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组蛋白乙酰化修饰对IEC-6恶性转化细胞细胞周期和p53、p21^(WAF1)基因表达的调控

第三军医大学学报 2007年第4期29卷 300-303页

作者：王燕郭乔楠章波许雪青白云第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室第三军医大学西南医院病理学研究所重庆400038

目的分析和探讨IEC-6恶性转化细胞不同时期组蛋白乙酰化修饰对肿瘤发生相关基因表达的影响。方法采用我们已建立的3个转化期(化学致癌剂MNNG和诱导剂PMA共同作用6、12、24次)的IEC-6转化细胞进行培养,提取不同转化时期的IEC-6转化细胞... 详细信息

目的分析和探讨IEC-6恶性转化细胞不同时期组蛋白乙酰化修饰对肿瘤发生相关基因表达的影响。方法采用我们已建立的3个转化期(化学致癌剂MNNG和诱导剂PMA共同作用6、12、24次)的IEC-6转化细胞进行培养,提取不同转化时期的IEC-6转化细胞的细胞核蛋白,采用免疫印迹检测H3乙酰化水平;并用ChIP及RT-PCR检测组蛋白H3乙酰化对p21WAF1表达的影响。结果24次IEC-6恶性转化细胞组蛋白H3乙酰化水平高于6次IEC-6转化细胞,而组蛋白H3去乙酰化水平低于6次IEC-6转化细胞;同时发现p21WAF1的启动子区PCR产物减少。在6、12次IEC-6转化细胞中均有较弱的p53、p21WAF1表达;在24次IEC-6恶性转化细胞中仍可检测到较弱的p53表达,但p21WAF1表达缺如。结论IEC-6恶性转化细胞过程中,组蛋白H3乙酰化水平增高,导致p21WAF1基因表达受抑,近而可能影响转化细胞的细胞周期。

关键词： IEC-6细胞组蛋白乙酰化 p53 p21WAF1

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数字化可视人体图像的目标提取

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第三军医大学学报 2007年第16期29卷 1549-1551页

作者：宁旭张绍祥谭立文邱全光第三军医大学基础医学部物理学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部人体解剖学教研室重庆市计算医学研究所重庆400038

目的探讨数字化可视人体图像的目标提取。方法利用归一化阈值分割排除大部分背景,再结合边缘跟踪对目标边界附近保留的边缘特征进行识别、连接、去噪,构建一种准确、有效的目标提取算法。结果基于边缘和阈值混合的分割技术有效地去除了... 详细信息

目的探讨数字化可视人体图像的目标提取。方法利用归一化阈值分割排除大部分背景,再结合边缘跟踪对目标边界附近保留的边缘特征进行识别、连接、去噪,构建一种准确、有效的目标提取算法。结果基于边缘和阈值混合的分割技术有效地去除了数字化人体图像的背景。结论通过与其他几种分割算法的比较,本计算法实际使用效果较好。

关键词：目标提取图像分割薄层断层解剖

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PS1/APP双转基因AD模型小鼠与Aβ_(1-40)海马注射AD模型大鼠的组织病理学比较

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第三军医大学学报 2006年第16期28卷 1648-1651页

作者：李达兵唐军范晓棠宋敏徐海伟周光纪白云第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038

目的对PS1/APP双转基因阿尔茨海默病(alzheimerdisease,AD)模型小鼠进行基因鉴定和组织学分析,探讨其与老化态Aβ1-40单侧海马注射AD模型大鼠之间的组织病理学差异。方法对Tg小鼠和AD大鼠模型应用改进刚果红染色法、Nissl’s染色结合免... 详细信息

目的对PS1/APP双转基因阿尔茨海默病(alzheimerdisease,AD)模型小鼠进行基因鉴定和组织学分析,探讨其与老化态Aβ1-40单侧海马注射AD模型大鼠之间的组织病理学差异。方法对Tg小鼠和AD大鼠模型应用改进刚果红染色法、Nissl’s染色结合免疫组织化学方法观察脑内Aβ沉积和星形胶质细胞的活化情况。结果①PS1/APP双转基因AD小鼠刚果红染色显示皮质和海马内广泛圆形Aβ沉积,周围绕以胶质细胞带,免疫组化显示GFAP阳性细胞活化呈团块聚集。②AD大鼠刚果红染色显示单侧海马齿回区有Aβ斑块状沉积,Nissl’s染色显示注射针道附近海马锥体层细胞丢失,注射侧海马GFAP阳性细胞增多。结论Aβ1-40单侧海马注射AD模型大鼠尽管可以模拟人类AD疾病的部分特征病理改变,但是不能模拟疾病渐进性的病理学改变。PS1/APP双转基因小鼠能够模拟AD病人脑内的主要病理改变与渐进性过程,是较为理想的实验动物模型,但该模型未发现细胞丢失。

