检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2005年第8期27卷 779-781页

作者：张诚杨恬曾益军第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的　探讨PAI 3在成人皮肤中的表达,为进一步研究PAI 3在皮肤表皮增殖、分化中的作用及机制提供基础。方法　采用免疫组织化学技术和RT PCR检测PAI 3和uPA在成人皮肤中的表达。结果　检测到PAI 3mRNA及uPAmRNA的表达,PAI 3在正常成人... 详细信息

目的　探讨PAI 3在成人皮肤中的表达,为进一步研究PAI 3在皮肤表皮增殖、分化中的作用及机制提供基础。方法　采用免疫组织化学技术和RT PCR检测PAI 3和uPA在成人皮肤中的表达。结果　检测到PAI 3mRNA及uPAmRNA的表达,PAI 3在正常成人皮肤组织中主要位于表皮的基底层、颗粒层和棘层,在分化程度较高的表皮角质形成细胞(keratinocyte ,KC)中,其表达增强,而uPA主要位于皮肤表皮的基底层。结论　PAI 3在正常成人皮肤中有表达并与表皮KC的分化有关。

关键词： PAI-3 uPA 皮肤

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pEGFPC1-uPAR重组质粒的构建及对细胞增殖和侵袭性的影响

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第三军医大学学报 2005年第19期27卷 1928-1930页

作者：高强国符刚曾益军杨恬第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的构建含人uPAR基因片断的真核表达绿色荧光蛋白质粒,并进行初步的细胞生物学研究。方法设计引物,利用PCR从原核表达质粒中扩增人全长uPAR基因,并导入真核表达载体绿色荧光蛋白质粒pGFPC1中,测序确认后转染Pam212细胞,使之在细胞中表... 详细信息

目的构建含人uPAR基因片断的真核表达绿色荧光蛋白质粒,并进行初步的细胞生物学研究。方法设计引物,利用PCR从原核表达质粒中扩增人全长uPAR基因,并导入真核表达载体绿色荧光蛋白质粒pGFPC1中,测序确认后转染Pam212细胞,使之在细胞中表达,检测其细胞生长特性和侵袭能力的变化。结果测序证实构建的含uPAR的绿色荧光蛋白质粒,其uPARcDNA阅读框完整,连接部位序列正确;转染Pam212细胞后,能促进细胞的生长并能增强细胞的侵袭能力。结论成功构建了含pEGFPC1-uPAR质粒,确认uPAR能促进Pam212细胞的生长和侵袭,为进一步在体定位研究打下了基础。

关键词： uPAR pEGFPC1 Pare 212细胞

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CCAAT/增强子结合蛋白在皮脂腺发育中的表达及意义

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第三军医大学学报 2005年第7期27卷 646-648页

作者：郑业华杨恬向明明王韵第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的　检测皮脂腺中C/EBPα和C/EBPβ的表达,探讨其与皮脂腺分化的关系。方法　利用RT PCR和免疫组化染色,分别检测C/EBPα和C/EBPβmRNA及蛋白在胚胎和成人皮脂腺中的表达情况。结果　C/EBPαmRNA的表达在胚胎期较弱,随着分化的进行逐... 详细信息

目的　检测皮脂腺中C/EBPα和C/EBPβ的表达,探讨其与皮脂腺分化的关系。方法　利用RT PCR和免疫组化染色,分别检测C/EBPα和C/EBPβmRNA及蛋白在胚胎和成人皮脂腺中的表达情况。结果　C/EBPαmRNA的表达在胚胎期较弱,随着分化的进行逐渐升高。C/EBPβmRNA的表达则维持在同一水平。免疫组化检测到C/EBPα和C/EBPβ在胚胎期皮脂腺细胞核内均有表达,在成人皮脂腺则表达在基底层细胞的胞核内。结论　C/EBPα和C/EBPβ的蛋白表达与皮脂腺分化密切的关系。

关键词： C/EBPs 皮脂腺分化

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毛囊bulge细胞在角膜缘基质诱导下向角膜上皮细胞分化的初步研究

