检索结果-内蒙古大学图书馆

局解手术学杂志 2005年第2期14卷 121-121页

作者：陈炜万颖杰安静第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038

医学微生物学是一门医学基础课,其特点是具有很强的实践性和应用性.实验教学的目的不仅是使学生了解和掌握微生物学实验基本方法和操作技术的一个学习过程,也为学生进一步深入学习微生物学及相关学科奠定基础.通过本课程学习,使学生牢... 详细信息

医学微生物学是一门医学基础课,其特点是具有很强的实践性和应用性.实验教学的目的不仅是使学生了解和掌握微生物学实验基本方法和操作技术的一个学习过程,也为学生进一步深入学习微生物学及相关学科奠定基础.通过本课程学习,使学生牢固掌握微生物学研究的基本方法与实验技术;加深学生对微生物学基本理论知识的理解与认识;提高观察、思考、分析和解决问题的能力;培养实事求是、严谨踏实的科学态度和良好作风[1].如何搞好实验教学,提高实验课质量,增强学生的学习兴趣,提高学生的综合能力,以下谈些初浅体会.

关键词：医学微生物学实验教学

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小鼠触须毛囊外根鞘细胞的体外培养及uPA和uPAR表达研究

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第三军医大学学报 2004年第16期26卷 1452-1454页

作者：高强国符刚杨恬第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的　建立小鼠毛囊外根鞘细胞的体外培养方法及研究尿激酶型纤溶酶原激活剂及其受体 (uPA uPAR)的表达。方法　建立以毛囊真皮鞘细胞为滋养层 ,培养外根鞘细胞并对uPA uPAR的表达进行免疫细胞化学鉴定。结果　外根鞘细胞在此滋养层上... 详细信息

目的　建立小鼠毛囊外根鞘细胞的体外培养方法及研究尿激酶型纤溶酶原激活剂及其受体 (uPA uPAR)的表达。方法　建立以毛囊真皮鞘细胞为滋养层 ,培养外根鞘细胞并对uPA uPAR的表达进行免疫细胞化学鉴定。结果　外根鞘细胞在此滋养层上生长较好 ,并有uPA uPAR的表达。结论　毛囊真皮鞘细胞是外根鞘细胞较好的滋养层。

关键词：毛囊外根鞘细胞真皮鞘细胞 uPA/uPAR

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小鼠皮肤器官培养模型的建立及存活状况的研究

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第三军医大学学报 2004年第18期26卷 1690-1692页

作者：崔志鸿杨恬高强国第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的　检测皮肤器官培养模型中细胞的生长及存活状况 ,建立稳定的小鼠皮肤体外培养模型。方法　将小鼠皮肤培养于transwell的内室 ,培养液加至皮肤的表真皮交界处 ,于培养后的 2 ,4,8d取皮片固定、切片后于光镜、共聚焦显微镜及透射式... 详细信息

目的　检测皮肤器官培养模型中细胞的生长及存活状况 ,建立稳定的小鼠皮肤体外培养模型。方法　将小鼠皮肤培养于transwell的内室 ,培养液加至皮肤的表真皮交界处 ,于培养后的 2 ,4,8d取皮片固定、切片后于光镜、共聚焦显微镜及透射式电镜下进行观察。结果　培养 2 ,4d的皮片与未经培养的皮片在形态结构与细胞的存活数量上没有显著差异 ;培养 8d的皮片光镜下的形态结构没有发生明显改变 ,但共聚焦显微镜下 ,细胞存活数量有所下降 ,透射式电镜下细胞的超微结构显示胞质及线粒体肿胀 ,溶酶体增多等退化性改变。结论　体外培养 4d以下的皮肤与在体生长的皮肤在形态结构及细胞生长方面没有显著差异。

关键词：皮肤器官培养激光共聚焦显微镜透射式电镜

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小鼠胚胎干细胞诱导的神经前体细胞纹状体移植对PD大鼠的治疗作用

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中国神经科学杂志 2004年第3期20卷 208-212页

作者：徐海伟范晓棠吴旋唐军曹娟黎海蒂第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

目的观察来源于小鼠胚胎干细胞的神经前体细胞移植PD大鼠纹状体后的存活、分化以及细胞移植对PD大鼠的治疗作用。方法采用无血清方法将小鼠胚胎干细胞定向诱导为神经前体细胞 ,免疫组化技术观察移植细胞的存活、分化。结果胚胎体... 详细信息

目的观察来源于小鼠胚胎干细胞的神经前体细胞移植PD大鼠纹状体后的存活、分化以及细胞移植对PD大鼠的治疗作用。方法采用无血清方法将小鼠胚胎干细胞定向诱导为神经前体细胞 ,免疫组化技术观察移植细胞的存活、分化。结果胚胎体在N2选择性培养基选择生长 5d后 ,85 %以上的小鼠胚胎干细胞分化为nestin阳性的神经前体细胞。移植到PD大鼠纹状体后大部分神经前体细胞存活良好 ,移植细胞分别保持为未分化的nestin阳性的神经前体细胞和TH阳性的神经元。移植后 3周 ,PD大鼠的旋转次数明显减少。结论胚胎干细胞来源的神经前体细胞移植PD大鼠纹状体后能分化为TH阳性的神经细胞 ,对PD有治疗作用。

