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第三军医大学学报 2003年第13期25卷 1168-1171页

作者：李红丽蔡文琴赵士福孙榆第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400037 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038 第三军医大学附属新桥医院神经外科重庆400037

目的　观察缺血性损伤后脑内一氧化氮 (Nitricoxide ,NO)含量的变化并确定NO的细胞来源。方法　采用短暂性全脑缺血再灌注模型 ,运用NO生化检测、NADPH 黄递酶组化、免疫荧光双标技术及图像分析等方法。结果　①脑内NO的浓度于缺血再灌... 详细信息

目的　观察缺血性损伤后脑内一氧化氮 (Nitricoxide ,NO)含量的变化并确定NO的细胞来源。方法　采用短暂性全脑缺血再灌注模型 ,运用NO生化检测、NADPH 黄递酶组化、免疫荧光双标技术及图像分析等方法。结果　①脑内NO的浓度于缺血再灌注后 12h后即升高 ,1～ 3d达高峰并持续至第 5天 ,此后逐步下降。②NDP阳性细胞数在缺血再灌注后 1d即达高峰 ,以颞叶皮质、海马与室周区明显 ;再灌注 14d后阳性细胞减少或消失。③脑缺血早期 ( 1～ 3d)NDP阳性细胞与GFAP免疫荧光阳性细胞少数有共存 ,仅占 10 %～ 15 %。结论　缺血性脑损伤早期NO的浓度增高。

关键词：脑缺血再灌注一氧化氮(NO) 胶质纤维酸性蛋白(GFAP) 大鼠

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斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA的克隆和表达

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中国人兽共患病杂志 2003年第6期19卷 24-28页

作者：王英张锡林段文元张艳玲段建华第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038 第三军医大学西南医院神经内科

目的　克隆斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段 ,并进行原核表达。方法　利用简并引物 ,进行RT -PCR ,扩增斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段。TA克隆装入 pUCm -T载体 ,进行鉴定、测序 ;利用DNASIS程序推导其所编码的氨基... 详细信息

目的　克隆斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段 ,并进行原核表达。方法　利用简并引物 ,进行RT -PCR ,扩增斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段。TA克隆装入 pUCm -T载体 ,进行鉴定、测序 ;利用DNASIS程序推导其所编码的氨基酸序列 ,并与相关虫种半胱氨酸蛋白酶进行氨基酸序列的同源性分析。将获得的cDNA片段克隆入Pin PointTMXa- 1T表达载体 ,经过筛选后 ,在大肠杆菌中进行原核表达。通过SDS -PAGE电泳和Westernblot方法鉴定表达产物 ,并检测所表达融合蛋白的免疫反应性。结果　RT -PCR扩增出了一 5 0 0bp左右的cDNA片段 ,对阳性克隆测序后获得其核酸序列 ,长 4 98bp。推导出的氨基酸序列长 16 6 ;氨基酸序列的同源性分析显示 ,该序列与相关虫种半胱氨酸蛋白酶存在着很高的同源性 ,组成半胱氨酸催化三联体的半胱氨酸、组氨酸和天冬酰胺残基高度保守。原核表达中 ,对表达产物的鉴定结果和免疫反应性检测结果均显示 ,目的克隆在 33kDa处有一明显条带。结论　本实验克隆获得了斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段 ,其序列中包含了与该酶活性有关的重要位点。原核表达获得一 33kDa的融合蛋白 ,该融合蛋白具有免疫反应性。

关键词：斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶基因表达基因克隆

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海马脑片LTP中钙变化的激光共聚焦扫描技术测定方法

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第三军医大学学报 2003年第3期25卷 263-265页

作者：罗峻胡志安黎海蒂姚忠祥徐海伟第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038

目的　探讨采用激光共聚焦扫描技术来测定海马脑片LTP诱出过程中锥体细胞胞内游离钙的变化。方法　海马脑片的常规孵育及LTP的诱出 ,通过间隙灌流法负载荧光剂Fluo 3AM的海马脑片内游离钙的激光共聚焦测定。结果　直接用Fluo 3AM孵育脑... 详细信息

目的　探讨采用激光共聚焦扫描技术来测定海马脑片LTP诱出过程中锥体细胞胞内游离钙的变化。方法　海马脑片的常规孵育及LTP的诱出 ,通过间隙灌流法负载荧光剂Fluo 3AM的海马脑片内游离钙的激光共聚焦测定。结果　直接用Fluo 3AM孵育脑片 ,可得到轮廓清晰的神经元共聚焦图像 ,条件刺激诱出LTP之后 ,海马锥体细胞胞内游离钙显著增高。结论　所述方法对实时测定LTP诱出过程中海马锥体细胞胞内游离钙的动态变化具有较好的效果。钙离子参与了LTP过程中的信号传递。

关键词：海马脑片 LTP 钙激光共聚焦扫描技术测定

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营养再生的双营养恒化器模型的全局稳定性

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西南师范大学学报（自然科学版） 2003年第2期28卷 187-192页

作者：王开发樊爱军第三军医大学基础医学部数学教研室重庆400038

讨论了一类单种群双营养的恒化器模型,得到了绝灭平衡点和幸存平衡点全局稳定的充分条件.

