检索结果-内蒙古大学图书馆

分析化学 2012年第3期40卷 331-338页

作者：王振宇杨军胡宁郑小林杨忠重庆大学生物工程学院生物流变科学与技术教育部重点实验室第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室

细胞电融合芯片技术是最近十几年来发展迅速的一种细胞融合方法,它可以广泛用于遗传学、动植物远缘杂交育种、发育生物学、免疫学、医药、食品以及农业等领域的基础研究和应用开发。由于其不仅具有可控性强、操作简便、对细胞无毒害等优... 详细信息

细胞电融合芯片技术是最近十几年来发展迅速的一种细胞融合方法,它可以广泛用于遗传学、动植物远缘杂交育种、发育生物学、免疫学、医药、食品以及农业等领域的基础研究和应用开发。由于其不仅具有可控性强、操作简便、对细胞无毒害等优点,还比传统细胞电融合技术更安全、快捷、高效、便携、集成度高,而且便于实验观察,样本消耗少,因此,在国内外广受关注。本文综述了细胞电融合芯片技术的基本原理、实现方法、研究进展,并对其未来发展作了展望。

关键词：细胞电融合芯片微电极微流控综述

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嗅球成鞘细胞的培养纯化及与功能相关的形态学研究

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第三军医大学学报 2003年第17期25卷 1540-1543页

作者：袁碧波蔡文琴孙榆吴喜贵胡志安第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

目的　培养纯化嗅球成鞘细胞 (Olfactoryensheathingcells ,OECs)并对其进行免疫细胞化学研究 ,探讨其相关功能。方法　分离嗅球嗅神经纤维层获得嗅球成鞘细胞 ,采用免疫溶解法对培养的嗅球成鞘细胞进行纯化 ,并利用免疫细胞化学方法和... 详细信息

目的　培养纯化嗅球成鞘细胞 (Olfactoryensheathingcells ,OECs)并对其进行免疫细胞化学研究 ,探讨其相关功能。方法　分离嗅球嗅神经纤维层获得嗅球成鞘细胞 ,采用免疫溶解法对培养的嗅球成鞘细胞进行纯化 ,并利用免疫细胞化学方法和电镜技术进行形态学观察。结果　通过纯化可以使培养的OECs纯度达 95 %以上 ,免疫细胞化学显示OECs表达P75NGFr、GAP43、N CAM和GFAP ;电镜结果显示OECs呈分叶状核 ,胞浆电子致密 ,胞膜有伪足样皱褶。结论　免疫溶解法可以较好的纯化OECs并保持其良好的生长状态 ,培养的OECs表达P75NGFr、GAP43、N

关键词：嗅球成鞘细胞细胞培养电镜技术免疫细胞化学

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登革病毒在中枢神经系统传播机制的研究

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第三军医大学学报 2002年第4期24卷 396-400页

作者：周德山安静王嘉丽第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038

目的　分析登革 (DEN)病毒感染后中枢神经系统 (CNS)的病理变化及病毒在CNS内的传播方式。方法　用 2型登革病毒 (DEN 2 )对严重联合免疫缺陷 (SCID)小鼠进行脑内接种 ,电镜观察感染后不同时间 ,DEN病毒在CNS的分布、增殖及感染细胞的... 详细信息

目的　分析登革 (DEN)病毒感染后中枢神经系统 (CNS)的病理变化及病毒在CNS内的传播方式。方法　用 2型登革病毒 (DEN 2 )对严重联合免疫缺陷 (SCID)小鼠进行脑内接种 ,电镜观察感染后不同时间 ,DEN病毒在CNS的分布、增殖及感染细胞的病变特点。结果　在感染早期 ,脊髓中央管上皮细胞胞浆内可见数量不等的病毒颗粒 ,随着感染的进展 ,子代病毒主要分布在神经元的粗面内质网和高尔基体内。在感染晚期 ,典型的神经突触及有髓和无髓的神经纤维中均可见病毒颗粒 ,其中有些病毒颗粒有与突触前膜融合倾向。在感染过程中 ,被感染的神经元逐渐出现空泡变性 ,进而溶解、死亡。结论　经脑内接种的登革病毒可能通过脑脊液播散 ,侵入脊髓灰质 ,并在神经元内增殖 ;并且 ,除组织间隙外 ,从神经元到神经元的传播途径可能参与登革病毒在CNS内的传播。

