检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2006年第9期28卷 892-895页

作者：林森杨恬曾益军金旻向明明第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038 第三军医大学西南医院皮肤科重庆400038

目的定性定量地检测毛囊bu lge细胞体外培养条件下分泌的β-神经生长因子(-βnerve growth factor,β-NGF)及其与bu lge细胞生长状态的关系。方法首先使用显微操作技术剥离出原代组织,然后培养原代细胞,使用超薄切片和透射电镜技术来观... 详细信息

目的定性定量地检测毛囊bu lge细胞体外培养条件下分泌的β-神经生长因子(-βnerve growth factor,β-NGF)及其与bu lge细胞生长状态的关系。方法首先使用显微操作技术剥离出原代组织,然后培养原代细胞,使用超薄切片和透射电镜技术来观察原代细胞超微结构,使用酶联免疫吸附(enzym e linked immunosorbent assay,ELISA)方法测定原代bu lge细胞分泌的β-NGF,利用免疫细胞化学(immunocytochem istry,ICC)方法检测原代细胞中β-NGF的表达。结果成功培养出原代bu lge细胞,ICC方法检测到原代培养的bu lge细胞质表达强阳性β-NGF。超薄切片和透射电镜技术能够显示出原代培养bu lge细胞的内部结构,即核质比大,细胞器较少。通过ELISA方法能够测定出原代细胞分泌的β-NGF与体外原代培养的bu lge细胞特性呈规律性变化。结论原代bu lge细胞分泌的β-NGF呈规律性表达,即生长高峰时期表达最为丰富,这与毛囊bu lge细胞的生长状态具有规律性变化有关,因此他们具有必然的联系。

关键词：毛囊 β-NGF bulge细胞

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日本脑炎病毒基因片段-GM-CSF双顺反子表达载体的构建

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第三军医大学学报 2006年第10期28卷 1019-1021页

作者：高娜彭涛陈炜张俊磊王嘉丽万颖杰陈宗涛李东英田衍平安静第三军医大学基础医学部微生物学教研室

目的利用分子生物学技术,构建pCAG- JG双顺反子真核表达质粒,为研制新型的日本脑炎病毒(Japanese encephalitisvirus,JEV)核酸疫苗奠定基础。方法RT PCR扩增JEV的prM- E- NS1和小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte macrophageco... 详细信息

目的利用分子生物学技术,构建pCAG- JG双顺反子真核表达质粒,为研制新型的日本脑炎病毒(Japanese encephalitisvirus,JEV)核酸疫苗奠定基础。方法RT PCR扩增JEV的prM- E- NS1和小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte macrophagecolony stimulatingfactor,GM -CSF)后,分别克隆入中间载体pIRES,经酶切获得prM- E- NS1IRES- GM -CSF片段,并将其插入pCAGGSP7质粒,鉴定阳性重组子。结果成功的将prM- E -NS1IRES- GM- CSF片段插入到pCAGGSP7质粒,测序鉴定结果正确,该质粒命名为pCAG- JG。结论成功的构建了pCAG JG双顺反子真核表达质粒。

关键词：日本脑炎病毒 GM-CSF pCAG-JG

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肽抗生素hPAB-β制备工艺中基因工程菌的改建

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第三军医大学学报 2006年第22期28卷 2243-2246页

作者：张椿丛延广胡福泉饶贤才第三军医大学基础医学部微生物学教研室

目的通过重新构建新的3拷贝串联体基因工程菌phPAB-β(3)/M15,在原有肽抗生素hPAB-β制备工艺路线基础上,使发酵后目的肽的最终产量得到提高。方法重新构建含有重组质粒pQE31-hPAB-β(3)的基因工程菌M15,然后筛选出能够稳定而且高效表... 详细信息

目的通过重新构建新的3拷贝串联体基因工程菌phPAB-β(3)/M15,在原有肽抗生素hPAB-β制备工艺路线基础上,使发酵后目的肽的最终产量得到提高。方法重新构建含有重组质粒pQE31-hPAB-β(3)的基因工程菌M15,然后筛选出能够稳定而且高效表达目标蛋白的最佳工程菌株,进行传代稳定性分析,并明确新建工程菌中目标融合蛋白的表达形式和亲和层析的效果,最后通过相同条件下,在逐步放大的发酵规模(1L摇瓶,3.7L和10L发酵罐),与以往的3拷贝串联体工程菌phPAB-β(3)/JM109进行对比研究(湿菌产量、目标蛋白表达率),同时观察新建工程菌在10L发酵中目标蛋白的表达和遗传稳定性。结果筛选出的最佳工程菌株的目标蛋白的表达效率为34.8%,经LB培养传代10次后,点种LB(AMP、KAN)平板,生长率为100%,质粒保存率达100%。在1L摇瓶,3.7L和10L发酵罐的发酵规模下,phPAB-β(3)/M15与phPAB-β(3)/JM109一样,目标融合蛋白都以包涵体形式表达,亲和层析效果相近,目标蛋白表达率无显著性差异(P>0·05),但发酵产量大于后者,有非常显著性差异(P<0·01)。且新建工程菌在10L发酵中发酵产量达到55.15g/L,诱导表达后的第5小时,蛋白表达达到高峰,蛋白表达率为30.2%,重组质粒保存率为100%。结论新构建工程菌phPAB-β(3)/M15比起原来基因工程菌phPAB-β(3)/JM109,是更为理想且利于肽抗生素hPAB-β工业生产的基因工程菌。

