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第三军医大学学报 2006年第14期28卷 1470-1472页

作者：刘建军姚忠祥秦茂林陈兴书陈建芳第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的寻找对神经干细胞（neural stem cells，NSCs）的增殖、分化和存活有促进作用的单味中药成分，进而确定对NSCs的增殖和分化有影响的中药有效成分。方法本研究筛选了黄芪、红花、丹参3种中药注射液分别刺激培养的NSCs，观察NSCs的分... 详细信息

目的寻找对神经干细胞（neural stem cells，NSCs）的增殖、分化和存活有促进作用的单味中药成分，进而确定对NSCs的增殖和分化有影响的中药有效成分。方法本研究筛选了黄芪、红花、丹参3种中药注射液分别刺激培养的NSCs，观察NSCs的分化状态。结果发现黄芪、红花有明显的促进NSCs分化的作用，其中黄芪效果最佳，而丹参却有促进NSCs凋亡的作用，这种作用随着其浓度的升高而加强。结论黄芪、红花对NSCs的分化起积极作用，丹参对NSCs的分化有毒性作用，也可能促进NSCs的凋亡，为进一步从细胞水平和分子水平研究中药的作用机制和NSCs的分化机制提供了依据。[著者文摘]

关键词：中药注射液神经干细胞分化

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双环己酮草酰二腙诱导的精神分裂症样小鼠大脑皮质体积及有髓神经纤维的体视学观测

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第三军医大学学报 2013年第8期35卷 717-721页

作者：彭超程国华王芸李永德陈林卢伟孔吉明肖岚唐勇重庆医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎教研室重庆400016 重庆医科大学干细胞与组织工程研究室重庆400016 加拿大曼尼托巴大学人体解剖与细胞科学系加拿大第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的探讨双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导的精神分裂症样小鼠大脑皮质体积及其内有髓神经纤维的改变。方法将6周龄的雄性C57BL/6小鼠分为CPZ组和对照组,CPZ组小鼠用含0.2%CPZ混合饲料饲育,对照组小鼠用标准的实验室饲料饲育。6周... 详细信息

目的探讨双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导的精神分裂症样小鼠大脑皮质体积及其内有髓神经纤维的改变。方法将6周龄的雄性C57BL/6小鼠分为CPZ组和对照组,CPZ组小鼠用含0.2%CPZ混合饲料饲育,对照组小鼠用标准的实验室饲料饲育。6周后进行行为学实验以证实精神分裂症样动物模型造模成功。然后运用透射电镜技术和体视学方法对小鼠大脑皮质体积和大脑皮质内有髓神经纤维进行定量研究。结果行为学实验中CPZ组小鼠出现精神分裂症样表现,体视学定量研究中CPZ组与对照组小鼠相比大脑皮质总体积没有显著性改变(P>0.05)。与对照组小鼠相比,CPZ组小鼠大脑皮质有髓神经纤维长度密度和总长度分别显著性降低了64.3%和68.9%(P<0.01),有髓神经纤维平均直径显著性增加了17.8%(P<0.01)。直径为0.2～<0.4μm、0.4～<0.6μm和0.6～<0.8μm的大脑皮质有髓神经纤维总长度与对照组小鼠相比分别显著性减少了4.317、3.313 km和0.940 km(P<0.01),CPZ组小鼠其他直径段大脑皮质有髓神经纤维总长度与对照组小鼠相比无显著性差异(P>0.05)。结论 CPZ组小鼠存在大脑皮质有髓神经纤维总长度的降低和平均直径的增加,有髓神经纤维总长度的降低主要是由小直径纤维丢失造成的。

关键词：双环己酮草酰二腙小鼠行为学大脑皮质有髓神经纤维体视学

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基于网络的虚拟显微镜系统辅助教学平台的应用

基于网络的虚拟显微镜系统辅助教学平台的应用

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中国解剖学会第十四届全国组织学与胚胎学青年学术研讨会暨第十一届组织学与胚胎学教学与科研技术研讨会

作者：田衍平李成仁刘运来秦茂林肖岚李红丽第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室发育生物学教研室重庆400038

由于学生的数量大,师资短缺和教学设备的限制,国内组织学课程的教学常使用传统的课件讲授、传统教材和光学显微镜的方式进行教学.该方式在传授知识方面是一种很好的方法,但不利于学生主动学习和问题解决能力的培养.研究显示,基于网络的...

