检索结果-内蒙古大学图书馆

免疫学杂志 2008年第2期24卷 173-177页

作者：刘丽娜胡福泉朱军民赵岩陈志瑾唐家琪第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038

目的表达SS2纤连蛋白结合蛋白(fibronectin-binding protein,FBP),研究其免疫学活性,探讨其保护活性和作为疫苗候选分子的可能性。方法用PCR技术从SS2临床分离株05ZYH33的基因组DNA中扩增出fbp基因片段,插入表达载体pET-30b(+)中,构建... 详细信息

目的表达SS2纤连蛋白结合蛋白(fibronectin-binding protein,FBP),研究其免疫学活性,探讨其保护活性和作为疫苗候选分子的可能性。方法用PCR技术从SS2临床分离株05ZYH33的基因组DNA中扩增出fbp基因片段,插入表达载体pET-30b(+)中,构建重组表达载体pET30b-fbp。该载体经酶切鉴定和DNA测序鉴定后,转化***,IPTG诱导表达,镍离子亲和层析纯化重组蛋白。Western blot证实目的蛋白的分子量和免疫反应原性。重组蛋白免疫小鼠后收集多抗血清,间接ELISA检测其效价。结果PCR扩增的fbp基因长度约为1700bp,所构建重组表达载体酶切鉴定无误、测序证实碱基序列100%正确且保持正确读框。IPTG诱导表达,目的蛋白表达量约占菌体总蛋白的10%。亲和层析获得目的蛋白,纯度达80%以上。Western blot检测证实该蛋白能与感染SS2的病人血清发生阳性反应。重组蛋白免疫小鼠后血清效价达1∶25600以上。结论成功构建了表达载体pET30b-fbp,可在工程菌***中表达;表达蛋白具有良好的免疫原性和反应原性。

关键词： SS2 FBP 表达免疫学活性

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医学教育中的全程无菌观念培养

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局解手术学杂志 2009年第1期18卷 51-51页

作者：陈炜肖卫东安静第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038 第三军医大学附属新桥医院普通外科重庆400037 首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

良好的无菌观念和无菌操作技术是合格的医务工作者必须具备的基本素质,然而随着各种新型消毒剂及先进仪器设备的应用,部分医务工作者出现了对消毒用品的依赖和盲目信任,忽视了无菌观念的培养及坚持,违反无菌操作规范的事件频频出现。这... 详细信息

良好的无菌观念和无菌操作技术是合格的医务工作者必须具备的基本素质,然而随着各种新型消毒剂及先进仪器设备的应用,部分医务工作者出现了对消毒用品的依赖和盲目信任,忽视了无菌观念的培养及坚持,违反无菌操作规范的事件频频出现。这就要求我们从医学生入校开始至其踏人工作岗位,进行包括基础教育阶段、实习阶段、工作阶段的全程无菌观念的培养、灌输与强化。[第一段]

关键词：无菌技术医学教学

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基于中国数字化可视人体喉区细小结构分割数据集的建立

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第三军医大学学报 2008年第1期30卷 8-10页

作者：谭立文张绍祥冉旭宋林胡南第三军医大学基础医学部:人体解剖学教研室重庆市计算医学研究所重庆400038 第三军医大学基础医学部计算机教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部重庆大学生物工程学院重庆400030

目的建立数字人体喉区细小解剖结构的分割数据集。方法利用Photoshop图像处理软件提供的磁性套索和多边形选择对中国数字化可视人体喉区数据的细小器官和结构进行数据分割,建立喉区解剖结构的分割数据集;分割数据集经图像格式转换后,在A... 详细信息

目的建立数字人体喉区细小解剖结构的分割数据集。方法利用Photoshop图像处理软件提供的磁性套索和多边形选择对中国数字化可视人体喉区数据的细小器官和结构进行数据分割,建立喉区解剖结构的分割数据集;分割数据集经图像格式转换后,在Amira4.1软件中利用域值分割方法自动提取分割区域,进行三维显示,并通过三维结果来验证分割数据。结果对喉软骨、喉肌、声带等细小解剖结构进行了分割,建立了基于数字人体的喉区数据集,基于分割数据建立三维模型真实、可信。结论喉区的分割数据准确、完整,为喉区精细模型的建立奠定了数据基础,同时提供了实用的彩色图像分割方法。

关键词：图像分割喉可视化人体

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PNRC1核定位信号序列的鉴定

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中国生物化学与分子生物学报 2008年第1期24卷 35-39页

作者：王元忠李渝萍陈敏陈彬陈健周度金第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

为鉴定富含脯氨酸核受体辅调节蛋白1(PNRC1)分子的核定位信号序列(nuclear localization signal sequence ,NLS) ,在生物信息学方法预测的基础上,先构建野生型PNRC1及删除预测NLS的PNRC1突变体的绿色荧光蛋白(GFP)重组表达载体,转染细... 详细信息

