检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2008年第3期30卷 192-194页

作者：钟善传罗雪陈兴书蔡其燕姚忠祥第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的观察转录因子EN2在小鼠胚胎发育过程中的时空分布规律。方法利用Westernblot技术检测EN2在小鼠胚胎E8．5-E17．5的表达强度；利用免疫组化技术观察EN2在胚胎发育不同时期各组织器官中的分布。结果①Westernblot：E8．5未检测到明显... 详细信息

目的观察转录因子EN2在小鼠胚胎发育过程中的时空分布规律。方法利用Westernblot技术检测EN2在小鼠胚胎E8．5-E17．5的表达强度；利用免疫组化技术观察EN2在胚胎发育不同时期各组织器官中的分布。结果①Westernblot：E8．5未检测到明显的阳性蛋白条带，E9．5-E15．5在相对分子质量为41×10。处检测到清晰的EN2蛋白条带，表达水平从E9．5-E12．5逐渐增强，E13．5之后逐渐减弱，至E16．5消失。②免疫组化：在胚胎不同时期，EN2蛋白在中后脑交界部、Rathke囊周围、下颌弓、视交叉、嗅球、椎间盘、轴旁肌和一些间充质组织中都有不同程度的表达。结论EN2蛋白可能参与了神经系统、骨骼肌、椎间盘和一些间充质组织的发育与分化。

关键词： Engrailed-2 胚胎发育

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人工锌指蛋白真核表达载体的构建及表达

引用

第三军医大学学报 2008年第2期30卷 134-137页

作者：魏勇应大君朱楚洪侯春丽崔晓萍第三军医大学基础医学部解剖学教研室重庆市生物力学与组织工程重点实验室重庆400038

目的构建人工锌指蛋白ZFP基因的真核表达载体,检测其在真核细胞的表达情况,从而探讨人工锌指蛋白作为人工转录因子DNA结合域的可能性。方法全基因合成人工锌指蛋白(putative zinc finger protein,ZFP)的核酸序列并克隆入pEGFP-N1及pIRES... 详细信息

目的构建人工锌指蛋白ZFP基因的真核表达载体,检测其在真核细胞的表达情况,从而探讨人工锌指蛋白作为人工转录因子DNA结合域的可能性。方法全基因合成人工锌指蛋白(putative zinc finger protein,ZFP)的核酸序列并克隆入pEGFP-N1及pIRES2-EGFP真核表达载体中,构建重组质粒pEGFP-N1/ZFP及pIRES2-EGFP/ZFP-Flag,通过酶切、菌落PCR及测序来鉴定重组载体的正确性。脂质体DOTAP体外转染重组质粒于COS-7细胞中,用荧光显微镜、RT-PCR、Western blot方法鉴定ZFP在该细胞中的表达。结果正确构建了pEGFP-N1/ZFP、pIRES2-EGFP/ZFP-flag重组表达质粒,并且在COS-7细胞中成功进行了人工锌指蛋白ZFP的表达。结论采用生物信息学手段获得的假定的锌指蛋白基因序列可以在真核细胞内正常表达。

关键词：人工锌指蛋白真核表达载体 EGFP COS-7细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

神经病理性痛大鼠背根神经节P2X3受体表达及电生理学特性的改变

引用

第三军医大学学报 2008年第4期30卷 288-291页

作者：刘晓红曾俊伟张金海阮怀珍第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 遵义医学院生理学教研室贵州遵义563003

目的观察坐骨神经缩窄性损伤(CCI)致神经病理性痛后大鼠背根节神经元P2X3受体的表达和电生理学特性的变化。方法应用免疫组化技术观察CCI后不同时间相应节段(L4、L5、L6)脊髓及背根神经节P2X3受体表达的变化;全细胞膜片钳技术观察CCI后... 详细信息

目的观察坐骨神经缩窄性损伤(CCI)致神经病理性痛后大鼠背根节神经元P2X3受体的表达和电生理学特性的变化。方法应用免疫组化技术观察CCI后不同时间相应节段(L4、L5、L6)脊髓及背根神经节P2X3受体表达的变化;全细胞膜片钳技术观察CCI后不同时间L4、L5、L6节段背根节神经元ATP反应电流的变化。结果CCI后7、14d,损伤同侧L4、L5、L6节段背根节P2X3免疫阳性神经元数量明显增加,而且染色加深,相应节段的脊髓背角浅层P2X3免疫反应性亦明显增加。CCI后7、14d,损伤同侧相应节段背根节产生ATP快反应电流的细胞数量明显增加,电流幅度亦增强。应用非选择性P2X受体拮抗剂Suramin能明显抑制ATP反应电流。结论坐骨神经缩窄性损伤致神经痛后同侧对应节段的背根节神经元P2X3受体表达明显增加,ATP快反应电流明显增强。