关键词：胚胎干细胞诱导神经前体细胞纹状体移植 PD大鼠治疗帕金森病

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Survivin对辐射损伤的影响及与caspase-9/6、3的关系

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第三军医大学学报 2004年第15期26卷 1350-1353页

作者：高洋罗成基黎海蒂郑业华第三军医大学预防医学院全军复合伤研究所第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的　观察survivin对辐射损伤的影响及与caspase 9 6、3的关系。方法　①将IEC 6细胞放置于 2 %O2 环境中低氧 8h后 ,复氧 2 4、48h ,采用Western blot检测胞内survivin ;②给予不同实验组IEC 6细胞 3 5Gy6 0 Co辐射照射 ,采用细胞流... 详细信息

目的　观察survivin对辐射损伤的影响及与caspase 9 6、3的关系。方法　①将IEC 6细胞放置于 2 %O2 环境中低氧 8h后 ,复氧 2 4、48h ,采用Western blot检测胞内survivin ;②给予不同实验组IEC 6细胞 3 5Gy6 0 Co辐射照射 ,采用细胞流式PI法检测细胞凋亡率 ,并使用荧光免疫检测试剂盒检测各组caspase 9 6、3活性。结果　低氧预处理方法可诱导IEC 6细胞表达survivin ,Survivin可明显降低辐射诱导的细胞凋亡率 (P <0 .0 1) ,其对caspase 9 6活性无明显影响 (P >0 0 5 ) ,可使caspase 3活性有明显下降 (P <0 .0 1)。结论　低氧预处理方法诱导的抗凋亡蛋白survivin是通过抑制caspase 3的活性。

关键词： survivin 辐射细胞凋亡 caspase 抗凋亡蛋白

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浆细胞发育基因表达谱的建立及部分基因表达的调控

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第三军医大学学报 2004年第15期26卷 1333-1335页

作者：程小星蹇锐第三军医大学基础医学部微生物学教研室

目的　研究浆细胞发育过程中基因表达的改变及其调控。方法　应用基因芯片和RT PCR的方法研究成熟B淋巴细胞到浆细胞发育过程中基因表达的变化。结果　建立了浆细胞发育的基因表达谱 ,证实在浆细胞发育阶段一些重要的B细胞抗原受体 (BCR... 详细信息

目的　研究浆细胞发育过程中基因表达的改变及其调控。方法　应用基因芯片和RT PCR的方法研究成熟B淋巴细胞到浆细胞发育过程中基因表达的变化。结果　建立了浆细胞发育的基因表达谱 ,证实在浆细胞发育阶段一些重要的B细胞抗原受体 (BCR)信号转导相关分子 ,包括Igα、Igβ、Lyn、Syk、BLNK、SWAP 70、SHP 1的表达显著下降。转录因子BSAP可能同这些分子表达的调控相关。

关键词： B淋巴细胞基因表达谱浆细胞发育

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应用载体介导的RNAi技术抑制Bcl-2的表达

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第三军医大学学报 2004年第4期26卷 294-297页

作者：蹇锐程小星安静陈炜王嘉丽张俊磊万颖杰陈宗涛第三军医大学基础医学部微生物学教研室

目的　应用载体介导的RNAi技术特异地干扰抗凋亡基因bcl 2在HeLa细胞中的表达。方法　构建利用H1启动子转录功能性siRNA的载体 ;在H1启动子下游分别插入含不同bcl 2基因特异性序列的 64nt寡核苷酸片段 ;将构建的质粒转染HeLa细胞 ,以间... 详细信息

目的　应用载体介导的RNAi技术特异地干扰抗凋亡基因bcl 2在HeLa细胞中的表达。方法　构建利用H1启动子转录功能性siRNA的载体 ;在H1启动子下游分别插入含不同bcl 2基因特异性序列的 64nt寡核苷酸片段 ;将构建的质粒转染HeLa细胞 ,以间接免疫荧光和免疫印迹检测转染后细胞中Bcl 2的表达水平。结果　 3种含不同bcl 2特异性序列的质粒转染后均能干扰该基因在细胞中的表达 ,但干扰的效果存在差异 ,从 45 %～ 83 5 %。结论　本研究建立的载体介导的RNAi技术可成功地用于干扰Bcl

关键词：载体介导 RNAi Bcl-2 表达

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铜绿假单胞菌噬菌体PaP2生物学特性的研究

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第三军医大学学报 2004年第13期26卷 1133-1136页

作者：黄建军胡晓梅饶贤才张克斌金晓琳周莹冰李明申晓冬朱军民胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室

