检索结果-内蒙古大学图书馆

陆军军医大学学报 2025年第5期47卷 417-425页

作者：杜艾贝任原锋储召乐刘碧颖李先锋向俊宇陈东风王涛王斌郭海英张璇李玉红陆军军医大学基础医学院细胞生物学教研室重庆陆军特色医学中心(第三军医大学大坪医院)消化内科消化系统肿瘤精准防治重庆市重点实验室重庆重庆市中医院肿瘤科重庆

目的通过表观遗传组学技术,解析胃印戒细胞癌(signet-ring cell carcinoma of the stomach,SRCC)的H3K27me3沉默子的全基因组特征及其对基因转录的调控作用,以阐明SRCC恶性进展的表观调控机制。方法采集2021年1月至2023年12月陆军特色... 详细信息

目的通过表观遗传组学技术,解析胃印戒细胞癌(signet-ring cell carcinoma of the stomach,SRCC)的H3K27me3沉默子的全基因组特征及其对基因转录的调控作用,以阐明SRCC恶性进展的表观调控机制。方法采集2021年1月至2023年12月陆军特色医学中心消化内科35例胃镜样本(正常胃窦/胃体15例,SRCC 20例)。采用以下多组学分析:染色质可及性测序(assay for transposase-accessible chromatin with high-throughput sequencing,ATAC-seq)检测染色质开放区域;染色质靶向捕获测序(cleavage under targets and tagmentation,CUT&Tag)捕获H3K27me3沉默子区域;转录组测序(transcriptome sequencing,RNA-seq)分析转录组。测序于Illumina NovaSeq 6000平台完成(符合深度标准)。通过DESeq2筛选H3K27me3相关差异基因(|Log_(2)FC|>1,FDR<0.05),并通过基因本体论(Gene Oncology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)分析进行功能富集,Homer鉴定转录因子基序,Cytoscape构建调控网络,并使用免疫组化进行验证,探讨其调控机制。结果SRCC沉默子主要分布于基因组远端基因间区(占37.06%)。与正常组织相比,SRCC中H3K27me3沉默子信号显著降低(95%CI:1.34~2.30,P=0.007),共鉴定出6257个丢失位点(FDR<0.01)。CUT&Tag和RNA-seq整合分析显示,380个因沉默子丢失而上调的基因显著富集于免疫相关通路,如T细胞受体信号通路(OR=4.2,95%CI:2.8~6.3,P=0.002)。免疫组化验证表明,转录因子EHF表达显著升高(P<0.05)。结论SRCC中存在H3K27me3沉默子重塑现象,转录因子EHF可能在SRCC恶性进展中发挥关键作用。

关键词：胃印戒细胞癌表观遗传组蛋白修饰沉默子 H3K27me3

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斯氏按蚊转录因子Relish基因克隆、定位及不同食源条件下表达

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2005年第5期23卷 257-261页

作者：杨松黄复生第三军医大学基础医学部病原生物学教研室

目的对斯氏按蚊转录因子Relish基因进行克隆、定位和差异分析,初步探讨转录因子Relish在前酚氧化酶(PPO)级联与疟原虫卵囊黑化中的信号调控作用。方法设计简并引物,对全蚊cDNA模板进行RT-PCR扩增,产物纯化、克隆、测序和鉴定,利用特异... 详细信息

目的对斯氏按蚊转录因子Relish基因进行克隆、定位和差异分析,初步探讨转录因子Relish在前酚氧化酶(PPO)级联与疟原虫卵囊黑化中的信号调控作用。方法设计简并引物,对全蚊cDNA模板进行RT-PCR扩增,产物纯化、克隆、测序和鉴定,利用特异引物分别从血细胞或中肠扩增目的基因,于不同食源条件下进行半定量分析和原位核酸分子杂交定位。结果获得了1种斯氏按蚊RelishcDNA部分序列,与冈比亚按蚊Relish基因很相似,并存在于中肠和血细胞,半定量分析显示,感染约氏疟原虫6、12、24和48h或吸硝喹糖水12和24h,于诱导约氏疟原虫卵囊黑化之前表达明显增强,原位核酸分子杂交证实血细胞和中肠有表达。结论斯氏按蚊转录因子Relish可能在疟原虫感染或/和约氏疟原虫卵囊黑化调控中发挥重要作用。