关键词：神经损伤背根神经节 P2X受体膜片钳 ATP

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

角膜缘基质诱导毛囊干细胞角膜上皮样转分化的研究

引用

第三军医大学学报 2008年第13期30卷 1235-1238页

作者：姜自玲杨力连小华杨恬杨柯重庆大学生物工程学院国家“111计划”基地重庆400044 第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的体外诱导培养毛囊干细胞角膜上皮样分化。方法体外分离培养毛囊干细胞,然后用角膜缘基质组织匀浆液对其进行诱导培养,并用免疫细胞化学(ICC)法检测诱导前后α6-integrin、CD34、K12的变化;RT-PCR方法检测细胞诱导前后K12的mRNA表达... 详细信息

目的体外诱导培养毛囊干细胞角膜上皮样分化。方法体外分离培养毛囊干细胞,然后用角膜缘基质组织匀浆液对其进行诱导培养,并用免疫细胞化学(ICC)法检测诱导前后α6-integrin、CD34、K12的变化;RT-PCR方法检测细胞诱导前后K12的mRNA表达情况;流式细胞分析(FCM)检测毛囊干细胞角膜上皮样分化的阳性率。结果体外培养的毛囊干细胞保持高增殖的状态,α6-integrin、CD34于细胞质表达。经过10d的诱导培养,可见K12于细胞质阳性表达;RT-PCR结果显示毛囊干细胞经诱导后K12的mRNA明显表达;FCM结果亦显示毛囊干细胞经诱导培养后有较高比率的K12阳性细胞。结论毛囊干细胞经角膜缘组织匀浆液体外诱导可成功地分化为角膜上皮样细胞。

关键词：毛囊干细胞角膜上皮细胞转分化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

淋巴增强因子-1在大鼠触须毛囊生长周期中的表达

引用

第三军医大学学报 2008年第1期30卷 43-45页

作者：施春英张艺陈伟郭燕燕杨恬杨力重庆大学生物工程学院国家“111计划”基地重庆400044 第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的研究淋巴增强因子(lymphoid enhancer factor-1,LEF-1)在大鼠触须毛囊生长周期中表达及其重要作用。方法选取处于毛发周期各阶段的触须毛囊,采用免疫组织化学的方法检测LEF-1在各时期毛囊中的表达及变化。结果生长期,LEF-1主要表达... 详细信息

目的研究淋巴增强因子(lymphoid enhancer factor-1,LEF-1)在大鼠触须毛囊生长周期中表达及其重要作用。方法选取处于毛发周期各阶段的触须毛囊,采用免疫组织化学的方法检测LEF-1在各时期毛囊中的表达及变化。结果生长期,LEF-1主要表达于毛囊的毛母质和外根鞘的细胞核内,随着生长的推进,核表达逐渐转化为细胞质表达;退化期,LEF-1表达明显减弱,毛母质中弱表达,外根鞘内表达消失;静止期,LEF-1重新出现在bulge区的外侧,在内根鞘中的表达明显增强。结论LEF-1参与毛干和内根鞘的分化,并且在毛囊周期的维持中起到重要的作用。

关键词：毛发周期 LEF-1 表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Pax6基因和蛋白在大鼠触须毛囊中的表达

引用

第三军医大学学报 2008年第13期30卷 1296-1298页

作者：杨珂杨恬姜自玲第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038 重庆大学生物工程学院国家“111计划”基地重庆400044

目的初步研究转录因子Pax6(paired homebox 6)在大鼠触须毛囊中的表达。方法运用免疫组织化学法检测Pax6蛋白在大鼠触须毛囊及培养的毛囊bulge细胞中的表达,RT-PCR分析毛囊中Pax6两种亚型的表达情况。结果大鼠触须毛囊细胞中Pax6表达阳... 详细信息

