检索结果-内蒙古大学图书馆

消化外科 2006年第3期5卷 201-205页

作者：张红军于彬梅峰周德山第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室发育生物学研究室重庆400038

目的研究Cajal样细胞和一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)表达阳性神经元在成年豚鼠Oddi括约肌(sphincter of Oddi,SO)的分布。方法成年豚鼠SO冷冻切片,c-Kit免疫细胞化学和NADPH-黄递酶组织化学双重染色。结果SO横切面环行平滑... 详细信息

目的研究Cajal样细胞和一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)表达阳性神经元在成年豚鼠Oddi括约肌(sphincter of Oddi,SO)的分布。方法成年豚鼠SO冷冻切片,c-Kit免疫细胞化学和NADPH-黄递酶组织化学双重染色。结果SO横切面环行平滑肌层内可见少量c-Kit阳性细胞,胞体呈梭形,两端伸出细长的突起。纵切面SO的两个壁分别为:外侧壁和十二指肠壁内SO壁,前者与肠壁结构类似,在深肌丛和肌间神经丛周围可见较多的c-Kit阳性细胞;而十二指肠壁内SO壁的肌层内存在大量c-Kit阳性细胞和突起,其形态与肠壁肌层内Cajal细胞相似。NADPH-黄递酶组织化学染色可见NOS表达阳性神经元广泛分布于SO的肌间神经丛和平滑肌内。c-Kit免疫细胞化学和NADPH-黄递酶组织化学双重染色虽未发现二者的共存,但可见c-Kit阳性细胞及突起存在于NOS表达阳性神经元的附近。结论豚鼠SO内存在的Cajal样细胞可能参与SO自主节律性运动的调控,可能是NOS表达阳性神经元对SO运动发挥调节作用的靶细胞。

关键词：神经元 Oddi 括约肌 Cajal细胞 NADPH-黄递酶 c-Kit 豚鼠

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肾母细胞瘤过度表达基因促进人神经干细胞增殖和向神经元分化的实验观察(英文)

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中国临床康复 2005年第5期9卷 202-204,i004页

作者：李成仁李巍陈德英蔡文琴苏炳银解放军第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆市400038 解放军第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市400038

背景:肾母细胞瘤过度表达基因(NOV)编码的NOV蛋白是一种胰岛素样生长因子(insulin-likegrowthfactor,IGF)结合蛋白,它对人神经干细胞的增殖和分化有什么影响作用呢?目的:探讨NOV蛋白对人神经干细胞(HNSCs)增殖和分化的影响。设计:以细... 详细信息

背景:肾母细胞瘤过度表达基因(NOV)编码的NOV蛋白是一种胰岛素样生长因子(insulin-likegrowthfactor,IGF)结合蛋白,它对人神经干细胞的增殖和分化有什么影响作用呢?目的:探讨NOV蛋白对人神经干细胞(HNSCs)增殖和分化的影响。设计:以细胞为研究对象,单因素方差分析实验研究。单位:一所军医大学组织学与胚胎学教研室和神经生物学教研室。材料:实验在解放军第三军医大学组织学与胚胎学教研室完成。对象为10～14周人胚大脑皮质培养的HNSCs。干预:NOV基因重组质粒转染COS-7细胞,收集COS-7细胞和NOV基因修饰COS-7细胞的条件培养液(COS-CM和NOV-CM),作用于培养的HNSCs。主要观察指标:3H-TdR掺入液闪检测HNSCs的增殖,免疫细胞化学和流式细胞仪检测HNSCs的分化。结果:COS-CM和NOV-CM均能明显促进HNSCs对3H-TdR的摄入,其中NOV-CM组的1/min比COS-CM组要高(P<0.05),说明NOV-CM中含有促进HNSCs增殖的成分,另外NOV-CM的促细胞增殖作用具有一定的量效关系;免疫细胞化学和流式细胞仪结果显示,在NOV-CM组内有较多的NF-200阳性细胞,在对照组和COS-CM组可见到大量GFAP阳性细胞。结论:NOV蛋白可能具有促进HNSCs增殖和向神经元分化的作用。

关键词：基因,肾母细胞瘤干细胞胚胎/细胞学神经系统细胞分化,细胞分裂

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DAT1基因在大鼠神经干细胞分化中作用的初步研究

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第三军医大学学报 2005年第7期27卷 588-591页

