检索结果-内蒙古大学图书馆

生理科学进展 2010年第2期41卷 121-124页

作者：李世峰周伟邢燕范晓棠第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆400038

雌激素受体属转录因子核受体超家族成员。雌激素受体的两个亚型ERα和ERβ都有类似于核受体超家族成员的调节结构,介导雌激素参与生理和病理过程中的多种效应。ERα和ERβ广泛分布于神经系统中疼痛调节相关的区域,大量动物实验及临床研... 详细信息

雌激素受体属转录因子核受体超家族成员。雌激素受体的两个亚型ERα和ERβ都有类似于核受体超家族成员的调节结构,介导雌激素参与生理和病理过程中的多种效应。ERα和ERβ广泛分布于神经系统中疼痛调节相关的区域,大量动物实验及临床研究资料证实ERα和ERβ参与急、慢性疼痛的调控。本文拟对雌激素受体的特性及其在疼痛调控中的作用予以阐述。

关键词：疼痛雌激素雌激素受体

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不同显色方法对免疫细胞化学显色结果的影响

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第三军医大学学报 2002年第3期24卷 359-360页

作者：张吉强姚青刘建军蔡文琴第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038

目的　探讨不同显色方法对免疫细胞化学实验结果的影响。方法　免疫细胞化学S P法 ,显色剂分别为 3 氨基 9 乙基咔唑 (3 amino 9 ethyl carbazole ,AEC)、二氨基联苯氨 (Diaminobenzidin ,DAB)和硫酸镍铵 DAB (Nickelammoniumsulfat... 详细信息

目的　探讨不同显色方法对免疫细胞化学实验结果的影响。方法　免疫细胞化学S P法 ,显色剂分别为 3 氨基 9 乙基咔唑 (3 amino 9 ethyl carbazole ,AEC)、二氨基联苯氨 (Diaminobenzidin ,DAB)和硫酸镍铵 DAB (Nickelammoniumsulfate DAB ,N DAB)。结果　在抗体浓度、孵育时间等条件完全相同的情况下 ,N DAB显色法灵敏度最高、反差强 ,AEC显色效果也较好 ,DAB效果最差。结论　N DAB显色敏感性较DAB高 8～ 12倍 ,特别适合于难以显示的抗原。其操作简单 ,仅需在显色时加入少量硫酸镍铵即可 ,所需抗体浓度大大降低 ,并可结合DAB或AEC进行双重标记。

关键词：免疫细胞化学显色结果影响显色方法 S-P法 AEC DAB N-DAB

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人胰腺干细胞的体外分离培养、鉴定和分化特性

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第三军医大学学报 2003年第1期25卷 23-25页

作者：姚忠祥秦茂林刘建军陈兴书周德山第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038

目的　体外分离培养人胰腺干细胞 ,进行鉴定并初步观察其分化为胰岛内分泌细胞的能力。方法　用酶消化法从人胎儿胰腺分离胰腺干细胞 ,培养并传代 ,应用胰腺干细胞特异性标志物CK 19、胰岛 β细胞特异性成分胰岛素和α细胞特异性成分胰... 详细信息

目的　体外分离培养人胰腺干细胞 ,进行鉴定并初步观察其分化为胰岛内分泌细胞的能力。方法　用酶消化法从人胎儿胰腺分离胰腺干细胞 ,培养并传代 ,应用胰腺干细胞特异性标志物CK 19、胰岛 β细胞特异性成分胰岛素和α细胞特异性成分胰高血糖素的抗体进行免疫细胞化学染色鉴定细胞种类和分化特性。结果　分离培养的人胎儿胰腺干细胞呈梭形 ,最初 1周生长较慢 ,以后增殖较快 ,约培养 3周后即可传代培养。传代细胞约生长 2周即可再次传代 ,免疫细胞化学染色显示细胞呈CK 19免疫阳性反应。经诱导分化后 ,细胞形成类胰岛样组织 ,此时免疫细胞化学染色显示部分细胞呈胰岛素免疫阳性反应 ,少数细胞呈胰高糖素免疫阳性反应。结论　人胰腺干细胞能在体外培养条件下快速增殖 ,并具有多向分化潜能 ,能分化形成胰岛

关键词：胰腺干细胞体外培养细胞分化细胞培养胰岛细胞酶消化法糖尿病细胞移植

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BDNF基因修饰神经干细胞移植后大鼠脊髓损伤移植处的基因表达变化

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第三军医大学学报 2003年第1期25卷 43-46页

作者：李巍李成仁蔡文琴周德山第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038

目的　了解脑源性神经营养因子 (Brain derivedneurotrophicfactor ,BDNF)基因修饰神经干细胞移植到大鼠脊髓损伤处后的基因表达变化 ,为脊髓损伤修复提供基础研究资料。方法　大鼠随机分为 4组 :正常对照组 ,手术对照组 ,神经干细胞 (N... 详细信息