目的初步研究转录因子Pax6(paired homebox 6)在大鼠触须毛囊中的表达。方法运用免疫组织化学法检测Pax6蛋白在大鼠触须毛囊及培养的毛囊bulge细胞中的表达,RT-PCR分析毛囊中Pax6两种亚型的表达情况。结果大鼠触须毛囊细胞中Pax6表达阳性,RT-PCR显示表达量以Pax6-5a为高,在体外培养细胞中表现出细胞增殖能力与Pax6在细胞中的表达部位相关。结论Pax6在大鼠触须毛囊中表达,可能在其形成和功能的维持上发挥一定的作用。

关键词： Pax6 毛囊

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

大鼠毛囊干细胞的纯化培养鉴定及其生物学特性

引用

第三军医大学学报 2008年第1期30卷 39-42页

作者：黄恩毅杨恬陈伟杨力重庆大学生物工程学院国家“111计划”基地重庆400044 第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的采用免疫磁珠法(vario magnetic activated cell sorting,Vario MACS)分离纯化培养大鼠CD34+毛囊干细胞,并研究其生物学特性。方法显微分离获得毛囊bulge区,消化成单细胞悬液并进行CD34抗体标记和磁珠标记,使细胞悬液通过分选柱,分... 详细信息

目的采用免疫磁珠法(vario magnetic activated cell sorting,Vario MACS)分离纯化培养大鼠CD34+毛囊干细胞,并研究其生物学特性。方法显微分离获得毛囊bulge区,消化成单细胞悬液并进行CD34抗体标记和磁珠标记,使细胞悬液通过分选柱,分别收集CD34+细胞和CD34-细胞,检测细胞活性后进行细胞培养并绘制细胞生长曲线。扫描电镜观察毛囊干细胞表面形态,透射电镜观察干细胞内部结构形态。免疫细胞化学检测培养细胞中β1-整联蛋白、CD34和α6-整联蛋白的表达。结果用VarioMACS法有效分离并成功培养CD34+毛囊干细胞,分选后的细胞仍具有较好的活性,细胞生长曲线表明,CD34+毛囊干细胞增殖速度快,增殖期长,而CD34-细胞则较快进入平台期。培养的CD34+细胞中干细胞标记物β1-整联蛋白、CD34和α6-整联蛋白的表达均强于CD34-细胞。获得电镜观察毛囊干细胞表面形态学特征及内部结构特征资料。结论VarioMACS法能有效分离获得的CD34+毛囊干细胞,该细胞具有良好的生物学性能。

关键词：免疫磁珠 CD34 毛囊干细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

数字人体肠道的三维可视化研究

引用

第三军医大学学报 2008年第6期30卷 481-484页

作者：刘利郑小林张绍祥胡南谭立文吴毅重庆大学生物工程学院生物医电教研室重庆400030 第三军医大学基础医学部解剖学教研室重庆市计算医学研究所重庆400038

目的建立中国数字人肠道的三维可视化数字模型。方法利用中国首例女性数字化可视人数据集(CVH-2),分割出肠道的轮廓数据,并进行表面三维重建。结果分割并三维重建出了十二指肠、空肠、回肠、盲肠、阑尾、结肠、直肠等肠道结构。模型能... 详细信息

目的建立中国数字人肠道的三维可视化数字模型。方法利用中国首例女性数字化可视人数据集(CVH-2),分割出肠道的轮廓数据,并进行表面三维重建。结果分割并三维重建出了十二指肠、空肠、回肠、盲肠、阑尾、结肠、直肠等肠道结构。模型能够实现缩放、旋转、任意角度切割,以及十二指肠、空肠和回肠、大肠等不同段单独或者整体显示,能够方便地观察人体肠道的走向和形态。结论数字人肠道消化道的可视化模型为教学和临床研究提供了数字化的工具,为虚拟内镜以及CT/MRI影像的消化道研究提供了形态学依据。

关键词：可视人消化道表面重建可视化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一种简易的豚鼠眨眼反应测量方法

引用

第三军医大学学报 2008年第24期30卷 2340-2342页

作者：林曦胡波万子兵杨丽黄率帅隋建峰第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 第三军医大学西南医院神经外科全军神经系统疾病微创诊治专科中心重庆400038 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第三研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的介绍一种简易的豚鼠眨眼反应测量方法,并观察其在眨眼条件反射训练过程中的应用效果。方法采2 kHz的正弦波纯音和压强为3.0 psi的束状医用氧气流先后作用于豚鼠左侧眼角膜,训练豚鼠建立眨眼条件反射,在此过程中利用高分辨率、低扭... 详细信息

