检索结果-内蒙古大学图书馆

uPA／uPAR系统的结构与功能及其在皮肤研究中的进展

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第三军医大学学报 2001年第A6期23卷 153-156页

作者：高强国第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室，重庆400038

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皮肤创伤修复中uPA/uPAR的表达及作用的研究

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第三军医大学学报 2001年第12期23卷 1396-1398页

作者：宋川杨恬曾益军第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的　探讨皮肤创伤修复中uPA/uPAR的表达规律及意义。方法　应用免疫组化、WesternBlot、细胞培养、ELISA等方法检测小鼠皮肤伤缘和培养的单层角质形成细胞创伤模型的uPA/uPAR的表达。结果　创伤后uPA/uPAR的表达增高 ,伤后 1 2～ 2 4h... 详细信息

目的　探讨皮肤创伤修复中uPA/uPAR的表达规律及意义。方法　应用免疫组化、WesternBlot、细胞培养、ELISA等方法检测小鼠皮肤伤缘和培养的单层角质形成细胞创伤模型的uPA/uPAR的表达。结果　创伤后uPA/uPAR的表达增高 ,伤后 1 2～ 2 4h为uPA/uPAR的表达高峰。结论　创伤促进了uPA/uPAR的表达。

关键词：皮肤创伤修复 uPA uPAR

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毛囊定位冰冻切片技术探讨

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第三军医大学学报 2001年第11期23卷 1363-1364页

作者：曾益军杨恬高强国第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的　探索毛囊完整纵剖面定位冰冻切片技术。方法　根据毛发生长方向观察判断毛囊生长纵剖面 ,选择适当的切片温度 ,匀速切片。结果　能成功地制作完整的皮肤及毛囊纵剖面冰冻切片。结论本方法操作简便 ,要求条件低 ,易于掌握 ,值得推... 详细信息

目的　探索毛囊完整纵剖面定位冰冻切片技术。方法　根据毛发生长方向观察判断毛囊生长纵剖面 ,选择适当的切片温度 ,匀速切片。结果　能成功地制作完整的皮肤及毛囊纵剖面冰冻切片。结论本方法操作简便 ,要求条件低 ,易于掌握 ,值得推广应用。

关键词：毛囊定位冻冻切片技术冻切片制作

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介绍一种快速反转录聚合酶链反应

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第三军医大学学报 2001年第6期23卷 745-746页

作者：张敬如第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的　介绍一种特异、高效的快速PCR方法。方法　总RNA分成 2份 ,采用相同反应体系 ,分别用普通PCR方法和快速PCR方法同时扩增FasL。结果　虽然两种方法均能成功扩增FasL基因 ,但普通PCR方法耗时 3h 4 8min ,而且还存在非特异性片段 ;... 详细信息

目的　介绍一种特异、高效的快速PCR方法。方法　总RNA分成 2份 ,采用相同反应体系 ,分别用普通PCR方法和快速PCR方法同时扩增FasL。结果　虽然两种方法均能成功扩增FasL基因 ,但普通PCR方法耗时 3h 4 8min ,而且还存在非特异性片段 ;而快速PCR方法耗时仅 2h 6min ,而且没有出现非特异片段。结论　快速PCR方法不仅极大的缩短了反应时间 ,同时提高了反应的特异性。

关键词：快速反转录聚合酶链反应 RT-PCR 材料方法

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噬菌体最佳保存方法探讨

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第三军医大学学报 2001年第7期23卷 863-864页

作者：金晓琳张克斌胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038

目的　寻找噬菌体有效而方便的保存方法。方法　将绿脓杆菌裂菌性噬菌体以不同方法保存在不同温度下 ,在不同时间取出 ,用终点稀释法动态检测其裂菌活性滴度。结果　冻干、室温、4℃和液氮保存对噬菌体活性滴度的影响无明显差异 ,6个月... 详细信息

