检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2004年第6期26卷 467-469页

作者：黄复生第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

疟疾是一种以按蚊为媒介的重要虫媒病,也是当今全球最重要的寄生虫病,虽然经过一个多世纪的国际合作,努力旨在控制该危害性极大的虫媒病,但每年疟疾患者依然高达5 0 0多万,死亡数达2 70多万[1 ] 。　　疟原虫是一种复杂的多阶段发育生物... 详细信息

疟疾是一种以按蚊为媒介的重要虫媒病,也是当今全球最重要的寄生虫病,虽然经过一个多世纪的国际合作,努力旨在控制该危害性极大的虫媒病,但每年疟疾患者依然高达5 0 0多万,死亡数达2 70多万[1 ] 。　　疟原虫是一种复杂的多阶段发育生物,有5 0 0 0个基因,已经在蚊体和脊椎动物体内共演化5 0 0多万年。2 0 0 2年10月欧美数国花费数亿美元、同时在“Science”和“Nature”发表大量有关冈比亚按蚊[1 ] 、恶性疟原虫[2 ] 基因组测序工作完成的论著,这些研究工作一方面说明疟疾对人类的危害性、重要性;另一方面说明疟疾研究的难度,疟疾很多基础性问题没有解决,很难取得突破性进展

关键词：疟原虫蚊相互关系研究疟疾流行病学

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温度对冻干脂质体物理化学稳定性的影响研究

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第三军医大学学报 2004年第6期26卷 552-554页

作者：蔡明志王昆黄复生第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的　研究温度对冻干脂质体物理化学稳定性的影响。方法　应用激光粒度仪检测冻干脂质体水化后的粒径变化 ,评价其物理稳定性 ;通过检测脂质二级过氧化物与硫代巴比妥酸反应物的吸光度和滴定分析脂质水解产物棕榈酸的方法 ,观察其化学... 详细信息

目的　研究温度对冻干脂质体物理化学稳定性的影响。方法　应用激光粒度仪检测冻干脂质体水化后的粒径变化 ,评价其物理稳定性 ;通过检测脂质二级过氧化物与硫代巴比妥酸反应物的吸光度和滴定分析脂质水解产物棕榈酸的方法 ,观察其化学稳定性。 2 5d内 ,分别对以密闭闭光形式分别储存于 -18、4、2 5、40℃等条件下的冻干脂质体氧化、水解和粒径等性质进行观察。结果　冻干脂质体在 40℃条件下时氧化程度明显高于 -18、4、2 5℃ ,随着温度的升高 ,氧化速度有升高的趋势 ;4种条件下的冻干脂质体产生的游离脂肪酸虽然都有一定程度升高 ,但变化较小 ,且没有明显差异。粒径在 40℃、第 2 5天时变化较大 ,其它经统计学处理没有显著性差异。结论　温度对冻干脂质体的化学稳定性影响较大 ,而对物理稳定性影响较小。

关键词：温度冻干脂质体物理化学稳定性影响研究脂质体过氧化

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大劣按蚊AdPPO2、AdPPO3基因cDNA克隆与组织定位

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第三军医大学学报 2004年第6期26卷 470-472页

作者：郝宏兴邱宗文段建华况明书黄复生王英第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的　克隆大劣按蚊PPO基因家族新成员的cDNA部分序列 ,并对所克隆基因进行蚊体组织定位研究。方法　根据已报道的多种昆虫PPO的保守氨基酸序列设计简并引物 ,以大劣按蚊总RNA为模板进行RT PCR扩增、目的片段克隆入T载体 ,然后 ,用PCR... 详细信息