目的介绍一种简易的豚鼠眨眼反应测量方法,并观察其在眨眼条件反射训练过程中的应用效果。方法采2 kHz的正弦波纯音和压强为3.0 psi的束状医用氧气流先后作用于豚鼠左侧眼角膜,训练豚鼠建立眨眼条件反射,在此过程中利用高分辨率、低扭矩的肌肉张力换能器测量眨眼活动。结果训练第14天豚鼠追踪性眨眼条件反射习得率为(87.0±12.9)%,显著高于训练第1天的习得率(8.0±6.3)% (P=0.003);训练第10天豚鼠延迟性眨眼条件反射习得率为(86.0±13.0)%,显著高于训练第1天的习得率(5.5±5.0)% (P=0.001)。在此过程中,测量了豚鼠习得条件眨眼反应的峰潜伏期、持续时间和幅度,所得结果与相关报道一致。结论本教研室设计的眨眼反应测量方法操作简单,结果准确,可用于研究小型啮齿类动物眨眼条件反射训练中眨眼活动的拓扑学参数变化。

关键词：眨眼条件反射豚鼠张力换能器

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

大鼠毛囊干细胞的体外分离培养及增强型绿色荧光蛋白示踪

引用

中国组织工程研究与临床康复 2008年第8期12卷 1481-1484页

作者：杨珂姜自林杨恬解放军第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆市400038 重庆大学生物工程学院重庆市400044

目的：毛囊干细胞具有分化为表皮、皮脂腺和毛囊的能力，在烧伤、创伤及大面积皮肤缺损的细胞治疗和基因治疗等方面均有很好的应用前景，但其特异性标志物和体外培养条件等方面存在争议。实验拟进一步探讨毛囊干细胞体外分离培养的方法... 详细信息

目的：毛囊干细胞具有分化为表皮、皮脂腺和毛囊的能力，在烧伤、创伤及大面积皮肤缺损的细胞治疗和基因治疗等方面均有很好的应用前景，但其特异性标志物和体外培养条件等方面存在争议。实验拟进一步探讨毛囊干细胞体外分离培养的方法，以及增强型绿色荧光蛋白作为其示踪标志物的可行性。方法：实验于200705／09在解放军第三军医大学细胞生物教研室完成。①材料：新生7d龄SPF级SD大鼠5只，由解放军第三军医大学实验动物中心提供，实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。pEGFP-N1质粒由本实验室保存。②实验方法：大鼠在体视显微镜下分离出含真皮鞘的完整毛囊，dispase消化，将毛囊从真皮鞘中挤出，收集形态完好且处于生长期的毛囊，分别在毛球部上端、皮脂腺下端横切毛囊，取中间部分置于胰酶和EDTA中联合消化，向所得细胞悬液中添加含10％胎牛血清DMEM／F12完全FAD培养基，常规培养7d后，采用Ⅳ型胶原快速贴壁法两次筛选以分离纯化大鼠毛囊干细胞。待筛选后的细胞生长至70％～80％融合后，进行pEGFP-N1质粒细胞转染。③实验评估：通过超微结构观察与流式细胞仪检测CD34、α6-integrin的表达，对分离纯化的大鼠毛囊干细胞进行鉴定。转染24—72h后，荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达，以毛囊干细胞克隆形成率判定标记细胞的增殖能力。结果：①细胞形态及超微结构：筛选后的毛囊干细胞形态均一，呈铺路石状，透射电镜显示细胞胞体小，核浆比例大，核仁明显，细胞器发育不成熟，处于原始状态。②细胞表型：高表达CD34和α6-integrin，细胞阳性率≥90％。③pEGFP-N1质粒转染及示踪：转染16h左右细胞出现微弱绿色荧光，经G418筛选后稳定表达绿色荧光蛋白。④细胞克隆形成率：与转染前比较，转染后细胞克隆形成率明显降低（r=4．541，P〈0．01）。结论：①利用二步酶消化法联合Ⅳ型胶原快速贴壁法可以获得较高纯度的毛囊干细胞。②增强型绿色荧光蛋白能稳定标记毛囊干细胞，是较理想的示踪方法，但细胞增殖能力受一定影响。

关键词：毛囊干细胞增强型绿色荧光蛋白细胞示踪细胞增殖

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：