作者：惠玲刘建军姚忠祥蔡文琴第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的　研究DAT1转染后不同诱导条件下DAT1在神经干细胞的表达以及DAT1过表达对神经干细胞分化的影响。方法　构建真核表达载体pEGFP C1 DAT1、pcDNA4/hisA DAT1,采用lipofectamine2 0 0 0脂质体介导法转染培养的胚胎大鼠皮层神经干细胞(... 详细信息

目的　研究DAT1转染后不同诱导条件下DAT1在神经干细胞的表达以及DAT1过表达对神经干细胞分化的影响。方法　构建真核表达载体pEGFP C1 DAT1、pcDNA4/hisA DAT1,采用lipofectamine2 0 0 0脂质体介导法转染培养的胚胎大鼠皮层神经干细胞(neuralstemcells ,NSCs) ,免疫组化染色,荧光显微镜观察。结果　DAT1瞬时转染神经干细胞后的诱导分化实验表明,DAT1转染可使NSCs分化为Mash 1阳性的细胞增加,DAT1的高表达有促进NSCs向神经元方向分化的作用;血清诱导分化及自然分化后DAT1在分化细胞中的表达定位发生了变化,同时这种变化也反映在NSCs分化的不同阶段。结论　不同的外界诱导因素或在NSCs分化的不同时期,DAT1可能通过与不同的转录因子的结合,从而在不同的信号通路中影响NSCs的分化。

关键词： DAT1 神经干细胞分化大鼠

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小鼠视神经发育损伤相关基因的凝聚性分层聚类分析

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第三军医大学学报 2005年第18期27卷 1848-1852页

作者：刘运来黄明辉伍亚舟袁碧波姚忠祥孙榆张彦琦杨梦苏蔡文琴第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 香港城市大学生物化学系第三军医大学高原军事医学系卫生统计学教研室重庆400038

目的对前期工作中采用高密度基因芯片技术筛选到的视神经发育、损伤相关基因进行聚类分析,以了解这些基因之间的相互联系,并根据已知功能和CNS轴突生长、导向相关的基因对部分未知功能基因进行功能预测.方法用Gene Cluster软件对筛选到... 详细信息

目的对前期工作中采用高密度基因芯片技术筛选到的视神经发育、损伤相关基因进行聚类分析,以了解这些基因之间的相互联系,并根据已知功能和CNS轴突生长、导向相关的基因对部分未知功能基因进行功能预测.方法用Gene Cluster软件对筛选到的视神经发育、损伤相关基因进行凝聚性分层聚类,并对已知功能和CNS轴突生长、导向相关的Ptn、Efnb3所在的小组进行进一步的分析.结果 1 033个符合聚类条件的基因根据聚类的树型图分成6类,其中B类基因的表达模式和小鼠外侧膝状体的发育过程非常类似,它们可能是视神经发育的关键基因;5个功能完全未知的基因Mm.28443、Mm.9671、Mm.25504、Mm.160640、Mm.182895和Ptn基因聚类在同一个小组中,它们和Ptn基因的相关性非常高,Pearson相关系数为0.979～0.996,这些基因我们暂时作为神经轴突生长、导向相关的候选基因;Lamr1基因和Efnb3基因的相似性很高,结合文献,推测Lamr1及其配体是视神经发育的重要轴突导向分子.结论新的轴突导向因子的发现能为基因工程治疗CNS损伤提供潜在的靶基因.

关键词：中枢神经系统发育损伤轴突导向聚类分析

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DAT1相互作用蛋白的筛选

DAT1相互作用蛋白的筛选

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中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会

作者：惠玲季朝能蔡文琴顾少华应康谢毅毛裕民第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室复旦大学生命科学院遗传所第三军医大学基础医学部神经生物学教研室复旦大学生命科学院遗传所复旦大学生命科学院遗传所复旦大学生命科学院遗传所复旦大学生命科学院遗传所

＜正＞目的:DAT1是LMO家族成员之一,在多巴胺刺激星形胶质细胞时上调表达,目前所知在神经系统有广泛表达,但具体作用未知。本文拟利用酵母双杂交系统筛选人胎脑组织中能与多巴胺相关转录因子DAT1的LIM2相互作用的蛋白质,以初步了解DAT1... 详细信息

