检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2006年第7期28卷 681-684页

作者：张恒周占松刘丽梅杨忠宋波第三军医大学西南医院全军泌尿外科中心第三军医大学西南医院病理学研究所第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的探讨P物质（P substance,SP）对脊髓星形胶质细胞活化和分泌炎性因子TNF-α、IL-1β的影响.方法体外培养脊髓星形胶质细胞,施加SP刺激后分别应用RT-PCR和Western blot测定胶质原纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFA... 详细信息

目的探讨P物质（P substance,SP）对脊髓星形胶质细胞活化和分泌炎性因子TNF-α、IL-1β的影响.方法体外培养脊髓星形胶质细胞,施加SP刺激后分别应用RT-PCR和Western blot测定胶质原纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）mRNA和蛋白的表达,ELISA法检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）分泌的变化.结果10^-7mol/L SP的作用下,星形胶质细胞GFAP mRNA和蛋白的表达在0～72 h逐渐升高,与正常对照组相比差异显著（P＜0.01）;SP在10^-9～10^-6mol/L浓度范围内呈浓度依赖性促进星形胶质细胞分泌TNF-α、IL-1β（12 h）,与对照组有显著差异（P＜0.01,P＜0.05）,但IL-1β在SP 10^-6mol/L作用组下降,与对照组无明显差异（P＞0.05）.结论 SP刺激下脊髓星形胶质细胞明显活化,分泌炎性致痛因子TNF-α、IL-1β增多,表明周围慢性疼痛可能通过致痛递质SP介导下星形胶质细胞的活化引起脊髓中枢神经炎性痛.

关键词：星形胶质细胞慢性疼痛 SP IL-1β TNF-α

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前列腺炎疼痛对背根神经节细胞兴奋性的影响及P2X_3表达的变化

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第三军医大学学报 2006年第11期28卷 1206-1208页

作者：周占松宋波黄华阮怀珍第三军医大学西南医院全军泌尿外科中心重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的探讨慢性前列腺炎疼痛对P2X介导的背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)细胞兴奋性的影响及P2X3受体表达的变化。方法采用膜片钳全细胞记录技术、蛋白免疫印迹(W estern blot)技术对急性分离的DRG细胞ATP所激发的自发放电反应及P2X... 详细信息

目的探讨慢性前列腺炎疼痛对P2X介导的背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)细胞兴奋性的影响及P2X3受体表达的变化。方法采用膜片钳全细胞记录技术、蛋白免疫印迹(W estern blot)技术对急性分离的DRG细胞ATP所激发的自发放电反应及P2X3蛋白表达进行检测。结果对照组、炎症疼痛3 d组神经元膜电位波动幅度都较小,不能产生自发性动作电位。炎症疼痛10 d组神经元膜电位波动明显,部分神经元膜电位波动幅度较大,可以达到阈值产生自发动作电位,约有10.26%(4/39)神经元出现自发性电活动。炎症3 d后P2X3蛋白表达有所增加,但与对照组相比无显著性差异,炎症10 d后P2X3蛋白表达与对照组相比显著增加。结论相应节段背根节神经元兴奋性及P2X3受体表达的增加可能在前列腺炎疼痛的产生和维持中起重要作用。

关键词：慢性前列腺炎疼痛 P2X3受体

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beta-catenin和cox-2在大鼠毛囊隆突区细胞中的表达及意义

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第三军医大学学报 2006年第4期28卷 324-326页

作者：张艺王韵曾益军杨恬第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的:通过观察β-catenin和cox-2在体外培养的毛囊隆突区细胞中的表达,探讨其对隆突区细胞增殖的作用及相互关系。方法:在体外分离培养毛囊隆突区细胞的基础上,采用免疫细胞化学方法分别检测不同时相β-catenin和cox-2在毛囊隆突区细胞... 详细信息

目的:通过观察β-catenin和cox-2在体外培养的毛囊隆突区细胞中的表达,探讨其对隆突区细胞增殖的作用及相互关系。方法:在体外分离培养毛囊隆突区细胞的基础上,采用免疫细胞化学方法分别检测不同时相β-catenin和cox-2在毛囊隆突区细胞中的表达。结果:β-catenin和cox-2在毛囊隆突区细胞呈强表达,并表现出与培养时间的相关性;同时β-catenin可见于细胞质与细胞核中,而cox-2仅见于细胞核。结论:β-catenin和cox-2对毛囊隆突区细胞具有促增殖作用,cox-2可能是β-catenin途径发挥作用的核内靶基因。

