检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2006年第16期28卷 1704-1706页

作者：文欣荣陶国才范晓棠张金海胡荣第三军医大学西南医院麻醉科重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

目的通过检测异丙酚静脉全麻诱导大鼠中枢一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)的表达,探讨异丙酚的可能中枢作用位点。方法采用NADPH-d酶组织化学法检测大鼠脑片的NOS阳性神经元在神经核团的分布。结果异丙酚作用的大鼠伏核、外侧隔... 详细信息

目的通过检测异丙酚静脉全麻诱导大鼠中枢一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)的表达,探讨异丙酚的可能中枢作用位点。方法采用NADPH-d酶组织化学法检测大鼠脑片的NOS阳性神经元在神经核团的分布。结果异丙酚作用的大鼠伏核、外侧隔核、下丘脑室旁核、膝状体腹下核、背外侧膝状核、视上核、视交叉上核、视前腹侧核、弧束核、杏仁基底外侧核、丘脑室旁核、外侧缰核、海马回嗅觉小岛及乳头状核等核团NOS阳性神经元的表达明显减少,与对照组比较均非常显著差异(P<0.01)。结论异丙酚在大鼠中枢神经系统的作用部位与神经核团有关。

关键词：异丙酚中枢神经系统一氧化氮合酶

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PS1/APP双转基因AD模型小鼠与Aβ_(1-40)海马注射AD模型大鼠的组织病理学比较

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第三军医大学学报 2006年第16期28卷 1648-1651页

作者：李达兵唐军范晓棠宋敏徐海伟周光纪白云第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038

目的对PS1/APP双转基因阿尔茨海默病(alzheimerdisease,AD)模型小鼠进行基因鉴定和组织学分析,探讨其与老化态Aβ1-40单侧海马注射AD模型大鼠之间的组织病理学差异。方法对Tg小鼠和AD大鼠模型应用改进刚果红染色法、Nissl’s染色结合免... 详细信息

目的对PS1/APP双转基因阿尔茨海默病(alzheimerdisease,AD)模型小鼠进行基因鉴定和组织学分析,探讨其与老化态Aβ1-40单侧海马注射AD模型大鼠之间的组织病理学差异。方法对Tg小鼠和AD大鼠模型应用改进刚果红染色法、Nissl’s染色结合免疫组织化学方法观察脑内Aβ沉积和星形胶质细胞的活化情况。结果①PS1/APP双转基因AD小鼠刚果红染色显示皮质和海马内广泛圆形Aβ沉积,周围绕以胶质细胞带,免疫组化显示GFAP阳性细胞活化呈团块聚集。②AD大鼠刚果红染色显示单侧海马齿回区有Aβ斑块状沉积,Nissl’s染色显示注射针道附近海马锥体层细胞丢失,注射侧海马GFAP阳性细胞增多。结论Aβ1-40单侧海马注射AD模型大鼠尽管可以模拟人类AD疾病的部分特征病理改变,但是不能模拟疾病渐进性的病理学改变。PS1/APP双转基因小鼠能够模拟AD病人脑内的主要病理改变与渐进性过程,是较为理想的实验动物模型,但该模型未发现细胞丢失。

关键词：阿尔茨海默病转基因小鼠大鼠 β淀粉样多肽

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雄激素受体在大鼠触须毛囊干细胞中的表达研究

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第三军医大学学报 2006年第9期28卷 889-891页

作者：李远宾王韵杨恬向明明第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038 第三军医大学西南医院皮肤科重庆市皮肤性病研究所重庆400038

目的探讨在毛囊周期的3个不同时期(生长期、退化期和静止期)中大鼠毛囊干细胞中以及体外培养的毛囊干细胞中雄激素受体(androgen receptor,AR)的表达规律及其意义。方法采用免疫组织化学方法检测AR表达,采用总RNA提取法及RT-PCR检测AR m... 详细信息

目的探讨在毛囊周期的3个不同时期(生长期、退化期和静止期)中大鼠毛囊干细胞中以及体外培养的毛囊干细胞中雄激素受体(androgen receptor,AR)的表达规律及其意义。方法采用免疫组织化学方法检测AR表达,采用总RNA提取法及RT-PCR检测AR mRNA的表达情况。结果①在体情况下,生长期、退化期和静止期毛囊干细胞中均有AR的表达,AR mRNA在生长期呈强表达,而在退化期和静止期表达微弱;②体外情况下,培养的毛囊干细胞中有AR的表达。结论毛囊干细胞在整个毛囊周期中均有AR的表达,是雄激素作用的靶细胞;AR mRNA在毛囊周期中呈规律性表达,提示雄激素与其受体的相互作用可能对毛囊干细胞的分化具有重要的促进作用。

