检索结果-内蒙古大学图书馆

应用SoftLink^(TM)Soft Release Avidin树脂亲和层析纯化融合IL-16蛋白

第三军医大学学报 2000年第7期22卷 703-704页

作者：曹廷兵甘立霞第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的　分离、纯化大肠杆菌中表达的融合IL 16蛋白。方法　采用SoftLinkTMSoftReleaseAvidinResin亲合树酯分离、纯化由大肠杆菌产生的生物素化融合IL 16蛋白。结果　融合IL 16蛋白成功地在该系统中被分离、纯化 ,每升细菌培养物可获得 1... 详细信息

目的　分离、纯化大肠杆菌中表达的融合IL 16蛋白。方法　采用SoftLinkTMSoftReleaseAvidinResin亲合树酯分离、纯化由大肠杆菌产生的生物素化融合IL 16蛋白。结果　融合IL 16蛋白成功地在该系统中被分离、纯化 ,每升细菌培养物可获得 1.4mg重组融合蛋白。纯化蛋白经SDS PAGE和毛细管电泳检测均为 1条蛋白质带。结论　此系统纯化IL 16融合蛋白操作方便、快捷 ,所得蛋白纯度和产率高。

关键词： IL-16 融合蛋白生物素亲和素纯化

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GPPCR-RDB法对HPV感染的快速基因诊断

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第三军医大学学报 2000年第2期22卷 194-195页

作者：郭华阳汪江华周来新叶治家陈安第三军医大学医学检验系临床生物化学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的 :对人乳头瘤病毒(HPV)感染进行快速的基因诊断。方法 :采用通用引物介导的聚合酶链反应(GPPCR)扩增皮损组织DNA ,并同时将扩增产物标记上地高辛配基 ,再结合扩增产物的非放射性反向斑点杂交技术 ,对HPV亚临床感染和假性湿疣进行了... 详细信息

目的 :对人乳头瘤病毒(HPV)感染进行快速的基因诊断。方法 :采用通用引物介导的聚合酶链反应(GPPCR)扩增皮损组织DNA ,并同时将扩增产物标记上地高辛配基 ,再结合扩增产物的非放射性反向斑点杂交技术 ,对HPV亚临床感染和假性湿疣进行了快速的基因分型诊断及鉴别诊断。结果 :14例亚临床感染中HPV6阳性12例 ,HPV11阳性4例 ,HPV16阳性4例 ,HPV18未检测出 ,所用探针以外型别1例 ,混合感染5例 ;11例假性湿疣中仅有1例为HPV16阳性。结论 :该方法对HPV感染特别是亚临床感染和隐性感染的基因诊断是快速敏感特异的 ,值得推广应用。

关键词： HPV感染基因诊断 GPPCR-RDB法

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梭曼诱发惊厥后大鼠脑内兴奋性氨基酸的变化

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第三军医大学学报 2000年第1期22卷 22-25页

作者：景德强陈尔瑜余争平程天民第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038 第二军医大学解剖学教研室上海200433 第三军医大学预防医学系防原医学教研室全军复合伤研究所重庆400038

目的 :对脑内兴奋性氨基酸的变化进行定位研究。方法 :应用Beckman 6300氨基酸分析仪和601黄金系统色谱工作站 ,对梭曼惊厥后不同时相大鼠的新鲜脑组织进行定位检测。结果 :梭曼诱发惊厥后脑内谷氨酸和天门冬氨酸的水平显著降低 ,谷氨... 详细信息