关键词：登革病毒严重联合免疫缺陷小鼠神经元中枢神经系统

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经脑感染后登革病毒在小鼠脊髓分布特点的研究

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第三军医大学学报 2002年第4期24卷 401-403页

作者：安静周德山张俊磊第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038

目的　分析登革 (DEN)病毒在中枢神经系统 (CNS)内的生长规律和分布特点。方法　用 2型登革病毒 (DEN 2 )对严重联合免疫缺陷 (SCID)小鼠进行脑内接种 ,应用空斑法和免疫荧光染色分别检测感染后小鼠CNS和血清中的病毒滴度及病毒抗原的... 详细信息

目的　分析登革 (DEN)病毒在中枢神经系统 (CNS)内的生长规律和分布特点。方法　用 2型登革病毒 (DEN 2 )对严重联合免疫缺陷 (SCID)小鼠进行脑内接种 ,应用空斑法和免疫荧光染色分别检测感染后小鼠CNS和血清中的病毒滴度及病毒抗原的分布。结果　感染后小鼠逐渐出现皮毛不整、脊柱侧凸及弛缓性麻痹。从感染后 3d到麻痹发生日 ,可在小鼠的脑皮质和脊髓中检测到滴度较高的DEN 2病毒 ,而血清中则检测不到病毒。免疫荧光染色显示DEN病毒抗原大量存在于大脑海马、基底核和脊髓灰质的神经元内。登革病毒抗原在感染早期和晚期在脊髓灰质的分布也存在差异。结论　感染后DEN在脊髓灰质内的分布不同提示脊髓不同部位的神经元对登革病毒的易感性可能不同。病毒在大脑、脊髓神经细胞内的增殖造成的细胞损害可能是登革病毒感染某些临床表现的病理基础。

关键词：登革病毒严重联合免疫缺陷小鼠脊髓脑感染

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肾母细胞瘤过度表达基因促进人神经干细胞增殖和向神经元分化的实验观察(英文)

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中国临床康复 2005年第5期9卷 202-204,i004页

作者：李成仁李巍陈德英蔡文琴苏炳银解放军第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆市400038 解放军第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市400038

背景:肾母细胞瘤过度表达基因(NOV)编码的NOV蛋白是一种胰岛素样生长因子(insulin-likegrowthfactor,IGF)结合蛋白,它对人神经干细胞的增殖和分化有什么影响作用呢?目的:探讨NOV蛋白对人神经干细胞(HNSCs)增殖和分化的影响。设计:以细... 详细信息

背景:肾母细胞瘤过度表达基因(NOV)编码的NOV蛋白是一种胰岛素样生长因子(insulin-likegrowthfactor,IGF)结合蛋白,它对人神经干细胞的增殖和分化有什么影响作用呢?目的:探讨NOV蛋白对人神经干细胞(HNSCs)增殖和分化的影响。设计:以细胞为研究对象,单因素方差分析实验研究。单位:一所军医大学组织学与胚胎学教研室和神经生物学教研室。材料:实验在解放军第三军医大学组织学与胚胎学教研室完成。对象为10～14周人胚大脑皮质培养的HNSCs。干预:NOV基因重组质粒转染COS-7细胞,收集COS-7细胞和NOV基因修饰COS-7细胞的条件培养液(COS-CM和NOV-CM),作用于培养的HNSCs。主要观察指标:3H-TdR掺入液闪检测HNSCs的增殖,免疫细胞化学和流式细胞仪检测HNSCs的分化。结果:COS-CM和NOV-CM均能明显促进HNSCs对3H-TdR的摄入,其中NOV-CM组的1/min比COS-CM组要高(P<0.05),说明NOV-CM中含有促进HNSCs增殖的成分,另外NOV-CM的促细胞增殖作用具有一定的量效关系;免疫细胞化学和流式细胞仪结果显示,在NOV-CM组内有较多的NF-200阳性细胞,在对照组和COS-CM组可见到大量GFAP阳性细胞。结论:NOV蛋白可能具有促进HNSCs增殖和向神经元分化的作用。