关键词：阿尔茨海默病转基因小鼠大鼠 β淀粉样多肽

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雌激素上调神经营养因子增加雄性小鼠中脑多巴胺神经元数量的实验研究

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第三军医大学学报 2011年第7期33卷 663-666页

作者：伊宏亮郭文琼孙卫忠郭亮黄伟范晓棠徐海伟第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织与胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的观察雌激素处理对成年雄性小鼠黑质多巴胺神经元数量的影响及可能的调控机制。方法选用雄性C57/BL6小鼠10只,分成对照组、雌激素组(E2),采用免疫组化检测雌激素处理对小鼠黑质多巴胺神经元与calb ind in阳性神经元数量的改变;采用RT... 详细信息

目的观察雌激素处理对成年雄性小鼠黑质多巴胺神经元数量的影响及可能的调控机制。方法选用雄性C57/BL6小鼠10只,分成对照组、雌激素组(E2),采用免疫组化检测雌激素处理对小鼠黑质多巴胺神经元与calb ind in阳性神经元数量的改变;采用RT-PCR分析雌激素处理对小鼠中脑内多巴胺转运蛋白(DAT)、胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)与脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA水平的影响。结果雌激素处理可以增加小鼠黑质多巴胺神经元数量[E2组(119.7±2.9)个vs对照组(93.5±5.1)个,P=0.004],并增加小鼠中脑内DAT的表达水平(P<0.05),而对calb ind in阳性神经元数量无影响[E2组(88.0±2.0)个vs对照组(86.2±1.5)个]。雌激素处理同时可以上调小鼠中脑内IGF-1R与BDNFmRNA水平(P<0.05)。结论雌激素通过调节IGF-1R与BDNF的表达增加小鼠中脑内多巴胺神经元数量。

关键词：雌二醇 TH神经元 calbindin阳性神经元胰岛素样生长因子1受体脑源性神经营养因子

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丝瓜叶成分L—10对BALB／C鼠产生IL—1、TNFα及IL—2的影响

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第三军医大学学报 2001年第A7期23卷 3-4页

作者：李利民聂梅等四川省中药研究所，成都610041 第三军医大学基础医学部药理学教研室，重庆400038

目的研究丝瓜叶份L－10对BALB／C小鼠产生IL－1、TNFα、及IL－2是否有影响。方法 IL－1采用胸腺细胞生物法测定：TNFα采用L929细胞生物法测定；IL－2采用CTLL细胞生物法测定。结果丝瓜叶成分L－10对LPS刺激BALB／C小鼠PM产生IL－... 详细信息

目的研究丝瓜叶份L－10对BALB／C小鼠产生IL－1、TNFα、及IL－2是否有影响。方法 IL－1采用胸腺细胞生物法测定：TNFα采用L929细胞生物法测定；IL－2采用CTLL细胞生物法测定。结果丝瓜叶成分L－10对LPS刺激BALB／C小鼠PM产生IL－1及TNFα有影响，2－50μg·ml^-1范围内，促进IL－1及TNFα的产生，促进IL－1作用在10μg·ml^-1时达高峰（P＜0．01）；L－10在0．2－50μg·ml^-1范围内，对于PHA刺激BALB／C小鼠脾细胞产生IL－2有促进作用，在2μg·ml^-1时达高峰（P＜0．01）。结论 L－10在体外对BALB／C小鼠产生IL－1、TNFα及IL－2有显著的促进作用。

关键词：丝瓜叶成份 L-10 IL-1 IL-2 TNFα

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^(60)Co辐照对不同物理状态内毒素生物活性的影响

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第三军医大学学报 2002年第10期24卷 1253-1254页

作者：潘文东周红郑江秦孝建罗平肖光夏第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所重庆400038 第三军医大学基础医学部药理学教研室重庆400038 第三军医大学附属西南医院综合实验研究中心重庆400038