目的 :对脑内兴奋性氨基酸的变化进行定位研究。方法 :应用Beckman 6300氨基酸分析仪和601黄金系统色谱工作站 ,对梭曼惊厥后不同时相大鼠的新鲜脑组织进行定位检测。结果 :梭曼诱发惊厥后脑内谷氨酸和天门冬氨酸的水平显著降低 ,谷氨酸下降最明显的是惊厥30min后的大脑皮质和海马 ,分别是正常组的53.2 %和52.6 % ,小脑的嗅球内谷氨酸水平显著下降 ,天门冬氨酸更易受梭曼中毒的影响 ,惊厥后5、30、90min3个时点测定的6个脑区(纹状体、大脑皮质、海马、中脑、小脑、间脑和嗅球)中均显著下降。结论 :梭曼中毒后脑内谷氨酸和天门冬氨酸水平显著降低 ,递质耗竭是递质活动增加的征象 ,因此 ,谷氨酸和天门冬氨酸递质活动增加可能在梭曼中毒性惊厥的发生和维持中起重要作用。

关键词：梭曼惊厥谷氨酸脑兴奋性氨基酸大鼠

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小鼠表皮TA细胞的细胞周期研究

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第三军医大学学报 1999年第12期21卷 871-873页

作者：杨恬王韵第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的：观察小鼠表皮ＴＡ细胞的增殖特性。方法：采用ＩＣＣ－ＴｄＲ双标技术，对成年小鼠和新生小鼠腹膜内注射５－溴尿嘧啶（ＢｒｄＵ），１２ｈ后注射３Ｈ－ＴｄＲ，再经１２ｈ后处死动物，取皮肤作切片，光镜下观察。结果：成年... 详细信息

目的：观察小鼠表皮ＴＡ细胞的增殖特性。方法：采用ＩＣＣ－ＴｄＲ双标技术，对成年小鼠和新生小鼠腹膜内注射５－溴尿嘧啶（ＢｒｄＵ），１２ｈ后注射３Ｈ－ＴｄＲ，再经１２ｈ后处死动物，取皮肤作切片，光镜下观察。结果：成年小鼠表皮未见ＩＣＣ－ＴｄＲ双标细胞；新生小鼠表皮上有大量的双标细胞；毛囊双标细胞集中在毛母质区域。结论：小鼠表皮ＴＡ细胞在增殖状态下细胞周期缩短到２４ｈ以内。

关键词： TA细胞表皮小鼠细胞周期

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急性低温低氧对大鼠下丘脑NOS及c-fos表达的影响

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第三军医大学学报 1999年第4期21卷 245-248页

作者：范晓棠阮怀珍张金海吴喜贵袁碧波第三军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的：探讨急性低温低氧对大鼠下丘脑ＮＯＳ及ｃ－ｆｏｓ表达的影响。方法：用ｃ－ｆｏｓ免疫组化技术和ＮＡＤＰＨ－ｄ组化法研究急性低温低氧大鼠下丘脑内ｃ－ｆｏｓ原癌基因的表达、一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的分布及两者的共存。结果... 详细信息

目的：探讨急性低温低氧对大鼠下丘脑ＮＯＳ及ｃ－ｆｏｓ表达的影响。方法：用ｃ－ｆｏｓ免疫组化技术和ＮＡＤＰＨ－ｄ组化法研究急性低温低氧大鼠下丘脑内ｃ－ｆｏｓ原癌基因的表达、一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的分布及两者的共存。结果：急性低温低氧组大鼠：①下丘脑内ｃ－ｆｏｓ表达明显增加，在许多核团呈恒定的核特异定位分布，其中室旁核、弓状核、腹内侧核、背内侧核表达最为强烈，乳头体前核、下丘脑后核有中等强度的表达，视上核偶有表达。②室旁核的大细胞部和视上核可见密集深染的ＮＯＳ阳性大细胞。③在室旁核的小细胞部及其附近的区域约有１０％～２０％的中小型ＮＯＳ阳性细胞同时表达ｃ－ｆｏｓ蛋白，其它部位偶见双染细胞。以上结果与对照组比较差异显著，而１ｄ组和３ｄ组之间无明显变化。结论：下丘脑内的特定核团可能参与低氧反应的整合。一氧化氮（ＮＯ）作为一种非经典的新型神经递质和信息分子可能与低氧反应有关。

关键词：低温低氧 c-fos 下丘脑大鼠一氧化氮合酶

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低压缺氧对大鼠学习记忆及海马GABA含量的影响

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第三军医大学学报 1999年第2期21卷 115-115,118页