关键词：反式激活因子类/生物合成毛囊/细胞学免疫组织化学前列腺素内过氧化物合酶类/生物合成同工酶类/生物合成细胞培养的大鼠动物

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不同分化程度胶质瘤细胞增殖和凋亡相关差异表达基因的鉴定(英文)

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中国临床康复 2006年第24期10卷 170-172,F0003页

作者：郭德玉杨忠曹健王志成解放军第三军医大学西南医院病理学研究所重庆市400038 解放军第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市400038 解放军第三军医大学新桥医院药剂科重庆市400038

背景:胶质瘤的发生、发展不仅涉及细胞周期调控基因,也涉及到细胞侵袭、转移和细胞凋亡的调节基因。目的:用基因芯片技术分析不同分化程度的胶质瘤细胞增殖和凋亡相关的差异表达基因,为进一步研究胶质瘤细胞的增殖和凋亡机制奠定基础。... 详细信息

背景:胶质瘤的发生、发展不仅涉及细胞周期调控基因,也涉及到细胞侵袭、转移和细胞凋亡的调节基因。目的:用基因芯片技术分析不同分化程度的胶质瘤细胞增殖和凋亡相关的差异表达基因,为进一步研究胶质瘤细胞的增殖和凋亡机制奠定基础。设计:开放性实验。单位:解放军第三军医大学,西南医院病理学研究所,基础医学部神经生物学教研室,新桥医院药剂科。材料:人脑恶性胶质瘤细胞系CHG-5(WHO分级为Ⅱ级)由本实验室建立并保存培养;SHG-44(WHO分级为Ⅳ级),由苏州医学院附属二院脑肿瘤研究室提供,小牛血清由杭州四季青生物材料研究所生产并提供。实验中还采用了RPMI-1640培养基(Gibco)、Trizol试剂盒(Gibco-BRL)、RNAsecureTM溶液(Ambion,Austin,Texas)、光度适应计(Eppendorf,Hamburg,Germany)。基因芯片含9,984个人类cDNA片段,由香港城市大学准备和提供(UniGEMV2cloneset已知的基因和ESTs购自Incyte公司),SuperscriptⅡ反转录酶由Gibco-BRL公司提供,荧光染料Cy3&Cy5为AmershamPharmacia公司产品。方法:实验于2001/2003在重庆第三军医大学和香港城市大学完成。用Trizol试剂盒抽提总RNA,用SuperscriptⅡ反转录酶进行反转录聚合酶链反应,并用荧光染料Cy3&Cy5标记cDNA产物,然后进行芯片杂交,检测人胶质瘤细胞系CHG-5和SHG-44瘤细胞基因表达的差异,特别是与细胞增殖和凋亡相关基因表达的差异,并用Northernblot杂交来验证芯片结果。主要观察指标:不同分化程度的人胶质瘤细胞基因表达的差异;Northern杂交结果与相应基因芯片结果的比较。结果:①与CHG-5相比,SHG-44细胞中检测到了有120个基因表达明显上调和22个基因表达明显下调,这些差异表达基因的种类很多,其中凋亡类相关基因共6个,上调基因有3个,下调基因3个;细胞周期与增殖类相关基因共12个,上调基因有5个,下调基因7个。②芯片结果进一步得到Northernblot杂交结果的支持。结论:初步揭示了胶质瘤进展的差异表达基因,特别是与细胞增殖和凋亡相关的差异表达基因。

关键词：肿瘤细胞,培养的基因表达脱噬作用遗传学技术

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MPTP致小鼠黑质致密部多巴胺能神经元损伤及定量研究

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第三军医大学学报 2006年第5期28卷 454-457页

作者：梁亚杰李淑蓉苏炳银第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 成都医学院组织学与胚胎学教研室成都610083

目的建立正常小鼠黑质致密部部位细胞数量标准曲线,并以之判定MPTP损伤的小鼠PD模型中多巴胺能神经元的损失。方法根据小鼠大脑解剖图谱观察小鼠黑质致密部的走向,酪氨酸羟化酶免疫组化染色显示正常小鼠大脑黑质致密部及多巴胺能神经元... 详细信息

目的建立正常小鼠黑质致密部部位细胞数量标准曲线,并以之判定MPTP损伤的小鼠PD模型中多巴胺能神经元的损失。方法根据小鼠大脑解剖图谱观察小鼠黑质致密部的走向,酪氨酸羟化酶免疫组化染色显示正常小鼠大脑黑质致密部及多巴胺能神经元;观察计数MPTP处理小鼠的大脑黑质致密部多巴胺能神经元,与正常小鼠的相似部位进行比较。结果建立了正常小鼠黑质致密部部位细胞数量分布图,利用曲线对MPTP处理小鼠所得到的切片进行分析,发现样本中多巴胺能神经元明显减少,证明判定方法可行而有效。结论本实验成功建立了MPTP致小鼠黑质致密部多巴胺神经元损伤模型,并对其损伤判定进行了标准化。