关键词：斯氏按蚊转录因子信号调控

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小鼠表皮角质形成细胞中TNF-α对PAI-2表达的调节

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第三军医大学学报 2003年第12期25卷 1069-1072页

作者：连小华杨恬第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的　探讨表皮角质形成细胞中TNF α对PAI 2表达的调节及其生物学意义。方法　利用免疫细胞化学、TUNEL反应及免疫细胞化学 TUNEL双标等方法 ,观察TNF α作用下 ,培养的表皮角质形成细胞及其脱落细胞中PAI 2表达的变化及凋亡发生的情... 详细信息

目的　探讨表皮角质形成细胞中TNF α对PAI 2表达的调节及其生物学意义。方法　利用免疫细胞化学、TUNEL反应及免疫细胞化学 TUNEL双标等方法 ,观察TNF α作用下 ,培养的表皮角质形成细胞及其脱落细胞中PAI 2表达的变化及凋亡发生的情况。结果　在TNF α作用下 ,脱落细胞中PAI 2的表达明显增加 ,凋亡细胞的数量增多 ,PAI 2在凋亡细胞中的表达也增强 ,而在一些胞体较大、形态呈多角形的凋亡细胞中PAI 2表达的增加更为明显。结论　在高度分化的表皮角质形成细胞中 ,TNF α可促进PAI 2的表达并可诱导凋亡的产生 ,就与KC凋亡的关系而言 ,TNF α所诱导的PAI 2可分为两种 ,一种与KC凋亡有关 ,另一种与KC凋亡无关。

关键词： PAI-2 TNF-α表皮角质形成细胞表达调节

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EGF对小鼠角质形成细胞中组织型纤溶酶原激活剂表达的调节

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第三军医大学学报 2001年第9期23卷 1094-1097页

作者：连小华杨恬第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的　探讨小鼠表皮角质形成细胞 (KC)中 ,EGF对组织型纤溶酶原激活剂 (tPA)表达的影响。方法　应用免疫组化及原位杂交技术 ,结合图像分析 ,定性及定量检测在EGF作用下的小鼠表皮角质形成细胞中 ,tPAmRNA/蛋白质的表达。结果　小鼠表... 详细信息

目的　探讨小鼠表皮角质形成细胞 (KC)中 ,EGF对组织型纤溶酶原激活剂 (tPA)表达的影响。方法　应用免疫组化及原位杂交技术 ,结合图像分析 ,定性及定量检测在EGF作用下的小鼠表皮角质形成细胞中 ,tPAmRNA/蛋白质的表达。结果　小鼠表皮KC经EGF处理 12、2 4、48、72h后 ,tPAmRNA/蛋白质的量均增加 (P <0 .0 1) ,tPAmRNA表达的高峰出现于EGF作用 2 4h时 ,tPA蛋白质表达的高峰则出现于EGF作用 48h时。EGF联合 0 .5、1.0、1.5mmol/LCa2 + 作用小鼠表皮KC 48h ,与EGF单独作用小鼠表皮KC 48h时 ,tPAmRNA/蛋白质的表达 ,均显著降低 (P <0 .0 0 1)。结论　小鼠表皮KC中 ,EGF可以时间依赖方式促进tPAmR NA/蛋白质的表达 ,但受Ca2 + 浓度的影响。

关键词： tPA EGF 基因表达调节表皮角质形成细胞组织型纤溶酶原激活剂

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人表皮角质形成细胞中PAI-3/PCI的表达及作用

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第三军医大学学报 2006年第4期28卷 294-297页

作者：张诚李习玲连小华王韵杨珂余谨高强国杨恬第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的探讨人表皮角质形成细胞(KERATINOCYTE,KC)中,PAI-3/PCI的表达及作用。方法利用免疫细胞化学、RT-PCR方法,检测高CA2+浓度作用下,培养的人分化表皮KC及KC提取物角质壳中PAI-3的表达变化。结果高CA2+浓度下培养24H后,分化标记物K10... 详细信息

