检索结果-内蒙古大学图书馆

分析化学 2012年第4期40卷 551-555页

作者：蒋凤杨军王振宇胡宁郑小林谢琳杨忠陈洁重庆大学生物工程学院生物流变科学与技术教育部重点实验室第三军医大学大坪医院野战外科研究所眼科第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆医科大学附属儿童医院儿童营养研究中心

利用旋转蒸发法制作基于大豆卵磷脂的一种大型脂质体,在微电极阵列芯片上进行脂质体电融合实验研究。在电融合过程中,利用介电电泳力实现脂质体在微流控芯片中的排队,再利用高场强的电脉冲使脂质体膜发生可逆性电穿孔,在持续的介电电泳... 详细信息

利用旋转蒸发法制作基于大豆卵磷脂的一种大型脂质体,在微电极阵列芯片上进行脂质体电融合实验研究。在电融合过程中,利用介电电泳力实现脂质体在微流控芯片中的排队,再利用高场强的电脉冲使脂质体膜发生可逆性电穿孔,在持续的介电电泳力作用下,使穿孔的脂质体实现融合。芯片上脂质体的融合率可以达到20%左右。而且,玻璃基底材料和低深宽比的通道结构更有利于脂质体融合过程的观察与控制。

关键词：微流控脂质体介电电泳电融合微电极

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基于薄膜电极的细胞电融合芯片

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高等学校化学学报 2012年第8期33卷 1698-1702页

作者：张小玲杨军胡宁侯文生郑小林谢琳杨忠陈洁重庆大学生物工程学院生物流变科学与技术教育部重点实验室重庆400030 第三军医大学大坪医院野战外科研究所眼科重庆400042 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 重庆医科大学附属儿童医院儿童营养研究中心重庆400014

构建了一种薄膜电极阵列结构的细胞电融合芯片,通过多聚物微通道底/顶层凸齿状的微电极,以及多聚物微通道侧壁上溅射形成的一层离散式金属薄膜电极,共同形成离散式"三明治"微电极结构.该微电极结构可在微通道内部形成与传统... 详细信息

构建了一种薄膜电极阵列结构的细胞电融合芯片,通过多聚物微通道底/顶层凸齿状的微电极,以及多聚物微通道侧壁上溅射形成的一层离散式金属薄膜电极,共同形成离散式"三明治"微电极结构.该微电极结构可在微通道内部形成与传统凸齿状电极相似的非均匀分布的梯度电场,通过介电电泳效应进行细胞控制及排队.利用多聚物在芯片上填充了传统凸齿状电极的凹陷区,克服了细胞在凹陷区无法有效排队与融合的缺点.在芯片上利用K562细胞开展了基于介电电泳效应的细胞排队实验及基于可逆性电穿孔效应的电融合实验,结果表明该芯片能够较好地实现细胞排队及融合,融合所需控制电压低至10 V左右.细胞排队率达99%以上,几乎无细胞在绝缘物填充区(传统凸齿电极芯片的凹陷区)滞留,细胞两两排队高于60%,细胞融合效率约为40%,比传统的细胞电融合方法和凸齿电极芯片有较大提高.

关键词：薄膜电极细胞电融合微流控芯片排队电穿孔

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RyR3介导ER钙释放参与少突胶质细胞髓鞘成熟的调控作用研究

RyR3介导ER钙释放参与少突胶质细胞髓鞘成熟的调控作用研究

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中国解剖学会2012年年会

作者：王凌云李红丽田衍平汪云牛建钦肖岚第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室、发育生物学教研室

近年众多实验证实钙信号参与髓鞘发育与损伤等过程。Ryanodine受体（RyR）作为一类跨内质网（ER）膜钙通道蛋白,是细胞内Ca释放的重要通道,但对于RyR在少突前体祖细胞（OPCs）的分化和少突胶质细胞（OLs）髓鞘形成的过程中的功能意义及... 详细信息

近年众多实验证实钙信号参与髓鞘发育与损伤等过程。Ryanodine受体（RyR）作为一类跨内质网（ER）膜钙通道蛋白,是细胞内Ca释放的重要通道,但对于RyR在少突前体祖细胞（OPCs）的分化和少突胶质细胞（OLs）髓鞘形成的过程中的功能意义及调控作用迄今了解很少。本实验采用体外纯化培养OPCs/OLs体系,应用活细胞钙成像,结合Western blotting

关键词：钙信号少突胶质细胞钙释放

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NCX3在脑损伤后白质区的表达变化及对髓鞘形成影响的实验研究

NCX3在脑损伤后白质区的表达变化及对髓鞘形成影响的实验研究

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中国解剖学会2012年年会

作者：田衍平李红丽刘淑丹蔡其燕何扬涛肖岚第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室、发育生物学教研室

少突胶质细胞（Oligodendrocyte,OLs）是中枢神经系统（CNS）的髓鞘形成细胞,髓鞘发育异常、脱髓鞘既是CNS疾病导致的后果,也是引起多种CNS疾病发生的原因。胞内Ca参与CNS的发育与损伤的调控机制一致备受关注。近年来研究发现新型钠钙... 详细信息

