检索结果-内蒙古大学图书馆

免疫学杂志 2008年第2期24卷 234-237页

作者：徐小峰田衍平陈宗涛陈炜江雯刘丽梅安静第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆400038 首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

目的获得Rab8纯化蛋白,制备多克隆抗体,为深入研究Rab8在病毒感染宿主细胞过程中的作用奠定基础。方法首先从HepG2细胞中克隆Rab8基因,然后从Rab8质粒中亚克隆Rab8C端编码122个氨基酸的基因片段,构建Rab8与6His的融合蛋白原核表达质粒... 详细信息

目的获得Rab8纯化蛋白,制备多克隆抗体,为深入研究Rab8在病毒感染宿主细胞过程中的作用奠定基础。方法首先从HepG2细胞中克隆Rab8基因,然后从Rab8质粒中亚克隆Rab8C端编码122个氨基酸的基因片段,构建Rab8与6His的融合蛋白原核表达质粒。原核表达与蛋白纯化后,免疫动物,制备Rab8多克隆抗体。采用ELISA法检测其效价,Western检验抗体特异性,间接免疫荧光染色法验证其免疫组化特性。结果克隆了人Rab8编码基因,构建了表达Rab8C端编码122个氨基酸的原核表达质粒pQE31-Rab8-122,经过大肠杆菌表达、镍亲和层析柱纯化,获得相对分子量约15000的融合蛋白,免疫Balb/c小鼠后收获抗血清。ELISA显示抗体效价达1/20000。Western blot和免疫荧光染色结果显示此多克隆抗体能够与原核表达的Rab8蛋白发生特异性反应,并能够识别HepG2细胞中内源性Rab8蛋白。结论本研究获得原核表达的Rab8纯化蛋白,成功的制备了Rab8多克隆抗体,为进一步研究Rab8参与病毒感染宿主细胞提供了重要的实验材料。

关键词： Rab8 原核表达抗体制备

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CHO细胞中稳定表达人整合素β3对登革2型病毒感染的影响

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第三军医大学学报 2009年第2期31卷 98-100页

作者：张俊磊高娜陈炜陈宗涛徐小峰安静第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 首都医科大学微生物学教研室北京100069

目的检测CHO细胞中稳定表达人整合素β3对登革2型病毒(Dengue virus serotype 2,DV2)感染的影响。方法将表达人整合素β3的质粒转染CHO细胞,通过G418筛选、流式细胞学检测和间接免疫荧光实验,建立稳定表达整合素β3的CHO细胞株;利用该... 详细信息

目的检测CHO细胞中稳定表达人整合素β3对登革2型病毒(Dengue virus serotype 2,DV2)感染的影响。方法将表达人整合素β3的质粒转染CHO细胞,通过G418筛选、流式细胞学检测和间接免疫荧光实验,建立稳定表达整合素β3的CHO细胞株;利用该细胞株进行感染实验,检测人整合素β3稳定表达对DV2易感性的影响。结果共获得了C9、C10、F8和H6 4个高表达整合素β3的细胞克隆,其中克隆F8中整合素β3的表达水平最高,是对照组的1.89倍。感染实验结果显示,进入整合素β3高表达细胞株的病毒数量均有所增高,增高的比例与整合素β3的表达增高趋势基本一致,进入F8细胞株的病毒量最高,是对照细胞的2.63倍,说明整合素β3有助于DV2进入细胞。结论在CHO细胞中外源性表达整合素β3可以提高DV2的感染率。

关键词：登革病毒整合素β3 CHO细胞

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MPTP致小鼠黑质致密部多巴胺能神经元损伤及定量研究

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第三军医大学学报 2006年第5期28卷 454-457页

作者：梁亚杰李淑蓉苏炳银第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 成都医学院组织学与胚胎学教研室成都610083

目的建立正常小鼠黑质致密部部位细胞数量标准曲线,并以之判定MPTP损伤的小鼠PD模型中多巴胺能神经元的损失。方法根据小鼠大脑解剖图谱观察小鼠黑质致密部的走向,酪氨酸羟化酶免疫组化染色显示正常小鼠大脑黑质致密部及多巴胺能神经元... 详细信息

目的建立正常小鼠黑质致密部部位细胞数量标准曲线,并以之判定MPTP损伤的小鼠PD模型中多巴胺能神经元的损失。方法根据小鼠大脑解剖图谱观察小鼠黑质致密部的走向,酪氨酸羟化酶免疫组化染色显示正常小鼠大脑黑质致密部及多巴胺能神经元;观察计数MPTP处理小鼠的大脑黑质致密部多巴胺能神经元,与正常小鼠的相似部位进行比较。结果建立了正常小鼠黑质致密部部位细胞数量分布图,利用曲线对MPTP处理小鼠所得到的切片进行分析,发现样本中多巴胺能神经元明显减少,证明判定方法可行而有效。结论本实验成功建立了MPTP致小鼠黑质致密部多巴胺神经元损伤模型,并对其损伤判定进行了标准化。