关键词：雄激素受体毛囊干细胞毛囊周期细胞分化

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FoxO转录因子在代谢调节及肿瘤抑制中的作用

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第三军医大学学报 2006年第12期28卷 1347-1350页

作者：甘立霞第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

转录因子是控制基因表达的一类蛋白质分子,通过调节靶基因的表达对机体的发育、分化、代谢等起重要的调控作用。Forkhead转录因子是2000年才正式统一命名的一个新的转录因子家族,从1989年在果蝇中发现第一个Forkhead基因以来,目前这个... 详细信息

转录因子是控制基因表达的一类蛋白质分子,通过调节靶基因的表达对机体的发育、分化、代谢等起重要的调控作用。Forkhead转录因子是2000年才正式统一命名的一个新的转录因子家族,从1989年在果蝇中发现第一个Forkhead基因以来,目前这个家族已超过100个成员。[第一段]

关键词： FoxO 转录因子代谢肿瘤

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神经前体细胞纹状体注入对帕金森病模型大鼠行为的影响(英文)

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中国临床康复 2006年第13期10卷 167-169,i0006页

作者：唐军徐海伟范晓棠吴旋曹娟高恩泉解放军第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆市400038 解放军第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市400038

背景:胚胎干细胞经诱导产生神经前体细胞,再进行脑内移植,依旧具备增殖与分化的潜能,与宿主神经组织整合,使其有强的可塑性,这将有助于帕金森病的治疗效果观察。目的:观察小鼠胚胎干细胞分化为神经前体细胞,以及定点移植对改进型帕金森... 详细信息

背景:胚胎干细胞经诱导产生神经前体细胞,再进行脑内移植,依旧具备增殖与分化的潜能,与宿主神经组织整合,使其有强的可塑性,这将有助于帕金森病的治疗效果观察。目的:观察小鼠胚胎干细胞分化为神经前体细胞,以及定点移植对改进型帕金森病大鼠模型行为学的影响。设计:随机对照动物实验。单位:解放军第三军医大学基础医学部生理学教研室和神经生物学教研室。材料:健康成年Wistar大鼠50只,随机分为实验组45只,对照组5只。方法:①实验组大鼠黑质致密部与中脑腹侧背盖区两点各注射6-羟基多巴5μL(2g/L)制备帕金森病大鼠模型,对照组注射生理盐水5μL/点,术后1周开始行为学检测,测定模型成功率,1次/周,连续7周。②选取成功帕金森病模型大鼠20只实施纹状体神经前体细胞移植,剂量为2μL[细胞悬液记数为(5～8)×106个/μL]。另取5只模型大鼠纹状体注射生理盐水2μL为生理盐水对照组。主要观察指标:①帕金森病模型成功率。②神经前体细胞移植对帕金森病模型大鼠旋转次数的影响。③移植的神经前体细胞在体分布,存活与分化情况。结果:①6周后实验组45只大鼠中共有33只(73%)达到成功帕金森病模型标准。②细菌培养皿上用无血清培养基培养形成胚胎体5d后,约85%胚胎干细胞分化为Nestin阳性的神经前体细胞。③神经前体细胞脑内移植后的帕金森病大鼠的旋转次数明显少于生理盐水对照组。多数移植的神经前体细胞存活,部分分化为TH阳性神经元。结论:小鼠胚胎干细胞诱导的神经前体细胞脑内移植后,分化为TH阳性神经元,帕金森病大鼠旋转次数明显减少。

关键词：帕金森病疾病模型动物干细胞移植

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Orexin-A对急性乙醇中毒昏迷大鼠的实验性促醒疗效研究

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第三军医大学学报 2006年第8期28卷 750-752页

作者：贾晓军王艳芳赵红梅谌小维张春青胡志安第三军医大学基础医学部神经生物学教研室内蒙锡盟阿巴嘎旗医院内科阿巴嘎旗011400 第三军医大学基础医学部基础医学教学实验中心重庆400038