关键词：基因,肾母细胞瘤干细胞胚胎/细胞学神经系统细胞分化,细胞分裂

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神经干细胞分化前后基因表达变化的DNA微阵列分析

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第三军医大学学报 2003年第1期25卷 29-32页

作者：李巍杨忠 Lowrence 蔡文琴李成仁周德山第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 香港城市大学分子生物学教研室

目的　了解神经干细胞分化前后的差异表达基因 ,为神经干细胞的分化调控提供基础研究资料。方法　利用细胞培养、DNA微阵列技术等 ,检测了神经干细胞分化前后的差异表达基因。结果　检测到了 10 0 0多个差异表达基因 ,其中明显上调的基... 详细信息

目的　了解神经干细胞分化前后的差异表达基因 ,为神经干细胞的分化调控提供基础研究资料。方法　利用细胞培养、DNA微阵列技术等 ,检测了神经干细胞分化前后的差异表达基因。结果　检测到了 10 0 0多个差异表达基因 ,其中明显上调的基因 13 8个 ,明显下调的基因 179个 ,基因种类很多如细胞周期相关基因、发育与分化相关基因、受体与通道相关基因、细胞骨架相关基因、生长因子相关基因、原癌基因和抑癌基因、转录和翻译调节基因、ESTs、代谢调节、蛋白运输相关基因等。结论　大量基因参与了神经干细胞的分化调控 ,其确切调控机制。

关键词：细胞分化基因表达神经干细胞分化调控 DNA 微阵列

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大鼠缺血性脑损伤早期一氧化氮含量的变化及其细胞来源的研究

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第三军医大学学报 2003年第13期25卷 1168-1171页

作者：李红丽蔡文琴赵士福孙榆第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400037 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038 第三军医大学附属新桥医院神经外科重庆400037

目的　观察缺血性损伤后脑内一氧化氮 (Nitricoxide ,NO)含量的变化并确定NO的细胞来源。方法　采用短暂性全脑缺血再灌注模型 ,运用NO生化检测、NADPH 黄递酶组化、免疫荧光双标技术及图像分析等方法。结果　①脑内NO的浓度于缺血再灌... 详细信息

目的　观察缺血性损伤后脑内一氧化氮 (Nitricoxide ,NO)含量的变化并确定NO的细胞来源。方法　采用短暂性全脑缺血再灌注模型 ,运用NO生化检测、NADPH 黄递酶组化、免疫荧光双标技术及图像分析等方法。结果　①脑内NO的浓度于缺血再灌注后 12h后即升高 ,1～ 3d达高峰并持续至第 5天 ,此后逐步下降。②NDP阳性细胞数在缺血再灌注后 1d即达高峰 ,以颞叶皮质、海马与室周区明显 ;再灌注 14d后阳性细胞减少或消失。③脑缺血早期 ( 1～ 3d)NDP阳性细胞与GFAP免疫荧光阳性细胞少数有共存 ,仅占 10 %～ 15 %。结论　缺血性脑损伤早期NO的浓度增高。

关键词：脑缺血再灌注一氧化氮(NO) 胶质纤维酸性蛋白(GFAP) 大鼠

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维甲酸诱导神经管畸形发生过程中神经干细胞的变化研究

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第三军医大学学报 2003年第1期25卷 11-14页

作者：李红丽蔡文琴杨忠李泽桂李巍付晓岚第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038 第三军医大学高原军事医学系中心实验室重庆400038

目的　了解维甲酸 (Retinoicacid ,RA)诱导神经管缺陷 (Neuraltubedefect ,NTD)小鼠神经发育过程中神经干细胞的变化规律。方法　分别取不同胚胎时段及新生、成年的正常及NTD小鼠的神经组织 ,采用神经干细胞特异性抗原神经巢蛋白 (Nest... 详细信息