关键词：单种群双营养恒化器模型营养再生全局稳定性绝灭平衡点幸存平衡点生物数学

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维甲酸诱导神经管畸形发生过程中神经干细胞的变化研究

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第三军医大学学报 2003年第1期25卷 11-14页

作者：李红丽蔡文琴杨忠李泽桂李巍付晓岚第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038 第三军医大学高原军事医学系中心实验室重庆400038

目的　了解维甲酸 (Retinoicacid ,RA)诱导神经管缺陷 (Neuraltubedefect ,NTD)小鼠神经发育过程中神经干细胞的变化规律。方法　分别取不同胚胎时段及新生、成年的正常及NTD小鼠的神经组织 ,采用神经干细胞特异性抗原神经巢蛋白 (Nest... 详细信息

目的　了解维甲酸 (Retinoicacid ,RA)诱导神经管缺陷 (Neuraltubedefect ,NTD)小鼠神经发育过程中神经干细胞的变化规律。方法　分别取不同胚胎时段及新生、成年的正常及NTD小鼠的神经组织 ,采用神经干细胞特异性抗原神经巢蛋白 (Nestin)间接免疫荧光抗体标记和DNA定量荧光染色 ,以流式细胞术检测。结果　①正常小鼠神经组织中Nestin阳性细胞数目在E8.5d时呈高峰 ,此后逐步下降 ,新生期仍保持较高水平 ;NTD小鼠神经组织中Nestin阳性细胞数在胚胎各期均低于正常小鼠 ,尤以E8.5d下降显著 ;出生后与正常组无显著差别。②NTD小鼠胚胎期神经组织G0 G1 期细胞数百分比明显高于正常组 ,S期细胞数百分比则明显低于正常组。

关键词：维甲酸神经干细胞神经巢蛋白神经管缺陷流式细胞术细胞周期 NTD

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三峡库区肺吸虫病临床表现和误诊原因分析

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第三军医大学学报 2003年第12期25卷 1068-1068,1072页

作者：张敬如王英杨松张锡林第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

肺吸虫病临床表现复杂多变 ,误诊率高。我们收集了近年来在我室确诊的肺吸病 46例 ,对其临床表现及误诊原因分析如下。1　临床资料1 1　一般资料　　 46例病人中男 3 6例 ,女 10例。年龄 4～ 5 4岁 ,15岁以下儿童占 83 %。从发病到确诊... 详细信息

肺吸虫病临床表现复杂多变 ,误诊率高。我们收集了近年来在我室确诊的肺吸病 46例 ,对其临床表现及误诊原因分析如下。1　临床资料1 1　一般资料　　 46例病人中男 3 6例 ,女 10例。年龄 4～ 5 4岁 ,15岁以下儿童占 83 %。从发病到确诊时间 2 0d至 10年。 41例有吃生溪蟹史 ,4例曾吃油煎溪蟹 ,1例不详。病人主要来自三峡库区的奉节、丰都、云阳、涪陵、万县 ,少数病人来自渝北、市郊和川南地区等。 46例病人都为我校附属医院的门诊或住院病人。1 2　临床表现　　本组病例起病均较缓慢 ,从吃溪蟹到发病最短 2 0d ,最长 2年。发病初期症状轻微 ,主要表现为胸部不适、食

关键词：三峡库区肺吸虫病临床表现误诊原因分析诊断

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小鼠视网膜干细胞的分离与鉴定

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第三军医大学学报 2003年第24期25卷 2161-2164页

作者：魏勇应大君朱楚洪张伟董世武第三军医大学基础医学部解剖学教研室重庆400038

目的　小鼠视网膜干细胞的分离与鉴定。方法　①对胎龄 17d昆明小鼠眼睫状体部 (CMZ)细胞进行分离与体外培养 ;②通过免疫荧光方法研究视网膜干细胞的增殖及分化特性。结果　①在bFGF作用下 ,所培养细胞可形成悬浮生长的细胞团 ,经多次... 详细信息