关键词：帕金森病 MPTP 标准曲线酪氨酸羟化酶黑质致密部定量研究 C57/BL6小鼠

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创伤性MODS患者血可溶性白细胞分化抗原14与内毒素比值变化

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免疫学杂志 2006年第1期22卷 76-77,81页

作者：王占科柴长春何凤田郭宝珠中国人民解放军94医院检验科南昌330002 第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的探讨创伤多器官功能不全综合症(MODS)患者血浆可溶性白细胞分化抗原14与内毒素比值(sCD14/LPS)变化及其临床意义。方法测定正常对照组,创伤MODS生存组和MODS死亡组血浆sCD14和LPS的摩尔浓度含量,并计算sCD14和LPS比值。观察创伤MOD... 详细信息

目的探讨创伤多器官功能不全综合症(MODS)患者血浆可溶性白细胞分化抗原14与内毒素比值(sCD14/LPS)变化及其临床意义。方法测定正常对照组,创伤MODS生存组和MODS死亡组血浆sCD14和LPS的摩尔浓度含量,并计算sCD14和LPS比值。观察创伤MODS患者血浆sCD14/LPS变化及其与主要器官功能受损指标的关系。结果创伤性MODS各组血浆sCD14,LPS均明显高于正常对照组(P<0.01),且创伤MODS死亡组LPS明显高于创伤MODS生存组(P<0.01),但sCD14与创伤MODS生存组没有显著差别。创伤MODS生存组sCD14/LPS与正常对照组无显著差异,MODS死亡组sCD14/LPS明显低于MODS生存组(P<0.01)。创伤MODS患者血sCD和LPS水平均与血谷丙转氨酶、肌酐和二氧化碳分压明显正相关(P<0.01),但sCD14/LPS与血谷丙转氨酶、肌酐和二氧化碳分压明显负相关(P<0.01)。sCD14/LPS与血谷丙转氨酶、肌酐和二氧化碳分压相关系数绝对值最大。结论创伤性MODS患者血sCD14浓度升高幅度不如LPS。sCD14/LPS比值可能作为判断MODS患者器官功能不全程度及预后转归的预警指标。

关键词：创伤 MODS 可溶性白细胞分化抗原14 内毒素

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大鼠骨髓间充质干细胞诱导分化为心肌样细胞内向钠电流的研究

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第三军医大学学报 2006年第5期28卷 435-437页

作者：农耀明宋治远陈鹏慧尹戴佳佳第三军医大学西南医院心血管内科重庆市介入心脏病学研究所第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的研究大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcell,MSCs)诱导分化为心肌样细胞内向钠电流的状态。方法取健康SD大鼠骨髓,经密度梯度离心和贴壁培养获得MSCs,传至第两代,以10μmol/L的5氮杂胞嘧啶(5aza)孵育诱导24h。培养4周,用免疫细... 详细信息

目的研究大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcell,MSCs)诱导分化为心肌样细胞内向钠电流的状态。方法取健康SD大鼠骨髓,经密度梯度离心和贴壁培养获得MSCs,传至第两代,以10μmol/L的5氮杂胞嘧啶(5aza)孵育诱导24h。培养4周,用免疫细胞化学染色方法鉴定心肌样细胞(cardiomyocytelikecells);用全细胞膜片钳技术,检测胞膜内向钠电流,并与未经诱导的MSCs和急性分离的心肌细胞进行比较。结果MSCs经5aza诱导后部分表达心肌特异性肌钙蛋白T,在诱导后4周记录到快速激活和失活的膜内向钠电流。与急性分离的心肌细胞比较,相同刺激脉冲下心肌样细胞所产生的电流幅值较小,IV曲线向右偏移。结论经5aza诱导后,MSCs可分化成具有兴奋性内向钠电流的心肌样细胞。

关键词：骨髓间充质干细胞 5-氮杂胞苷膜片钳内向电流大鼠

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大劣按蚊感染约氏疟原虫血淋巴相关蛋白的筛选和鉴定

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中国病原生物学杂志 2006年第5期1卷 344-347页

作者：王英黄复生张锡林段建华周桃莉夏丽莎第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的筛选并鉴定大劣按蚊感染约氏疟原虫后血淋巴的相关蛋白,为进一步的功能研究和蚊先天性免疫研究奠定基础。方法以大劣按蚊-约氏疟原虫为实验模型,利用二维电泳技术分离和比较饱吸约氏疟原虫感染的鼠血和正常鼠血后24 h的大劣按蚊血... 详细信息