目的探讨人表皮角质形成细胞(KERATINOCYTE,KC)中,PAI-3/PCI的表达及作用。方法利用免疫细胞化学、RT-PCR方法,检测高CA2+浓度作用下,培养的人分化表皮KC及KC提取物角质壳中PAI-3的表达变化。结果高CA2+浓度下培养24H后,分化标记物K10弱阳性表达,PAI-3呈阳性表达;培养48H后,K10强阳性表达,而PAI-3的阳性表达明显增加,72H后,表达开始降低,在低CA2+浓度下阳性染色主要位于细胞核膜周围而高CA2+浓度下主要位于细胞质,同时,PAI-3存在终末分化KCS角质壳中。结论人表皮KC分化过程中,PAI-3的表达随着分化的增加而增加,PAI-3存在终末分化KCS角质壳蛋白中,表明PAI-3参与KC分化的作用。

关键词：角质形成细胞分化 PAI-3 角质壳 PCI

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角膜缘碱烧伤后应激调控基因的筛选

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中华创伤杂志 2005年第2期21卷 108-111页

作者：严军杨恬李国平曾益军杨珂余瑾第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

　目的　获得新西兰大白兔角膜缘碱烧伤前后参与修复调控的差异表达基因。　方法　主要采用细胞培养、体外碱烧伤模型的构建、免疫细胞化学、抑制消减杂交和生物信息学等方法。　结果　初步认定样品之一与编码人类血小板反应蛋白 2(TSP2... 详细信息

　目的　获得新西兰大白兔角膜缘碱烧伤前后参与修复调控的差异表达基因。　方法　主要采用细胞培养、体外碱烧伤模型的构建、免疫细胞化学、抑制消减杂交和生物信息学等方法。　结果　初步认定样品之一与编码人类血小板反应蛋白 2(TSP2)的基因tsp2高度同源,其中前 698bp序列与人类tsp2基因完全一样,后 230bp与一种人类Trp-4相关蛋白样的新蛋白(人类染色体定位为 20q11. 21-12)相似,后者属于调控蛋白类,具典型的CpG岛特征。目前已在Gen Bank中登录(AF454919)。　结论　该样品可能是TSP家族中TSP2系列的新成员,它对细胞去黏合状态的诱导和抑制血管发生功能的协调可能是促进角膜碱烧伤后创伤愈合的重要原因。

关键词：角膜缘碱烧伤应激调控基因筛选新蛋白化学烧伤

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PAI-3在正常成人皮肤中的表达及作用的初步研究

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第三军医大学学报 2005年第8期27卷 779-781页

作者：张诚杨恬曾益军第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的　探讨PAI 3在成人皮肤中的表达,为进一步研究PAI 3在皮肤表皮增殖、分化中的作用及机制提供基础。方法　采用免疫组织化学技术和RT PCR检测PAI 3和uPA在成人皮肤中的表达。结果　检测到PAI 3mRNA及uPAmRNA的表达,PAI 3在正常成人... 详细信息

目的　探讨PAI 3在成人皮肤中的表达,为进一步研究PAI 3在皮肤表皮增殖、分化中的作用及机制提供基础。方法　采用免疫组织化学技术和RT PCR检测PAI 3和uPA在成人皮肤中的表达。结果　检测到PAI 3mRNA及uPAmRNA的表达,PAI 3在正常成人皮肤组织中主要位于表皮的基底层、颗粒层和棘层,在分化程度较高的表皮角质形成细胞(keratinocyte ,KC)中,其表达增强,而uPA主要位于皮肤表皮的基底层。结论　PAI 3在正常成人皮肤中有表达并与表皮KC的分化有关。

关键词： PAI-3 uPA 皮肤

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尿激酶型纤溶酶原激活物对毛囊外根鞘细胞增殖的影响

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第三军医大学学报 2002年第3期24卷 277-279页

作者：崔志鸿杨恬高强国杨进第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的　探讨尿激酶型纤溶酶原激活物 (Urokinase typeplasminogenactivator,uPA)对体外培养的毛囊外根鞘 (Outerrootsheath ,ORS)细胞增殖的作用。方法　体外培养了小鼠ORS细胞 ;用MTT法研究了uPA促进因子肝细胞生长因子 (Hepatocytegrow... 详细信息