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第三军医大学学报 2005年第20期27卷 2016-2019页

作者：余瑾杨珂杨恬符刚第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的探讨体外培养的毛囊bulge细胞向角膜上皮细胞分化的可能性。方法体外分离培养毛囊bulge细胞,然后在transwell中与角膜缘基质细胞共培养诱导分化,观察毛囊bulge细胞的分化情况,免疫组化检测K12及K19表达的变化。结果体外培养的毛囊bu... 详细信息

目的探讨体外培养的毛囊bulge细胞向角膜上皮细胞分化的可能性。方法体外分离培养毛囊bulge细胞,然后在transwell中与角膜缘基质细胞共培养诱导分化,观察毛囊bulge细胞的分化情况,免疫组化检测K12及K19表达的变化。结果体外培养的毛囊bulge细胞保持高增殖,低分化状态。经过2周左右的共培养,毛囊bulge细胞逐渐分化,部分细胞K12表达阳性。结论角膜缘基质细胞可以诱导毛囊bulge细胞向角膜上皮细胞分化。

关键词：毛囊 bulge细胞角膜上皮转分化

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内毒素预处理对大鼠全脑缺血后海马内生性IL-1Rα的影响

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第三军医大学学报 2005年第4期27卷 320-322页

作者：向强文亮楚军高强国刘明华第三军医大学西南医院急救部ICU 第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的　探讨内毒素预处理对大鼠全脑缺血再灌注后海马内生性白细胞介素 1受体拮抗剂 (IL 1Rα)的影响及意义。方法　采用大鼠全脑缺血再灌注模型 ,动态观察内毒素预处理后海马组织IL 1Rα的表达、含量及CA1区神经元计数的变化。结... 详细信息

目的　探讨内毒素预处理对大鼠全脑缺血再灌注后海马内生性白细胞介素 1受体拮抗剂 (IL 1Rα)的影响及意义。方法　采用大鼠全脑缺血再灌注模型 ,动态观察内毒素预处理后海马组织IL 1Rα的表达、含量及CA1区神经元计数的变化。结果　内毒素预处理后脑组织内生性IL 1Rα表达及含量显著增加 ,海马CA1区神经元计数下降幅度减少。结论　内毒素预处理对全脑缺血再灌注后神经元的损伤有明显保护作用 ;其机制可能与诱导了中枢神经系统内生性抗损伤蛋白IL 1Rα的合成有关。

关键词：脑缺血预处理内毒素 IL-1Rα

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小鼠胚胎干细胞诱导的神经前体细胞大脑皮层移植对AD大鼠的治疗作用

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中国病理生理杂志 2005年第3期21卷 449-454页

作者：徐海伟范晓棠吴旋唐军曹娟黎海蒂第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

目的与方法 :将小鼠胚胎干细胞无血清诱导为神经前体细胞后移植到叠氮钠所致的阿尔茨海默氏病 (AD)大鼠额叶皮层 ,采用免疫组化观察移植细胞的存活、分化以及细胞移植对AD大鼠Morris水迷宫记忆功能的作用。结果 :胚胎干细胞形成的胚胎... 详细信息

目的与方法 :将小鼠胚胎干细胞无血清诱导为神经前体细胞后移植到叠氮钠所致的阿尔茨海默氏病 (AD)大鼠额叶皮层 ,采用免疫组化观察移植细胞的存活、分化以及细胞移植对AD大鼠Morris水迷宫记忆功能的作用。结果 :胚胎干细胞形成的胚胎样体经N2选择性培养基选择生长 5d后 ,85 %以上的小鼠胚胎干细胞分化为nestin阳性的神经前体细胞。移植到AD大鼠额叶皮层后 4 - 6周 ,神经前体细胞存活良好 ,大部分移植细胞保持为未分化的nestin阳性的神经前体细胞并呈克隆生长 ,部分细胞发出类似于神经元的长突起。移植后 4周 ,AD大鼠的空间记忆能力明显提高。结论 :胚胎干细胞来源的神经前体细胞移植到AD大鼠额叶皮层后能存活并分化为神经元 ,能改善AD大鼠的记忆功能障碍。