为鉴定富含脯氨酸核受体辅调节蛋白1(PNRC1)分子的核定位信号序列(nuclear localization signal sequence ,NLS) ,在生物信息学方法预测的基础上,先构建野生型PNRC1及删除预测NLS的PNRC1突变体的绿色荧光蛋白(GFP)重组表达载体,转染细胞后通过激光共聚焦显微镜观察PNRC1分子在删除预测NLS后细胞内的定位变化.然后,将预测的NLS编码序列直接连到GFP表达载体上,以及将预测的NLS加到胞浆蛋白上构建其GFP重组表达载体,转染细胞,观察预测的NLS能否把构建的重组体都带到细胞核内.结果显示,删除PNRC1中预测的NLS后,其定位从细胞核中变为主要定位在细胞浆中,而预测的NLS能把GFP或胞浆中的蛋白带到细胞核中.研究表明,预测的NLS为PNRC1分子真正的NLS.

关键词：富含脯氨酸核受体辅调节蛋白1 核定位信号序列辅活化子绿色荧光蛋白

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DNA甲基化PCR引物的设计

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第三军医大学学报 2008年第3期30卷 268-269页

作者：张艳陈彬陈敏李渝萍陈健娄桂予周度金第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

DNA甲基化是哺乳类动物一个重要的基因外遗传信号。有研究表明,DNA甲基化与大多数肿瘤的发生相关,抑癌基因启动子CpG岛的高甲基化可引起抑癌基因表达沉默,细胞出现无节制生长,导致肿瘤的发生。目前,甲基化特异性PCR(methylation·sp... 详细信息

DNA甲基化是哺乳类动物一个重要的基因外遗传信号。有研究表明,DNA甲基化与大多数肿瘤的发生相关,抑癌基因启动子CpG岛的高甲基化可引起抑癌基因表达沉默,细胞出现无节制生长,导致肿瘤的发生。目前,甲基化特异性PCR(methylation·specific PCR,MS-PCR)是研究DNA甲基化最为常用且准确度较高的方法之一,[第一段]

关键词：甲基化 PCR

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乳腺癌细胞中PNRC基因启动子区CpG岛甲基化状态的研究

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第三军医大学学报 2008年第4期30卷 299-302页

作者：张艳陈彬李渝萍陈健陈敏娄桂予周度金第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的研究乳腺癌细胞中富含脯氨酸核受体辅活化子(proline-rich nuclear receptor coactivator protein,PNRC)基因启动子CpG岛的甲基化状态及在PNRC转录调节中的作用。方法应用PT-PCR检测PNRC基因在正常乳腺细胞与乳腺癌细胞中的表达情况... 详细信息

目的研究乳腺癌细胞中富含脯氨酸核受体辅活化子(proline-rich nuclear receptor coactivator protein,PNRC)基因启动子CpG岛的甲基化状态及在PNRC转录调节中的作用。方法应用PT-PCR检测PNRC基因在正常乳腺细胞与乳腺癌细胞中的表达情况,并运用"MethPrimer"软件对PNRC启动子区进行分析,预测CpG岛,通过甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)检测PNRC启动子区CpG岛的甲基化状况;PT-PCR及Northern杂交检测乳腺癌细胞经甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-dc)作用后,PNRC基因mRNA的表达情况;Westernblot检测5-Aza-dc干预对PNRC蛋白表达的影响;将含PNRC启动子序列的报告质粒转染乳腺癌细胞,再经5-Aza-dc处理后,检测PNRC基因启动子的活性。结果PNRC基因在乳腺癌细胞中的表达较正常乳腺细胞明显降低;乳腺癌细胞PNRC基因启动子区存在CpG岛甲基化;乳腺癌细胞经5-Aza-dc处理后,PNRC基因mRNA及蛋白表达水平显著增加,其PNRC基因启动子的活性也明显增强。结论PNRC基因启动子区的高甲基化导致PNRC在乳腺癌细胞中表达降低。

关键词： PNRC DNA甲基化 MSP 5-氮杂-2’-脱氧胞苷

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登革病毒2型非结构蛋白NS2B的原核表达、纯化及其抗体的制备

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免疫学杂志 2008年第2期24卷 135-138页

作者：刘丽梅陈宗涛田衍平陈炜江雯徐小峰高娜安静第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆400038 首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

目的原核表达登革病毒(Dengue Virus,DV)NS2B蛋白并纯化,制备NS2B的小鼠多克隆抗体。方法RT-PCR扩增DV2全长的NS2B基因序列,构建表达带有6×His标签的NS2B的原核表达载体,进行表达与纯化,免疫Balb/c小鼠,制备NS2B多克隆抗体。采用EL... 详细信息