目的建立大鼠急性乙醇中毒昏迷模型,观察orexinA对昏迷动物的促醒作用。方法取成年雌性SD大鼠74只,分别通过腹腔注射乙醇的方法建立大鼠急性乙醇中毒昏迷实验模型。通过翻正反射判断大鼠意识状态的改变;通过脑电图判断脑电活动变化。结... 详细信息

目的建立大鼠急性乙醇中毒昏迷模型,观察orexinA对昏迷动物的促醒作用。方法取成年雌性SD大鼠74只,分别通过腹腔注射乙醇的方法建立大鼠急性乙醇中毒昏迷实验模型。通过翻正反射判断大鼠意识状态的改变;通过脑电图判断脑电活动变化。结果给予腹腔注射32%乙醇(14ml/kg)后,大鼠行为状态和脑电图变化符合昏迷诊断标准。同对照组比较,高剂量orexinA治疗组(7.70nmol/kg)大鼠翻正反射消失持续时间明显缩短,行为觉醒改变较为显著,而低剂量治疗组(3.85nmol/kg)行为变化不明显。此外,给予高剂量orexinA可引起大鼠脑电活动改变,同给药前比较,δ波显著减少。结论侧脑室使用orexinA对昏迷大鼠具有促醒治疗作用。

关键词： orexin—A 乙醇中毒昏迷促醒翻正反射脑电图

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人mBAFF在原核系统的可溶性表达及功能鉴定

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免疫学杂志 2006年第2期22卷 217-220页

作者：张立何凤田高会广李蓉芬彭家和陈麟凤黄刚胡大强第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的利用含重组质粒pQE80L-mBAFF的DH5α大肠杆菌,优化表达B细胞活化因子的突变蛋白(mBAFF)。方法研究mBAFF的体外诱导条件,包括诱导时间I、PTG浓度、诱导温度对表达量的影响。对表达条件进行优化后进行大量表达,经Ni2+NTA亲和层析和Sep... 详细信息

目的利用含重组质粒pQE80L-mBAFF的DH5α大肠杆菌,优化表达B细胞活化因子的突变蛋白(mBAFF)。方法研究mBAFF的体外诱导条件,包括诱导时间I、PTG浓度、诱导温度对表达量的影响。对表达条件进行优化后进行大量表达,经Ni2+NTA亲和层析和SepharcryL S200凝胶过滤层析纯化。流式检测突变蛋白与细胞结合的能力以及MTT检测突变蛋白的生物学活性。结果最佳表达条件是诱导时间4 h,诱导温度37℃,IPTG终浓度0.2 mmol/L。mBAFF占菌体总蛋白的35%,蛋白纯度达98%以上,所获突变蛋白能与淋巴细胞表面受体结合,但不能刺激淋巴细胞增殖。结论优化可溶性表达后能提高mBAFF蛋白质在DH5α大肠杆菌表达,并经Ni2+NTA亲和层析和Sepharcryl S200凝胶过滤层析得到纯度高的表达产物,所获结果为进一步研究创造了条件。

关键词： B细胞活化因子突变蛋白优化表达纯化

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甘氨酸/丝氨酸置换146位半胱氨酸对sBAFF功能的影响

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第三军医大学学报 2006年第8期28卷 753-756页

作者：黄刚何凤田李蓉芬高会广陈麟凤张立胡大强第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的探讨甘氨酸/丝氨酸置换146位半胱氨酸对sBAFF功能的影响,为深入探讨sBAFF的功能和机制奠定基础。方法采用一步反向PCR法,将编码sBAFF第146位半胱氨酸(Cys)的核苷酸序列置换为甘氨酸(G)和丝氨酸(S)的编码序列,测序正确后,亚克隆到高... 详细信息

目的探讨甘氨酸/丝氨酸置换146位半胱氨酸对sBAFF功能的影响,为深入探讨sBAFF的功能和机制奠定基础。方法采用一步反向PCR法,将编码sBAFF第146位半胱氨酸(Cys)的核苷酸序列置换为甘氨酸(G)和丝氨酸(S)的编码序列,测序正确后,亚克隆到高效原核表达载体pQE80L;以IPTG诱导表达,SDSPAGE和Westernblot检测表达产物,Ni2+NTA柱层析纯化目的蛋白;最后经MTT法检测其促B淋巴细胞增殖活性。结果经一步反向PCR扩增后均得到459bp的DNA片段,经测序分析表明分别为sBAFF第146位半胱氨酸残基点突变为甘氨酸和丝氨酸的序列,目的蛋白在大肠杆菌中得到高效表达。活性检测证实其能明显刺激B淋巴细胞系Raji细胞增殖,与正常sBAFF相比,置换为丝氨酸后活性升高,置换为甘氨酸后活性无明显改变。结论在原核表达时,通过置换146位半胱氨酸为丝氨酸可明显提高sBAFF的活性,为进一步探讨sBAFF的功能机制奠定了基础。