目的　确定铜绿假单胞菌噬菌体PaP2的形态与大小、裂菌特性、最佳感染复数、一步生长特性等基本的生物学特性。方法　电镜观察纯化噬菌体颗粒 ;制备PaP2噬斑 ,观察其特点 ;提取噬菌体感染的细菌基因组 ,用SmaⅠ酶切 ,通过脉冲场电泳观... 详细信息

目的　确定铜绿假单胞菌噬菌体PaP2的形态与大小、裂菌特性、最佳感染复数、一步生长特性等基本的生物学特性。方法　电镜观察纯化噬菌体颗粒 ;制备PaP2噬斑 ,观察其特点 ;提取噬菌体感染的细菌基因组 ,用SmaⅠ酶切 ,通过脉冲场电泳观察酶切产物的带型特点 ;测定不同感染复数 ,培养 3 5h后细菌噬菌体液中的噬菌体滴度 ;加入宿主菌及噬菌体使MOI =10 ,进行一步生长实验 ,在 0时刻和每隔 15min测定噬菌体滴度。结果　噬菌体PaP2头部直径约为 5 2nm ,无囊膜 ,有一短尾 ;噬斑雾状半透明 ,直径约 1～ 2mm ;被噬菌体感染的宿主菌基因组的SmaⅠ酶切产物带型 ,比未感染宿主菌的多出了 1条大于噬菌体基因组的片段 ;当MOI =10时宿主菌产生的子代噬菌体滴度最高 ;绘制出了一步生长曲线。结论　PaP2属短尾噬菌体科 ,是溶原性噬菌体 ;最佳感染复数是 10 ;感染宿主菌的潜伏期是 75min ,裂解期是 90min ,平均裂解量是 3

关键词：铜绿假单胞菌噬菌体短尾噬菌体溶原性最佳感染复数一步生长实验

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对琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段的有效性的再认识

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第三军医大学学报 2004年第1期26卷 84-86页

作者：黄建军饶贤才胡晓梅金晓琳朱军民胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室

目的　探讨琼脂糖凝胶电泳对DNA酶切片段的分离效果。方法　将酶切后DNA片段进行琼脂糖凝胶电泳 ,回收单一目的片段并再行电泳 ,观察非目的片段的分离效果。结果　第一次回收的“单一”目的片段中 ,除目的DNA外 ,还含有多条较小的DNA分... 详细信息

目的　探讨琼脂糖凝胶电泳对DNA酶切片段的分离效果。方法　将酶切后DNA片段进行琼脂糖凝胶电泳 ,回收单一目的片段并再行电泳 ,观察非目的片段的分离效果。结果　第一次回收的“单一”目的片段中 ,除目的DNA外 ,还含有多条较小的DNA分子 ;再次电泳回收的单一目的片段中 ,肉眼已看不见其它DNA分子 ,其纯度已大为提高 ;但是将几个批次的再次回收的目的片段浓缩后进行电泳发现其中仍然含有其它DNA片段。结论　琼脂糖凝胶电泳难以将大小不同的DNA片段彻底分开 ,电泳后回收的目的片段中含有大小不同的污染分子。

关键词： DNA 琼脂糖凝胶电泳回收

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PaP3噬菌体53×10^3蛋白编码基因的确定

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第三军医大学学报 2004年第1期26卷 51-53页

作者：朱军民金晓琳饶贤才黄建军张克斌胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室

目的　确认PaP3噬菌体 5 3× 10 3 蛋白的编码基因。方法　用PEG沉淀结合CsCl梯度密度离心分离、纯化噬菌体颗粒 ,通过SDS PAGE电泳分析该噬菌体的结构性蛋白带 ,转印PVDF膜后 ,对 5 3× 10 3 蛋白进行N 端氨基酸测序 ,进而从P... 详细信息

目的　确认PaP3噬菌体 5 3× 10 3 蛋白的编码基因。方法　用PEG沉淀结合CsCl梯度密度离心分离、纯化噬菌体颗粒 ,通过SDS PAGE电泳分析该噬菌体的结构性蛋白带 ,转印PVDF膜后 ,对 5 3× 10 3 蛋白进行N 端氨基酸测序 ,进而从PaP3全基因组的 2 5 2个ORFs中确认该蛋白质的编码基因及其对应的氨基酸序列。结果　PaP3噬菌体的结构性蛋白共发现有 8个 ,其中 5 3× 10 3 蛋白是由ORF2 9893编码的。 5 3× 10 3 蛋白编码基因全长 15 2 4bp ,G +C =5 4 92 %,编码 5 0 8个氨基酸。该蛋白分子质量为 5 3 7× 10 3 ,等电点 (PI)为 7 2 0 7。结论　 5 3× 10 3 蛋白是由噬菌体基因组中ORF2 9893编码的 ,共由 5 0 8个氨基酸组成。

关键词： PaP3噬菌体结构性蛋白编码基因

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