检测NOSmRNA表达变化。生化反应方法检测NO含量和NO合酶 (NOS)活性变化。结果　条件刺激 10min后 ,LTP... 详细信息

目的　观察离体脑片突触传递长时程增强 (LTP)中一氧化氮 (NO)变化的特点。方法　采用胞外记录方法检测LTP产生和维持。原位杂交技术检测NOSmRNA表达变化。生化反应方法检测NO含量和NO合酶 (NOS)活性变化。结果　条件刺激 10min后 ,LTP产生 ,NO含量和NOS活性均显著升高。NOSmRNA表达也明显增加。条件刺激 60min后 ,LTP稳定维持 ,但NO含量和NOS活性却恢复到条件刺激前水平。结论　NO的显著升高过程主要发生在LTP形成的早期阶段。

关键词：长时程增强一氧化氮原位杂交海马大鼠

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