少突胶质细胞（Oligodendrocyte,OLs）是中枢神经系统（CNS）的髓鞘形成细胞,髓鞘发育异常、脱髓鞘既是CNS疾病导致的后果,也是引起多种CNS疾病发生的原因。胞内Ca参与CNS的发育与损伤的调控机制一致备受关注。近年来研究发现新型钠钙交换体家族蛋白3(Na/Ca exchangers,NCX3)对OLs内钙稳态的调节起重要作用。然而,NCX3在

关键词：髓鞘形成白质区

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氯乙烯诱导小鼠胚胎神经管发育畸形的研究

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第三军医大学学报 2010年第2期32卷 159-163页

作者：何乐杨君杰彭玉立王景鹏秦茂林李红丽第三军医大学学员旅7队重庆400038 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室发育生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的观察孕早期不同剂量氯乙烯(VC)染毒后胎鼠神经系统发育以及神经上皮细胞增殖和凋亡的变化情况,明确VC对神经系统发育的致畸作用。方法将孕鼠21只按完全随机设计分组法分为实验组和对照组,实验组分别用不同剂量的VC对孕6.5 d的小鼠... 详细信息

目的观察孕早期不同剂量氯乙烯(VC)染毒后胎鼠神经系统发育以及神经上皮细胞增殖和凋亡的变化情况,明确VC对神经系统发育的致畸作用。方法将孕鼠21只按完全随机设计分组法分为实验组和对照组,实验组分别用不同剂量的VC对孕6.5 d的小鼠进行腹腔染毒,对照组注射花生油,均于E12.5取胚胎。观察胎鼠的表观发育情况,计算胚胎畸形率以及神经系统异常的发生率。运用PCNA免疫组织化学技术和TUNEL染色技术检测并观察神经管上皮细胞的增殖及其凋亡的变化。结果①中剂量VC组胎鼠活胎率下降,活胎中畸胎发生率高达51%,其中神经管畸形发生率占40%,与正常对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);高剂量VC组胎鼠活胎率仅占55%,活胎中畸胎率明显增高占71%,其中神经管畸形发生率占50%,与正常对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。②中剂量和高剂量VC组胚胎神经管上皮厚薄不一致;高剂量组神经管多数呈明显未闭合状,神经管周围的间充质细胞肿胀,轮廓不清。③正常小鼠神经管神经上皮内可见PCNA阳性细胞与TUNEL阳性细胞分布;实验组各型阳性细胞分布与对照组相似,但随着染毒剂量的增加,PCNA阳性细胞表达减少,而TUNEL阳性细胞表达增多。结论孕早期一定剂量氯乙烯染毒可导致胚胎畸形率升高,神经管畸形率也相应上升。氯乙烯主要可抑制神经上皮细胞的增殖,诱导细胞凋亡发生增多,导致增殖与凋亡比例失调。

关键词：氯乙烯神经管畸形增殖凋亡

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BAT2L蛋白在大鼠脑内的发育学表达研究

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第三军医大学学报 2010年第9期32卷 922-925页

作者：刘运来李红丽孙榆罗雪董家鸿第三军医大学西南医院全军肝胆外科研究所重庆400038 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室发育生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的检测BAT2L蛋白在大鼠脑内的发育学表达情况。方法分别采用Western blot、免疫组化、免疫荧光技术检测BAT2L蛋白在胚胎18d,出生1、7、15d,成年不同时期大鼠脑内的表达、分布、定位情况。结果①Western blot结果显示,BAT2L在胚胎18d,... 详细信息

目的检测BAT2L蛋白在大鼠脑内的发育学表达情况。方法分别采用Western blot、免疫组化、免疫荧光技术检测BAT2L蛋白在胚胎18d,出生1、7、15d,成年不同时期大鼠脑内的表达、分布、定位情况。结果①Western blot结果显示,BAT2L在胚胎18d,出生1、7d大鼠脑内有高水平表达,而出生15d和成年则表达水平较低。②免疫组化、免疫荧光检测其在大鼠脑内的分布、定位情况:结果显示脑内阳性着色部位为神经元的细胞膜、细胞质,而细胞核、细胞外间质不着色;阳性神经元广泛分布于各个时期的大鼠大脑皮质、小脑皮质、海马、丘脑等部位;阳性神经元的形态在新生阶段和成年大鼠有明显差异,新生大鼠脑组织中部分神经元的突起及分支呈强阳性着色,而成年大鼠神经元突起几乎不着色。结论BAT2L蛋白特异性表达于大鼠大脑的神经元胞体、胞膜及突起中。

关键词：中枢神经系统发育轴突生长

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利用DNA免疫技术制备抗登革2型病毒NS2B蛋白多克隆抗体

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第三军医大学学报 2010年第4期32卷 327-330页

作者：刘丽梅陈宗涛高娜田衍平陈炜张俊磊王嘉丽安静第三军医大学西南医院病理学研究所重庆400038 第三军医大学基础医学部微生物学教研室、重庆市微生物工程实验室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室、重庆市神经科学研究所重庆400038 首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