目的　小鼠视网膜干细胞的分离与鉴定。方法　①对胎龄 17d昆明小鼠眼睫状体部 (CMZ)细胞进行分离与体外培养 ;②通过免疫荧光方法研究视网膜干细胞的增殖及分化特性。结果　①在bFGF作用下 ,所培养细胞可形成悬浮生长的细胞团 ,经多次传代 ,细胞增殖能力未见衰减。BrdU标记结果显示悬浮细胞团主要是由分裂增殖的细胞组成。而且培养细胞可表达神经干细胞的特异性抗原Nestin及胚胎发育早期视网膜内原始细胞的特异性抗原Chx 10。②培养细胞经 5 %胎牛血清诱导可向成熟细胞分化 ,分别表达神经元与神经胶质细胞的特异性抗原NSE、GFAP。免疫荧光检测显示分化细胞可分别表达感光细胞、双极细胞以及节细胞的特异性抗原Opsin、PKC及 β tubulin。

关键词：视网膜干细胞分离鉴定

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猕猴海马参与痛觉感受与调制过程中的非线性信息编码探索

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第三军医大学学报 2003年第3期25卷 247-250页

作者：朱志茹隋建峰高洁熊鹰张长城张光辉李希成第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038

目的　探索海马参与痛觉感受与调制过程中信息编码规律。方法　分析了当给予多种类型的外界刺激以及吗啡和纳络酮作用时 ,猕猴海马神经元放电序列复杂度、近似熵及放电频率的变化情况。结果　观察当给予伤害性电刺激、痛刺激以及吗啡和... 详细信息

目的　探索海马参与痛觉感受与调制过程中信息编码规律。方法　分析了当给予多种类型的外界刺激以及吗啡和纳络酮作用时 ,猕猴海马神经元放电序列复杂度、近似熵及放电频率的变化情况。结果　观察当给予伤害性电刺激、痛刺激以及吗啡和纳络酮作用时 ,复杂度、近似熵和放电频率变化趋势相同 ,而给予非伤害性的触摸刺激和声刺激时复杂度、近似熵的变化规律与放电频率变化规律不相同。结论　海马可能在痛觉感受与调制过程中可能是利用混沌编码和频率编码相结合的一种编码方式来进行信息编码。

关键词：海马痛觉复杂度近似熵放电频率

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不同鼠龄和学习记忆成绩大鼠海马锥体细胞自发放电差异性研究

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第三军医大学学报 2003年第3期25卷 234-235页

作者：高洁隋建峰朱志茹黎海蒂第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038

目的　结合非线性理论初步探讨不同鼠龄和学习记忆成绩大鼠海马锥体细胞 (PC)的自发放电特征。方法　将实验大鼠按鼠龄和学习记忆成绩分组。年龄组分老年组 (16～ 19月 )和青年组 (3～ 4月 ) ;学习记忆组分成绩好、差组 ,进行在体单电... 详细信息

目的　结合非线性理论初步探讨不同鼠龄和学习记忆成绩大鼠海马锥体细胞 (PC)的自发放电特征。方法　将实验大鼠按鼠龄和学习记忆成绩分组。年龄组分老年组 (16～ 19月 )和青年组 (3～ 4月 ) ;学习记忆组分成绩好、差组 ,进行在体单电极细胞外记录。结果　海马锥体细胞自发放电序列峰峰间隔 (ISI)分布图在各组均无明显规律 ;老年组锥体细胞自发放电ISI复杂度 (C)小于年轻组 ,成绩差组小于成绩好组 (P <0 0 5 ) ;老年组三联优势模式百分比 (PF)明显低于年轻组 (P <0 0 1) ,成绩差组低于成绩好组 (P <0 0 5 )。结论　神经元ISI复杂度和优势模式百分比与年龄、记忆能力有一定相关性 ,提示对神经元复杂度与优势模式的分析有助于揭示神经元自发放电的信息编码特征。

关键词：海马锥体细胞自发放电复杂度优势模式

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视觉分辨的Go/No-Go任务行为训练自动控制系统的研制

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第三军医大学学报 2003年第3期25卷 245-246页

作者：赵邦云黎海蒂李希成高恩泉第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038

目的　研制视觉分辨的Go No Go任务行为训练自动控制系统 ,应用于认知神经科学、神经生理学、神经药理学、心理物理学、精神科学等实验研究。方法　以Windows操作系统作为开发平台 ,利用功能强大的可视化开发软件VisualC + + 6.0作为本... 详细信息

目的　研制视觉分辨的Go No Go任务行为训练自动控制系统 ,应用于认知神经科学、神经生理学、神经药理学、心理物理学、精神科学等实验研究。方法　以Windows操作系统作为开发平台 ,利用功能强大的可视化开发软件VisualC + + 6.0作为本系统开发软件。在硬件设计中 ,引进电磁兼容技术 ,使系统性能更加稳定。结果　本系统能精确地自动控制灵长类动物完成Go No Go任务行为训练实验的全过程。结论　该系统性能稳定、可靠 ,人机界面友好 ,操作简便 ;利用传感器检测动物行为活动 ,判断准确。

关键词：研制传感器 Go/No-Go任务自动控制视觉

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