目的原核表达登革病毒(Dengue Virus,DV)NS2B蛋白并纯化,制备NS2B的小鼠多克隆抗体。方法RT-PCR扩增DV2全长的NS2B基因序列,构建表达带有6×His标签的NS2B的原核表达载体,进行表达与纯化,免疫Balb/c小鼠,制备NS2B多克隆抗体。采用ELISA检测抗体效价,Western-blot及免疫荧光染色检测其特异性。结果成功构建原核表达载体pQE-31/NS2B,进一步获得相对分子质量为16000的纯化蛋白及多克隆抗体,ELISA显示抗体效价达1∶25600。Western-blot和免疫荧光染色显示多克隆抗体与NS2B蛋白特异性结合。结论本研究获得了纯化的DV2NS2B蛋白,成功地制备了NS2B多克隆抗体,为进一步研究NS2B的作用机制奠定了基础。

关键词：登革病毒 Nonstructural Protein 2B(NS2B) 原核表达载体纯化蛋白多克隆抗体

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低频微电场对细菌繁殖和生长的影响

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第三军医大学学报 2008年第1期30卷 64-66页

作者：马显光李晓寒宁旭蒋洪刘俊康邓玲廖新华陈仕国第三军医大学基础医学部物理学教研室重庆400038 第三军医大学医学检验系暨药学院生物波研究室重庆400038

目的研究奇异变形杆菌和绿脓杆菌在低频微电场作用下的复苏、繁殖和生长情况。方法将相同细菌和相同培养基的平板放置在同一个培养箱，一个平板用电场仪进行刺激，另一个平板紧靠刺激源放置，最后一个离刺激源较远。在固体培养基中观察... 详细信息

目的研究奇异变形杆菌和绿脓杆菌在低频微电场作用下的复苏、繁殖和生长情况。方法将相同细菌和相同培养基的平板放置在同一个培养箱，一个平板用电场仪进行刺激，另一个平板紧靠刺激源放置，最后一个离刺激源较远。在固体培养基中观察细菌的复苏快慢和繁殖速度，在液体培养基中观察生长快慢情况，结果发现在微弱低频电场（重复频率0．2～9．8Hz占空比为0％～100％，电流强度为0～100μA）的刺激作用下，直接受到刺激和近靠刺激源平板内的细菌繁殖速度以及长势超过无刺激对照组，远离刺激源的细菌生长繁殖速度不受电场的影响。结论低频脉冲微电场对细菌的生长有一定的促进作用。

关键词：低频微弱电场细菌生长繁殖

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Myosin-Vc特异性片段的原核表达及其抗血清的制备

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第三军医大学学报 2008年第7期30卷 600-602页

作者：陈宗涛刘丽梅徐小峰田衍平张俊磊王嘉丽安静第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038 第三军医大学西南医院病理学研究所重庆400038

目的原核表达Myosin-Vc(Myo5c)蛋白并纯化,制备小鼠、家兔多克隆抗体,为探索Myo5c在病毒感染中的作用提供研究工具。方法采用RT-PCR方法从人胃粘膜组织中克隆编码Myo5c特异性蛋白的基因片段,构建该片段与6×His标签的融合蛋白表达质... 详细信息

目的原核表达Myosin-Vc(Myo5c)蛋白并纯化,制备小鼠、家兔多克隆抗体,为探索Myo5c在病毒感染中的作用提供研究工具。方法采用RT-PCR方法从人胃粘膜组织中克隆编码Myo5c特异性蛋白的基因片段,构建该片段与6×His标签的融合蛋白表达质粒pQE-31/Myo5c,原核表达与蛋白纯化后,分别免疫BALB/c小鼠和新西兰兔,制备Myo5c抗血清。采用ELISA检测抗体效价,Westernblot和间接免疫荧光染色检验抗体特异性。结果获得Myo5c特异性片段约42×103的纯化蛋白。ELISA检测小鼠和家兔抗血清效价分别为1∶12800、1∶6400。Westernblot和间接免疫荧光染色显示所制备的抗体能特异性识别Myo5c。结论获得Myo5c特异性蛋白,并成功地制备了Myo5c特异性的小鼠和家兔抗血清。

关键词： Myosin—Vc 原核表达多克隆抗体

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MicroRNA调控造血干细胞发育

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中国生物化学与分子生物学报 2008年第7期24卷 593-596页

作者：孙建国廖荣霞周度金第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所重庆400037 第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

造血干细胞是目前研究最为深入的成体干细胞,是极富应用前景的研究领域,然而其维持自我更新以及多向分化潜能的分子机制尚不明.MicroRNA(miRNA)是一类崭新的调控性非编码小分子RNA,在监控生物体个体发育和细胞增殖、分化进程中起着重要... 详细信息

造血干细胞是目前研究最为深入的成体干细胞,是极富应用前景的研究领域,然而其维持自我更新以及多向分化潜能的分子机制尚不明.MicroRNA(miRNA)是一类崭新的调控性非编码小分子RNA,在监控生物体个体发育和细胞增殖、分化进程中起着重要作用.miRNA参与包括胚胎干细胞和多种成体干细胞的发育进程,人类造血干细胞及其发育过程中也存在特征性miRNA表达谱,参与调控造血干细胞发育进程,以miRNA为分子靶点的防治造血功能低下疾患的研究具有广阔的应用前景.

关键词：造血干细胞 microRNA 非编码RNA 基因表达调控

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