目的　了解脑源性神经营养因子 (Brain derivedneurotrophicfactor ,BDNF)基因修饰神经干细胞移植到大鼠脊髓损伤处后的基因表达变化 ,为脊髓损伤修复提供基础研究资料。方法　大鼠随机分为 4组 :正常对照组 ,手术对照组 ,神经干细胞 (Neuralstemcells ,NSCs)移植组 ,BDNF NSCs移植组 ,各组分 4个时相点 (7d、1个月、2个月、3个月 ) ,利用细胞移植、X gal组化、免疫组化、原位杂交等方法 ,观察了移植处细胞的标记基因 (LacZ)表达和BDNF、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经丝 2 0 0 (NF 2 0 0 )的表达。结果　大鼠脊髓损伤移植处细胞中 ,有标记基因阳性细胞 ,BDNF强烈表达 ,尤其是BDNF NSCs移植组的移植后 1周和 1个月时。各组各时相点均有GFAP和NF 2 0 0免疫反应阳性细胞和纤维。结论　BD NF基因修饰神经干细胞能在脊髓损伤移植处存活 ,强烈表达BDNF ,BDNF基因修饰神经干细胞可以作为脊髓损伤修复的移植材料。

关键词： BDNF基因神经干细胞移植神经干细胞脊髓损伤 SCI

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神经干细胞移植在恢复损伤脊髓传导功能中的作用

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第三军医大学学报 2003年第1期25卷 40-42页

作者：李成仁李巍蔡文琴苏炳银陈德英第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038

目的　探讨神经干细胞 (NSCs)移植在恢复损伤脊髓传导功能中的作用。方法　 3 0只Wistar大鼠随机分为对照组 (A组 )、损伤组 (B组 )和移植组 (C组 ) ,每组 10只 ;将培养的大鼠NSCs悬液注入C组损伤脊髓处 ,B组注射等量的生理盐水。采用... 详细信息

目的　探讨神经干细胞 (NSCs)移植在恢复损伤脊髓传导功能中的作用。方法　 3 0只Wistar大鼠随机分为对照组 (A组 )、损伤组 (B组 )和移植组 (C组 ) ,每组 10只 ;将培养的大鼠NSCs悬液注入C组损伤脊髓处 ,B组注射等量的生理盐水。采用皮层体感诱发电位 (CSEP)和HRP逆行示踪技术观察大鼠脊髓传导功能的恢复情况。结果　①脊髓损伤后 ,B组的CSEP波消失 ,术后 2月C组的波形有所恢复 ,但潜伏期延长 ;②A组脊髓前角可见到许多HRP标记阳性神经元 ,B组未见阳性神经元 ,C组可见有阳性神经元 ,但数目较A组少。结论　NSCs脊髓内移植能促进损伤脊髓传导功能的部分恢复。

关键词：神经干细胞移植神经干细胞脊髓损伤皮层体感诱发电位 HRP SCI

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昆明种系小鼠胚胎干细胞的分离培养及特性鉴定

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第三军医大学学报 2001年第9期23卷 1071-1073页

作者：秦茂林蔡文琴姚忠祥第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038

目的　提高昆明小鼠胚胎干细胞 (ES细胞 )建株的成功率。方法　收集小鼠 3.5d的囊胚培养 ,用小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层 ,形成的ES细胞样集落 ,经两次亚克隆分离培养ES细胞 ;进行相差显微镜观察、碱性磷酸酶染色和体内外分化能力鉴... 详细信息

目的　提高昆明小鼠胚胎干细胞 (ES细胞 )建株的成功率。方法　收集小鼠 3.5d的囊胚培养 ,用小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层 ,形成的ES细胞样集落 ,经两次亚克隆分离培养ES细胞 ;进行相差显微镜观察、碱性磷酸酶染色和体内外分化能力鉴定。结果　获得两个稳定ES细胞集落 ,传至第 11代。ES细胞呈集落样生长 ,碱性磷酸酶染色强阳性 ,体外分化的细胞沿拟胚体外向性生长 ,形态多样 ,在体分化可形成来源于 3个胚层的组织。结论　两次亚克隆法获得的细胞具有ES细胞主要的生物学性状。

关键词：小鼠胚胎干细胞 ES细胞系细胞分离细胞培养

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胃肠道Cajal细胞与消化管疾病

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第三军医大学学报 2002年第B11期25卷 11-13页

作者：于彬第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室，重庆400038

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大鼠不同类型脑损伤后NO表达变化的比较研究

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第三军医大学学报 2000年第7期22卷 656-659页

作者：李红丽蔡文琴邓晓林赵士福第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038

目的　研究不同类型脑损伤后NO的表达变化。方法　建立大鼠 3种脑损伤模型 :脑皮质针刺伤、短暂性全脑缺血 /再灌注与模拟低压性脑缺氧 (海拔 5 0 0 0m) ,运用NADPH d组化 (NDP)、原位分子杂交、图像分析等方法对 3种脑损伤后NO的表达... 详细信息