目的　了解维甲酸 (Retinoicacid ,RA)诱导神经管缺陷 (Neuraltubedefect ,NTD)小鼠神经发育过程中神经干细胞的变化规律。方法　分别取不同胚胎时段及新生、成年的正常及NTD小鼠的神经组织 ,采用神经干细胞特异性抗原神经巢蛋白 (Nestin)间接免疫荧光抗体标记和DNA定量荧光染色 ,以流式细胞术检测。结果　①正常小鼠神经组织中Nestin阳性细胞数目在E8.5d时呈高峰 ,此后逐步下降 ,新生期仍保持较高水平 ;NTD小鼠神经组织中Nestin阳性细胞数在胚胎各期均低于正常小鼠 ,尤以E8.5d下降显著 ;出生后与正常组无显著差别。②NTD小鼠胚胎期神经组织G0 G1 期细胞数百分比明显高于正常组 ,S期细胞数百分比则明显低于正常组。

关键词：维甲酸神经干细胞神经巢蛋白神经管缺陷流式细胞术细胞周期 NTD

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DAT1基因在大鼠神经干细胞分化中作用的初步研究

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第三军医大学学报 2005年第7期27卷 588-591页

作者：惠玲刘建军姚忠祥蔡文琴第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的　研究DAT1转染后不同诱导条件下DAT1在神经干细胞的表达以及DAT1过表达对神经干细胞分化的影响。方法　构建真核表达载体pEGFP C1 DAT1、pcDNA4/hisA DAT1,采用lipofectamine2 0 0 0脂质体介导法转染培养的胚胎大鼠皮层神经干细胞(... 详细信息

目的　研究DAT1转染后不同诱导条件下DAT1在神经干细胞的表达以及DAT1过表达对神经干细胞分化的影响。方法　构建真核表达载体pEGFP C1 DAT1、pcDNA4/hisA DAT1,采用lipofectamine2 0 0 0脂质体介导法转染培养的胚胎大鼠皮层神经干细胞(neuralstemcells ,NSCs) ,免疫组化染色,荧光显微镜观察。结果　DAT1瞬时转染神经干细胞后的诱导分化实验表明,DAT1转染可使NSCs分化为Mash 1阳性的细胞增加,DAT1的高表达有促进NSCs向神经元方向分化的作用;血清诱导分化及自然分化后DAT1在分化细胞中的表达定位发生了变化,同时这种变化也反映在NSCs分化的不同阶段。结论　不同的外界诱导因素或在NSCs分化的不同时期,DAT1可能通过与不同的转录因子的结合,从而在不同的信号通路中影响NSCs的分化。

关键词： DAT1 神经干细胞分化大鼠

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BC023882基因克隆及其对细胞周期的影响

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第三军医大学学报 2006年第11期28卷 1178-1180页

作者：秦茂林蔡文琴刘运来刘建军第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的获得基因BC023882全长真核表达载体及检测该基因对培养细胞生长的影响。方法利用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)扩增基因BC023882的编码区序列,克隆到pcDNA3.1(-)/Myc-H is(+)/lac Z真核表达载体中,构建基因BC023882的真核表达载体;... 详细信息

目的获得基因BC023882全长真核表达载体及检测该基因对培养细胞生长的影响。方法利用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)扩增基因BC023882的编码区序列,克隆到pcDNA3.1(-)/Myc-H is(+)/lac Z真核表达载体中,构建基因BC023882的真核表达载体;脂质体法转染小鼠胚胎成纤维细胞和COS-7细胞,并且通过细胞生长曲线测定和流式细胞仪观察该基因对细胞生长的影响。结果酶切并测序鉴定证明获得的重组子符合基因BC023882的编码序列;转染该基因后细胞增殖减慢,细胞增殖指数减低。结论成功构建了基因BC023882的真核表达载体,并且观察到该基因对细胞生长起到一定的抑制作用。

关键词：基因克隆细胞 Golgins相关蛋白家族

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