由于学生的数量大,师资短缺和教学设备的限制,国内组织学课程的教学常使用传统的课件讲授、传统教材和光学显微镜的方式进行教学.该方式在传授知识方面是一种很好的方法,但不利于学生主动学习和问题解决能力的培养.研究显示,基于网络的虚拟显微镜(virtual microscopy,VM)系统是一种有效的教育策略.本研究描述我校VM系统在本科生组织学与胚胎学教学中的应用,并评估该策略促进学生主动学习和问题解决能力的效果.以我校229名大学二年级学生为研究对象,分成VM组和光学显微镜组(light microscopy,LM)两组进行教学.VM组使用虚拟显微镜系统进行教学,通过案例分析,自主学习并进行学生间讨论,线上线下与教员交流等形式进行学习,LM组采用传统教学方式进行.

关键词：

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体外不同发育阶段OLs对缺氧性损伤调节能力的研究

体外不同发育阶段OLs对缺氧性损伤调节能力的研究

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中国解剖学会第十三届全国组织学与胚胎学青年学术研讨会

作者：蔡其燕李红丽吴锡艳田衍平齐振波肖岚第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室发育生物学教研室重庆400038

少突胶质细胞(OLs)具有明显的发育阶段性特征,发育早期的OLs即晚期OLs前体细胞对缺氧性损伤最为敏感,可能与线粒体功能异常促进细胞的凋亡密切相关.那么,发育中未成熟和成熟期OLs对缺氧性损伤的敏感性及其涉及的具体机制如何,值得进一...

少突胶质细胞(OLs)具有明显的发育阶段性特征,发育早期的OLs即晚期OLs前体细胞对缺氧性损伤最为敏感,可能与线粒体功能异常促进细胞的凋亡密切相关.那么,发育中未成熟和成熟期OLs对缺氧性损伤的敏感性及其涉及的具体机制如何,值得进一步关注.

关键词：

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不同功能状态滋养层对人胚胎生殖嵴干细胞生长作用的实验研究

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西南国防医药 2010年第8期20卷 815-818页

作者：李欣刘尧李丽君秦茂林杨卫兵李红丽解放军181医院皮肤科广西桂林541002 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室

目的筛选并建立高效胚胎干细胞滋养层体外培养的最佳条件,利于人胚胎生殖嵴原始生殖细胞(PGC)的增殖。方法分离培养孕14.5 d(E14.5 d)和新生0 d(P0)昆明小鼠原代胚胎成纤维细胞(MEF)并传代制备滋养层,以60Coγ射线照射后继续培养并接种... 详细信息

目的筛选并建立高效胚胎干细胞滋养层体外培养的最佳条件,利于人胚胎生殖嵴原始生殖细胞(PGC)的增殖。方法分离培养孕14.5 d(E14.5 d)和新生0 d(P0)昆明小鼠原代胚胎成纤维细胞(MEF)并传代制备滋养层,以60Coγ射线照射后继续培养并接种人PGC。采用活细胞拒染法、免疫细胞化学染色,对比观察滋养层的生长活性和照射后分泌功能;采用碱性磷酸酶(AKP)染色技术鉴定人PGCs的生长状态。结果 (1)E14.5 d和P0来源的第3～5代MEF生长旺盛。P0来源第6代与E14.5 d来源同代MEF相比深染变形细胞增达32%,经60Coγ照射后衰老细胞明显增多(P<0.05)。(2)E14.5 d来源第3～6代和P0来源第3～4代MEF经60Coγ照射后培养5 d时,Ⅰ型胶原蛋白免疫阳性细胞数目较多,染色较深;但P0来源第5代其阳性细胞数目明显减少,染色变浅。(3)人PGCs接种于E14.5 d第3代制备的滋养层3～4 d后见典型的ESC小克隆团,细胞呈圆形;AKP染色呈深蓝色团;而接种于P0来源第6代MEF制备的滋养层5～6 d,可见ESC克隆松散、变大,周围边界不清,细胞紊乱。结论以60Coγ射线照射小鼠E14.5 d来源第3～6代MEF是制备滋养层的最佳来源,可维持人PGCs增殖。

关键词：胚胎成纤维细胞人胚胎生殖嵴细胞滋养层 60Coγ射线小鼠

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体外培养获得稳定高效胚胎干细胞滋养层的实验研究

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华南国防医学杂志 2010年第6期24卷 439-442页

作者：杨卫兵刘尧李欣秦茂林李红丽解放军181医院皮肤科广西桂林541002 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室

目的筛选并优化获得稳定的胚胎干细胞（embryonic stem cells,ESCs）滋养层细胞的来源及其体外培养的最佳条件,为胚胎干细胞体外存活提供必要条件。方法分别取人工流产胎儿皮肤组织、昆明小鼠孕12.5、14.5、18.5d胚胎和新生鼠（P0）组织... 详细信息

