检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2005年第1期27卷 12-15页

作者：刘运来蔡文琴姚忠祥杨忠孙榆第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的　寻找人脐静脉内皮细胞之间的直接通讯的形态学证据。方法　本研究采用RT PCR、免疫荧光染色、划痕负载染料迁移法等方法来研究培养的人脐静脉内皮细胞缝隙连接蛋白Cx43的表达情况以及染料负载迁移情况。结果　RT PCR方法证实体外... 详细信息

目的　寻找人脐静脉内皮细胞之间的直接通讯的形态学证据。方法　本研究采用RT PCR、免疫荧光染色、划痕负载染料迁移法等方法来研究培养的人脐静脉内皮细胞缝隙连接蛋白Cx43的表达情况以及染料负载迁移情况。结果　RT PCR方法证实体外原代培养的人脐静脉内皮细胞有缝隙连接蛋白Cx43的mRNA的表达 ,免疫荧光染色发现Cx43蛋白质主要位于胞膜上 ,少量位于胞浆中。用划痕负载染料迁移法发现 ,小分子量的荧光黄染料能在培养的人脐静脉内皮细胞之间互相传递 ,而大分子量的罗丹明染料则不能在细胞间自由扩散 ,荧光黄染料的传递是通过细胞间的缝隙连接来实现的。结论　该研究为人脐静脉内皮细胞之间直接通讯提供了新的形态学证据。

关键词：人脐静脉内皮细胞缝隙连接直接通讯划痕负载染料迁移

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DAT1基因在大鼠神经干细胞分化中作用的初步研究

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第三军医大学学报 2005年第7期27卷 588-591页

作者：惠玲刘建军姚忠祥蔡文琴第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的　研究DAT1转染后不同诱导条件下DAT1在神经干细胞的表达以及DAT1过表达对神经干细胞分化的影响。方法　构建真核表达载体pEGFP C1 DAT1、pcDNA4/hisA DAT1,采用lipofectamine2 0 0 0脂质体介导法转染培养的胚胎大鼠皮层神经干细胞(... 详细信息

目的　研究DAT1转染后不同诱导条件下DAT1在神经干细胞的表达以及DAT1过表达对神经干细胞分化的影响。方法　构建真核表达载体pEGFP C1 DAT1、pcDNA4/hisA DAT1,采用lipofectamine2 0 0 0脂质体介导法转染培养的胚胎大鼠皮层神经干细胞(neuralstemcells ,NSCs) ,免疫组化染色,荧光显微镜观察。结果　DAT1瞬时转染神经干细胞后的诱导分化实验表明,DAT1转染可使NSCs分化为Mash 1阳性的细胞增加,DAT1的高表达有促进NSCs向神经元方向分化的作用;血清诱导分化及自然分化后DAT1在分化细胞中的表达定位发生了变化,同时这种变化也反映在NSCs分化的不同阶段。结论　不同的外界诱导因素或在NSCs分化的不同时期,DAT1可能通过与不同的转录因子的结合,从而在不同的信号通路中影响NSCs的分化。

关键词： DAT1 神经干细胞分化大鼠

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不同年龄小鼠脱髓鞘动物模型中脑内星形胶质细胞激活情况的观察

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第三军医大学学报 2012年第8期34卷 696-700页

作者：王洪凯梅峰刘志韦美肖岚第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的观察星形胶质细胞在不同年龄(青壮年及中老年)cuprizone(CPZ)脱髓鞘小鼠模型中的激活特点,探讨星形胶质细胞激活与髓鞘脱失可能存在的内在联系。方法选取6周龄(青壮年)及9月龄(中老年)雄性C57BL/6小鼠建立CPZ导致的急性脱髓鞘动物模... 详细信息