＜正＞目的:DAT1是LMO家族成员之一,在多巴胺刺激星形胶质细胞时上调表达,目前所知在神经系统有广泛表达,但具体作用未知。本文拟利用酵母双杂交系统筛选人胎脑组织中能与多巴胺相关转录因子DAT1的LIM2相互作用的蛋白质,以初步了解DAT1的功能。方法:构建酵母双杂交诱饵质粒pLexA-LIM2,筛选人胎脑cDNA文库,并用酵母交配试验初步验证。结果:（1）果表明融合质粒pLexA-LIM2克隆成功。将此pLexA-LIM2质粒用LiAc法转化酵母双杂交报告菌株EGY48（p8op-LacZ）,将阳性的菌落涂布在加有X-Gal的SD/Gal/Raf/-His/-Ura营养缺陷型诱导平板,

关键词： DAT1 蛋白筛选 cDNA文库

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神经干细胞移植促进脊髓损伤大鼠脊髓功能的恢复

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中国临床康复 2004年第29期8卷 6364-6366,i004页

作者：李成仁李巍蔡文琴陈德英苏炳银解放军第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆市400038 解放军第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市400038

目的:观察神经干细胞移植对脊髓损伤大鼠功能恢复的作用。方法:30只Wistar大鼠随机分为对照组、损伤组和移植组,每组10只;损伤组和移植组制作成平面的脊髓全横断模型,将培养的大鼠L4NSCs悬液注入移植组损伤脊髓处,损伤组注射等量的生理... 详细信息

目的:观察神经干细胞移植对脊髓损伤大鼠功能恢复的作用。方法:30只Wistar大鼠随机分为对照组、损伤组和移植组,每组10只;损伤组和移植组制作成平面的脊髓全横断模型,将培养的大鼠L4NSCs悬液注入移植组损伤脊髓处,损伤组注射等量的生理盐水。术后个2月,采用BBB评分、皮层体感诱发电位CSEP和辣根过氧化物酶()()逆行示踪技术观察大鼠脊髓运动和传导功能的恢复程度。HRP结果:术后个月2BBB评分损伤组、移植组大鼠有所恢复,但都未达到正常水平,其中移植组的大鼠恢复较好,评分较高,与损伤组有显著性差异。脊髓损伤后,损伤组、移植组的CSEP波消失,术后2个月移植组的波形有所恢复,但潜伏期延长。对照组脊髓前角可见到许多HRP标记阳性神经元,损伤组未见阳性神经元,移植组可见有阳性神经元,但数目较对照组少。结论:NSCs脊髓内移植能促进损伤脊髓运动和传导功能的部分恢复。

关键词：神经干细胞移植大鼠脊髓损伤对照组阳性神经元术后 BBB 结论等量培养

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NT3基因的克隆、鉴定及高表达胚胎干细胞的构建与筛选

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第三军医大学学报 2004年第9期26卷 763-766页

作者：钟小林秦茂林第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的　从小鼠肝脏组织中克隆神经营养因子NT3基因 ,在此基础上构建能稳定表达NT3的MESPU3 5细胞株。方法　RT PCR扩增目的基因 ,克隆入穿梭载体pExchange 1neo ,酶切及测序鉴定。重组载体转染MESPU3 5胚胎干细胞株 ,G418长期筛选 ,RT PC... 详细信息

目的　从小鼠肝脏组织中克隆神经营养因子NT3基因 ,在此基础上构建能稳定表达NT3的MESPU3 5细胞株。方法　RT PCR扩增目的基因 ,克隆入穿梭载体pExchange 1neo ,酶切及测序鉴定。重组载体转染MESPU3 5胚胎干细胞株 ,G418长期筛选 ,RT PCR检测转染细胞NT3水平。结果　RT PCR得到长度为 777bp的基因片段 ,克隆后酶切鉴定正确 ,测序结果经BLAST对比 ,与GenBank中小鼠NT 3序列完全一致。成功构建了NT3真核表达载体及高表达细胞株。结论　从小鼠肝脏组织中PCR克隆了正确的NT3基因 ,所获得的NT3稳定表达MESPU3 5

关键词： NT3 克隆胚胎干细胞小鼠

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小鼠脑发育中CDK5 mRNA表达变化的研究

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第三军医大学学报 2004年第24期26卷 2223-2226页

作者：李红丽杨忠李泽桂陈活彝蔡文琴第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 香港中文大学医学院解剖系