目的　克隆大劣按蚊PPO基因家族新成员的cDNA部分序列 ,并对所克隆基因进行蚊体组织定位研究。方法　根据已报道的多种昆虫PPO的保守氨基酸序列设计简并引物 ,以大劣按蚊总RNA为模板进行RT PCR扩增、目的片段克隆入T载体 ,然后 ,用PCR方法筛选新的PPO克隆并测序 ;以RT PCR方法分析AdPPO2和AdPPO3在蚊血淋巴、蚊胃和唾液腺的分布情况。结果　AdPPO2和AdPPO3基因cDNA部分序列长均为 5 97bp ,编码 199个氨基酸 ;它们在血淋巴、蚊胃和唾液腺均有分布。结论　从大劣按蚊成功克隆获得 2种新的PPO基因家族成员的cDNA部分序列。

关键词：大劣按蚊前酚氧化酶基因克隆

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大劣按蚊对约氏疟原虫卵囊黑化相关血细胞类型的初步鉴定

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第三军医大学学报 2004年第6期26卷 498-500页

作者：杨松时超美周桃莉黄复生况明书王英第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的　鉴定与抗疟黑化反应相关的大劣按蚊血细胞。方法　采用姬氏染色法初步鉴定大劣按蚊血细胞类型 ,继而利用免疫细胞化学技术检测大劣按蚊血细胞内前酚氧化酶和丝氨酸蛋白酶。结果　颗粒细胞和浆细胞为大劣按蚊主要血细胞 ,前酚氧化... 详细信息

目的　鉴定与抗疟黑化反应相关的大劣按蚊血细胞。方法　采用姬氏染色法初步鉴定大劣按蚊血细胞类型 ,继而利用免疫细胞化学技术检测大劣按蚊血细胞内前酚氧化酶和丝氨酸蛋白酶。结果　颗粒细胞和浆细胞为大劣按蚊主要血细胞 ,前酚氧化酶和丝氨酸蛋白酶也主要分布于颗粒细胞和浆细胞内 ,其中颗粒细胞最常见。

关键词：大劣按蚊血细胞黑化免疫细胞化学

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PD大鼠纹状体提取液诱导中脑神经干细胞分化为多巴胺能神经元的研究

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第三军医大学学报 2004年第1期26卷 18-21页

作者：余小强阮怀珍蔡文琴范晓棠姚忠祥杨辉第三军医大学基础医学部神经生物学教研室第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 第三军医大学新桥医院神经外科重庆400037

目的　研究PD大鼠纹状体提取液诱对中脑神经干细胞的诱导分化作用。方法　①体外分离、培养大鼠胚胎的中脑神经干细胞 ,并诱导其分化 ,巢素 (Nestin)、神经丝 2 0 0 (NF 2 0 0 )、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)免疫组化染色鉴定。②加入纹... 详细信息

目的　研究PD大鼠纹状体提取液诱对中脑神经干细胞的诱导分化作用。方法　①体外分离、培养大鼠胚胎的中脑神经干细胞 ,并诱导其分化 ,巢素 (Nestin)、神经丝 2 0 0 (NF 2 0 0 )、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)免疫组化染色鉴定。②加入纹状体提取液后 ,分化细胞用抗酪氨酸羟化酶 (TH)免疫组化鉴定 ,并用流式细胞技术检测分化比例。结果　①从大鼠胚胎的腹侧中脑部位分离获得了大量未分化、呈巢状悬浮生长的细胞团 ,且能分化为神经元和神经胶质细胞。②经纹状体提取液诱导后 ,能够分化出多巴胺能神经元 ,分化比例达 2 0 %左右。

关键词：中脑神经干细胞纹状体提取液分化

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PaP3噬菌体57kD蛋白编码基因的确定

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微生物学报 2004年第1期44卷 50-53页

作者：朱军民金晓琳饶贤才申晓东胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038

分离鉴定了PaP3噬菌体 5 7kD蛋白的编码基因并对其功能进行了初步探讨。用PEG沉淀结合CsCl梯度密度离心分离、纯化噬菌体颗粒 ,通过SDS PAGE分析该噬菌体的衣壳蛋白 ,转印PVDF膜后 ,对 5 7kD蛋白用Edman降解法进行N 端氨基酸测序 ,进而... 详细信息