目的观察星形胶质细胞在不同年龄(青壮年及中老年)cuprizone(CPZ)脱髓鞘小鼠模型中的激活特点,探讨星形胶质细胞激活与髓鞘脱失可能存在的内在联系。方法选取6周龄(青壮年)及9月龄(中老年)雄性C57BL/6小鼠建立CPZ导致的急性脱髓鞘动物模型,经0.2%CPZ处理6周后,通过体质量测量及卢卡斯快蓝(luxol fast blue,LFB)染色观察模型建立是否成功,利用免疫组织化学染色检测实验组(CPZ)和对照组(CTL)小鼠胼胝体(corpus callosum,CC)及皮层(cortex,CTX)区胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)表达变化,并通过Western blot方法进一步检测GFAP及MBP蛋白表达差异。结果 0.2%CPZ处理6周后,青壮年CPZ小鼠于胼胝体及皮层区GFAP阳性细胞数显著增多(P<0.01),同时伴有显著的MBP表达下降(P<0.01);中老年小鼠于胼胝体区GFAP阳性细胞数增多较明显(P<0.05),并伴有MBP表达明显下降(P<0.05);GFAP阳性细胞数的增多和MBP表达下降均表现为青壮年组更加明显(P<0.01)。结论星形胶质细胞的激活于青壮年小鼠更加明显,并与髓鞘损伤呈现出一定的正相关性,星形胶质细胞激活可能是参与髓鞘损伤的重要原因。

关键词：星形胶质细胞激活脱髓鞘年龄小鼠

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豚鼠空肠吻合术后ICCs的再生及细胞网络再形成研究

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第三军医大学学报 2005年第5期27卷 376-380页

作者：梅峰于彬马华张红军周德山第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的　探讨豚鼠空肠壁内ICCs再生及细胞网络重新形成过程。方法　利用手术切断的方法 ,制造ICCs损伤丢失、网络断裂动物模型 ,冰冻切片和全层铺片免疫细胞化学染色观察。结果　术后 3 0～ 5 0d ,断端KIT阳性细胞开始增多 ;术后 70d左右 ... 详细信息

目的　探讨豚鼠空肠壁内ICCs再生及细胞网络重新形成过程。方法　利用手术切断的方法 ,制造ICCs损伤丢失、网络断裂动物模型 ,冰冻切片和全层铺片免疫细胞化学染色观察。结果　术后 3 0～ 5 0d ,断端KIT阳性细胞开始增多 ;术后 70d左右 ,KIT阳性细胞在断端形成以正常肠壁为底面 ,顶端向吻合部位的三角形增生区域 ,在该区域中部KIT阳性细胞的数量较多 ,且排列不规则 ,呈团状 ,突起较短 ,胞浆丰富 ,细胞核较大 ;而靠近三角形底部的KIT阳性细胞逐渐与肌间神经丛周围和深肌丛附近的ICCs相延续。在术后 6个月 ,近端和远端的肠壁已逐渐恢复延续性 ,肠壁各层结构基本正常 ,此时KIT阳性细胞亦趋于恢复正常细胞网络分布模式。结论　当肠壁内ICCs及其网络损伤后。

关键词： Cajal间质细胞再生 KIT蛋白小肠 c-kit

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BC023882基因克隆及其对细胞周期的影响

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第三军医大学学报 2006年第11期28卷 1178-1180页

作者：秦茂林蔡文琴刘运来刘建军第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的获得基因BC023882全长真核表达载体及检测该基因对培养细胞生长的影响。方法利用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)扩增基因BC023882的编码区序列,克隆到pcDNA3.1(-)/Myc-H is(+)/lac Z真核表达载体中,构建基因BC023882的真核表达载体;... 详细信息

目的获得基因BC023882全长真核表达载体及检测该基因对培养细胞生长的影响。方法利用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)扩增基因BC023882的编码区序列,克隆到pcDNA3.1(-)/Myc-H is(+)/lac Z真核表达载体中,构建基因BC023882的真核表达载体;脂质体法转染小鼠胚胎成纤维细胞和COS-7细胞,并且通过细胞生长曲线测定和流式细胞仪观察该基因对细胞生长的影响。结果酶切并测序鉴定证明获得的重组子符合基因BC023882的编码序列;转染该基因后细胞增殖减慢,细胞增殖指数减低。结论成功构建了基因BC023882的真核表达载体,并且观察到该基因对细胞生长起到一定的抑制作用。

关键词：基因克隆细胞 Golgins相关蛋白家族

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NOV基因真核表达载体的构建及在COS-7细胞中的表达

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第三军医大学学报 2005年第12期27卷 1187-1189页