关键词：帕金森病 MPTP 标准曲线酪氨酸羟化酶黑质致密部定量研究 C57/BL6小鼠

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小鼠视神经发育损伤相关基因的凝聚性分层聚类分析

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第三军医大学学报 2005年第18期27卷 1848-1852页

作者：刘运来黄明辉伍亚舟袁碧波姚忠祥孙榆张彦琦杨梦苏蔡文琴第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 香港城市大学生物化学系第三军医大学高原军事医学系卫生统计学教研室重庆400038

目的对前期工作中采用高密度基因芯片技术筛选到的视神经发育、损伤相关基因进行聚类分析,以了解这些基因之间的相互联系,并根据已知功能和CNS轴突生长、导向相关的基因对部分未知功能基因进行功能预测.方法用Gene Cluster软件对筛选到... 详细信息

目的对前期工作中采用高密度基因芯片技术筛选到的视神经发育、损伤相关基因进行聚类分析,以了解这些基因之间的相互联系,并根据已知功能和CNS轴突生长、导向相关的基因对部分未知功能基因进行功能预测.方法用Gene Cluster软件对筛选到的视神经发育、损伤相关基因进行凝聚性分层聚类,并对已知功能和CNS轴突生长、导向相关的Ptn、Efnb3所在的小组进行进一步的分析.结果 1 033个符合聚类条件的基因根据聚类的树型图分成6类,其中B类基因的表达模式和小鼠外侧膝状体的发育过程非常类似,它们可能是视神经发育的关键基因;5个功能完全未知的基因Mm.28443、Mm.9671、Mm.25504、Mm.160640、Mm.182895和Ptn基因聚类在同一个小组中,它们和Ptn基因的相关性非常高,Pearson相关系数为0.979～0.996,这些基因我们暂时作为神经轴突生长、导向相关的候选基因;Lamr1基因和Efnb3基因的相似性很高,结合文献,推测Lamr1及其配体是视神经发育的重要轴突导向分子.结论新的轴突导向因子的发现能为基因工程治疗CNS损伤提供潜在的靶基因.

关键词：中枢神经系统发育损伤轴突导向聚类分析

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移植诱导中脑NSCs分化的多巴胺能神经元对PD大鼠治疗作用的实验研究

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第三军医大学学报 2004年第9期26卷 749-752页

作者：余小强阮怀珍蔡文琴范晓棠姚忠祥杨辉第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 第三军医大学新桥医院神经外科重庆400037

目的　研究移植诱导中脑神经干细胞分化出的多巴胺能神经元对PD大鼠的治疗作用。方法　利用纹状体提取液诱导大鼠胚胎中脑神经干细胞 ,使其部分分化为酪氨酸羟化酶 (TH)阳性的多巴胺能神经元 ,继而把分化后的细胞移植到PD大鼠的纹状体... 详细信息

目的　研究移植诱导中脑神经干细胞分化出的多巴胺能神经元对PD大鼠的治疗作用。方法　利用纹状体提取液诱导大鼠胚胎中脑神经干细胞 ,使其部分分化为酪氨酸羟化酶 (TH)阳性的多巴胺能神经元 ,继而把分化后的细胞移植到PD大鼠的纹状体内 ,免疫组化法证实移植细胞的存活并以诱发旋转行为的改善来观察其治疗作用。结果　纹状体提取液能够诱导中脑神经干细胞分化出多巴胺能神经元而且这种经诱导后产生的细胞能够在PD大鼠体内长期存活并改善阿卟吗啡诱导的旋转行为。

关键词：帕金森病神经干细胞神经移植

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基于薄膜电极的细胞电融合芯片

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高等学校化学学报 2012年第8期33卷 1698-1702页

作者：张小玲杨军胡宁侯文生郑小林谢琳杨忠陈洁重庆大学生物工程学院生物流变科学与技术教育部重点实验室重庆400030 第三军医大学大坪医院野战外科研究所眼科重庆400042 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 重庆医科大学附属儿童医院儿童营养研究中心重庆400014

构建了一种薄膜电极阵列结构的细胞电融合芯片,通过多聚物微通道底/顶层凸齿状的微电极,以及多聚物微通道侧壁上溅射形成的一层离散式金属薄膜电极,共同形成离散式"三明治"微电极结构.该微电极结构可在微通道内部形成与传统... 详细信息

构建了一种薄膜电极阵列结构的细胞电融合芯片,通过多聚物微通道底/顶层凸齿状的微电极,以及多聚物微通道侧壁上溅射形成的一层离散式金属薄膜电极,共同形成离散式"三明治"微电极结构.该微电极结构可在微通道内部形成与传统凸齿状电极相似的非均匀分布的梯度电场,通过介电电泳效应进行细胞控制及排队.利用多聚物在芯片上填充了传统凸齿状电极的凹陷区,克服了细胞在凹陷区无法有效排队与融合的缺点.在芯片上利用K562细胞开展了基于介电电泳效应的细胞排队实验及基于可逆性电穿孔效应的电融合实验,结果表明该芯片能够较好地实现细胞排队及融合,融合所需控制电压低至10 V左右.细胞排队率达99%以上,几乎无细胞在绝缘物填充区(传统凸齿电极芯片的凹陷区)滞留,细胞两两排队高于60%,细胞融合效率约为40%,比传统的细胞电融合方法和凸齿电极芯片有较大提高.

