检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2003年第1期25卷 11-14页

作者：李红丽蔡文琴杨忠李泽桂李巍付晓岚第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038 第三军医大学高原军事医学系中心实验室重庆400038

目的　了解维甲酸 (Retinoicacid ,RA)诱导神经管缺陷 (Neuraltubedefect ,NTD)小鼠神经发育过程中神经干细胞的变化规律。方法　分别取不同胚胎时段及新生、成年的正常及NTD小鼠的神经组织 ,采用神经干细胞特异性抗原神经巢蛋白 (Nest... 详细信息

目的　了解维甲酸 (Retinoicacid ,RA)诱导神经管缺陷 (Neuraltubedefect ,NTD)小鼠神经发育过程中神经干细胞的变化规律。方法　分别取不同胚胎时段及新生、成年的正常及NTD小鼠的神经组织 ,采用神经干细胞特异性抗原神经巢蛋白 (Nestin)间接免疫荧光抗体标记和DNA定量荧光染色 ,以流式细胞术检测。结果　①正常小鼠神经组织中Nestin阳性细胞数目在E8.5d时呈高峰 ,此后逐步下降 ,新生期仍保持较高水平 ;NTD小鼠神经组织中Nestin阳性细胞数在胚胎各期均低于正常小鼠 ,尤以E8.5d下降显著 ;出生后与正常组无显著差别。②NTD小鼠胚胎期神经组织G0 G1 期细胞数百分比明显高于正常组 ,S期细胞数百分比则明显低于正常组。

关键词：维甲酸神经干细胞神经巢蛋白神经管缺陷流式细胞术细胞周期 NTD

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26S蛋白酶复合体介导的蛋白降解对LTP产生的影响

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中国神经科学杂志 2003年第4期19卷 234-237页

作者：胡志安谭银玲罗峻黎海蒂蔡文琴李希成第三军医大学基础医学部生理学教研室第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

目的 :观察 2 6S蛋白酶复合体介导的蛋白降解对大鼠海马LTP产生的影响。方法 :利用 2 6S蛋白酶复合体特异抑制剂和本室制备的 2 6S蛋白酶复合体抗体灌流海马脑片 ,观察海马CA1区通路LTP的诱导情况。结果 :正常情况下 ,LTP诱出率为 86 ... 详细信息

目的 :观察 2 6S蛋白酶复合体介导的蛋白降解对大鼠海马LTP产生的影响。方法 :利用 2 6S蛋白酶复合体特异抑制剂和本室制备的 2 6S蛋白酶复合体抗体灌流海马脑片 ,观察海马CA1区通路LTP的诱导情况。结果 :正常情况下 ,LTP诱出率为 86 %。在 2 6S蛋白酶复合体抗体灌流脑片情况下 ,LTP诱出率显著下降 (18% ) ;在 2 6S蛋白酶复合体特异抑制剂lactacystin存在条件下 ,LTP诱出率也明显降低 (0 % )。结论 :本研究证明 2 6S蛋白酶复合体抗体及特异抑制剂能显著抑制LTP产生。这提示 ,2 6S蛋白酶复合体介导的蛋白降解过程在LTP中发挥了重要作用。

关键词： 26S蛋白酶复合体蛋白降解 LTP 长时程增强大鼠海马突触传递长时程增强海马

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内皮活化相关新基因EOLA1的体外表达及亚细胞定位

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第三军医大学学报 2003年第18期25卷 1617-1619页

作者：梁自文杨宗城罗向东刘月明蔡文琴第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

目的　研究内皮细胞高表达脂多糖相关因子 1(Endothelial over expressedlipopolysaccharide associatedfactor 1,EOLA1)基因的体外表达和亚细胞定位 ,为进一步功能研究打下基础。方法　通过偶联转录翻译系统体外表达EOLA1蛋白 ,并用... 详细信息

目的　研究内皮细胞高表达脂多糖相关因子 1(Endothelial over expressedlipopolysaccharide associatedfactor 1,EOLA1)基因的体外表达和亚细胞定位 ,为进一步功能研究打下基础。方法　通过偶联转录翻译系统体外表达EOLA1蛋白 ,并用变性凝胶电泳进行产物检测 ;构建EOLA1 EGFP(绿色荧光蛋白 )融合蛋白表达质粒 ,转染内皮细胞后瞬时表达 ,在激光共聚焦显微镜下观察EOLA1蛋白的亚细胞定位。结果　体外表达的EOLA1蛋白分子量约 18× 10 3,与预测结果相符合 ;EOLA1蛋白主要定位于细胞浆 ,少量表达于细胞核。结论　EOLA1属细胞内结构蛋白 ,可能是参与了炎症时细胞内信号转导。