目的筛选并鉴定大劣按蚊感染约氏疟原虫后血淋巴的相关蛋白,为进一步的功能研究和蚊先天性免疫研究奠定基础。方法以大劣按蚊-约氏疟原虫为实验模型,利用二维电泳技术分离和比较饱吸约氏疟原虫感染的鼠血和正常鼠血后24 h的大劣按蚊血淋巴蛋白,获得差异蛋白,并对差异蛋白进行N端氨基酸测序和生物信息学分析,从而推测差异蛋白的功能。结果获得清晰二维电泳图,并筛选获得37个差异蛋白点。对其中比较明显的差异蛋白1进行氨基酸测序后发现,该蛋白可能为一翻译延伸因子。结论成功分离和筛选获得了大劣按蚊感染约氏疟原虫血淋巴相关蛋白,并进行了初步鉴定。

关键词：大劣按蚊约氏疟原虫血淋巴二维电泳蛋白质测序

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慢病毒携带shRNA对宫颈癌细胞中HPV16型E6表达的抑制作用

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第三军医大学学报 2006年第11期28卷 1218-1220页

作者：郭建新李力白垚程小星邓少丽郑秀惠第三军医大学大坪医院野战外科研究所妇产科重庆400042 重庆医科大学附属第一医院检验科重庆400016 第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038

目的研究慢病毒携带的短发夹状干扰RNA(short hairp in RNA,shRNA)对宫颈癌Cask i细胞中人乳头瘤病毒(hum an pap illom a virus,HPV)16型E6表达的抑制作用。方法将靶向HPV16型E6的shRNA表达序列克隆到改建的慢病毒表达载体PLL3.7中,经... 详细信息

目的研究慢病毒携带的短发夹状干扰RNA(short hairp in RNA,shRNA)对宫颈癌Cask i细胞中人乳头瘤病毒(hum an pap illom a virus,HPV)16型E6表达的抑制作用。方法将靶向HPV16型E6的shRNA表达序列克隆到改建的慢病毒表达载体PLL3.7中,经限制性酶切鉴定和测序后,与3种包装质粒混合,以L ipofectam ine 2000包裹后转染293FT细胞,72 h后收取含病毒的上清液并感染宫颈癌Cask i细胞,感染48 h后加入G418筛选阳性克隆。每天对阳性细胞克隆进行细胞计数;提取细胞总mRNA,进行RT-PCR反应。结果与对照组相比HPV16型E6的表达降低70%,宫颈癌Cask i细胞生长速度减慢50%。结论慢病毒携带的短发夹状干扰RNA能干扰宫颈癌细胞中HPV16型E6的表达并有抑制癌细胞生长的作用。

关键词：宫颈癌慢病毒 RNA干扰人乳头瘤病毒

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LMO3 mRNA在小鼠中枢神经系统的表达定位

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第三军医大学学报 2006年第13期28卷 1367-1369页

作者：惠玲蔡文琴吕同德第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 兰州军区兰州总医院医学科学实验中心兰州730050

目的观察神经特异性转录因子LMO3mRNA在小鼠中枢神经系统中的定位。方法原位杂交组织化学染色。结果LMO3mRNA阳性神经元可见于大脑、小脑、丘脑、脑干、脊髓，在小鼠中枢神经系统中，LMO3mRNA阳性反应产物主要位于细胞质和突起内。强... 详细信息

目的观察神经特异性转录因子LMO3mRNA在小鼠中枢神经系统中的定位。方法原位杂交组织化学染色。结果LMO3mRNA阳性神经元可见于大脑、小脑、丘脑、脑干、脊髓，在小鼠中枢神经系统中，LMO3mRNA阳性反应产物主要位于细胞质和突起内。强阳性信号主要出现于大脑皮质的Ⅱ一Ⅵ层、梨状皮质、内嗅皮质、海马的CA1区、齿状回、中脑的黑质致密部、红核、室旁核、巨细胞网状核、外侧网状核、三叉神经脑桥核、面神经核、三叉神经运动核、舌下神经核等部位；中等强度着色主要分布于扣带前皮质、嗅球、海马的CA2区、梨状内核、杏仁核等部位；海马的CA3区、尾壳核、苍白球、杏仁复合体、丘脑、三叉神经脊束核、疑核、中缝核团、小脑间置核及外侧核、浦肯野细胞可见弱的阳性细胞。结论LMO3基因在CNS的广泛分布提示它除了在多巴胺神经递质的活动中起作用外，还参与了机体的学习记忆、嗅觉的调节。

关键词： LMO3 LIM-only 中枢神经系统原位杂交组织化学小鼠

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