分离鉴定了PaP3噬菌体 5 7kD蛋白的编码基因并对其功能进行了初步探讨。用PEG沉淀结合CsCl梯度密度离心分离、纯化噬菌体颗粒 ,通过SDS PAGE分析该噬菌体的衣壳蛋白 ,转印PVDF膜后 ,对 5 7kD蛋白用Edman降解法进行N 端氨基酸测序 ,进而从PaP3全基因组的 2 5 6个ORFs中确认该蛋白质的编码基因及其对应的氨基酸序列。结果显示噬菌体PaP3有 9种结构蛋白分子 ,其中 5 7kD蛋白是由ORF34 793编码的。 5 7kD蛋白编码基因全长1 5 4 2bp ,G +C百分含量为 4 9 1 6 % ,编码 5 1 4个氨基酸。该蛋白分子量为 5 7 4kD ,等电点为 5 879。实验表明该蛋白是一种结构性蛋白。

关键词：噬菌体 57kD蛋白编码基因结构性蛋白

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几种培养方法对ES/GFP小鼠胚胎干细胞系增殖和分化能力作用比较

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第三军医大学学报 2004年第19期26卷 1775-1777页

作者：曹娟徐海伟唐军范晓棠吴旋第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的　观察采用不同的饲养层和培养基对永久表达绿色荧光蛋白的小鼠胚胎干细胞系ES/GFP的增殖、分化和绿色荧光蛋白表达的影响。方法　分别采用小鼠胚胎成纤维细胞和人胚胎成纤维细胞为饲养层 ,采用含重组人白血病抑制因子的DMEM/FCS培... 详细信息

目的　观察采用不同的饲养层和培养基对永久表达绿色荧光蛋白的小鼠胚胎干细胞系ES/GFP的增殖、分化和绿色荧光蛋白表达的影响。方法　分别采用小鼠胚胎成纤维细胞和人胚胎成纤维细胞为饲养层 ,采用含重组人白血病抑制因子的DMEM/FCS培养基和Buffalo条件培养基培养ES/GFP细胞系。N2 无血清培养基诱导ES/GFP小鼠胚胎干细胞为神经前体细胞 ,Nestin免疫组化染色。结果　小鼠胚胎成纤维细胞和人胚胎成纤维细胞为饲养层 ,常规LIF培养液和Buffalo条件培养基均能较好维持ES/GFP细胞的高增殖能力和全能分化能力 ,对绿色荧光蛋白的表达和胚体形成、神经前体细胞的分化无明显差异。结论　人胚胎成纤维细胞可替代小鼠胚胎成纤维细胞作为ES/GFP饲养层 ,减少饲养层制备的工作量和污染的机会。Buffalo条件培养基可完全替代LIF培养基 ,降低细胞培养的成本。

关键词：干细胞 ES 饲养层分化增殖表达小鼠胚胎 GFP 人胚胎成纤维细胞条件培养基

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羟基喜树碱脂自制质体注射液与市售注射液家兔体内药代动力学行为的比较

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第三军医大学学报 2004年第6期26卷 517-519页

作者：黄毅刘松青林彩穆海川王昆周桃莉第三军医大学西南医院药剂科重庆400038 第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的　比较自制羟基喜树碱脂质体注射液 (hydroxycamptothecinliposomesinjection ,L HCPT)和市售羟基喜树碱注射液 (markethydroxycamptothecininjection ,M HCPT)在家兔体内的药代动力学行为。方法　分别静脉注射单剂量 ( 1mg kg)的L ... 详细信息