目的　探讨尿激酶型纤溶酶原激活物 (Urokinase typeplasminogenactivator,uPA)对体外培养的毛囊外根鞘 (Outerrootsheath ,ORS)细胞增殖的作用。方法　体外培养了小鼠ORS细胞 ;用MTT法研究了uPA促进因子肝细胞生长因子 (Hepatocytegrowthfactor ,HGF)和uPA抑制因子Amiloride处理后ORS细胞的增殖变化 ;用RT PCR方法研究了ORS细胞的uPAmRNA的表达情况 ,以及HGF和Amiloride处理ORS细胞后uPA的mRNA表达的变化。结果　体外培养的ORS细胞有uPA表达 ;HGF可促进uPAmRNA的表达并促进ORS细胞的增殖 ;Amiloride抑制uPAmRNA表达并抑制ORS细胞增殖。结论　毛囊ORS细胞表达uPA ,HGF促进uPA的表达并促进ORS细胞增殖 ,Amiloride通过抑制uPA的表达和其活性抑制ORS细胞的增殖。

关键词：尿激酶型纤溶酶原激活物外根鞘细胞 HGF Amiloride 毛囊细胞增殖影响

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毛囊黑素谱系细胞中β-catenin在毛囊周期中的表达

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第三军医大学学报 2011年第8期33卷 793-796页

作者：邓芳郭海英连小华杨恬第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的探讨毛囊周期中,β-catenin在毛囊黑素谱系细胞中的表达变化。方法采用β-gal染色、石蜡切片免疫组化、RT-PCR、Western blot等方法检测Dct-Lac-Z CD1小鼠毛囊的黑素谱系细胞随着毛囊的周期其细胞数量、分布的变化及β-catenin的表... 详细信息

目的探讨毛囊周期中,β-catenin在毛囊黑素谱系细胞中的表达变化。方法采用β-gal染色、石蜡切片免疫组化、RT-PCR、Western blot等方法检测Dct-Lac-Z CD1小鼠毛囊的黑素谱系细胞随着毛囊的周期其细胞数量、分布的变化及β-catenin的表达在mRNA和蛋白水平表达量及部位的变化。结果 WB及RT-PCR结果表明在毛囊周期中,β-cate-nin的表达总量由高到低依次为生长早期(P4、P29)、生长中期(P8)、静止期(P23)、退化期(P18),数据经统计学单因素方差分析,各组间存在显著差异(P<0.05)。免疫组化结果显示在黑素谱系细胞中,β-catenin强表达于活化的黑素母细胞、黑素干细胞和分化过程中的黑素细胞,弱表达于静息的黑素干细胞、成熟分化的黑素细胞。结论β-catenin的上调能促进毛囊黑素谱系细胞的分化,其周期性的表达变化可能是毛发周期性色素生成的基础。

关键词：黑素细胞黑素干细胞毛囊 β-catenin

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Wnt10b在小鼠毛囊周期中的表达

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第三军医大学学报 2009年第10期31卷 891-894页

作者：张坤连小华李玉红杨珂徐伟星懿展杨恬第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的初步探讨Wnt10b在小鼠毛囊生长周期中的表达变化规律及其意义。方法首先用RT-PCR检测Wnt10b在小鼠皮肤中的表达情况,然后以免疫组化检测Wnt10b在毛囊生长周期各阶段的表达定位及变化,同时检测了核增殖抗原Ki67在毛母质中的表达情况... 详细信息

目的初步探讨Wnt10b在小鼠毛囊生长周期中的表达变化规律及其意义。方法首先用RT-PCR检测Wnt10b在小鼠皮肤中的表达情况,然后以免疫组化检测Wnt10b在毛囊生长周期各阶段的表达定位及变化,同时检测了核增殖抗原Ki67在毛母质中的表达情况。结果Wnt10b在生后第1周期生长期皮肤的mRNA表达量显著高于退化期和静止期(P<0.01),生长中期达到峰值,退化期和静止期呈低表达;第2周期生长早期表达量略高于退化期和静止期。Wnt10b蛋白特异性表达于生长期毛囊的毛母质(Matrix)部位;退化期和静止期在整个毛囊都不表达;第2周期生长早期主要表达于毛囊次级毛芽。Ki67在毛母质中的表达变化情况与Wnt10b具有一致性。结论Wnt10b的表达具有严格的时空特异性,生后第1周期特异性表达于生长期毛囊的毛母质细胞,第2周期生长早期表达于毛母质细胞的祖细胞次级毛芽,提示Wnt10b可能对毛母质细胞增殖起作用,进而调控毛囊的生长并维持毛囊周期。

关键词： Wnt10b 毛囊周期毛母质增殖

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