目的　观察周期素依赖性蛋白激酶 5 (CDK5 )mRNA在脑发育中的表达与分布。方法　采用胚胎期至老年期小鼠全胚胎及脑切片的原位杂交染色。结果　①全胚胎原位杂交染色发现脑内CDK5mRNA从胚胎 10 5d(E10 .5 )开始表达 ,主要分布于神经上... 详细信息

目的　观察周期素依赖性蛋白激酶 5 (CDK5 )mRNA在脑发育中的表达与分布。方法　采用胚胎期至老年期小鼠全胚胎及脑切片的原位杂交染色。结果　①全胚胎原位杂交染色发现脑内CDK5mRNA从胚胎 10 5d(E10 .5 )开始表达 ,主要分布于神经上皮的套层细胞内 ;②脑切片的原位杂交染色观察到从E14到成年期脑内均见CDK5mRNA阳性信号 ,主要定位于神经元的胞浆与核周 ,于新生期前后表达达高峰 ;分布于包括大脑皮层、海马、丘脑、下丘脑、小脑及许多神经核团。在老年期上述区域CDK5表达均有减弱 ,部分区域呈阴性。结论　表明脑内CDK5作用贯穿了整个脑的发育阶段 ,且主要参与了神经系统的早期发育 ;成年后CDK5可能继续保持对某些区域中神经元的功能调节。

关键词：周期素依赖性蛋白激酶5(CDK5)mRNA 脑发育全胚胎原位杂交小鼠

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PD大鼠纹状体提取液诱导中脑神经干细胞分化为多巴胺能神经元的研究

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第三军医大学学报 2004年第1期26卷 18-21页

作者：余小强阮怀珍蔡文琴范晓棠姚忠祥杨辉第三军医大学基础医学部神经生物学教研室第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 第三军医大学新桥医院神经外科重庆400037

目的　研究PD大鼠纹状体提取液诱对中脑神经干细胞的诱导分化作用。方法　①体外分离、培养大鼠胚胎的中脑神经干细胞 ,并诱导其分化 ,巢素 (Nestin)、神经丝 2 0 0 (NF 2 0 0 )、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)免疫组化染色鉴定。②加入纹... 详细信息

目的　研究PD大鼠纹状体提取液诱对中脑神经干细胞的诱导分化作用。方法　①体外分离、培养大鼠胚胎的中脑神经干细胞 ,并诱导其分化 ,巢素 (Nestin)、神经丝 2 0 0 (NF 2 0 0 )、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)免疫组化染色鉴定。②加入纹状体提取液后 ,分化细胞用抗酪氨酸羟化酶 (TH)免疫组化鉴定 ,并用流式细胞技术检测分化比例。结果　①从大鼠胚胎的腹侧中脑部位分离获得了大量未分化、呈巢状悬浮生长的细胞团 ,且能分化为神经元和神经胶质细胞。②经纹状体提取液诱导后 ,能够分化出多巴胺能神经元 ,分化比例达 2 0 %左右。

关键词：中脑神经干细胞纹状体提取液分化

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移植诱导中脑NSCs分化的多巴胺能神经元对PD大鼠治疗作用的实验研究

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第三军医大学学报 2004年第9期26卷 749-752页

作者：余小强阮怀珍蔡文琴范晓棠姚忠祥杨辉第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 第三军医大学新桥医院神经外科重庆400037

目的　研究移植诱导中脑神经干细胞分化出的多巴胺能神经元对PD大鼠的治疗作用。方法　利用纹状体提取液诱导大鼠胚胎中脑神经干细胞 ,使其部分分化为酪氨酸羟化酶 (TH)阳性的多巴胺能神经元 ,继而把分化后的细胞移植到PD大鼠的纹状体... 详细信息

目的　研究移植诱导中脑神经干细胞分化出的多巴胺能神经元对PD大鼠的治疗作用。方法　利用纹状体提取液诱导大鼠胚胎中脑神经干细胞 ,使其部分分化为酪氨酸羟化酶 (TH)阳性的多巴胺能神经元 ,继而把分化后的细胞移植到PD大鼠的纹状体内 ,免疫组化法证实移植细胞的存活并以诱发旋转行为的改善来观察其治疗作用。结果　纹状体提取液能够诱导中脑神经干细胞分化出多巴胺能神经元而且这种经诱导后产生的细胞能够在PD大鼠体内长期存活并改善阿卟吗啡诱导的旋转行为。

关键词：帕金森病神经干细胞神经移植

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