关键词： TNF家族的B细胞激活因子(BAFF) cDNA克隆原核表达蛋白纯化细胞活化

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HEPC1和HEPC2基因的稳定转染促进RAW264.7细胞铁滞留

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第三军医大学学报 2006年第17期28卷 1772-1774页

作者：王元忠陈彬廖荣霞周建新第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的观察HEPC1和HEPC2基因稳定转染对RAW264.7细胞铁滞留的影响。方法用脂质体将HEPC1和HEPC2基因的真核表达载体分别稳定转染RAW264.7细胞,以转染空载体为对照,RT-PCR鉴定后,分别给予FeCl3和59FeCl3处理,然后测定各组细胞及培养上清中5... 详细信息

目的观察HEPC1和HEPC2基因稳定转染对RAW264.7细胞铁滞留的影响。方法用脂质体将HEPC1和HEPC2基因的真核表达载体分别稳定转染RAW264.7细胞,以转染空载体为对照,RT-PCR鉴定后,分别给予FeCl3和59FeCl3处理,然后测定各组细胞及培养上清中59Fe的放射活性,分别以105细胞的cpm和培养上清cpm/(细胞cpm+培养上清cpm)作为衡量铁贮存和铁释放的指标。结果RT-PCR鉴定HEPC1和HEPC2基因的稳定转染均获得成功;稳定转染HEPC1和稳定转染HEPC2的RAW264.7细胞组铁贮存分别是稳定转染空载体的RAW264.7细胞组的1.65倍(P<0.01)和1.71倍(P<0.01),而铁释放率则分别是稳定转染空载体的对照组的67.6%(P<0.01)和57.9%(P<0.01)。结论HEPC1和HEPC2基因的稳定转染具有促进RAW264.7细胞铁滞留的作用。

关键词： Hepcidin 巨噬细胞铁代谢

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重组小鼠高迁移率族蛋白B1抗菌活性研究

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第三军医大学学报 2006年第9期28卷 939-941页

作者：龚薇何凤田高会广李蓉芬胡颖第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的:制备具有功能活性的重组小鼠高迁移率族蛋白B1(recomb inant mouse h igh-mob ility group box-1,rmH-MGB1)并观察其抗菌活性,为深入研究HMGB1抗菌功能创造条件。方法提取BALB/c小鼠脾脏总RNA,经RT-PCR扩增得到编码小鼠HMGB1的cDN... 详细信息

目的:制备具有功能活性的重组小鼠高迁移率族蛋白B1(recomb inant mouse h igh-mob ility group box-1,rmH-MGB1)并观察其抗菌活性,为深入研究HMGB1抗菌功能创造条件。方法提取BALB/c小鼠脾脏总RNA,经RT-PCR扩增得到编码小鼠HMGB1的cDNA片段,序列测定正确后,构建于原核表达载体pQE-80L,转化于大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导表达目的蛋白,再经N i2+-NTA亲和层析柱纯化后,通过试管稀释法、琼脂扩散法两种抗菌实验观察并比较rmHMGB1对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌(JM109、ATCC25922、DH5α)、绿脓杆菌抗菌活性的差异。结果RT-PCR扩增得到了约648bp的cDNA片段,序列分析与GenBank中报道的编码小鼠HMGB1的cDNA序列一致,纯化后的rmHMGB1对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌(JM109、ATCC25922、DH5α)有明确的抗菌活性,其抗菌活性强弱依次为金黄色葡萄球菌>JM109>ATCC25922>DH5α,对绿脓杆菌则无抗菌活性。结论利用大肠杆菌可表达重组小鼠HMGB1,所获得纯化产物对部分细菌确有抗菌活性,此研究为进一步探讨HMGB1抗菌功能的机制奠定了基础。

关键词：高迁移率族蛋白B1(HMGB1) 原核表达抗菌活性

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