关键词：阿尔茨海默病胚胎干细胞分化大鼠

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斯氏按蚊丝氨酸蛋白酶基因克隆及其与约氏疟原虫卵囊黑化关系的研究

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中国人兽共患病杂志 2005年第12期21卷 1059-1063页

作者：杨松黄复生段建华第三军医大学基础医学部病原生物学教研室

目的克隆斯氏按蚊丝氨酸蛋白酶基因,分析该分子与约氏疟原虫卵囊黑化关系。方法根据其它昆虫丝氨酸蛋白酶的保守氨基酸序列设计简并引物,以斯氏按蚊全蚊cDNA为模板,进行RT-PCR扩增,PCR产物纯化,克隆入pUCm(T载体,测定插入片段序列,对序... 详细信息

目的克隆斯氏按蚊丝氨酸蛋白酶基因,分析该分子与约氏疟原虫卵囊黑化关系。方法根据其它昆虫丝氨酸蛋白酶的保守氨基酸序列设计简并引物,以斯氏按蚊全蚊cDNA为模板,进行RT-PCR扩增,PCR产物纯化,克隆入pUCm(T载体,测定插入片段序列,对序列进行BLAST检索和鉴定,根据序列设计相应基因的特异引物,然后分别从血淋巴细胞或中肠扩增目的基因,并进行不同食源条件下丝氨酸蛋白酶基因的半定量、原位核酸分子杂交定位与约氏疟原虫卵囊黑化关系的分析。结果获得了2种斯氏按蚊血细胞丝氨酸蛋白酶cDNA部分序列,即AsSP1(448bp)和AsSP2(472bp),分别与冈比亚按蚊SP2A和大劣按蚊SP2基因很相似,其编码的氨基酸序列均包含保守的丝氨酸蛋白酶催化功能域。在中肠和血淋巴内也获得相同的目的基因片段,半定量分析显示约氏疟原虫感染或诱导卵囊黑化呈现之前的表达明显增强,原位核酸分子杂交技术也进一步证实血细胞有AsSP1和AsSP2 mRNA表达。结论AsSP1和AsSP2很可能与疟原虫感染或约氏疟原虫卵囊黑化相关,推测可能是斯氏按蚊的前酚氧化酶的活化酶。

关键词：斯氏按蚊约氏疟原虫丝氨酸蛋白酶黑化 RT—PCR 原位核酸分子杂交

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人可溶性增殖诱导配体cDNA突变体的设计与构建

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第三军医大学学报 2005年第10期27卷 948-950页

作者：高全胜黄复生何凤田第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的　构建6种人可溶性增殖诱导配体(solubleaproliferation inducingligand ,sAPRIL)cDNA突变体。方法　采用PCR将可溶性增殖诱导配体(sAPRIL)cDNA进行突变,并分别在其N端和C端连接TELTh表位序列,插入到pQE80表达载体上,最后转化至DH5... 详细信息

目的　构建6种人可溶性增殖诱导配体(solubleaproliferation inducingligand ,sAPRIL)cDNA突变体。方法　采用PCR将可溶性增殖诱导配体(sAPRIL)cDNA进行突变,并分别在其N端和C端连接TELTh表位序列,插入到pQE80表达载体上,最后转化至DH5α感受态细胞。重组质粒经酶切鉴定后进行测序。结果　经PCR扩增分别得到了对应于6种突变体的sAPRIL序列,酶切和测序证实成功构建了含HELTh表位的sAPRILcDNA突变体表达质粒。结论　成功构建了6种sAPRILcDNA突变体的表达质粒,为进一步进行sAPRIL突变体cDNA的表达和活性鉴定奠定了基础。

关键词： sAPRIL 突变体

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基于增殖诱导配体新型抗肿瘤分子的构建及初步筛选

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第三军医大学学报 2005年第13期27卷 1317-1319页

