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神经解剖学杂志 2008年第1期24卷 101-104页

作者：曾俊伟阮怀珍第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

ATP是维持机体细胞正常代谢所必须的能量载体,但同时也是一种重要的神经递质。1978年,Bumstock等将ATP受体分为P1和P2两类受体:P1受体又称腺苷受体;P2受体分为P2X(离子通道受体)和P2Y(G蛋白偶联受体)。由于分子克隆技术的迅速发展,迄今... 详细信息

ATP是维持机体细胞正常代谢所必须的能量载体,但同时也是一种重要的神经递质。1978年,Bumstock等将ATP受体分为P1和P2两类受体:P1受体又称腺苷受体;P2受体分为P2X(离子通道受体)和P2Y(G蛋白偶联受体)。由于分子克隆技术的迅速发展,迄今已从人体组织细胞克隆出9种P2Y受体,分别是P2Y1,2,4,6,11,12,13,14,15受体,除P2Y15受体之外的8种受体在人体神经系统均广泛分布,不同亚型P2Y受体通过不同G蛋白激活不同的胞内信号转导通路,执行特定的生理功能。本文就近年来神经系统P2Y受体方面的研究进展综述如下。[第一段]

关键词：神经系统 G蛋白偶联受体 ATP受体体功能信号转导通路能量载体机体细胞神经递质

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ATP/P2X受体在痛觉调制中的作用及其与其它递质/受体的相互关系

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神经解剖学杂志 2008年第4期24卷 436-438页

作者：刘晓红阮怀珍第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

长期以来,人们只认识到ATP作为体内的一种储能、供能物质在细胞能量代谢中起重要作用。直到1959年Hohon研究发现刺激外周神经末梢时有ATP释放,才第一次提示了ATP可能是一种神经递质。此后一系列的研究证明ATP及其代谢产物ADP、AMP和腺... 详细信息

长期以来,人们只认识到ATP作为体内的一种储能、供能物质在细胞能量代谢中起重要作用。直到1959年Hohon研究发现刺激外周神经末梢时有ATP释放,才第一次提示了ATP可能是一种神经递质。此后一系列的研究证明ATP及其代谢产物ADP、AMP和腺苷都有传递信息的作用。1978年Burnstock将它们所结合的受体正式命名为“嘌呤能受体”,[第一段]

关键词： P2X受体神经递质 ATP 痛觉调制能量代谢神经末梢代谢产物 ADP

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神经病理性痛大鼠背根神经节P2X3受体表达及电生理学特性的改变

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第三军医大学学报 2008年第4期30卷 288-291页

作者：刘晓红曾俊伟张金海阮怀珍第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 遵义医学院生理学教研室贵州遵义563003

目的观察坐骨神经缩窄性损伤(CCI)致神经病理性痛后大鼠背根节神经元P2X3受体的表达和电生理学特性的变化。方法应用免疫组化技术观察CCI后不同时间相应节段(L4、L5、L6)脊髓及背根神经节P2X3受体表达的变化;全细胞膜片钳技术观察CCI后... 详细信息

目的观察坐骨神经缩窄性损伤(CCI)致神经病理性痛后大鼠背根节神经元P2X3受体的表达和电生理学特性的变化。方法应用免疫组化技术观察CCI后不同时间相应节段(L4、L5、L6)脊髓及背根神经节P2X3受体表达的变化;全细胞膜片钳技术观察CCI后不同时间L4、L5、L6节段背根节神经元ATP反应电流的变化。结果CCI后7、14d,损伤同侧L4、L5、L6节段背根节P2X3免疫阳性神经元数量明显增加,而且染色加深,相应节段的脊髓背角浅层P2X3免疫反应性亦明显增加。CCI后7、14d,损伤同侧相应节段背根节产生ATP快反应电流的细胞数量明显增加,电流幅度亦增强。应用非选择性P2X受体拮抗剂Suramin能明显抑制ATP反应电流。结论坐骨神经缩窄性损伤致神经痛后同侧对应节段的背根节神经元P2X3受体表达明显增加,ATP快反应电流明显增强。

关键词：神经损伤背根神经节 P2X受体膜片钳 ATP

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帕金森病发病机制的研究现状

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局解手术学杂志 2008年第6期17卷 420-421,423页

作者：张艳玲苏炳银文灿梁亚杰第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

帕金森病（parkinson disease，PD）是中枢神经系统常见的一种变性疾病，中老年发病，起病缓慢，慢性进行性发展，以静止性震颤、肌强直、姿势异常和运动减少为主要表现。主要病变在黑质致密带，可累及蓝斑、迷走神经背核等。尽管病理... 详细信息

帕金森病（parkinson disease，PD）是中枢神经系统常见的一种变性疾病，中老年发病，起病缓慢，慢性进行性发展，以静止性震颤、肌强直、姿势异常和运动减少为主要表现。主要病变在黑质致密带，可累及蓝斑、迷走神经背核等。尽管病理改变位置明确、局限，但帕金森病的病因及发病机制目前仍不明确，本文就PD发病机制的进展作一综述。