作者：李成仁蔡文琴苏炳银张成岗第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的　获得NOV基因真核表达载体并检测其在细胞中的表达。方法　利用逆转录多聚酶链反应(RT PCR)方法,从新鲜大鼠大脑组织的总cDNA中扩增出1165bp的NOV基因的cDNA编码区序列,然后用HindⅢ和BamHⅠ双酶切后定向克隆入真核表达载体pcDNA3... 详细信息

目的　获得NOV基因真核表达载体并检测其在细胞中的表达。方法　利用逆转录多聚酶链反应(RT PCR)方法,从新鲜大鼠大脑组织的总cDNA中扩增出1165bp的NOV基因的cDNA编码区序列,然后用HindⅢ和BamHⅠ双酶切后定向克隆入真核表达载体pcDNA3 1 Myc His(+ ) lacZ质粒中,用脂质体法将载体转染入COS 7细胞中,用Westernblot和免疫细胞化学方法检测其表达情况。结果　NOV基因cDNA已经正确克隆到真核表达载体pcDNA3 .1 Myc His(+ ) lacZ质粒中;体外转染入COS 7细胞中后,可见转染细胞有NOV蛋白的表达。结论　本实验所构建的重组质粒为NOV基因的作用研究提供了有利的分子工具。

关键词： NOV基因 RT-PCR 基因克隆

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HCN2阳性细胞在小鼠胃肠道肌间神经丛内的分布

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第三军医大学学报 2010年第5期32卷 409-413页

作者：熊承杰梅峰韩鹃田衍平江忠勇周德山第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的探讨超级化激活环核苷酸调控的阳离子通道(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated channel 2,HCN2)阳性细胞在小鼠胃肠道肌间神经丛的分布。方法成年昆明小鼠的胃肠道,包括胃、小肠、结肠,制作全层铺片,免疫细胞化... 详细信息

目的探讨超级化激活环核苷酸调控的阳离子通道(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated channel 2,HCN2)阳性细胞在小鼠胃肠道肌间神经丛的分布。方法成年昆明小鼠的胃肠道,包括胃、小肠、结肠,制作全层铺片,免疫细胞化学染色HCN2阳性细胞、胆碱能神经及Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)。结果成年小鼠胃肠道肌间神经丛的HCN2阳性细胞成簇紧密排列,多数阳性细胞为DogielⅡ型神经元,阳性产物分布在细胞质和细胞膜,每个神经节内可见数个至数十个阳性细胞;神经突起虽可见HCN2阳性产物,但主要存在于较粗的突起。HCN2阳性神经元分布密度在胃肠道各段存在较大差异(P<0.05):以结肠密度最高,胃次之,小肠略低。利用胆碱能神经元标志物胆碱乙酰转移酶(ChAT)和ICCs的标志物(c-kit蛋白)分别与HCN2通道进行双重免疫染色,可见HCN2存在于胆碱能神经元,未见HCN2存在于ICCs的胞体,ICCs的突起与HCN2阳性神经元距离很近。结论HCN2离子通道广泛表达于肌间神经丛,主要表达于胆碱能神经元,可能参与该神经元调控胃肠神经活动、神经递质的释放以及胃肠功能的调节。

关键词： HCN2 肠肌丛胆碱能神经 Cajal间质细胞 c—kit 小鼠

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肿瘤抑制因子PTEN蛋白在成年大鼠中枢神经系统的表达

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第三军医大学学报 2007年第5期29卷 384-386页

作者：蔡其燕姚忠祥第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的观察PTEN在成年大鼠中枢神经系统(central nervous system,CNS)的表达情况。方法用免疫组织化学ABC法显示大鼠CNS中PTEN阳性免疫反应产物。结果PTEN阳性反应产物广泛分布于大鼠的CNS内,阳性细胞的分布主要表现为较多、中等量和少量... 详细信息

目的观察PTEN在成年大鼠中枢神经系统(central nervous system,CNS)的表达情况。方法用免疫组织化学ABC法显示大鼠CNS中PTEN阳性免疫反应产物。结果PTEN阳性反应产物广泛分布于大鼠的CNS内,阳性细胞的分布主要表现为较多、中等量和少量3种情况,其亚细胞定位包括细胞质、细胞核和细胞质突起。结论明确PTEN在成年大鼠CNS中的表达模式。

关键词： PTEN 中枢神经系统表达

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转录因子EN2在小鼠胚胎组织中的分布

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第三军医大学学报 2008年第3期30卷 192-194页