关键词：内皮细胞内皮细胞高表达脂多糖相关因子1 亚细胞定位体外表达

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斯氏肺吸虫半胱氨酸蛋白酶的原核表达及其免疫活性分析

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第三军医大学学报 2003年第24期25卷 2199-2201页

作者：王英张锡林张艳玲段建华段文元第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038 第三军医大学附属西南医院神经内科重庆400038

目的　对克隆的斯氏肺吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA进行原核表达并检测其免疫反应性。方法　利用PinPointTM Xa 1T表达载体系统 ,对已克隆的斯氏肺吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段在大肠杆菌中进行原核表达。通过SDS PAGE和Westernblot... 详细信息

目的　对克隆的斯氏肺吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA进行原核表达并检测其免疫反应性。方法　利用PinPointTM Xa 1T表达载体系统 ,对已克隆的斯氏肺吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段在大肠杆菌中进行原核表达。通过SDS PAGE和Westernblot方法鉴定表达产物 ,分别检测所表达融合蛋白的分子量和免疫反应性。结果　SDS PAGE结果显示 ,与对照相比较目的克隆在 3 3× 10 3处有一明显差异带。Westernblot结果则表明有一阳性条带出现 ,分子量为 3 3×10 3。结论　通过原核表达获得斯氏肺吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA的表达融合蛋白 ,分子量为 3 3× 10 3;

关键词：斯氏肺吸虫半胱氨酸蛋白酶原核表达

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人β-防御素3的cDNA克隆和表达载体的构建

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第三军医大学学报 2003年第7期25卷 617-619页

作者：陈姗董燕麟何凤田李蓉芬高会广陈敏彭家和第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的　克隆人 β 防御素 3 (hβD 3 )cDNA并构建其原核表达载体 ,为更深入的抗菌肽活性研究及制备新型肽类抗生素创造条件。方法　从人扁桃体组织中提取总RNA ,经RT PCR扩增编码hβD 3成熟肽的cDNA序列 ,将其克隆至pUC18载体进行序列测... 详细信息

目的　克隆人 β 防御素 3 (hβD 3 )cDNA并构建其原核表达载体 ,为更深入的抗菌肽活性研究及制备新型肽类抗生素创造条件。方法　从人扁桃体组织中提取总RNA ,经RT PCR扩增编码hβD 3成熟肽的cDNA序列 ,将其克隆至pUC18载体进行序列测定 ,然后构建于新型原核表达载体pQE 80L中。结果　RT PCR扩增得到约 13 5bp的目的DNA片断 ,序列分析与GenBank中报道的编码hβD 3成熟肽的cDNA序列完全一致。结论　hβD 3cDNA的克隆和原核表达载体的构建 ,为进一步制备抗耐药菌的肽类抗生素奠定了基础。

关键词：抗菌肽人β-防御素3 基因克隆

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利用酵母双杂合系统筛选与hERRα1相互作用的蛋白质

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第三军医大学学报 2003年第15期25卷 1352-1354页

作者：李渝萍陈敏陈彬陈健李强周度金第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的　利用酵母双杂合系统筛选乳腺组织中与人雌激素受体相关受体α1(Humanestrogenreceptorrelated receptorα1,hERRα1)相互作用的蛋白质 ,特别是新的核受体辅助活化因子 ,以进一步研究核受体辅助活化因子在乳腺癌发生、发展中如何参... 详细信息

目的　利用酵母双杂合系统筛选乳腺组织中与人雌激素受体相关受体α1(Humanestrogenreceptorrelated receptorα1,hERRα1)相互作用的蛋白质 ,特别是新的核受体辅助活化因子 ,以进一步研究核受体辅助活化因子在乳腺癌发生、发展中如何参与ERR1调控基因的表达。方法　以质粒pGBT9 hERRα1 LBD为“诱饵” ,筛选人乳腺组织cDNA文库。结果　筛得有阳性相互作用的克隆共 17个。除 3种为已知核受体辅助调节因子外 ,其他为功能已经明确的蛋白 ,其中有3种与hERRα1有明显相互作用。结论　核受体辅助活化因子SRC 1,RIP14 0 。

关键词：人雌激素受体相关受体α1 核受体辅助活化因子酵母双杂合系统乳腺癌

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一种用Tripure试剂从冻存组织分离纯化RNA的方法

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第三军医大学学报 2003年第9期25卷 822-823页

作者：曹廷兵彭家和巩燕叶治家江渝第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的　探索一种使提取的冻存组织RNA纯度和完整性均较高的方法。方法　在Tripure分离试剂说明书基础上 ,结合异硫氰酸胍等提取RNA的方法 ,对提取组织RNA的操作步骤进行调整、改进。结果　用此法提取的冻存组织RNA ,经电泳鉴定及进一步RT... 详细信息