作者：张金海阮怀珍袁碧波吴喜贵范晓棠第三军医大学基础医学部神经生物学教研室

Ｅｆｅｃｔｓｏｆａｌｔｉｔｕｄｅｈｙｐｏｘｉａｏｎｌｅａｒｎｉｎｇ，ｍｅｍｏｒｙａｎｄＧＡＢＡｃｏｎｔｅｎｔｏｆｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓｉｎｒａｔ在机体的所有器官中，中枢神经系统对低氧最敏感，低氧可引起脑功能障碍，如记... 详细信息

Ｅｆｅｃｔｓｏｆａｌｔｉｔｕｄｅｈｙｐｏｘｉａｏｎｌｅａｒｎｉｎｇ，ｍｅｍｏｒｙａｎｄＧＡＢＡｃｏｎｔｅｎｔｏｆｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓｉｎｒａｔ在机体的所有器官中，中枢神经系统对低氧最敏感，低氧可引起脑功能障碍，如记忆、行为、情绪等高级功能障碍，但机...

关键词：学习记忆海马 GABA 大鼠脑缺血

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NADase细菌毒素的非放射性测定法

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第三军医大学学报 1999年第1期21卷 53-55页

作者：金晓琳黎庶胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室

目的：建立一种测定ＮＡＤａｓｅ细菌毒素活性的非放射性测定法。方法：建立一个ＮＡＤ（辅酶Ｉ）依赖的显色系统，在该系统中，ＮＡＤ接受乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）从乳酸脱下来的氢，再通过ＰＭＳ（吩嗪二甲酯硫酸盐）传递给ＩＮＴ（碘化... 详细信息

目的：建立一种测定ＮＡＤａｓｅ细菌毒素活性的非放射性测定法。方法：建立一个ＮＡＤ（辅酶Ｉ）依赖的显色系统，在该系统中，ＮＡＤ接受乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）从乳酸脱下来的氢，再通过ＰＭＳ（吩嗪二甲酯硫酸盐）传递给ＩＮＴ（碘化硝基四氮唑蓝），使后者还原而显色。如果ＮＡＤａｓｅ毒素分解ＮＡＤ，就会打断递氢链而抑制显色反应。结果：显色系统中，ＮＡＤ含量与显色有良好线性关系（Ｒ＝０．９８９８）。绿脓杆菌外毒素Ａ分解ＮＡＤ而抑制显色反应。以毒素含量为自变量，以毒素对显色反应的抑制为应变量，建立了对数线性回归方程Ｙ＝１２．５Ｘ０．２６，当Ｙ＝５０％时［即显色系统中的ＮＡＤ有半数（２５０ｎｇ）被分解］，Ｘ＝２０７（ｎｇ）。定义分解１ｎｇＮＡＤ的毒素活性为一个单位，则２０７ｎｇ毒素含有２５０个毒素活性单位。该方法的测定敏感性达到“ｎｇ”水平。结论：本方法是一种敏感的测定ＮＡＤａｓｅ细菌毒素活性的非放射性测定方法。

关键词：细菌毒素 NADase 非放射性测定法

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一种稳定、易于操作的噬菌体随机肽库载体的构建

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第三军医大学学报 1999年第4期21卷 256-258页

作者：万瑛代佳平王燕刘昕第三军医大学基础医学部分子生物学教研室

目的：拟将噬菌粒ｐＣＯＭＢ３改建为更为稳定、高拷贝且易于操作的噬菌体随机肽库载体。方法：对常用噬菌体抗体库呈现载体ｐＣＯＭＢ３序列进行点矩阵作图分析（Ｄｏｔ－Ｐｌｏｔ分析），切除其中重复区，纠正其多代培养后自删除特性... 详细信息