关键词：肽抗生素 hPAB—β 发酵 M15

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抑制Blimp-1表达导致浆细胞去分化

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免疫学杂志 2006年第2期22卷 141-146页

作者：邓少丽胡福泉蹇锐蒋静程小星第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038

目的探讨转录因子Blimp-1在浆细胞发育中的作用。方法应用慢病毒载体稳定表达针对Blimp-1的siR-NA,抑制骨髓瘤细胞J558L中Blimp-1的表达。采用免疫荧光及流式细胞技术观察Blimp-1抑制前后细胞的免疫表型变化,半定量RT-PCR检测XBP-1J、-c... 详细信息

目的探讨转录因子Blimp-1在浆细胞发育中的作用。方法应用慢病毒载体稳定表达针对Blimp-1的siR-NA,抑制骨髓瘤细胞J558L中Blimp-1的表达。采用免疫荧光及流式细胞技术观察Blimp-1抑制前后细胞的免疫表型变化,半定量RT-PCR检测XBP-1J、-chainc、-myc、BCMA的变化。结果Blimp-1抑制后,浆细胞表面标志CD138表达显著下降,B淋巴细胞免疫标志CD19表达增加。同时,与浆细胞功能及存活密切相关的XBP-1、J-chain、BCMA基因表达下降,而促进B淋巴细胞增殖发育的c-myc表达上升。结论浆细胞中Blimp-1被抑制后,浆细胞发育程序出现再编程,发生了去分化现象,返回到更早期的发育阶段,提示Blimp-1特异性shRNA有可能用于浆细胞相关疾病的治疗。

关键词： Blimp-1 浆细胞细胞发育 BCMA RNA干扰

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长时连续作业对大鼠下丘脑及背缝核orexin-A和受体的影响

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第三军医大学学报 2006年第10期28卷 1046-1048页

作者：王臻谌小维张春青樊宏孝程赛宇阮怀珍胡志安第三军医大学基础医学部神经生物学教研室第三军医大学基础医学部基础医学教学实验中心重庆400038

目的研究长时连续作业对大鼠促觉醒肽orexin- A及受体表达的影响。方法使用长时连续作业动物模型,采用免疫组织化学方法结合图像分析技术测定orexin -A及受体OX1R在下丘脑外侧区,背缝核的变化。结果经过长时连续作业训练后,跑台组与对... 详细信息

目的研究长时连续作业对大鼠促觉醒肽orexin- A及受体表达的影响。方法使用长时连续作业动物模型,采用免疫组织化学方法结合图像分析技术测定orexin -A及受体OX1R在下丘脑外侧区,背缝核的变化。结果经过长时连续作业训练后,跑台组与对照组相比,orexin- A阳性细胞在下丘脑外侧区、orexin- A阳性纤维在背缝核及OX1R在背缝核均显著减少。结论长时连续作业可造成促觉醒肽orexin- A和OX1R的表达降低。

关键词：长时连续作业 orexin-A 疲劳觉醒免疫组织化学背缝核下丘脑

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约氏疟原虫子孢子感染对大鼠腹腔巨噬细胞B7.1、B7.2分子表达的影响

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第三军医大学学报 2006年第20期28卷 2024-2026页

作者：宋蓓张锡林段建华吕杨第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的研究约氏疟原虫感染后协同刺激分子B7.1、B7.2在大鼠腹腔巨噬细胞的表达情况,探讨B7.1、B7.2分子在宿主抵抗疟原虫感染免疫中的作用。方法利用约氏疟原虫感染大鼠的动物模型,分别在感染约氏疟原虫子孢子后2、12、24、48、72h分离获... 详细信息

目的研究约氏疟原虫感染后协同刺激分子B7.1、B7.2在大鼠腹腔巨噬细胞的表达情况,探讨B7.1、B7.2分子在宿主抵抗疟原虫感染免疫中的作用。方法利用约氏疟原虫感染大鼠的动物模型,分别在感染约氏疟原虫子孢子后2、12、24、48、72h分离获得大鼠腹腔巨噬细胞,通过免疫荧光及激光扫描共聚焦显微镜技术定量分析B7.1、B7.2分子表达情况。结果在宿主感染约氏疟原虫后巨噬细胞B7.1、B7.2分子表达增加;B7.1上调较缓慢,并在72h后出现回落;B7.2上调非常迅速,在48h达到峰值,从72h开始略有下降;在所选时间范围内B7.2的表达水平始终高于B7.1(P<0.05)。结论疟原虫子孢子感染大鼠后,B7.1、B7.2分子表达水平发生改变,提示协同刺激因子参与了宿主免疫系统活化,推测该现象与受疟原虫感染哺乳动物机体的免疫防御、免疫调控密切相关。