目的　比较自制羟基喜树碱脂质体注射液 (hydroxycamptothecinliposomesinjection ,L HCPT)和市售羟基喜树碱注射液 (markethydroxycamptothecininjection ,M HCPT)在家兔体内的药代动力学行为。方法　分别静脉注射单剂量 ( 1mg kg)的L HCPT和M HCPT ,用HPLC法测定血浆中的药物浓度 ,用 3p87程序和SPSS软件处理和分析数据 ,计算有关药代动力学参数。结果　经 3p87程序拟合 ,家兔静脉注射单剂量L HCPT和M HCPT后 ,其血药浓度时间数据分别符合权重为1 C C的二室模型 ;静脉注射L HCPT和M HCPT后Cmax分别为 3 1768、1 5 2 19μg ml,t1 2 β分别为 3 3 990 7、2 9 3 92 9min ,AUC分别为 2 8 85 15、11 65 5 1μg·min·ml- 1 ,CL分别为 0 .0 3 5 0、0 0 860L·min- 1 ·kg- 1 ,Vc分别为 0 2 70 0、0 64 0 0L kg ,可见L HCPT比M HCPT注射后具有更高的血药浓度水平 ,较长的消除半衰期 ,更大的血药浓度时间曲线下面积 ,较低的总体清除率和较小的表观分布容积。结论　L HCPT和M HCPT在家兔体内的一些重要的药代动力学特性发生了明显改变。

关键词：羟基喜树碱药代动力学脂质体高效液相色谱法

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移植诱导中脑NSCs分化的多巴胺能神经元对PD大鼠治疗作用的实验研究

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第三军医大学学报 2004年第9期26卷 749-752页

作者：余小强阮怀珍蔡文琴范晓棠姚忠祥杨辉第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 第三军医大学新桥医院神经外科重庆400037

目的　研究移植诱导中脑神经干细胞分化出的多巴胺能神经元对PD大鼠的治疗作用。方法　利用纹状体提取液诱导大鼠胚胎中脑神经干细胞 ,使其部分分化为酪氨酸羟化酶 (TH)阳性的多巴胺能神经元 ,继而把分化后的细胞移植到PD大鼠的纹状体... 详细信息

目的　研究移植诱导中脑神经干细胞分化出的多巴胺能神经元对PD大鼠的治疗作用。方法　利用纹状体提取液诱导大鼠胚胎中脑神经干细胞 ,使其部分分化为酪氨酸羟化酶 (TH)阳性的多巴胺能神经元 ,继而把分化后的细胞移植到PD大鼠的纹状体内 ,免疫组化法证实移植细胞的存活并以诱发旋转行为的改善来观察其治疗作用。结果　纹状体提取液能够诱导中脑神经干细胞分化出多巴胺能神经元而且这种经诱导后产生的细胞能够在PD大鼠体内长期存活并改善阿卟吗啡诱导的旋转行为。

关键词：帕金森病神经干细胞神经移植

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人TNFRI cDNA的克隆及酵母表达载体的构建

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第三军医大学学报 2004年第17期26卷 1572-1572,1575页

作者：代佳平毛琼国王燕梁红刘昕第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038

本实验利用反转录聚合酶链反应 (RT PCR)以人单核淋巴细胞系U93 7细胞总RNA为模板 ,扩增出人TNFRI型受体胞外区约 2 2 4个氨基酸残基的cDNA序列 ,将此片段为模板 ,采用剿式PCR技术扩增出编码TNFRI胞外区约 180个氨基酸的DNA序列 ,将其... 详细信息

本实验利用反转录聚合酶链反应 (RT PCR)以人单核淋巴细胞系U93 7细胞总RNA为模板 ,扩增出人TNFRI型受体胞外区约 2 2 4个氨基酸残基的cDNA序列 ,将此片段为模板 ,采用剿式PCR技术扩增出编码TNFRI胞外区约 180个氨基酸的DNA序列 ,将其克隆于载体PDM18 T进行序列测定 ,随后构建于新型酵母表达载体PGBKT7 DNA BD ,为进一步通过酵母双杂交获得拮抗TNFRI的具有生物学活性的多肽奠定了基础。1　材料与方法1 1　材料　　U93 7由本教研室提供 ,质粒PDM18 T以及连接酶为宝生物公司产品 ,PGBKT7 BD购自Clontech ,RPMI

关键词： TNFRIcDNA RT-PCR 载体构建

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