目的　寻找噬菌体有效而方便的保存方法。方法　将绿脓杆菌裂菌性噬菌体以不同方法保存在不同温度下 ,在不同时间取出 ,用终点稀释法动态检测其裂菌活性滴度。结果　冻干、室温、4℃和液氮保存对噬菌体活性滴度的影响无明显差异 ,6个月后仅有 10 2 数量级的降低 ;-2 0℃保存 6月后滴度下降 10 4 数量级 ,效果最差。结论　日常工作中 ,至少 6个月内 ,室温或 4℃是噬菌体最简便而可靠的保存方法。

关键词：噬菌体保存方法效果

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利用人工合成XcmⅠ接头盒构建T-载体

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第三军医大学学报 2001年第5期23卷 608-610页

作者：胡晓梅胡福泉饶贤才张光明张克斌金晓琳刘启富第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038

目的　采用人工法合成XcmⅠ接头盒 ,进而构建T 载体。方法　用人工方法合成含XcmⅠ酶切位点的寡核苷酸接头 ,将其插入pBluescriptSKⅡ (+ )质粒的EcoRⅤ位点 ,以XcmⅠ消化含接头的质粒即构建成T 载体。利用PCR反应扩增PEA全长结构基因 ... 详细信息

目的　采用人工法合成XcmⅠ接头盒 ,进而构建T 载体。方法　用人工方法合成含XcmⅠ酶切位点的寡核苷酸接头 ,将其插入pBluescriptSKⅡ (+ )质粒的EcoRⅤ位点 ,以XcmⅠ消化含接头的质粒即构建成T 载体。利用PCR反应扩增PEA全长结构基因 ,直接克隆入T 载体以验证所构建T 载体的可用性。结果　限制性酶切分析、DNA序列测定及PEA基因的克隆等均证实T 载体的构建成功。结论　所构建的T 载体可有效用于直接克隆PCR产物。

关键词： T-载体人工合成 PCR XcmⅠ接头构建

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半套式PCR和DNA探针技术检测Q热立克次体

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第三军医大学学报 2001年第9期23卷 1104-1106页

作者：胡廷徽温博海万泽生俞树荣第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038

目的　建立半套式PCR和DNA探针技术由于检测Q热立克次体。方法　依据已知的Q热立克次体的 16S和 2 3SrRNA基因及其间区的序列 ,设计 3条引物 ,建立了扩增 16S 2 3SrRNA基因间区的半套式PCR方法 ,并将扩增片段制成探针 ,建立了斑点杂交... 详细信息

目的　建立半套式PCR和DNA探针技术由于检测Q热立克次体。方法　依据已知的Q热立克次体的 16S和 2 3SrRNA基因及其间区的序列 ,设计 3条引物 ,建立了扩增 16S 2 3SrRNA基因间区的半套式PCR方法 ,并将扩增片段制成探针 ,建立了斑点杂交技术。结果　 10株Q热立克次体分离株均可扩增出 5 72bp的PCR条带 ,而对照菌都为阴性 ,此半套式PCR方法的灵敏度高达 1pg ;用九里株扩增片段标记后制成的探针 ,与 10个Q热立克次体分离株的全DNA呈阳性杂交 ,对照菌为阴性 ,此杂交方法的灵敏度为 0 .5ng。结论　基于Q热立克次体 16S 2 3SrRNA基因间区的半套式PCR和DNA探针技术具有较好的特异性和灵敏度 ,可联合应用于Q热的病原学诊断。

关键词：半套式PCR DNA探针 Q热立克次体诊断

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查菲埃立克体120000表面抗原蛋白基因的克隆与表达

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第三军医大学学报 2001年第8期23卷 938-941页

作者：蹇锐温博海第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038

目的构建查菲埃立克体特异性表面抗原Ｐ１２０基因的原核表达质粒，并使该基因在Ｅ．ｃｏｌｉ中高效表达。方法依据查菲埃立克体Ｐ１２０基因序列设计一对特异性引物，用ＰＣＲ从查菲埃立克体的基因组中扩增含有编码Ｐ１２０抗原决... 详细信息