目的　研究不同类型脑损伤后NO的表达变化。方法　建立大鼠 3种脑损伤模型 :脑皮质针刺伤、短暂性全脑缺血 /再灌注与模拟低压性脑缺氧 (海拔 5 0 0 0m) ,运用NADPH d组化 (NDP)、原位分子杂交、图像分析等方法对 3种脑损伤后NO的表达及其细胞来源进行对比观察。结果　①NDP阳性细胞数在脑皮质针刺伤后第 5～ 7d达高峰 ,且主要分布于海马、室周区等处 ;全脑缺血再灌注后 1～ 3d即达高峰 ,以颞叶皮质、海马与室周区明显 ;高原缺氧仅 2d有一过性增高。②表达NO的细胞以神经元样细胞、胶质细胞样细胞为主 ,有少数内皮细胞样细胞。结论　 3种不同类型脑损伤后NO表达的时空分布存在差异 ;NO的细胞来源可能有多种。

关键词：一氧化氮星形胶质细胞大鼠颅脑损伤

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DISC1基因过表达对星形胶质细胞质膜伸展的影响

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第三军医大学学报 2013年第10期35卷 938-942页

作者：刘淑宝田衍平陈显军吴锡艳肖岚第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038

目的构建精神分裂症断裂基因1(Disrupted-In-Schizophrenia 1,DISC1)蛋白表达质粒,检测其过表达后对星形胶质细胞(Astrocytes,ASTs)质膜伸展的影响。方法针对小鼠DISC1基因mRNA编码序列,设计合成可扩增全长引物;以小鼠脑白质cDNA为模板... 详细信息

目的构建精神分裂症断裂基因1(Disrupted-In-Schizophrenia 1,DISC1)蛋白表达质粒,检测其过表达后对星形胶质细胞(Astrocytes,ASTs)质膜伸展的影响。方法针对小鼠DISC1基因mRNA编码序列,设计合成可扩增全长引物;以小鼠脑白质cDNA为模板进行PCR扩增,构建全长表达质粒,命名为pEGFP-n1-DISC1。分别将过表达组pEGFP-n1-DISC1和空载体对照组pEGFP-n1电转染原代培养ASTs,以Western blot及免疫荧光染色检测DISC1-GFP融合蛋白的表达,利用Image-Pro Plus 5.0软件分析对照组与DISC1过表达组星形胶质细胞质膜伸展面积的大小。结果成功从cDNA中扩增出DISC1编码序列并插入pEGFP-n1载体,双酶切和测序结果证实,DISC1蛋白编码序列插入载体,并能正确读码翻译。构建质粒转染ASTs 60 h后,可见DISC1-GFP融合蛋白表达;与对照组相比,DISC1过表达组ASTs的质膜伸展面积明显增加(P<0.05)。结论成功构建小鼠DISC1全长基因表达载体,DISC1基因过表达后可促使ASTs质膜伸展面积增加。

关键词：精神分裂症断裂基因1 真核表达质粒星形胶质细胞质膜伸展

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体外培养神经干细胞分化为类胰岛样组织的研究

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第三军医大学学报 2003年第1期25卷 26-28页

作者：姚忠祥李巍李成仁秦茂林刘建军陈兴书周德山第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038

目的　观察体外培养的神经干细胞是否可以被诱导分化为类胰岛样组织。方法　体外培养神经干细胞 ,在胰岛素等外源性复合成分 (ITS)诱导分化后 ,分别进行胰腺上皮干细胞特异性标志物CK 19、胰腺 β细胞特异性成分胰岛素和胰腺α细胞特异... 详细信息

目的　观察体外培养的神经干细胞是否可以被诱导分化为类胰岛样组织。方法　体外培养神经干细胞 ,在胰岛素等外源性复合成分 (ITS)诱导分化后 ,分别进行胰腺上皮干细胞特异性标志物CK 19、胰腺 β细胞特异性成分胰岛素和胰腺α细胞特异性成分胰高糖素等的免疫细胞化学染色鉴定。结果　体外培养的神经干细胞经诱导分化 3d后 ,在神经干细胞集落附近可见散在或成群分布的上皮样细胞 ,并呈CK 19免疫阳性反应。继续培养 2～ 4周后 ,上皮样细胞增多 ,细胞圆形或呈鹅卵石样排列 ,进一步增生形成类胰岛样组织 ,其中大多数细胞呈胰岛素免疫反应阳性 ,少数细胞呈胰高糖素免疫反应阳性。结论　体外培养的神经干细胞具有向类胰岛样组织分化的潜能 ,它能分化为胰岛的α细胞和 β细胞。

关键词：体外培养类胰岛样组织神经干细胞胰腺细胞角蛋白-19 胰岛素胰高糖素糖尿病细胞移植

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