目的　探索一种使提取的冻存组织RNA纯度和完整性均较高的方法。方法　在Tripure分离试剂说明书基础上 ,结合异硫氰酸胍等提取RNA的方法 ,对提取组织RNA的操作步骤进行调整、改进。结果　用此法提取的冻存组织RNA ,经电泳鉴定及进一步RT PCR检测 ,显示RNA的纯度及模板性较好。结论　用此法提取的冻存组织RNA质量稳定可靠。

关键词： Tripure试剂冻存组织分离纯化 RNA

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人BAFF cDNA的克隆及原核表达载体的构建

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第三军医大学学报 2003年第6期25卷 498-500页

作者：高会广何凤田李蓉芬陈珊唐蓓彭家和陈敏周度金第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的　克隆人BAFF(BcellactivatingfactorbelongingtotheTNFfamily)全长及 12 8～ 2 85片段的cDNA并构建其原核表达载体 ,为表达和检测其生物学活性做准备。方法　提取HL 60细胞总RNA ,经RT PCR扩增编码人BAFF全长及12 8～ 2 85氨基酸... 详细信息

目的　克隆人BAFF(BcellactivatingfactorbelongingtotheTNFfamily)全长及 12 8～ 2 85片段的cDNA并构建其原核表达载体 ,为表达和检测其生物学活性做准备。方法　提取HL 60细胞总RNA ,经RT PCR扩增编码人BAFF全长及12 8～ 2 85氨基酸残基的cDNA序列 ,并将其克隆至载体pUC18和pUC19进行序列测定 ,然后构建于新型原核表达载体pQE 80L中。结果　RT PCR扩增得到了 85 8bp和 477bp的DNA片段 ,序列分析与GenBank中报道的编码BAFF全长及 12 8～2 85氨基酸残基的cDNA序列完全一致。结论　BAFFcDNA的克隆及其原核表达载体的构建。

关键词： BAFF RT-PCR 克隆序列分析

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AF-2结构域突变的SF1酵母表达质粒的构建及其与PNRC相互作用分析

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第三军医大学学报 2003年第7期25卷 614-616页

作者：陈彬陈敏李渝萍陈健周度金第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的　探讨激活功能 2 (AF 2 )结构域在孤儿核受体辅活化富含脯氨酸的受体辅调节蛋白 (PNRC)相互作用的意义。方法　采用PCR和DNA重组技术构建了野生型SF1和AF 2结构域突变的SF1的酵母表达质粒pGBT9 SF1/HBDD和pGBT9 SF1/HBD/AF 2del... 详细信息

目的　探讨激活功能 2 (AF 2 )结构域在孤儿核受体辅活化富含脯氨酸的受体辅调节蛋白 (PNRC)相互作用的意义。方法　采用PCR和DNA重组技术构建了野生型SF1和AF 2结构域突变的SF1的酵母表达质粒pGBT9 SF1/HBDD和pGBT9 SF1/HBD/AF 2del并采用酵母双杂合分析比较了它们与PNRC的相互作用强弱。结果　SF1/HBD能与野生型PNRC及其N 末端缺失突变体PNRC2 70 3 2 7,PNRC2 78 3 0 0产生较强的相互作用 ,而AF 2缺失的SF1/HBD不与这些PNRC片段发生相互作用。结论　功能性的AF 2结构域是SF1与PNRC相互作用所必须的。

关键词：类固醇生成因子1 富含脯氨酸的核受体辅调节蛋白辅活化子激活功能-2

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大鼠烧伤复合内毒素血症致肝脏细胞凋亡实验研究

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第三军医大学学报 2003年第12期25卷 1062-1064页

作者：孙素群许霖水何凤田第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的　研究大鼠烧伤复合内毒素血症早期肝细胞的凋亡规律 ,并初步探讨其机制。方法　烧注组以大鼠体表面积 2 0 %Ⅲ度烧伤复合内毒素血症为模型 ,与正常对照、单烧组、单注组比较 ,观察其肝脏病理变化、TUNEL检测、DNA凝胶电泳的改变 ,... 详细信息

目的　研究大鼠烧伤复合内毒素血症早期肝细胞的凋亡规律 ,并初步探讨其机制。方法　烧注组以大鼠体表面积 2 0 %Ⅲ度烧伤复合内毒素血症为模型 ,与正常对照、单烧组、单注组比较 ,观察其肝脏病理变化、TUNEL检测、DNA凝胶电泳的改变 ,并测量血浆MDA浓度和SOD活性。结果　烧注组凋亡细胞的数量明显比后两组多且发生时间早 ,于伤后 6h达到峰值。血浆MDA含量升高趋势和SOD活性降低趋势与肝细胞凋亡发生相一致。结论　烧伤复合内毒素血症大鼠早期肝细胞损伤以凋亡为主 ,脂质过氧化是其发生机制之一。

关键词：内毒素血症肝脏凋亡脂质过氧化

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