关键词： B7.1 B7.2 约氏疟原虫抗原递呈细胞激光扫描共聚焦显微镜

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全反式维甲酸脂质体制备及稳定性研究

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第三军医大学学报 2006年第8期28卷 807-809页

作者：张敬如黄复生王昆第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的通过制备不同配方全反式维甲酸脂质体,对处方进行优化。方法采用逆相蒸发法制备全反式维甲酸脂质体,高效液相色谱法检测活性药物含量及包封率,并进行加速试验检测其初步稳定性。结果3组全反式维甲酸脂质体包封率分别为33.98%、42.11... 详细信息

目的通过制备不同配方全反式维甲酸脂质体,对处方进行优化。方法采用逆相蒸发法制备全反式维甲酸脂质体,高效液相色谱法检测活性药物含量及包封率,并进行加速试验检测其初步稳定性。结果3组全反式维甲酸脂质体包封率分别为33.98%、42.11%、70.34%,各配方稳定性好,冻干前后及0℃、25℃、40℃放置后活性药物含量无显著改变。结论全反式维甲酸脂质体制备工艺可行,质量控制方法简单、准确。

关键词：全反式维甲酸脂质体高效液相色谱法

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约氏疟原虫卵囊与唾液腺子孢子不同时相点的CSP与MAEBL基因表达研究

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第三军医大学学报 2006年第8期28卷 757-759页

作者：陈继德张锡林段建华宋蓓第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的为研究约氏疟原虫在蚊体内发育过程中,卵囊子孢子与唾液腺子孢子不同时相点的环子孢子蛋白(circumsporozoiteprotein,CSP)与红细胞结合蛋白(erythrocytebindingprotein,MAEBL)基因表达水平的变化。方法分别在约氏疟原虫感染斯氏按蚊... 详细信息

目的为研究约氏疟原虫在蚊体内发育过程中,卵囊子孢子与唾液腺子孢子不同时相点的环子孢子蛋白(circumsporozoiteprotein,CSP)与红细胞结合蛋白(erythrocytebindingprotein,MAEBL)基因表达水平的变化。方法分别在约氏疟原虫感染斯氏按蚊后5、7、10d取蚊腹部、12、15、18d取蚊头胸部分离疟原虫总RNA,以rRNA28S为对照,通过RTPCR法半定量分析CSP与MAEBLmRNA表达量。结果蚊期疟原虫子孢子CSP与MAEBL转录显著上调(P<0.01),在侵入唾液腺后达到峰值。结论疟原虫唾液腺子孢子CSP和MAEBLmRNA高水平表达,提示CSP和MAEBL可能与侵入脊椎动物宿主密切相关。

关键词： CSP MAEBL 约氏疟原虫斯氏按蚊

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鞭毛抗原与细菌的群集运动

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免疫学杂志 2006年第z1期22卷 117-119页

作者：陈志瑾丛延广饶贤才第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038

群集运动是指在培养基表面某些运动细菌依赖鞭毛的群体迁移行为,涉及繁殖体细胞分化成群集细胞,发生形态、代谢以及蛋白表达等显著变化。菌细胞密度、表面接触和生理学信号均可成为群集运动的刺激因素。群集运动的关键是鞭毛的生物合成,... 详细信息

群集运动是指在培养基表面某些运动细菌依赖鞭毛的群体迁移行为,涉及繁殖体细胞分化成群集细胞,发生形态、代谢以及蛋白表达等显著变化。菌细胞密度、表面接触和生理学信号均可成为群集运动的刺激因素。群集运动的关键是鞭毛的生物合成,flhDC鞭毛操纵子是支配分化和迁移的细菌调控网络的焦点。

关键词：群集运动分子机制鞭毛抗原

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异丙酚对大鼠中枢神经核团一氧化氮合酶表达的影响

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第三军医大学学报 2006年第16期28卷 1704-1706页

作者：文欣荣陶国才范晓棠张金海胡荣第三军医大学西南医院麻醉科重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

目的通过检测异丙酚静脉全麻诱导大鼠中枢一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)的表达,探讨异丙酚的可能中枢作用位点。方法采用NADPH-d酶组织化学法检测大鼠脑片的NOS阳性神经元在神经核团的分布。结果异丙酚作用的大鼠伏核、外侧隔... 详细信息

目的通过检测异丙酚静脉全麻诱导大鼠中枢一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)的表达,探讨异丙酚的可能中枢作用位点。方法采用NADPH-d酶组织化学法检测大鼠脑片的NOS阳性神经元在神经核团的分布。结果异丙酚作用的大鼠伏核、外侧隔核、下丘脑室旁核、膝状体腹下核、背外侧膝状核、视上核、视交叉上核、视前腹侧核、弧束核、杏仁基底外侧核、丘脑室旁核、外侧缰核、海马回嗅觉小岛及乳头状核等核团NOS阳性神经元的表达明显减少,与对照组比较均非常显著差异(P<0.01)。结论异丙酚在大鼠中枢神经系统的作用部位与神经核团有关。

关键词：异丙酚中枢神经系统一氧化氮合酶

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