目的构建查菲埃立克体特异性表面抗原Ｐ１２０基因的原核表达质粒，并使该基因在Ｅ．ｃｏｌｉ中高效表达。方法依据查菲埃立克体Ｐ１２０基因序列设计一对特异性引物，用ＰＣＲ从查菲埃立克体的基因组中扩增含有编码Ｐ１２０抗原决定簇的基因片段，而后将ＰＣＲ产物用Ｔ载体克隆。用酶将ＰＣＲ产物从Ｔ载体切下，将它定向插入原核表达质粒ＰＥＴ１１Ｃ构建ＰＥＴ１１Ｃ／ｐ１２０重组质粒；用重组质粒转化Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）。结果从ＤＮＡ片断中扩增出一约１１１９ｂｐ产物，经测序为查菲埃立克体ｐ１２０基因。ＰＥＴ１１Ｃ／ｐ１２０重组质粒转化的Ｅ．ｃｏｌｉ在ＩＰＴＧ的诱导下产生一分子量为４１０００的天然蛋白，它的产量占细菌蛋白总量的２８％，用免疫印迹分析证明它能特异地与查菲埃立克体感染病人血清反应。结论查菲埃立克体特异性的Ｐ１２０抗原在原核表达系统被高效表达，该抗原的研制成功为制备人单核细胞埃立克体病诊断抗原和疫苗奠定了基础。

关键词：查菲埃立体体表面抗原基因表达病原体克隆埃立克体病

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雌激素对下丘脑神经元结构及雌激素受体表达水平的影响

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第三军医大学学报 2001年第3期23卷 318-320页

作者：常青应大君史常旭第三军医大学附属西南医院妇产科第三军医大学基础医学部解剖学教研室重庆400038

目的　观察应用雌激素后老年前期雌性大鼠视前内侧区、弓状核雌激素受体的变化及神经元超微结构的改变。方法采用免疫组织化学及电镜观察。结果　应用雌激素后视前内侧区、弓状核雌激素受体免疫反应 (ER IR)的表达明显下降 ,神经元核仁... 详细信息

目的　观察应用雌激素后老年前期雌性大鼠视前内侧区、弓状核雌激素受体的变化及神经元超微结构的改变。方法采用免疫组织化学及电镜观察。结果　应用雌激素后视前内侧区、弓状核雌激素受体免疫反应 (ER IR)的表达明显下降 ,神经元核仁边移、核膜皱折 ,突触丰富、突触内分泌小泡增多。结论　雌激素可调节下丘脑心血管中枢视前内侧区。

关键词：雌激素下丘脑雌激素受体超微结构老年期雌性大鼠

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PCR-SSCP分析Q热立克次体中国分离株16S-23SrDNA基因间区

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第三军医大学学报 2001年第11期23卷 1312-1314页

作者：胡廷徽温博海万泽生俞树荣第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038

目的　建立快速分析Q热立克次体分离株 16S 2 3SrDNA基因间区株间差异的PCR SSCP方法。方法　用半套式PCR扩增 7株中国分离株 (七医、新桥、雅安、李、YS 8、YS 9和YH 11)和 3株国际参考株 (九里、Henzerling和Grita)的 16S 2 3SrDNA基... 详细信息

目的　建立快速分析Q热立克次体分离株 16S 2 3SrDNA基因间区株间差异的PCR SSCP方法。方法　用半套式PCR扩增 7株中国分离株 (七医、新桥、雅安、李、YS 8、YS 9和YH 11)和 3株国际参考株 (九里、Henzerling和Grita)的 16S 2 3SrDNA基因间区 ,对扩增产物进行PCR SSCP分析。结果　 3株云南分离株 (YS 8,YS 9和YH 11)与其它 7株之间的差异较大。与此区域的序列分析结果一致。结论　Q热立克次体分离株的 16S 2 3SrRNA基因间区由于适应不同的地理环境可发生变异 ,PCR SSCP是快速分析这些变异的有效方法。

关键词：贝氏柯克斯体 16S-23S rDNA基因间区 PCR-SSCP 中国分离株株间差异

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