作者：高全胜黄复生何凤田第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的构建针对APRIL的免疫抑制分子,并对其原核表达蛋白进行纯化及活性筛选。方法将可溶性增殖诱导配体(sAPRIL)cDNA进行突变并插入TELTh表位序列,突变体用pQE-80L/DH5α原核表达系统进行表达,表达蛋白经SDS-PAGE鉴定、Ni-NTA亲和层析纯... 详细信息

目的构建针对APRIL的免疫抑制分子,并对其原核表达蛋白进行纯化及活性筛选。方法将可溶性增殖诱导配体(sAPRIL)cDNA进行突变并插入TELTh表位序列,突变体用pQE-80L/DH5α原核表达系统进行表达,表达蛋白经SDS-PAGE鉴定、Ni-NTA亲和层析纯化及Western印迹分析,最后检测纯化蛋白对Raji细胞增殖的影响。结果成功构建并表达了4种sAPRIL突变体:C端引入HELTh表位的sAPRIL突变体(Ⅰ)、N端引入HELTh表位的sAPRIL突变体(Ⅱ)、C端缺失45bp序列并引入HELTh表位的sAPRIL突变体(Ⅲ)、N端缺失45bp序列并引入HELTh表位的sAPRIL突变体(Ⅳ)。SDS-PAGE电泳、Western印迹分析均检测到相应的特异蛋白带。用Ni-NTA系统成功纯化表达的突变体蛋白。细胞试验表明,突变体Ⅰ、Ⅱ纯化蛋白具有明显的促细胞增殖活性,而突变体Ⅲ、Ⅳ纯化蛋白没有促细胞增殖活性。结论在4种sAPRIL突变体中初步筛选到不具有促细胞增殖活性的APRIL免疫抑制分子,为下一步确定该分子的免疫抑制功能奠定了物质基础。

关键词： sAPRIL 突变体表达免疫抑制

来源：评论

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改进的一维二维电泳法分析疟原虫子孢子蛋白质的差异表达

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第三军医大学学报 2005年第5期27卷 458-460页

作者：许颖张锡林段建华黄复生第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的　建立及优化一维和二维凝胶电泳技术显示不同时期约氏疟原虫子孢子的蛋白差异表达的实验条件, 为进一步研究疟原虫具有感染性的唾液腺子孢子和不具感染性的卵囊成熟子孢子间的差异表达蛋白研究奠定基础。方法　采用优化的蛋... 详细信息

目的　建立及优化一维和二维凝胶电泳技术显示不同时期约氏疟原虫子孢子的蛋白差异表达的实验条件, 为进一步研究疟原虫具有感染性的唾液腺子孢子和不具感染性的卵囊成熟子孢子间的差异表达蛋白研究奠定基础。方法　采用优化的蛋白质抽提试剂、方法分别获得疟原虫具有感染性的唾液腺子孢子和不具感染性的卵囊成熟子孢子蛋白。采用一维和二维蛋白电泳技术对不同时期约氏疟原虫子孢子蛋白进行分析比较,建立约氏疟原虫子孢子蛋白质一维、二维电泳图谱。结果　采用一维和二维蛋白电泳技术能够有效显示疟原虫具有感染性的唾液腺子孢子和不具感染性的卵囊成熟子孢子蛋白,为以后进一步研究子孢子侵入相关蛋白,进行功能学的分析奠定基础。结论　所采用的一维和二维蛋白电泳相结合的方法对分离斯氏按蚊中约氏疟原虫唾液腺子孢子和卵囊成熟子孢子蛋白质具有较好的重复性和分辨率。

关键词：疟原虫子孢子蛋白质电泳法二维凝胶电泳技术差异表达蛋白二维电泳图谱不同时期感染性约氏疟原虫唾液腺实验条件分析比较相关蛋白斯氏按蚊蛋白电泳步研究成熟卵囊功能学分辨率重复性显示优化

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