目的筛选并优化获得稳定的胚胎干细胞（embryonic stem cells,ESCs）滋养层细胞的来源及其体外培养的最佳条件,为胚胎干细胞体外存活提供必要条件。方法分别取人工流产胎儿皮肤组织、昆明小鼠孕12.5、14.5、18.5d胚胎和新生鼠（P0）组织,分离培养原代胚胎成纤维细胞（embryonic fibroblasts,EFs）并传代制成滋养层。采用活细胞拒染法和免疫细胞化学染色等技术,观察并比较两种来源以及不同时相来源制备的滋养层细胞的功能状态差异。结果细胞活性状态：①人胚来源第1～5代成纤维细胞活性均好;但1～2代时杂细胞较多,此后可见深染色细胞逐渐增多。②E12.5d、E14.5d鼠胚来源的各代细胞均较同代E18.5d和P0来源的活性细胞数目高（P〈0.05）。以E14.5d第3～6代细胞最易培养存活。P0来源第6代与E14.5d来源同代细胞相比,深染变形细胞增多达30%。细胞分泌功能：①人胚来源第3～5代细胞I型胶原蛋白免疫阳性细胞数目少且染色较淡。②鼠胚来源的以E12.5d、E14.5d、E18.5d的第3～6代细胞免疫阳性细胞数目最多,且染色深;P0来源第6代细胞免疫阳性细胞染色深浅不一。结论采用人胚胎来源的成纤维细胞的活性尚可,但分泌功能稳定性欠佳。鼠胚E12.5～18.5d来源的第3～6代成纤维细胞,具有细胞活性强、分泌功能旺盛的特点,是作为胚胎干细胞赖以存活滋养层的最佳选择。

关键词：胚胎成纤维细胞胚胎干细胞滋养层

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慢性癫痫大鼠脑组织GAT-1的表达变化及其与星形胶质细胞的相关性

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西南国防医药 2010年第6期20卷 605-607,698页

作者：胡远兵李红丽梁义杨忠武警四川总队医院成都分院神经内科成都610041 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室第三军医大学神经生物学教研室

目的研究γ-氨基丁酸转运体-1(GAT-1)与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)在戊四氮点燃的慢性癫痫大鼠脑中的变化。方法采用免疫组化技术分别标记正常SD大鼠和戊四氮点燃的慢性癫痫大鼠发作后海马及外侧皮质区GAT-1和GFAP,结合Western blot实验结... 详细信息

目的研究γ-氨基丁酸转运体-1(GAT-1)与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)在戊四氮点燃的慢性癫痫大鼠脑中的变化。方法采用免疫组化技术分别标记正常SD大鼠和戊四氮点燃的慢性癫痫大鼠发作后海马及外侧皮质区GAT-1和GFAP,结合Western blot实验结果分析其变化关系。结果 GAT-1和GFAP在慢性癫痫发作后,均有不同程度的表达增高,GAT-1增高更明显。结论 GAT-1和GFAP的同方向变化证明,在慢性癫痫发作后,GAT-1的表达增高并不只是由于星形胶质细胞的增生所致。

关键词： γ-氨基丁酸转运体-1 癫痫胶质纤维酸性蛋白戊四氮

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HPV18E2蛋白CTL表位多肽的构建与表达

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局解手术学杂志 2007年第6期16卷 376-378页

作者：汪云肖岚吕凤林第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所第一研究室重庆400042

目的分析HPV18E2蛋白的CTL表位,合成并纯化这些表位多肽,构建表达HPV18E2蛋白的靶细胞,检验特异性CTL对靶细胞的杀伤效果,为进一步研制人乳头瘤病毒18型(HPV18)基因工程疫苗打下基础。方法以重组质粒(pBR322-HPV18)为模板,利用PCR方法扩... 详细信息

目的分析HPV18E2蛋白的CTL表位,合成并纯化这些表位多肽,构建表达HPV18E2蛋白的靶细胞,检验特异性CTL对靶细胞的杀伤效果,为进一步研制人乳头瘤病毒18型(HPV18)基因工程疫苗打下基础。方法以重组质粒(pBR322-HPV18)为模板,利用PCR方法扩增HPV18E2 DNA片段,将HPV18E2 DNA与加强绿色荧光质粒(pIRES2-EGFP)重组构建重组质粒(pIRES2-HPV18E2-EGFP)。用酶切电泳及测序检查质粒重组后序列正确性。重组质粒转染Hela细胞。51Cr释放实验评估CTL杀伤能力。结果克隆重组质粒pIRES2-HPV18E2-EGFP酶切后显示的酶切图谱与预期相同,而且测序验证插入片段全序列无改变。转染并用G418筛选后,在荧光显微镜下可见绿色荧光细胞的表达。三条候选多肽特异性杀伤能力分别为60.00%、71.29%和80.00%。结论三条备选肽段都具有明显的杀伤效应,均为HPV18E2蛋白的有效CTL表位。

