检索结果-内蒙古大学图书馆

免疫学杂志 2004年第1期20卷 37-39,42页

作者：王英张锡林段建华张敬如徐文岳黄复生第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的　克隆斯氏肺吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段 ,并对其进行测序和序列分析。方法　利用简并引物 ,进行RT PCR ,扩增斯氏肺吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段。TA克隆装入pUCm T载体 ,进行鉴定、测序 ;利用DNASIS程序推导其所编码的氨... 详细信息

目的　克隆斯氏肺吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段 ,并对其进行测序和序列分析。方法　利用简并引物 ,进行RT PCR ,扩增斯氏肺吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段。TA克隆装入pUCm T载体 ,进行鉴定、测序 ;利用DNASIS程序推导其所编码的氨基酸序列 ,并与相关虫种半胱氨酸蛋白酶进行氨基酸序列的同源性分析。结果　RT PCR扩增出了一约5 0 0bp的cDNA片段 ,对阳性克隆测序后获得其核酸序列 ,长 4 95bp。将推导的氨基酸序列作同源性分析显示 ,该序列与相关虫种半胱氨酸蛋白酶存在着较高的同源性 ,组成半胱氨酸催化三联体的半胱氨酸、组胺酸和天冬酰胺残基高度保守。结论　克隆获得了斯氏肺吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段 ,该片段包含了与半胱氨酸蛋白酶活性和空间结构相关的重要基因位点。

关键词：斯氏肺吸虫半胱氨酸蛋白酶 cDNA 克隆

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日本血吸虫和斯氏并殖吸虫的rDNA-ITS2遗传多态性研究

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第三军医大学学报 2009年第21期31卷 2073-2077页

作者：何谐张锡林牛靖萱陈琳第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的分析日本血吸虫和斯氏并殖吸虫的核糖体DNA第二内转录间隔区(rDNA-ITS2)基因的遗传变异。方法采集2种吸虫成虫标本,提取其基因组DNA,PCR特异性扩增rDNA-ITS2基因并测序;Clusterx软件进行多序列对比;MEGA4软件计算遗传距离,NJ法和MP... 详细信息

目的分析日本血吸虫和斯氏并殖吸虫的核糖体DNA第二内转录间隔区(rDNA-ITS2)基因的遗传变异。方法采集2种吸虫成虫标本,提取其基因组DNA,PCR特异性扩增rDNA-ITS2基因并测序;Clusterx软件进行多序列对比;MEGA4软件计算遗传距离,NJ法和MP法构建系统进化树;DNAsis软件对rDNA-ITS2序列片段进行模序分析。结果2种方法构建的遗传系统进化树基本结构相似,日本血吸虫与斯氏并殖吸虫间存在较远的遗传距离,但二吸虫ITS2序列间有42.7%的相似性。利用DNAsis软件在日本血吸虫和斯氏并殖吸虫的rDNA-ITS2序列中发现AP_2_CS6、bHLH_CS和CAP_site3种相同的转录因子。结论日本血吸虫和斯氏并殖吸虫虽然在rDNA-ITS2基因水平上存在明显种间差异,但在rDNA-ITS2序列、转录因子方面具有重要的相似性。

关键词：日本血吸虫斯氏并殖吸虫 rDNA-ITS2 序列遗传多态性

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全反式维甲酸脂质体制备及稳定性研究

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第三军医大学学报 2006年第8期28卷 807-809页

作者：张敬如黄复生王昆第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的通过制备不同配方全反式维甲酸脂质体,对处方进行优化。方法采用逆相蒸发法制备全反式维甲酸脂质体,高效液相色谱法检测活性药物含量及包封率,并进行加速试验检测其初步稳定性。结果3组全反式维甲酸脂质体包封率分别为33.98%、42.11... 详细信息

目的通过制备不同配方全反式维甲酸脂质体,对处方进行优化。方法采用逆相蒸发法制备全反式维甲酸脂质体,高效液相色谱法检测活性药物含量及包封率,并进行加速试验检测其初步稳定性。结果3组全反式维甲酸脂质体包封率分别为33.98%、42.11%、70.34%,各配方稳定性好,冻干前后及0℃、25℃、40℃放置后活性药物含量无显著改变。结论全反式维甲酸脂质体制备工艺可行,质量控制方法简单、准确。

关键词：全反式维甲酸脂质体高效液相色谱法

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三峡库区肺吸虫病临床表现和误诊原因分析

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第三军医大学学报 2003年第12期25卷 1068-1068,1072页

作者：张敬如王英杨松张锡林第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

肺吸虫病临床表现复杂多变 ,误诊率高。我们收集了近年来在我室确诊的肺吸病 46例 ,对其临床表现及误诊原因分析如下。1　临床资料1 1　一般资料　　 46例病人中男 3 6例 ,女 10例。年龄 4～ 5 4岁 ,15岁以下儿童占 83 %。从发病到确诊... 详细信息