由于内毒素（Lipopolysacchrade，LPS）具有引起机体一系列炎症反应的作用，消除内毒素一直是制药和科研中广泛关注的问题。本研究采用~(60)Co辐射灭活内毒素的方法，观察内毒素干粉和溶液中内毒素在辐射前后其生物活性的变化，以达到... 详细信息

由于内毒素（Lipopolysacchrade，LPS）具有引起机体一系列炎症反应的作用，消除内毒素一直是制药和科研中广泛关注的问题。本研究采用~(60)Co辐射灭活内毒素的方法，观察内毒素干粉和溶液中内毒素在辐射前后其生物活性的变化，以达到明确何种物理状态的内毒素采用~(60)Co辐射灭活效果最佳的目的。

关键词： ^60Co辐照物理状态内毒素生物活性干粉溶液

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hLNα4LG1基因克隆、表达及生物学活性检测

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第三军医大学学报 2006年第14期28卷 1464-1466页

作者：连继勤戴旭芳李晓辉何凤田第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038 重庆师范大学特殊教育学院重庆400047 第三军医大学基础医学部药理学教研室重庆400038

目的克隆并表达具有生物学活性的人层黏连蛋白α4链LG1组件(hum an lam in in alpha4 chain LG1 modu le,hLNα4LG1)蛋白。方法RT-PCR扩增hLNα4LG1的cDNA片段并将其插入pMD-18T载体进行测序。将测序片段亚克隆入原核表达载体pET-28 a并... 详细信息

目的克隆并表达具有生物学活性的人层黏连蛋白α4链LG1组件(hum an lam in in alpha4 chain LG1 modu le,hLNα4LG1)蛋白。方法RT-PCR扩增hLNα4LG1的cDNA片段并将其插入pMD-18T载体进行测序。将测序片段亚克隆入原核表达载体pET-28 a并在BL21(DE3)大肠杆菌中进行表达,W estern b lot对表达蛋白进行鉴定。用N i-NTA亲和柱对目的蛋白进行纯化,并通过细胞黏附与伸展实验对其生物学活性进行检测。结果成功克隆了hLNα4LG1的cDNA片段,SDS-PAGE及W estern b lot分析显示,经IPTG诱导后BL21(DE3)/pET28 a-LG1总蛋白中出现一条分子量为26×103的新蛋白带。与对照组相比,N i-NTA亲和层析纯化的目的蛋白有明显促进A549细胞伸展与黏附的作用。结论克隆并原核表达了hLNα4LG1蛋白,目的蛋白具有促进细胞黏附与伸展的活性,为深入研究hLNα4LG1的功能奠定了基础。

关键词： hLNα4LG1 基因克隆原核表达

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电离辐射对小鼠腹腔巨噬细胞阴离子通道活动的影响及康复新对其的作用

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第三军医大学学报 2001年第3期23卷 290-292页

作者：舒崇湘叶本兰程天民萧家思第三军医大学预防医学系防原医学教研室全军复合伤研究所第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038

目的　探讨电离辐射对小鼠腹腔巨噬细胞阴离子通道活动的影响及康复新对其的作用。方法　采用电生理膜片钳离子单通道记录方法。结果　用调理的zymosan刺激腹腔巨噬细胞后 ,阴离子通道开放的阳性率在受照射组显著减少 ,且受刺激至通道... 详细信息

目的　探讨电离辐射对小鼠腹腔巨噬细胞阴离子通道活动的影响及康复新对其的作用。方法　采用电生理膜片钳离子单通道记录方法。结果　用调理的zymosan刺激腹腔巨噬细胞后 ,阴离子通道开放的阳性率在受照射组显著减少 ,且受刺激至通道开放的时间间隔显著延长。受照射组较正常对照组通道开放概率显著降低、开放时间常数缩短而关闭时间常数延长 ,康复新对正常对照组离子通道活动的影响不显著 ,但可使照射组的通道开放有一定程度的加强。结论　电离辐射抑制巨噬细胞膜上阴离子通道的开放可能是其抑制巨噬细胞功能的一个重要途径。

关键词：电离辐射巨噬细胞阴离子通道康复新腹腔创伤小鼠

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采用组织工程技术建造人工膀胱组织的实验研究

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第三军医大学学报 2004年第3期26卷 256-258页