关键词：帕金森病发病机制病因

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缺氧性脑损伤对大鼠癫痫敏感性和脑内PSD-95表达的影响

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第三军医大学学报 2008年第14期30卷 1353-1356页

作者：陈秀吴万福胡长林蔡文琴杨忠重庆医科大学附属第二医院神经内科重庆400010 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的探讨缺氧性脑损伤后癫痫发作敏感性及其与PSD-95的关系。方法采用成年雄性SD大鼠,以8%氧氮混合气体建立大鼠缺氧性脑损伤模型,腹腔注射戊四唑(pentylenetetrazol,PTZ)10mg/(kg.5min)和35mg/(kg.2d)点燃大鼠,检测其癫痫敏感性的改变... 详细信息

目的探讨缺氧性脑损伤后癫痫发作敏感性及其与PSD-95的关系。方法采用成年雄性SD大鼠,以8%氧氮混合气体建立大鼠缺氧性脑损伤模型,腹腔注射戊四唑(pentylenetetrazol,PTZ)10mg/(kg.5min)和35mg/(kg.2d)点燃大鼠,检测其癫痫敏感性的改变。分别用免疫组织化学和免疫印迹方法观察大鼠颞叶皮层、海马和中脑神经元脱失的病理学改变以及脑内PSD-95表达的变化。结果缺氧损伤后大鼠癫痫敏感性明显增强。缺氧大鼠和缺氧后PTZ致痫大鼠海马CA1区、颞叶皮层和中脑神经元不同程度的脱失,缺氧大鼠脑内PSD-95表达明显降低。结论成年大鼠缺氧性脑损害后癫痫敏感性增强,可能与神经元脱失以及脑内PSD-95表达变化有关。

关键词：缺氧性脑损伤癫痫敏感性神经元脱失 PSD-95 戊四唑

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成年大鼠缺氧性脑损伤后亚临床痫性发作及海马苔藓纤维出芽

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第三军医大学学报 2008年第1期30卷 49-52页

目的探讨缺氧性脑损伤后亚临床痫性发作的病理生理机制。方法采用成年雄性SD大鼠,充以8%氧氮混合气体缺氧后,监测大鼠脑电活动,检测海马组织苔藓纤维出芽(mossy fiber sprouting,MFS)的变化。结果大鼠缺氧损伤后痫样放电的发生率为19.6... 详细信息

目的探讨缺氧性脑损伤后亚临床痫性发作的病理生理机制。方法采用成年雄性SD大鼠,充以8%氧氮混合气体缺氧后,监测大鼠脑电活动,检测海马组织苔藓纤维出芽(mossy fiber sprouting,MFS)的变化。结果大鼠缺氧损伤后痫样放电的发生率为19.67%,亚临床痫性发作组缺氧后7d海马CA3区下锥体细胞层棕黑色颗粒逐渐增多:14d呈束状、斑片状颗粒沉积;28d呈现明显颗粒沉积条带,亚临床痫性发作组海马CA3区苔藓纤维出芽评分明显高于非亚临床痫性发作组和对照组,而3组齿状回(dentate gyrus;DG)内分子层苔藓纤维出芽评分无差异(P>0.05)。结论成年大鼠缺氧性脑损害后可出现痫样放电并在海马CA3区形成苔藓纤维出芽,而海马CA3区苔藓纤维出芽可能与缺氧性脑损伤后痫性发作有关。

关键词：缺氧性脑损伤痫性发作苔藓纤维出芽

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NOV基因真核表达载体的构建及在大鼠真皮多能干细胞中的表达

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中华神经医学杂志 2008年第4期7卷 353-356页

作者：刘雁平李露斯王涛徐文岳屈纪富第三军医大学西南医院神经内科重庆400038 第三军医大学西南医院急救部重庆400038 第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的构建肾母细胞瘤过度表达（NOV）基因真核表达载体并检测其在真皮多能干细胞中的表达。方法利用逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）方法，以新生大鼠大脑组织总RNA为模板，扩增出1l178bp的NOV基因的cDNA编码区序列，然后用Hind Ⅲ和BamH... 详细信息

目的构建肾母细胞瘤过度表达（NOV）基因真核表达载体并检测其在真皮多能干细胞中的表达。方法利用逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）方法，以新生大鼠大脑组织总RNA为模板，扩增出1l178bp的NOV基因的cDNA编码区序列，然后用Hind Ⅲ和BamH Ⅰ双酶切后定向克隆入真核表达载体pEGFP-N1质粒中，用脂质体法将重组质粒转染入大鼠真皮多能干细胞中，荧光显微镜观察转染产物．RT—PCR法检测转染细胞中NOV基因表达。结果NOV基因cDNA正确克隆到真核表达载体pEGFP-N1质粒中；重组质粒体外转染入大鼠真皮多能干细胞后，可见转染细胞有绿色荧光表达，转染细胞中检测到NOV基因。结论构建成功NOV基因重组质粒，并能在大鼠真皮多能干细胞中稳定表达，为NOV基因及真皮多能干细胞的作用研究提供了有利的分子工具。