肺吸虫病临床表现复杂多变 ,误诊率高。我们收集了近年来在我室确诊的肺吸病 46例 ,对其临床表现及误诊原因分析如下。1　临床资料1 1　一般资料　　 46例病人中男 3 6例 ,女 10例。年龄 4～ 5 4岁 ,15岁以下儿童占 83 %。从发病到确诊时间 2 0d至 10年。 41例有吃生溪蟹史 ,4例曾吃油煎溪蟹 ,1例不详。病人主要来自三峡库区的奉节、丰都、云阳、涪陵、万县 ,少数病人来自渝北、市郊和川南地区等。 46例病人都为我校附属医院的门诊或住院病人。1 2　临床表现　　本组病例起病均较缓慢 ,从吃溪蟹到发病最短 2 0d ,最长 2年。发病初期症状轻微 ,主要表现为胸部不适、食

关键词：三峡库区肺吸虫病临床表现误诊原因分析诊断

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约氏疟原虫子孢子感染对大鼠腹腔巨噬细胞B7.1、B7.2分子表达的影响

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第三军医大学学报 2006年第20期28卷 2024-2026页

作者：宋蓓张锡林段建华吕杨第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的研究约氏疟原虫感染后协同刺激分子B7.1、B7.2在大鼠腹腔巨噬细胞的表达情况,探讨B7.1、B7.2分子在宿主抵抗疟原虫感染免疫中的作用。方法利用约氏疟原虫感染大鼠的动物模型,分别在感染约氏疟原虫子孢子后2、12、24、48、72h分离获... 详细信息

目的研究约氏疟原虫感染后协同刺激分子B7.1、B7.2在大鼠腹腔巨噬细胞的表达情况,探讨B7.1、B7.2分子在宿主抵抗疟原虫感染免疫中的作用。方法利用约氏疟原虫感染大鼠的动物模型,分别在感染约氏疟原虫子孢子后2、12、24、48、72h分离获得大鼠腹腔巨噬细胞,通过免疫荧光及激光扫描共聚焦显微镜技术定量分析B7.1、B7.2分子表达情况。结果在宿主感染约氏疟原虫后巨噬细胞B7.1、B7.2分子表达增加;B7.1上调较缓慢,并在72h后出现回落;B7.2上调非常迅速,在48h达到峰值,从72h开始略有下降;在所选时间范围内B7.2的表达水平始终高于B7.1(P<0.05)。结论疟原虫子孢子感染大鼠后,B7.1、B7.2分子表达水平发生改变,提示协同刺激因子参与了宿主免疫系统活化,推测该现象与受疟原虫感染哺乳动物机体的免疫防御、免疫调控密切相关。

关键词： B7.1 B7.2 约氏疟原虫抗原递呈细胞激光扫描共聚焦显微镜

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大劣按蚊AdS7基因的克隆及分析

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第三军医大学学报 2004年第6期26卷 476-478页

作者：郝宏兴黄复生段建华况明书王英第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的　克隆AdS7基因cDNA序列 ,为大劣按蚊基因定量研究提供内参照。方法　采用RT PCR扩增、TA克隆技术获得AdS7cDNA部分序列 ,标记地高辛AdS7探针 ,从大劣按蚊cDNA文库中筛选得到AdS7全长克隆 ,以半定量RT PCR方法研究血餐和约氏疟原虫... 详细信息

目的　克隆AdS7基因cDNA序列 ,为大劣按蚊基因定量研究提供内参照。方法　采用RT PCR扩增、TA克隆技术获得AdS7cDNA部分序列 ,标记地高辛AdS7探针 ,从大劣按蚊cDNA文库中筛选得到AdS7全长克隆 ,以半定量RT PCR方法研究血餐和约氏疟原虫感染对其表达水平的影响。结果　从大劣按蚊cDNA克隆得到长 464bp的AdS7基因cD NA部分序列 ,从大劣按蚊cDNA文库筛选获得了长 871bp的AdS7基因全长克隆 ,大劣按蚊吸血和感染约氏疟原虫后 2 4h ,AdS7表达水平没有显著变化。

关键词： AdS7 基因克隆半定量RT-PCR

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衰老可导致间充质干细胞氧化损伤修复能力降低

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中国组织工程研究 2013年第10期17卷 1801-1808页

作者：张岳余瑾张艺石家仲黄亚琴杨劲解放军第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆市400038

背景:DNA损伤及损伤后的应答异常会导致基因组不稳定,基因组不稳定是肿瘤形成的重要因素之一。在细胞衰老过程中,衰老细胞基因组稳定性下降,对于端粒、端粒酶的研究以及对于原癌基因和抑癌基因的研究,表明细胞衰老和肿瘤有密切的联系。... 详细信息