作者：侯卫平叶本兰王常勇郭希民赵强第三军医大学新桥医院肾内科第三军医大学军事医学科学院基础医学研究所北京100039 第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038

目的　通过将扩增的膀胱种子细胞与一定形状聚合材料复合后植入裸鼠体内进行培育 ,尝试采用组织工程技术建造人造膀胱组织的可行性。方法　从幼兔取膀胱 ,机械分离与酶消化获取上皮细胞和平滑肌细胞 ,在体外培养并扩增细胞 ,之后将上皮... 详细信息

目的　通过将扩增的膀胱种子细胞与一定形状聚合材料复合后植入裸鼠体内进行培育 ,尝试采用组织工程技术建造人造膀胱组织的可行性。方法　从幼兔取膀胱 ,机械分离与酶消化获取上皮细胞和平滑肌细胞 ,在体外培养并扩增细胞 ,之后将上皮细胞和平滑肌细胞分别接种到聚合材料的内外表面 ,将其植入到裸鼠体内进行培育。对植入术后4、8周的标本取材 ,进行大体、组织学观察及免疫组化检测。结果　培育的细胞材料复合体的内壁可形成数层移行上皮细胞层 ,外壁由数层平滑肌细胞层构成。随着聚合材料的降解 ,移行上皮细胞与平滑肌细胞不断增殖并达汇合。

关键词：组织工程膀胱细胞培养聚合物

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Cuprizone致小鼠脱髓鞘对胼胝体少突胶质细胞数及动物运动能力的影响

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第三军医大学学报 2012年第8期34卷 691-695页

作者：詹晓黎顾思斯丁诚苏乐陈兴书蔡其燕姚忠祥第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 第三军医大学学员旅五队重庆400038 第三军医大学学员旅九队重庆400038 第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038

目的研究Cuprizone(CPZ)诱导C57BL/6小鼠脱髓鞘对胼胝体少突胶质细胞变化情况,并探讨对小鼠运动能力的调控特点。方法以正常饲料喂食的6周龄雄性小鼠作为对照,实验组用含0.2%Cuprizone的混合饲料持续喂食6周龄雄性小鼠6周,诱导中枢神经... 详细信息

目的研究Cuprizone(CPZ)诱导C57BL/6小鼠脱髓鞘对胼胝体少突胶质细胞变化情况,并探讨对小鼠运动能力的调控特点。方法以正常饲料喂食的6周龄雄性小鼠作为对照,实验组用含0.2%Cuprizone的混合饲料持续喂食6周龄雄性小鼠6周,诱导中枢神经系统脱髓鞘。用LFB组化和MBP免疫组化技术鉴定脑胼胝体区的脱髓鞘改变,确认模型的稳定可靠性。结合MBP和CC-1免疫荧光双标技术,观察脱髓鞘的胼胝体区少突胶质细胞变化情况。并通过体质量监测观察小鼠的整体功能状态变化,进一步采用行为学实验技术(旋转棒测试和旷场实验)观察对小鼠运动能力的调控效果和特点。结果与正常组相比,Cuprizone诱导脱髓鞘6周后,脑胼胝体区的髓鞘缺失明显,髓鞘结构蛋白MBP含量明显减少[(0.395±0.019)vs(0.242±0.016);P<0.01];应用图像分析和统计学分析发现,成熟少突胶质细胞的胞体(CC-1+)和(MBP+)呈平行性减少[(42.62±2.48)vs(25.04±3.68)/100μm2;P<0.05];在实验监测过程中,正常小鼠体质量呈上升增加,而CPZ组小鼠体质量先急剧下降,后趋于平稳并稍有恢复;同时行为学实验结果表明,小鼠的运动协调能力、自发活动能力都有明显减弱[(156.17±22.17)vs(78.50±7.80);(240.91±29.52)vs(163.31±21.05);P<0.05],但是对小鼠的探索习性并无明显影响(3.7%/5.4%vs 3.6%/5.3%;P>0.05)。结论利用Cuprizone诱导小鼠脱髓鞘改变与少突胶质细胞减少有关,其主要影响小鼠的运动协调能力和自发活动而不影响探索习性等高级功能。

关键词： CPZ脱髓鞘模型少突胶质细胞行为学监测

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