关键词： NOV基因逆转录-多聚酶链反应基因克隆真皮多能干细胞

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免疫电镜技术运用过程中电子染色方法的选用

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局解手术学杂志 2008年第2期17卷 88-90页

作者：赵承军张东梅邓其跃陈鹏慧蔡文琴陶忠芬张吉强第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 第三军医大学基础医学部中心实验室重庆400038

目的探究免疫电镜不同染色方法对免疫组化阳性实验结果影响的关系。方法组织切片经常规免疫组化(雌激素受体GPR30)并行DAB-硫酸镍铵显色后进行电镜切片,然后分为双氧铀-柠檬酸铅双染、双氧铀单染与未染色3组,以便对不同电子染色结果进... 详细信息

目的探究免疫电镜不同染色方法对免疫组化阳性实验结果影响的关系。方法组织切片经常规免疫组化(雌激素受体GPR30)并行DAB-硫酸镍铵显色后进行电镜切片,然后分为双氧铀-柠檬酸铅双染、双氧铀单染与未染色3组,以便对不同电子染色结果进行比较。结果GPR30免疫阳性产物位于细胞核外的膜性结构上,在铀-铅双染组显示很高的电子密度,但是背景染色也很深,在铀单染组的反差比较好,而未染色组的反差更好。结论免疫电镜技术中针对不同的免疫阳性反应选用不同的电子染色方法,有利于阳性结果的判断与鉴别。

关键词：免疫电镜技术雌激素受体海马电子染色

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Poll在膀胱尿路上皮癌细胞株及肿瘤组织中mRNA的表达

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第三军医大学学报 2008年第14期30卷 1305-1307页

作者：曾益军杨劲金锡御陈志文宋波位全芳季惠翔李劲周虎传第三军医大学:西南医院全军泌尿外科研究所第三军医大学:基础医学部生物化学与分子生物学教研室

目的检测DNA聚合酶l（Polymerase iota，Poll）在尿路上皮癌细胞株及肿瘤组织的表达，探讨Poll在尿路上皮癌组织表达的意义。方法培养尿路上皮癌细胞株BIU87、T24，反转录聚合酶链式反应（Reverse transciptase-polymer-ase chain reac... 详细信息

目的检测DNA聚合酶l（Polymerase iota，Poll）在尿路上皮癌细胞株及肿瘤组织的表达，探讨Poll在尿路上皮癌组织表达的意义。方法培养尿路上皮癌细胞株BIU87、T24，反转录聚合酶链式反应（Reverse transciptase-polymer-ase chain reaction，RT-PCR）检测Poll在尿路上皮癌细胞株的表达；收集人膀胱黏膜正常组织及临床膀胱尿路上皮癌、肾盂尿路上皮癌组织标本，检测组织标本中Poll的表达。结果Poll在尿路上皮癌细胞株有丰富表达，显著高于膀胱正常黏膜组织；Poll在膀胱尿路上皮癌及肾盂癌组织的表达显著高于膀胱正常黏膜组织的表达（P〈0．01），并与尿路上皮癌的分级有关。结论Poll在尿路上皮癌组织的高表达可能与尿路上皮癌的发生、发展有关。

关键词： DNA聚合酶 Poll 尿路上皮癌

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离体脊髓星形胶质细胞的纯化与鉴定

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局解手术学杂志 2008年第1期17卷 16-18页

作者：文灿李淑蓉苏炳银第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038 成都医学院病理学教研室四川成都610081

目的探索新生大鼠脊髓星形胶质细胞的分离、培养与传代及纯化方法,鉴定其培养纯度。方法分离、培养新生大鼠脊髓星形胶质细胞,用换液时暴露结合旋转法加以纯化,酶消化法传代后进行免疫组化鉴定,并染核计数星形胶质细胞的纯度。结果星形... 详细信息

目的探索新生大鼠脊髓星形胶质细胞的分离、培养与传代及纯化方法,鉴定其培养纯度。方法分离、培养新生大鼠脊髓星形胶质细胞,用换液时暴露结合旋转法加以纯化,酶消化法传代后进行免疫组化鉴定,并染核计数星形胶质细胞的纯度。结果星形胶质细胞贴壁快,多在12 h内,3 d后数量显著增加;免疫细胞化学染色显示,NF200抗体染色为阴性,提示培养盖片中不含神经元;GFAP阳性染色细胞高达95.8%。结论换液时短暂暴露结合恒温旋转法可纯化得到高纯度的星形胶质细胞,是一种简单、高效的星形胶质细胞纯化方法。

关键词：星形胶质细胞神经微丝蛋白胶质纤维酸性蛋白

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