关键词：薄膜电极细胞电融合微流控芯片排队电穿孔

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教学导师培训制度促进青年教师快速成长有效性探讨

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现代医药卫生 2017年第12期33卷 1885-1886页

作者：蔡其燕李红丽田衍平李成仁陈兴书肖岚第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室/发育生物学教研室重庆400038

为了缩短青年教师的成长周期,快速提高青年教师的教学水平,该校基础医学部决定尝试大学培养硕士研究生、博士研究生的导师制模式,实施教学导师指导下的青年教师培训制度,遴选热爱教学和具备丰富教学经验的教学专家和资深教师组成导师团... 详细信息

为了缩短青年教师的成长周期,快速提高青年教师的教学水平,该校基础医学部决定尝试大学培养硕士研究生、博士研究生的导师制模式,实施教学导师指导下的青年教师培训制度,遴选热爱教学和具备丰富教学经验的教学专家和资深教师组成导师团队,有针对性地对青年教师进行为期两年的教学培训。其组织形式包括团队式课前辅导、双向随堂听课、教学技能专项培训及教学能力的考核评价。实践表明,教学导师培训制度增强了青年教师的责任感和教学热情,是"传、帮、带"的新方法。教学导师培训制度推进了青年教师的培养进程,是促进青年教师快速成长的有效途径。

关键词：教学方法教学导师制教学能力青年教师基础医学

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登革2型病毒NS1-NS2a基因真核表达载体的构建及鉴定

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第三军医大学学报 2009年第6期31卷 557-559页

作者：陈炜王嘉丽高娜田衍平陈宗涛徐小峰张俊磊刘丽梅江雯安静第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

目的构建登革2型病毒NS1-NS2a基因真核表达质粒。方法RT-PCR扩增NS1-NS2a基因片段后,将其克隆入真核表达载体pReceiver-M01a;通过PCR、酶切、测序和间接免疫荧光染色鉴定重组质粒。结果经PCR扩增、酶切和测序验证,重组质粒构建正确,命名... 详细信息

目的构建登革2型病毒NS1-NS2a基因真核表达质粒。方法RT-PCR扩增NS1-NS2a基因片段后,将其克隆入真核表达载体pReceiver-M01a;通过PCR、酶切、测序和间接免疫荧光染色鉴定重组质粒。结果经PCR扩增、酶切和测序验证,重组质粒构建正确,命名为pRe-NS1-NS2a;重组质粒转染Vero细胞后,间接免疫荧光染色显示细胞质中有登革2型病毒特异性蛋白的表达。结论成功构建了真核表达质粒pRe-NS1-NS2a。

关键词：登革2型病毒 NS1-NS2a基因真核表达

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利用DNA免疫技术制备抗登革2型病毒NS2B蛋白多克隆抗体

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第三军医大学学报 2010年第4期32卷 327-330页

作者：刘丽梅陈宗涛高娜田衍平陈炜张俊磊王嘉丽安静第三军医大学西南医院病理学研究所重庆400038 第三军医大学基础医学部微生物学教研室、重庆市微生物工程实验室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室、重庆市神经科学研究所重庆400038 首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

目的构建登革2型病毒(dengue virus serotype2,DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。方法PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染... 详细信息

目的构建登革2型病毒(dengue virus serotype2,DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。方法PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染Vero细胞,检测目标蛋白的表达。用该表达质粒免疫BALB/c小鼠,制备抗NS2B抗血清。结果成功构建真核表达重组质粒pCAGGS-P7/NS2B,该重组质粒具有良好的免疫原性,免疫小鼠后所获的抗血清,抗体效价达1∶3200,Western blot和间接免疫荧光证实抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。结论通过DNA免疫所制备小鼠抗DV2-NS2B抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。

关键词：登革热病毒病毒非结构蛋白质类 NS2B 小鼠近交BALBC

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交互式讨论教学法提高医学本科生综合分析能力的评价与实践

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西北医学教育 2013年第6期21卷 1202-1205页

作者：蔡其燕李红丽田衍平李成仁吴锡艳肖岚第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室发育生物学教研室重庆400038

为了提高医学本科生自学与综合分析能力,作者以班级为单位将交互式讨论教学法应用于组织胚胎学实验教学中,分析并比较交互式讨论教学法组和传统教学法组实施后的效果。结果显示:交互式讨论教学法在提高学习兴趣和考试成绩、提高分析解... 详细信息

为了提高医学本科生自学与综合分析能力,作者以班级为单位将交互式讨论教学法应用于组织胚胎学实验教学中,分析并比较交互式讨论教学法组和传统教学法组实施后的效果。结果显示:交互式讨论教学法在提高学习兴趣和考试成绩、提高分析解决问题能力及提高综合素质等方面明显优于传统教学法。交互式讨论教学法能够有助于培养高素质的医学人才。

关键词：交互式讨论教学法创新能力组织胚胎学实验教学基础医学

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