关键词：人乳头瘤病毒18型 E2基因多肽

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大鼠90%极限门静脉分支结扎后肝脏组织中IL-6的表达与肝增殖作用的相关性研究

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第三军医大学学报 2010年第22期32卷 2427-2430页

作者：代雪梅李红丽李可洲肖岚张晓姚豫桐第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 成都军区成都总院麻醉科成都610038 成都军区成都总院肝胆科成都610038 成都医学院基础医学院成都610038

目的探讨在大鼠极限90%门静脉分支结扎模型中门静脉压力促进肝再生过程中白介素-6(interleukin 6,IL-6)在肝脏组织中的表达及其与肝细胞增殖作用的关系。方法 72只Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠随机分成假手术对照组和门静脉分支结扎实验... 详细信息

目的探讨在大鼠极限90%门静脉分支结扎模型中门静脉压力促进肝再生过程中白介素-6(interleukin 6,IL-6)在肝脏组织中的表达及其与肝细胞增殖作用的关系。方法 72只Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠随机分成假手术对照组和门静脉分支结扎实验组。测定术后0.5、1、3、5、7、14d大鼠门静脉压力变化,观察实验组非结扎侧肝脏质量大体变化,光学显微镜下观察非结扎侧肝组织的病理形态变化,用免疫组化方法检测非结扎侧肝细胞的IL-6和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,并进行统计分析。结果①门静脉压力在结扎后立即升高,0.5d达到高峰(P<0.01),随后逐渐下降,7d左右降至正常水平。②非结扎侧肝叶质量逐渐增加,7d达"平台期";而结扎侧肝叶逐渐萎缩;非结扎侧肝细胞术后3～7d可见较多的分裂象,肝细胞核增大。③非结扎侧肝细胞中PCNA阳性细胞计数与对照组比较,0.5～5d表达增强(P<0.05),以后逐渐恢复正常。④非结扎侧肝叶IL-6的表达量与对照组比较0.5～5d表达增强,术后7～14d恢复至对照组水平(P>0.05)。⑤门静脉压力与非结扎侧肝叶肝细胞PCNA的表达在术后1、3、5d组呈正相关(r分别为0.816、0.774、0.827,P<0.05),在术后14d组呈负相关(r=-0.761,P<0.05);大鼠肝脏PCNA的表达在术后1、14d组与肝内IL-6表达呈正相关(r分别为0.813、0.825,P<0.05)。结论 IL-6蛋白在门静脉压力促进极限门静脉分支结扎致肝再生过程中发挥重要作用。

关键词：肝再生门静脉分支结扎门静脉压力白介素-6

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DIDS抑制氯离子通道ClC-2的表达减缓新生大鼠缺血缺氧性脑白质损伤

DIDS抑制氯离子通道ClC-2的表达减缓新生大鼠缺血缺氧性脑白质损伤

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中国解剖学会第十四届全国组织学与胚胎学青年学术研讨会暨第十一届组织学与胚胎学教学与科研技术研讨会

作者：赵柏雄全弘宇马腾田衍平蔡其燕李红丽第三军医大学学员旅四营重庆400038 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室和发育生物学教研室重庆400038

缺血缺氧可引起新生儿脑白质病变(WMLs),常导致儿童脑瘫及认知障碍.已有的研究提示2型氯离子通道(ClC2)的异常表达参与炎症与细胞凋亡的发生,然而氯离子通道是否参与新生大鼠WMLs的发生,目前文献报道尚少.本研究选择新生4-5日龄SD大鼠,...

缺血缺氧可引起新生儿脑白质病变(WMLs),常导致儿童脑瘫及认知障碍.已有的研究提示2型氯离子通道(ClC2)的异常表达参与炎症与细胞凋亡的发生,然而氯离子通道是否参与新生大鼠WMLs的发生,目前文献报道尚少.本研究选择新生4-5日龄SD大鼠,建立慢性脑缺血缺氧模型,在伤后不同时间给予Cl-通道阻断剂DIDS处理.结果显示,新生大鼠脑缺血缺氧损伤后白质中ClC-2 mRNA和蛋白表达均较正常组显著增高,且伴白质组织中活性氧浓度显著升高;iNOS、TNF-α mRNA的表达也大幅度增加.

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