目的构建登革2型病毒(dengue virus serotype2,DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。方法PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染... 详细信息

目的构建登革2型病毒(dengue virus serotype2,DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。方法PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染Vero细胞,检测目标蛋白的表达。用该表达质粒免疫BALB/c小鼠,制备抗NS2B抗血清。结果成功构建真核表达重组质粒pCAGGS-P7/NS2B,该重组质粒具有良好的免疫原性,免疫小鼠后所获的抗血清,抗体效价达1∶3200,Western blot和间接免疫荧光证实抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。结论通过DNA免疫所制备小鼠抗DV2-NS2B抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。

关键词：登革热病毒病毒非结构蛋白质类 NS2B 小鼠近交BALBC

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慢性癫痫大鼠脑组织GAT-1的表达变化及其与星形胶质细胞的相关性

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西南国防医药 2010年第6期20卷 605-607,698页

作者：胡远兵李红丽梁义杨忠武警四川总队医院成都分院神经内科成都610041 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室第三军医大学神经生物学教研室

目的研究γ-氨基丁酸转运体-1(GAT-1)与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)在戊四氮点燃的慢性癫痫大鼠脑中的变化。方法采用免疫组化技术分别标记正常SD大鼠和戊四氮点燃的慢性癫痫大鼠发作后海马及外侧皮质区GAT-1和GFAP,结合Western blot实验结... 详细信息

目的研究γ-氨基丁酸转运体-1(GAT-1)与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)在戊四氮点燃的慢性癫痫大鼠脑中的变化。方法采用免疫组化技术分别标记正常SD大鼠和戊四氮点燃的慢性癫痫大鼠发作后海马及外侧皮质区GAT-1和GFAP,结合Western blot实验结果分析其变化关系。结果 GAT-1和GFAP在慢性癫痫发作后,均有不同程度的表达增高,GAT-1增高更明显。结论 GAT-1和GFAP的同方向变化证明,在慢性癫痫发作后,GAT-1的表达增高并不只是由于星形胶质细胞的增生所致。

关键词： γ-氨基丁酸转运体-1 癫痫胶质纤维酸性蛋白戊四氮

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CHO细胞中稳定表达人整合素β3对登革2型病毒感染的影响

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第三军医大学学报 2009年第2期31卷 98-100页

作者：张俊磊高娜陈炜陈宗涛徐小峰安静第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 首都医科大学微生物学教研室北京100069

目的检测CHO细胞中稳定表达人整合素β3对登革2型病毒(Dengue virus serotype 2,DV2)感染的影响。方法将表达人整合素β3的质粒转染CHO细胞,通过G418筛选、流式细胞学检测和间接免疫荧光实验,建立稳定表达整合素β3的CHO细胞株;利用该... 详细信息

目的检测CHO细胞中稳定表达人整合素β3对登革2型病毒(Dengue virus serotype 2,DV2)感染的影响。方法将表达人整合素β3的质粒转染CHO细胞,通过G418筛选、流式细胞学检测和间接免疫荧光实验,建立稳定表达整合素β3的CHO细胞株;利用该细胞株进行感染实验,检测人整合素β3稳定表达对DV2易感性的影响。结果共获得了C9、C10、F8和H6 4个高表达整合素β3的细胞克隆,其中克隆F8中整合素β3的表达水平最高,是对照组的1.89倍。感染实验结果显示,进入整合素β3高表达细胞株的病毒数量均有所增高,增高的比例与整合素β3的表达增高趋势基本一致,进入F8细胞株的病毒量最高,是对照细胞的2.63倍,说明整合素β3有助于DV2进入细胞。结论在CHO细胞中外源性表达整合素β3可以提高DV2的感染率。

关键词：登革病毒整合素β3 CHO细胞

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登革2型病毒NS1-NS2a基因真核表达载体的构建及鉴定

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第三军医大学学报 2009年第6期31卷 557-559页

作者：陈炜王嘉丽高娜田衍平陈宗涛徐小峰张俊磊刘丽梅江雯安静第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

目的构建登革2型病毒NS1-NS2a基因真核表达质粒。方法RT-PCR扩增NS1-NS2a基因片段后,将其克隆入真核表达载体pReceiver-M01a;通过PCR、酶切、测序和间接免疫荧光染色鉴定重组质粒。结果经PCR扩增、酶切和测序验证,重组质粒构建正确,命名... 详细信息

目的构建登革2型病毒NS1-NS2a基因真核表达质粒。方法RT-PCR扩增NS1-NS2a基因片段后,将其克隆入真核表达载体pReceiver-M01a;通过PCR、酶切、测序和间接免疫荧光染色鉴定重组质粒。结果经PCR扩增、酶切和测序验证,重组质粒构建正确,命名为pRe-NS1-NS2a;重组质粒转染Vero细胞后,间接免疫荧光染色显示细胞质中有登革2型病毒特异性蛋白的表达。结论成功构建了真核表达质粒pRe-NS1-NS2a。

关键词：登革2型病毒 NS1-NS2a基因真核表达

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