目的：拟将噬菌粒ｐＣＯＭＢ３改建为更为稳定、高拷贝且易于操作的噬菌体随机肽库载体。方法：对常用噬菌体抗体库呈现载体ｐＣＯＭＢ３序列进行点矩阵作图分析（Ｄｏｔ－Ｐｌｏｔ分析），切除其中重复区，纠正其多代培养后自删除特性。原克隆位点６３ｂｐ的填充序列增加到１４３５ｂｐ以便于酶切鉴定和电泳回收。结果：构建了命名为ｐＴＭＢ２的噬菌粒载体。结论：ｐＴＭＢ２的噬菌粒载体更为稳定且易于操作。

关键词：噬菌体随机肽库 pCOMB3 Dot-Plot分析载体

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丝状噬菌体随机呈现肽库的构建与鉴定

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第三军医大学学报 1999年第11期21卷 837-839页

作者：万瑛代佳平王燕刘昕第三军医大学基础医学部分子生物学教研室重庆400038

目的：构建一个随机２０个氨基酸的丝状噬菌体肽库。方法：扩增随机合成ＤＮＡ模板，经限制性内切酶ＸｈｏⅠ＋ＳｐｅⅠ酶切后克隆进噬菌粒ｐＴＭＢ２，构建随机丝状噬菌体肽库并检验其库容及随机性。结果：完成丝状噬菌体随机肽库的... 详细信息

目的：构建一个随机２０个氨基酸的丝状噬菌体肽库。方法：扩增随机合成ＤＮＡ模板，经限制性内切酶ＸｈｏⅠ＋ＳｐｅⅠ酶切后克隆进噬菌粒ｐＴＭＢ２，构建随机丝状噬菌体肽库并检验其库容及随机性。结果：完成丝状噬菌体随机肽库的构建，其库容为２．１×１０８，其氨基酸分布于理论频数无显著差异。结论：丝状噬菌体随机肽库被成功构建。

关键词：丝状噬菌体随机肽库 pTMB2 构建鉴定

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旁路活化补体对枯否细胞吞噬杀菌功能影响的实验研究

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第三军医大学学报 1999年第2期21卷 90-92页

作者：熊杰汪正清周善章刘启富第三军医大学基础医学部微生物学教研室成都军区总医院检验科

目的：证明一定条件下，旁路活化补体可使ＫＣ吞噬杀菌功能失常。方法：观测定量培养的ＫＣ在ＺＡＨＳ作用下吞噬杀菌及分泌杀菌致炎物质功能的动态水平；观察大鼠肠系膜注射ＺＡＨＳ后肝组织的病理改变；以抗人Ｃ３、Ｃ５血清中和的Ｚ... 详细信息

目的：证明一定条件下，旁路活化补体可使ＫＣ吞噬杀菌功能失常。方法：观测定量培养的ＫＣ在ＺＡＨＳ作用下吞噬杀菌及分泌杀菌致炎物质功能的动态水平；观察大鼠肠系膜注射ＺＡＨＳ后肝组织的病理改变；以抗人Ｃ３、Ｃ５血清中和的ＺＡＨＳ进行反证。结果：①ＺＡＨＳ处理组，ＫＣ的ＰＩ和ＩＣＢＡ以及胞内Ｏ－２水平先升后降，胞内ＡＣＰ水平只降无升；ＩＣＢＡ与Ｏ－２和ＡＣＰ的水平均显著相关；各指标至６ｈ降至最低；②阻断组Ｏ－２、ＡＣＰ、ＩＣＢＡ在６ｈ水平保持在正常对照组的９７％、８３％和７９％，显著高于ＺＡＨＳ处理组；③肠系膜静脉注射ＺＡＨＳ１２ｈ后，大鼠肝组织轻度变性，部分ＫＣ线粒体受损，与ＫＣ相邻肝细胞出现凋亡改变，阻断组肝组织无明显病变。结论：ＺＡＨＳ中过量的Ｃ３、Ｃ５碎片持续作用能使ＫＣ吞噬杀菌功能下降，对肝组织结构亦有一定间接破坏作用。

关键词：补体枯否细胞胞内杀菌力旁路活化补体

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