作者：钟善传罗雪陈兴书蔡其燕姚忠祥第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的观察转录因子EN2在小鼠胚胎发育过程中的时空分布规律。方法利用Westernblot技术检测EN2在小鼠胚胎E8．5-E17．5的表达强度；利用免疫组化技术观察EN2在胚胎发育不同时期各组织器官中的分布。结果①Westernblot：E8．5未检测到明显... 详细信息

目的观察转录因子EN2在小鼠胚胎发育过程中的时空分布规律。方法利用Westernblot技术检测EN2在小鼠胚胎E8．5-E17．5的表达强度；利用免疫组化技术观察EN2在胚胎发育不同时期各组织器官中的分布。结果①Westernblot：E8．5未检测到明显的阳性蛋白条带，E9．5-E15．5在相对分子质量为41×10。处检测到清晰的EN2蛋白条带，表达水平从E9．5-E12．5逐渐增强，E13．5之后逐渐减弱，至E16．5消失。②免疫组化：在胚胎不同时期，EN2蛋白在中后脑交界部、Rathke囊周围、下颌弓、视交叉、嗅球、椎间盘、轴旁肌和一些间充质组织中都有不同程度的表达。结论EN2蛋白可能参与了神经系统、骨骼肌、椎间盘和一些间充质组织的发育与分化。

关键词： Engrailed-2 胚胎发育

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激活内源性肝X受体对酒精暴露致新生鼠神经前体细胞增殖障碍的保护作用

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第三军医大学学报 2014年第3期36卷 203-208页

作者：唐小童杨阳徐培王颖范晓棠第三军医大学基础医学部组织与胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的探索激活肝脏X受体(liver X receptors,LXRs)对新生期小鼠酒精暴露后海马齿状回内神经前体细胞的保护作用。方法选用同窝的子鼠按随机数字表法分成3组(n=3):对照组、酒精组(分别注射等量溶剂或酒精)和LXRs激动剂(TO901317,TO)+酒精... 详细信息

目的探索激活肝脏X受体(liver X receptors,LXRs)对新生期小鼠酒精暴露后海马齿状回内神经前体细胞的保护作用。方法选用同窝的子鼠按随机数字表法分成3组(n=3):对照组、酒精组(分别注射等量溶剂或酒精)和LXRs激动剂(TO901317,TO)+酒精组[腹腔注射TO激动剂10 mg/kg(DMSO∶PBS=1∶3为溶剂)]。采用免疫组化方法检测与增殖细胞相关的Ki67、5-溴-2'-脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)以及性别决定区域Y同源盒基因2(Sox2)、巢蛋白Nestin的表达水平,观察激活内源性LXRs对新生期小鼠酒精暴露后海马齿状回神经前体细胞增殖与神经前体细胞维持的影响。结果新生期小鼠酒精暴露后抑制海马齿状回神经前体细胞的增殖,包括Ki67阳性细胞数量显著减少[酒精组(24.7±5.5)vs对照组(45.9±7.1),P<0.01],BrdU阳性细胞数量显著减少[酒精组(44.9±2.9)vs对照组(54.8±6.0),P<0.01],Sox2标记的神经前体细胞数量减少[酒精组(31.1±6.4)vs对照组(46.6±6.3),P<0.01],Nestin标记的长纤维出现断裂,数量减少[酒精组(25.3±3.8)vs对照组(35.0±2.0),P<0.01]。TO901317预处理有效减轻酒精对海马齿状回前体细胞的毒性作用,TO+酒精组较酒精组Ki67阳性细胞数量增加[TO+酒精组(54.2±10.8)vs酒精组(24.7±5.5),P<0.01],BrdU阳性细胞数量显著增加[TO+酒精组(53.4±2.8)vs酒精组(44.9±2.9),P<0.01],Sox2阳性细胞增加[TO+酒精组(54.0±6.7)vs酒精组(31.1±6.4),P<0.01],Nestin标记的纤维断裂减少,数量增加[TO+酒精组(33.0±2.6)vs酒精组(25.3±3.8),P<0.05]。结论激活LXRs可减轻酒精暴露对新生期小鼠海马齿状回神经前体细胞增殖的抑制作用,从而保护海马齿状回的发育。

关键词：海马增殖酒精神经前体细胞肝脏X受体

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