背景:DNA损伤及损伤后的应答异常会导致基因组不稳定,基因组不稳定是肿瘤形成的重要因素之一。在细胞衰老过程中,衰老细胞基因组稳定性下降,对于端粒、端粒酶的研究以及对于原癌基因和抑癌基因的研究,表明细胞衰老和肿瘤有密切的联系。目的:以氧化损伤为模型,探索DNA损伤应答异常是衰老细胞基因组不稳定性的直接原因。方法:培养骨髓间充质干细胞,流式细胞术进行检测鉴定。衰老相关β-半乳糖苷酶检测细胞衰老情况,BrdU掺入实验检测细胞增殖情况。建立体外培养人间充质干细胞衰老模型,通过CCK-8法检测细胞存活情况,DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧,单细胞凝胶电泳观察细胞DNA损伤情况。结果与结论:人间充质干细胞经长期培养发生衰老,培养40代以后,衰老相关β-半乳糖苷酶染色阳性细胞明显增多,BrdU掺入能力显著下降,提示间充质干细胞长期培养后发生衰老。生存曲线结果显示H2O2作用下,年轻间充质干细胞存活率明显高于衰老间充质干细胞;活性氧及单细胞凝胶电泳结果显示,H2O2处理后衰老间充质干细胞DNA损伤更严重,修复时间更长,说明衰老间充质干细胞比年轻间充质干细胞对H2O2损伤更为敏感。

关键词：干细胞干细胞培养与分化间充质干细胞衰老 DNA损伤修复氧化损伤衰老相关β-半乳糖苷酶活性氧单细胞凝胶电泳国家自然科学基金干细胞图片文章

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木犀草素脂质体制剂处方和工艺优化研究

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第三军医大学学报 2008年第9期30卷 810-813页

作者：幸海燕王昆赵凯张敬如黄复生第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的优化制备注射用木犀草素脂质体的处方工艺。方法采用薄膜分散法和冻干工艺进行木犀草素脂质体制备,并以载药量、包封率为评价指标,优化制备处方和工艺。结果木犀草素脂质体制备的最佳工艺处方为磷脂∶木犀草素10∶1,磷脂∶胆固醇4... 详细信息

目的优化制备注射用木犀草素脂质体的处方工艺。方法采用薄膜分散法和冻干工艺进行木犀草素脂质体制备,并以载药量、包封率为评价指标,优化制备处方和工艺。结果木犀草素脂质体制备的最佳工艺处方为磷脂∶木犀草素10∶1,磷脂∶胆固醇4∶1,水化介质为注射用水,温度为50℃。按照此处方工艺制备的木犀草素脂质体平均载药量、平均包封率、平均粒径分别为7.21%、66.8%、278.4nm。结论按优化处方和工艺制备的木犀草素脂质体各项指标基本符合静脉应用要求。

关键词：木犀草素脂质体包封率载药量

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斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段的克隆和序列分析

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第三军医大学学报 2002年第9期24卷 1052-1055页

作者：王英张锡林段建华徐文岳第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的　克隆斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段 ,获得其序列 ,并进行序列分析。方法　利用简并引物 ,进行RT PCR ,扩增斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段。TA克隆装入pUCm T载体 ,进行鉴定、测序 ;利用DNASIS程序推导其所编... 详细信息

目的　克隆斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段 ,获得其序列 ,并进行序列分析。方法　利用简并引物 ,进行RT PCR ,扩增斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段。TA克隆装入pUCm T载体 ,进行鉴定、测序 ;利用DNASIS程序推导其所编码的氨基酸序列 ,并与相关虫种半胱氨酸蛋白酶进行氨基酸序列的同源性分析。结果　RT PCR扩增出了一 5 0 0bp左右的cDNA片段 ,对阳性克隆测序后获得其核酸序列 ,长 498bp。推导出的氨基酸序列长 166;氨基酸序列的同源性分析显示 ,该序列与相关虫种半胱氨酸蛋白酶存在着很高的同源性 ,组成半胱氨酸催化三联体的半胱氨酸、组胺酸和天冬酰胺残基高度保守。

关键词：斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶 cDNA片段克隆序列分析

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三峡库区12例脑型肺吸虫病的误诊原因及治疗效果分析

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第三军医大学学报 2007年第7期29卷 648-649页

作者：周桃莉张锡林张敬如第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

三峡库区的巫溪、奉节、云阳等地均为肺吸虫病的中、高度流行区。致病虫种为斯氏狸殖吸虫,引起肺外型肺吸虫病,其中脑型肺吸虫病是一种严重的肺吸虫病。本教研室从2002年起确认肺吸早病95例,其中肺吸虫脑病共12例,所占比例为12.6%,现将... 详细信息

三峡库区的巫溪、奉节、云阳等地均为肺吸虫病的中、高度流行区。致病虫种为斯氏狸殖吸虫,引起肺外型肺吸虫病,其中脑型肺吸虫病是一种严重的肺吸虫病。本教研室从2002年起确认肺吸早病95例,其中肺吸虫脑病共12例,所占比例为12.6%,现将其治疗前后情况作分析,其中3例典型病例介绍如下:[第一段]

关键词：脑型肺吸虫病误诊三峡库区

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